韓慶彬+劉詩柱+石瑞峰

摘要：近年來禽流感的肆虐發(fā)生，讓養(yǎng)雞場對禽流感高度重視，甚至談禽流感色變，而對于腎型傳染性支氣管炎往往重視不夠，在疫苗選擇、防疫程序、免疫操作等方面均存在很多問題。進(jìn)入2014年冬季以后，商丘市連續(xù)發(fā)生多起雞腎型傳染性支氣管炎病例，死亡率達(dá)10%，生產(chǎn)性能也受到影響。對雞腎型傳染性支氣管炎的病原、流行特點(diǎn)、臨床癥狀、病理變化、診斷及防控措施進(jìn)行了介紹，提出養(yǎng)雞場必須提高對腎型傳染性支氣管炎的關(guān)注程度，科學(xué)選擇、使用疫苗，來控制腎型傳染性支氣管炎的發(fā)生。

關(guān)鍵詞：雞腎型傳染性支氣管炎；病原；流行特點(diǎn)；病理變化；診斷；防控

中圖分類號：S858.31 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B 文章編號：1007-273X（2017）07-0023-03

雞傳染性支氣管炎（IB）是一種由傳染性支氣管炎病毒（IBV）引起的雞的急性、高度傳染性疫病。而腎型傳染性支氣管炎是雞傳染性支氣管炎的一種臨床表現(xiàn)形式。1962年Winterfild等在美國發(fā)現(xiàn)了致腎病變型傳染性支氣管炎病毒，并將其命名為Holte株，該型的代表毒株有Hotle株、Gray株、CV56株、Wolgemuth株等，其中Gray株是緩和型毒株。澳大利亞學(xué)者Cumming在澳大利亞分離出N1/62（T株），該病毒被認(rèn)為是嗜腎型傳染性支氣管炎的強(qiáng)毒代表株，能引起雞只死亡和嚴(yán)重腎病變。1972年我國禽病專家辛朝安教授首次報(bào)道我國有傳染性支氣管炎的存在，其他省份也陸續(xù)報(bào)道了該病的存在，但當(dāng)時發(fā)生的主要是呼吸型。傳染性支氣管炎具有高度的傳染性，且病原存在多個血清型和多個臨床型，甚至臨床型和血清型之間沒有直接的關(guān)系，從而造成疫苗免疫控制比較困難。到了20世紀(jì)90年代之后腎型傳染性支氣管炎在我國大陸大面積暴發(fā)和流行，主要發(fā)生在集約化生產(chǎn)的肉雞群，其引起的雛雞死亡率高達(dá)30%；產(chǎn)蛋雞和種雞表現(xiàn)為產(chǎn)蛋量和蛋質(zhì)量下降，并可對雛雞和育成雞的輸卵管造成永久性傷害，從而影響后期產(chǎn)蛋性能的發(fā)揮。

1 病原

雞傳染性支氣管炎病毒（Infections bronchitis virus，IBV）屬于冠狀病毒科冠狀病毒屬的第三群，有囊膜，單股正鏈RNA病毒，病毒粒子呈球形或多邊形，直徑為80～120 nm。囊膜表面有均勻的長約20 nm冠狀纖突，狀如皇冠，其纖突不如副黏病毒的棒狀纖突排列緊密。傳染性支氣管炎病毒粒子含有纖突蛋白（S）、膜糖蛋白（M）、核衣殼蛋白（N）和小膜蛋白（E），S蛋白由S1和S2兩種糖蛋白組成。血凝抑制HI抗體和大部分病毒中和抗體由S1誘導(dǎo)產(chǎn)生，具有免疫保護(hù)作用。IBV對宿主細(xì)胞的吸附作用與S糖蛋白有關(guān)。重組IBV的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明S蛋白是決定病毒宿主細(xì)胞范圍的一個重要因子。傳染性支氣管炎病毒在細(xì)胞質(zhì)的基質(zhì)內(nèi)復(fù)制，通過不連續(xù)的轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)生5條亞基因組mRNA，其中2、4和6分別編碼蛋白S、M和N，而3和5分別編碼3種和2種蛋白。遺傳實(shí)驗(yàn)表明這四種非結(jié)構(gòu)蛋白不是病毒復(fù)制必須的，但是有助于病毒的復(fù)制。在37 ℃下，感染后3～4 h細(xì)胞胞漿內(nèi)開始出現(xiàn)新病毒粒子，而12 h后細(xì)胞內(nèi)的病毒量達(dá)最大。IBV在56 ℃ 15 min和45 ℃ 90 min可滅活大部分IBV。在-20 ℃條件下保存IBV是不合適的。感染性組織在50%甘油中保存良好，并且不需冷凍即可直接送往實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行診斷或研究。有人報(bào)道，春季IBV可在戶外存活12 d，冬季為56 d。凍干的感染性尿囊液真空密封的條件下，可在冰箱中保存30年。IBV對乙醚敏感，50%氯仿室溫下作用10 min，0.1%去氧膽酸鈉4 ℃作用18 h能使病毒完全失去感染性。病毒對常見消毒劑敏感，1%來蘇兒溶液，1%福爾馬林溶液，2%氫氧化鈉溶液及70%乙醇3～5 min即可將其滅活。傳染性支氣管炎病毒能在10～11日齡的雞胚中生長，用自然毒初次接種雞胚，多數(shù)雞胚存活，但隨續(xù)代次數(shù)的增加，對雞胚的毒力增加，到第10代時，可在接種后的第9天引起80%的雞胚死亡。胚體的特征性變化是發(fā)育受阻，胚體卷成球形，腳變形壓在頭部，羊膜增厚，緊貼胚體，卵黃囊縮小，尿囊液增多，腎臟尿酸鹽沉淀。傳染性支氣管炎病毒也能在15～18日齡的雞胚腎細(xì)胞（CEK），雞腎細(xì)胞（CK）和雞胚肝細(xì)胞（CEL）上生長，經(jīng)多次傳代（6～10代）后，可引起較明顯的細(xì)胞病變，表現(xiàn)為胞漿融合，形成合胞體及細(xì)胞死亡。

用于IBV鑒別和分類的方法很多。近年來發(fā)展起來的基因型分類是基于S蛋白的特征的分類方法。目前已發(fā)現(xiàn)的基因型和血清型已有數(shù)十種，以后還會有新的發(fā)現(xiàn)。血清型的確定可通過傳統(tǒng)的VN（中和試驗(yàn)）和HI（血凝抑制），也有人采用單克隆抗體法，但這些方法都有較大的局限性?，F(xiàn)在越來越多的實(shí)驗(yàn)室通過反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）獲取IBV基因的DNA片段，然后再通過做限制性內(nèi)切酶分析或測序?；蛐团c血清型并不完全相符，比如屬于同一血清型毒株如果S蛋白的同源性不低于90%，則可認(rèn)定為同一基因型；但有些毒株屬于一個基因型但可能不屬于一個血清型。國內(nèi)外已報(bào)道的IBV有26種以上血清型。實(shí)驗(yàn)表明隨著S1基因序列差異增大，毒株間的交叉保護(hù)程度將減弱。同一血清型的毒株也有可能基因序列差異。同時有證據(jù)表明在混合感染的情況下，IBV可能發(fā)生基因重組，很容易出現(xiàn)新的血清型或基因型。主要的血清型為M41型及C型，其他為變異型，包括腎型、呼吸型和腺胃型等。腎病變型是引起感染雞死亡率最高的病型。

2 流行特點(diǎn)

該病的主要傳播方式是病雞從呼吸道中排出病毒，經(jīng)空氣飛沫傳染給易感雞。此外，可通過被污染的飼料，飲水，用具等傳播，也可經(jīng)消化道感染。一年四季均可發(fā)病，營養(yǎng)不足、密度過高、舍溫過低、氣候突變、寒冷、通風(fēng)不良或應(yīng)激等可誘發(fā)該病。秋冬季節(jié)，雞IB發(fā)病率較高。各日齡的雞均可發(fā)病，該病的發(fā)病表現(xiàn)與日齡關(guān)系密切。但以雛雞危害最為嚴(yán)重，蛋雞在15日齡以前感染該病會造成輸卵管終生損傷，產(chǎn)蛋雞成年后形成假母雞，輸卵管囊腫，雞終身不產(chǎn)蛋。公雞發(fā)病率往往高于母雞，肉仔雞發(fā)病率高于產(chǎn)蛋雞，這可能與雞只生長速度和飼料中的蛋白質(zhì)含量有關(guān)，飼料中蛋白質(zhì)含量愈高，雞生長速度愈快，雞群死亡率就愈高。有資料表明，雛雞10～30日齡發(fā)生各型IB后對蛋雞性成熟期輸卵管發(fā)育會造成無可逆轉(zhuǎn)損害，在90日齡左右開始出現(xiàn)輸卵管囊腫或不發(fā)育。因此，在蛋雛雞或種雞育雛期，尤其是冬季必須做好免疫接種。

3 臨床癥狀

腎型傳染性支氣管炎的發(fā)病日齡多集中在2～8周齡，該病典型的癥狀呈二相性，第一階段有短期（約1～4 d）的輕微呼吸道癥狀，包括啰音、噴嚏、咳嗽等[1]，但只有在夜間才較明顯。如無混合感染導(dǎo)致的明顯癥狀，常常容易被忽視。隨后又有幾天癥狀消失的“康復(fù)”階段：第二階段開始排灰白色稀糞，后軀及泄殖腔周圍常被糞便污染，病雞食欲減退，渴欲增加，精神不振，羽毛粗亂，脫水，全身衰竭[2]。病程12～20 d，死亡率高達(dá)15%～40%：產(chǎn)蛋雞感染后也會引起產(chǎn)蛋量下降，產(chǎn)異常蛋和死胚率增加，但死亡不多。

4 病理變化及診斷

病雞雞爪干癟，鼻腔有黏液，喉頭，氣管及支氣管黏膜水腫增厚，可見輕度出血，有的氣管1/3處有黏液堵塞[3]。脫水嚴(yán)重，肌肉發(fā)紺，皮膚與肌肉不易分離。腎臟高度腫脹，蒼白，腎小管和輸尿管變粗，內(nèi)充滿白色尿酸鹽，俗稱“花斑腎”[4]。嚴(yán)重者在心包、肝臟、腸漿膜面表面有白色霜樣物沉淀。泄殖腔內(nèi)充滿白色石灰樣稀糞：病程較長者繼發(fā)大腸桿菌和支原體感染，形成心包炎、氣囊炎、肝周炎等敗血癥變化。

根據(jù)該病的流行特點(diǎn)，臨床癥狀和病理剖檢變化，可作出初步診斷。確診需要借助于病毒學(xué)、血清學(xué)和分子生物學(xué)等一系列實(shí)驗(yàn)室檢測法。

5 免疫防制

5.1 疫苗的選擇

由于傳染性支氣管炎病毒血清型復(fù)雜且相互之間交叉保護(hù)力弱，而且新的血清型和變異株不斷出現(xiàn)，臨床上在某一地區(qū)對腎型傳染性支氣管炎保護(hù)力很好的疫苗，對另一地區(qū)的腎型傳染性支氣管炎可能沒有保護(hù)作用。如果盲目地引進(jìn)外地的腎型傳染性支氣管炎疫苗，有可能對本地腎型傳染性支氣管炎有保護(hù)作用，也有可能完全得不到保護(hù)，反而給當(dāng)?shù)卦鎏砹诵碌亩局?。所以用疫苗前必須掌握?dāng)?shù)丶膊×餍械牟《狙逍停褂门c當(dāng)?shù)亓餍卸局昕乖砸恢碌囊呙缙废?，這樣才能達(dá)到有效的免疫預(yù)防目的。目前使用的疫苗主要有：H120株、H52株、Ma5株、M41、28/86株、4/91株等。其中H120株、H52株、Ma5株、M41株均屬于馬薩諸塞型毒株。H120、H52是我國引進(jìn)的荷蘭株，對我國流行的多種血清型傳染性支氣管炎病毒有較好的免疫效果，并對一些腎型病變株有一定的交叉免疫，故成為我國使用最廣的兩個毒株。H120株疫苗毒力很弱，相當(dāng)安全，可以用于1日齡以上育雛雞和產(chǎn)蛋雞。H52株毒力較強(qiáng)，在生產(chǎn)實(shí)踐中一般不用于雛雞和產(chǎn)蛋雞，主要用于60～120日齡雞復(fù)免用。Ma5毒力相當(dāng)于或低于H120株，既可以用于雛雞也可用于產(chǎn)蛋雞。M41毒力較強(qiáng)，因和許多國家和地區(qū)分離出來的毒株屬同一血清型，所以M41被廣泛地應(yīng)用。28/86株是于1986年在意大利的波溪谷暴發(fā)腎型傳染性支氣管炎雞場的28號雞舍分離出的一株腎型毒株，因而命名為28/86株。該毒株被認(rèn)為是致腎病變毒力最強(qiáng)的毒株之一，經(jīng)過SPF雞胚的傳代，達(dá)到滿意的毒力致弱程度，但仍保留了很好的免疫原性。通過一系列的雞群回歸實(shí)驗(yàn)，證明28/86株致弱后穩(wěn)定，毒力不會反強(qiáng)，對免疫動物有很好的免疫原性和高度的安全性，能有效抵御腎型傳染性支氣管炎強(qiáng)毒的攻擊。此毒株毒力低，可用于任何日齡的雞，對腎型病變保護(hù)率較高，毒力穩(wěn)定。4/91株對預(yù)防雞發(fā)生深層肌肉病變、輸卵管病變、產(chǎn)蛋率下降、呼吸道癥狀、頑固性腹瀉的變異性傳染性支氣管炎有較好的預(yù)防效果。

5.2 免疫程序的制定

制定免疫程序時應(yīng)全面考慮該病在當(dāng)?shù)氐牧餍袪顩r、飼養(yǎng)管理?xiàng)l件、疫苗毒株的特點(diǎn)、雞群母源抗體水平等因素，以確定適當(dāng)?shù)拿庖邥r間，以期發(fā)揮疫苗最大的保護(hù)作用。由于該病對機(jī)體的損害主要在幼齡階段，且母源抗體不能阻止感染，只能減輕疾病的癥狀，所以雛雞免疫接種尤為重要。

首免日齡取決于雛雞母源抗體水平及免疫方法以及當(dāng)?shù)匕l(fā)病情況。在腎型傳染性支氣管炎高發(fā)區(qū)，筆者建議將首免日期提前到1日齡，盡早產(chǎn)生主動免疫，增加傳染性支氣管炎的免疫次數(shù)，使雞群得到更多的保護(hù)：種雞或蛋雞1日齡和10日齡必須接種M41、4/91+Ma5進(jìn)行有效預(yù)防；蛋雞群開產(chǎn)前使用滅活疫苗加強(qiáng)免疫，開產(chǎn)后每隔6～8周用H120飲水或噴霧免疫，以防止由于產(chǎn)蛋期感染傳染性支氣管炎造成的產(chǎn)蛋下降、蛋殼質(zhì)量問題和輸卵管囊腫[5]。

5.3 疫苗使用注意事項(xiàng)

活疫苗免疫最好采用滴鼻或點(diǎn)眼免疫的方法，這樣有利于局部抗體的產(chǎn)生。免疫操作時要注意，傳染性支氣管炎病毒在水中衰減快，疫苗稀釋后必須在30 min內(nèi)滴完：由于傳染性支氣管炎病毒在水中迅速上浮，造成不均勻，使用時必須隨時搖動。使用單苗或新支二聯(lián)活疫苗免疫時，不要將兩種疫苗混合在一起進(jìn)行免疫接種，因?yàn)槿绻麄魅拘灾夤苎撞《具^量會干擾新城疫的免疫應(yīng)答。如果采用單苗進(jìn)行免疫，為了避免干擾作用一般應(yīng)該在免疫新城疫后間隔1～2周或者采用新城疫和雞傳染性支氣管炎二聯(lián)活苗（新支二聯(lián)）。新支二聯(lián)活疫苗按照科學(xué)合理的配比進(jìn)行生產(chǎn)，能夠有效地消除兩種病毒之間的干擾。

另外，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，做好生物安全工作，注重消毒工作，嚴(yán)格的衛(wèi)生消毒措施，完善的生物安全體系是預(yù)防該病的關(guān)鍵。雞場要全進(jìn)全出，平時做好帶雞消毒工作，減少環(huán)境中野毒的數(shù)量。平時要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，注意保持雞舍內(nèi)適宜溫度、濕度，合理通風(fēng)，提高雞群體質(zhì)，增強(qiáng)雞群抗病能力。

參考文獻(xiàn)：

[1] 尹震東.免疫不當(dāng)而誘發(fā)雞的傳染性支氣管炎[J].醫(yī)學(xué)動物防制，2007，23（10）：795.

[2] 李淑艷，桂紅艷.傳染性支氣管炎的診斷與防治[J].畜牧獸醫(yī)科技信息，2007（5）：70-71.

[3] 劉 鋒.雞群暴發(fā)傳染性支氣管炎的診治[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2006（6）：47.

[4] 李艷霞.雞腎型傳染性支氣管炎診斷與治療[J].中國畜禽種業(yè)， 2015（12）：143-144.

[5] 劉玉山，馬秀麗，孔凡翠，等.產(chǎn)蛋雞新型傳染性支氣管炎的防制[J].湖北畜牧獸醫(yī)，2005（3）：35-36.