劉 亞,龔 全,李 強(qiáng),杜 軍,趙 剛
(四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院水產(chǎn)研究所,四川 成都 611730)
?
全人工繁殖達(dá)氏鱘胚胎發(fā)育的形態(tài)學(xué)和組織學(xué)觀察
劉 亞,龔 全,李 強(qiáng),杜 軍,趙 剛
(四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院水產(chǎn)研究所,四川 成都 611730)
【目的】為探討達(dá)氏鱘胚胎在各階段的形態(tài)學(xué)特征和發(fā)育過程?!痉椒ā坑肔eica EZ4 HD體視顯微鏡和 Leica DM2500正置熒光顯微成像系統(tǒng)分別對(duì)全人工繁殖達(dá)氏鱘受精卵的胚胎發(fā)育過程和組織切片進(jìn)行了觀察和描述。【結(jié)果】全人工繁殖達(dá)氏鱘受精卵呈球形、灰褐色或淡黃色、不透明,卵徑2.6~3.2 mm。受精卵在水溫為16~18 ℃下歷時(shí)159 h后開始出膜,整個(gè)發(fā)育過程可人為地劃分為受精卵、卵裂、囊胚、原腸胚、神經(jīng)胚、器官發(fā)生和出膜7個(gè)階段,34個(gè)發(fā)育時(shí)期。整個(gè)胚胎發(fā)育過程所需總積溫為2322~2544 ℃*h?!窘Y(jié)論】總體而言,達(dá)氏鱘胚胎發(fā)育階段經(jīng)歷鱘形目魚類普遍存在的輻射狀卵裂方式,與其它鱘魚胚胎發(fā)育早期階段有較高的相似性。
達(dá)氏鱘;全人工繁殖;胚胎發(fā)育;形態(tài)學(xué);組織學(xué)
【研究意義】達(dá)氏鱘(AcipenserdabryanusDumeril),隸屬于鱘形目(Acipenseriformes),鱘科(Acipenseridae),鱘屬(Acipenser),又稱長(zhǎng)江鱘、沙臘子,屬于國(guó)家一級(jí)重點(diǎn)保護(hù)動(dòng)物,為我國(guó)特有種。達(dá)氏鱘主要分布在長(zhǎng)江干流和金沙江下游,在嘉陵江和沱江流域也有分布[1],曾經(jīng)是長(zhǎng)江上游干流和主要支流的漁業(yè)捕撈對(duì)象之一。由于過度捕撈、生存環(huán)境的破壞、水利水電工程建設(shè)和環(huán)境污染等因素的影響, 20世紀(jì)中后期其資源量急劇下降。按照世界自然保護(hù)聯(lián)盟(IUCN)1994年評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)和1996年的評(píng)估結(jié)果,達(dá)氏鱘處于極危級(jí)(CR)[1]?!厩叭搜芯窟M(jìn)展】目前,對(duì)達(dá)氏鱘的研究主要集中于資源調(diào)查、池塘養(yǎng)殖、疾病防治及生長(zhǎng)特性等方面[2-8],而其發(fā)育生物學(xué)研究?jī)H有零星報(bào)道。據(jù)資料記載,前人[9]在1976年對(duì)野生達(dá)氏鱘親魚開展了拴養(yǎng)繁殖,并進(jìn)行了胚胎發(fā)育的形態(tài)學(xué)觀察,獲得部分圖片,但由于研究條件的限制,早期圖示資料有限,且缺乏系統(tǒng)性研究?!颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】本研究首次對(duì)全人工繁殖子一代達(dá)氏鱘的胚胎發(fā)育進(jìn)行形態(tài)學(xué)并結(jié)合組織學(xué)觀察,并比較正常和異常發(fā)育的受精卵形態(tài)學(xué)特征。通過討論野生拴養(yǎng)繁殖和全人工繁殖條件下胚胎發(fā)育的差異以及達(dá)氏鱘與其近緣種胚胎發(fā)育的異同?!緮M解決的關(guān)鍵問題】旨在掌握和揭示達(dá)氏鱘胚胎發(fā)育規(guī)律,豐富達(dá)氏鱘發(fā)育生物學(xué)的基礎(chǔ)資料,為人工繁殖、養(yǎng)殖生產(chǎn)以及育種研究等提供科學(xué)依據(jù),從而促進(jìn)該資源的保護(hù)和合理利用。
1.1 親魚來源及性腺發(fā)育基本情況
實(shí)驗(yàn)用親魚雌雄各5尾,為四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院水產(chǎn)研究所在長(zhǎng)江宜賓段捕獲野生子一代個(gè)體,于2006年進(jìn)行內(nèi)塘馴養(yǎng)。雌魚體長(zhǎng):104~126 cm,體重:9.2~17 kg,年齡7~9齡,性腺發(fā)育Ⅳ期,均為初產(chǎn)魚。雄魚體長(zhǎng):102~118 cm,體重:8.9~14.5 kg,年齡7~9齡,性腺發(fā)育Ⅳ期。
1.2 催產(chǎn)和孵化
通過注射LHRH-A2及鯉魚腦垂體進(jìn)行人工催產(chǎn),采用半干法人工授精,得到受精卵。受精后的魚卵用20 %的滑石粉脫粘,經(jīng)清洗后轉(zhuǎn)入孵化器中流水孵化,孵化水溫16~18 ℃。
1.3 胚胎發(fā)育過程觀察
用解剖針去除外膜,經(jīng)清水沖洗,采用Leica EZ4 HD體視顯微鏡觀察并拍照,同時(shí)取部分樣品固定于10 %甲醛溶液中以供后期復(fù)查和作為組織切片樣品備用。胚胎發(fā)育前期每0.5 h觀察1次,到達(dá)囊胚期后每2 h觀察1次,每次觀察取樣30粒以上,觀察時(shí)間從剛受精開始至全部出膜結(jié)束。各發(fā)育階段的起始時(shí)間以發(fā)育過程中50 %以上個(gè)體達(dá)到該時(shí)期為準(zhǔn)。
1.4 組織切片及HE染色
將胚胎發(fā)育各階段的受精卵用10 %甲醛固定24 h后轉(zhuǎn)移至70 %酒精中保存。經(jīng)梯度乙醇脫水,二甲苯透明,石蠟包埋??v切胚胎動(dòng)物極和植物極,切片制好后置于37 ℃恒溫箱中烘干。將烘干后的切片進(jìn)行HE染色,在Leica DM2500正置熒光顯微成像系統(tǒng)下觀察組織學(xué)形態(tài)結(jié)構(gòu),拍照記錄。
2.1 達(dá)氏鱘胚胎發(fā)育時(shí)序
根據(jù)達(dá)氏鱘胚胎發(fā)育各階段形態(tài)和組織學(xué)特點(diǎn),參考其他學(xué)者[10-17]的研究工作,對(duì)達(dá)氏鱘的胚胎發(fā)育過程進(jìn)行分期和描述。在16~18 ℃溫度條件下,達(dá)氏鱘胚胎從受精開始至發(fā)育至出膜耗時(shí)129 h,人為可劃分7個(gè)階段,包括:受精卵、卵裂、囊胚、原腸胚、神經(jīng)胚、器官發(fā)生和出膜。根據(jù)胚胎發(fā)育時(shí)序及形態(tài)特征變化,將7個(gè)階段劃分為34個(gè)時(shí)期(表1)。整個(gè)胚胎發(fā)育過程所需總積溫為:2322~2544 ℃*h。
2.2 各階段發(fā)育特征
2.2.1 受精卵階段 成熟達(dá)氏鱘卵呈球形、灰褐色或淡黃色、不透明;卵徑2.6~3.2 mm,卵膜緊貼于卵的表面(圖2-1);卵為粘性、沉性卵。剛受精的卵,動(dòng)物極集中多數(shù)細(xì)胞質(zhì),中央出現(xiàn)暗色的色素環(huán)包圍著明亮的極性斑,植物極色素均勻(圖1-1),卵膜開始吸水,并逐漸開始形成卵周系(圖2-2)。受精后約25 min,受精卵吸水膨脹,卵徑約3.2~3.8 mm,形成較大的卵周隙,此時(shí)受精卵具有較強(qiáng)黏性;動(dòng)物極朝上,植物極朝下,細(xì)胞質(zhì)從植物極向動(dòng)物極流動(dòng),在動(dòng)物極中心形成一個(gè)暗斑,暗斑周圍有一寬的明亮帶(圖1-2);受精后大約1 h,色素在偏心的動(dòng)物極積累形成褐色帶(圖1-3),胚盤形成期,胚盤隆起不明顯(圖2-3)。
2.2.2 卵裂階段 達(dá)氏鱘的卵裂為特殊的輻射裂。受精后4 h,動(dòng)物極出現(xiàn)一縱向分裂溝,為經(jīng)裂,將動(dòng)物極分裂成大小相似的2個(gè)分裂球,此時(shí)胚胎進(jìn)入2細(xì)胞期(圖1-4)。受精后5 h,第2次分裂開始,為經(jīng)裂;此時(shí)卵裂溝與第1次卵裂溝垂直,受精卵被分割成 4 個(gè)大小基本相同的分裂球,胚胎進(jìn)入4細(xì)胞期(圖1-5)。受精后6 h,第3次卵裂開始,仍然為經(jīng)裂,受精卵被分裂成8個(gè)大小不等的分裂球(圖1-6);進(jìn)入8細(xì)胞期。同時(shí)第1次分裂溝在植物極閉合,植物極被分為兩部分。受精后7 h,第4次卵裂開始,出現(xiàn)橫向分裂溝,為緯裂,此時(shí),胚胎被分成16個(gè)大小不等的分裂球(圖1-7);進(jìn)入16細(xì)胞期。同時(shí)第2次分裂溝延伸至赤道下方,但大多數(shù)并未在植物極形成完全閉合。受精后8 h,第5次卵裂開始,第 2 次的縱向分裂溝在植物極閉合,胚胎被分成 32 個(gè)大小不等的分裂球(圖1-8),進(jìn)入32細(xì)胞期。受精8.8 h后,動(dòng)物極分成越來越小的不規(guī)則細(xì)胞,進(jìn)入多細(xì)胞期。此時(shí),動(dòng)物極中心出現(xiàn)較深的色素,植物極完全分裂(圖1-9)。
2.2.3 囊胚階段 受精后9 h 30 min,胚胎進(jìn)入囊胚早期,動(dòng)物極色素變淺并逐漸變得明亮,植物極色素較深。動(dòng)物極分裂球變小,單個(gè)細(xì)胞可辨認(rèn)(圖1-10);植物極分裂球仍較大。受精后 11 h,胚胎進(jìn)入囊胚中期,分裂球更小,動(dòng)物極細(xì)胞核分裂出現(xiàn)不同步,整個(gè)受精卵的分裂球之間有明顯的間隙(圖1-11)。受精后16 h,進(jìn)入囊胚晚期,動(dòng)物極、植物極分裂球均不斷變小,動(dòng)物極細(xì)胞間的界線變得模糊,單個(gè)細(xì)胞難以辨認(rèn),動(dòng)物極開始往植物極下包(圖1-12),形成囊胚腔(圖2-4、2-5)。
表1 全人工繁殖達(dá)氏鱘胚胎發(fā)育過程
2.2.4 原腸胚階段 受精后約22 h,原腸初期開始,一深色的色素帶出現(xiàn)在赤道附近形成(圖1-13)。受精后 22 h,胚胎進(jìn)入原腸初期,色素帶處產(chǎn)生一個(gè)短而不深的狹縫狀胚孔(圖1-14)。受精后約30 h,原腸中期開始,此時(shí)側(cè)唇和腹唇形成,外胚層細(xì)胞通過側(cè)唇和腹唇繼續(xù)內(nèi)卷,形成胚環(huán);動(dòng)物極覆蓋胚胎表面的 2/3,植物極、動(dòng)物極界限明顯(圖1-15)。受精后約35 h,內(nèi)胚層細(xì)胞仍然暴露在植物極外面,形似栓狀,故稱為“卵黃栓”。較大的卵黃栓像一個(gè)大塞子嵌在胚環(huán)內(nèi),進(jìn)入大卵黃栓期,動(dòng)物極和植物極界限很清晰(圖1-16)。受精后約38 h,進(jìn)入小黃栓期,植物極僅有一個(gè)很小的卵黃栓,動(dòng)物極幾乎覆蓋整個(gè)卵(圖1-17)。在原腸早期可見包被層EVL及深層細(xì)胞DC(圖2-6),原腸中期和后期,原腸胚明顯(圖2-7、2-8);上胚層Ep,內(nèi)胚層 En,下胚層 Hy可見(圖2-9)。
1.剛受精的卵;2.卵周隙形成;3.胚盤隆起期;4.2細(xì)胞期;5.4細(xì)胞期;6.8細(xì)胞期;7.16細(xì)胞期;8.32細(xì)胞期;9.多細(xì)胞期;10.囊胚早期;11.囊胚中期;12.囊胚晚期;13.原腸初期;14.原腸早期;15.原腸中期;16.大卵黃栓期;17.小卵黃栓期;18.隙狀胚孔期;19.神經(jīng)胚早期;20.寬神經(jīng)板期;21.神經(jīng)褶靠攏期;22.神經(jīng)胚晚期;23.神經(jīng)管閉合期;24.眼囊形成期;25.尾牙形成期;26.尾牙分離期;27.短管心臟期;28.長(zhǎng)管心臟期;29.聽板形成期;30.肌肉效應(yīng)期;31.心跳期;32.尾達(dá)頭部期;33.出膜前期;34.出膜期圖1 全人工繁殖達(dá)氏鱘胚胎發(fā)育Fig.1 Embryonic development of artificially-bred A. dabryanus Dumeril
2.2.5 神經(jīng)胚階段 受精后約39 h,卵黃栓逐漸消失,胚孔的二側(cè)唇相互靠攏,胚孔邊緣接近閉合,只留下極其狹窄的裂隙,進(jìn)入隙狀胚孔期(圖1-18)。受精后約 41 h,胚胎背部開始形成馬蹄狀的神經(jīng)板,隨后,神經(jīng)板增厚,并在周圍神經(jīng)板腦部周圍出現(xiàn)神經(jīng)褶(圖1-19)。受精后約42.5 h,進(jìn)入寬板神經(jīng)期,在頭部神經(jīng)板周圍有清楚的呈馬蹄形的神經(jīng)褶(圖1-20);神經(jīng)板中央有向下增長(zhǎng)的呈縱行的神經(jīng)溝。受精后43.5 h,腦部處的神經(jīng)褶邊緣升高、增厚并逐漸靠攏。神經(jīng)板下陷、變窄,在軀干部的兩側(cè)出現(xiàn)排泄系統(tǒng)原基(圖1-21)。受精后45h,腦部神經(jīng)褶繼續(xù)靠攏,神經(jīng)板最后閉合成神經(jīng)管(圖1-22);軀干部的神經(jīng)褶也開始靠近,排泄系統(tǒng)原基加長(zhǎng)。受精后51 h,神經(jīng)管閉合,沿神經(jīng)褶融合線的聯(lián)合清晰可見;頭部逐漸膨大加長(zhǎng),胚胎頭部形成為前、中、后 3 個(gè)腦泡(圖1-23);胚胎的頭和尾部已很明顯,胚體位于背面,卵黃囊位于腹面;排泄系統(tǒng)原基也顯著加長(zhǎng),但沒有達(dá)到神經(jīng)管末端。該階段神經(jīng)板形成(圖2-10、2-11),視泡開始出現(xiàn)(圖2-12),神經(jīng)管NT及脊索NO形成(圖2-13、2-14、2-15、2-16),此后肌節(jié)So也可見(圖2-17)。
表2 全人工繁殖達(dá)氏鱘與其它鱘科魚類胚胎發(fā)育情況的比較
1.未受精;2.剛授精3 min;3.胚盤形成期;4.囊胚期;5.囊胚腔 Bl;6.原腸早期 包被層 EVL,深層細(xì)胞 DC;7.原腸中期;8.原腸胚 9.上胚層 Ep,內(nèi)胚層 En,下胚層 Hy;10.神經(jīng)胚期;11.神經(jīng)板形成;12.視泡出現(xiàn)期;13.神經(jīng)管 NT,脊索 No形成;14.神經(jīng)管 NT,脊索 No.;15. 神經(jīng)胚期(神經(jīng)管閉合);16.神經(jīng)管 NT,脊索 No.;17.神經(jīng)管 NT,脊索 No.,肌節(jié)So ;18、19.體節(jié)出現(xiàn);20.眼囊期;21.聽囊期;22.腦分化期;23.圍心腔形成期;24.消化管形成;25.尾芽游離期;26、27.出膜前期 圖中比例尺大小均為200 μm圖2 全人工繁殖達(dá)氏鱘胚胎發(fā)育的組織學(xué)觀察Fig.2 Histological observations of embryonic development in artificially-bred A. dabryanus Dumeril
達(dá)氏鱘A.dabryanus發(fā)育水溫(℃)Watertemperatureofembryonicdevelopment總孵育時(shí)間(h)Timeofembryonicdevelopment積溫(℃?h)Accumulatedtemperature平均卵徑(mm)Averageeggdiameter全人工繁殖16.0~18.0129~1592322~25442.85野生拴養(yǎng)催產(chǎn)繁殖[9]17.0~18.0115~1172012~20473.00
2.2.6 器官發(fā)生階段 胚胎發(fā)育至55 h進(jìn)入視泡形成期,2個(gè)眼突形成于前腦泡處,眼原基形成(圖1-24)。受精后約60 h,側(cè)板達(dá)到頭部前端,排泄系統(tǒng)原基前部增厚,腎小管原基形成,此時(shí)胚胎尾部扁平(圖1-25)。受精后65 h,側(cè)板從接近到完全聯(lián)合,排泄系統(tǒng)從身體中部一直延伸至尾端;胚體向上隆起,高出球面,尾芽呈棒狀并突出(圖1-26)。受精后約74 h,心臟開始呈短管狀,位于頭部的前下方(圖1-27);頭部開始抬起,尾芽開始逐漸變長(zhǎng)變窄。受精后約80 h,心臟原基呈長(zhǎng)管狀(圖1-28),頭明顯抬高,視泡明顯。受精后約 85 h,頭部繼續(xù)抬高,心臟呈“C”形;聽板在腦的第三膨大部分的兩側(cè)出現(xiàn)(圖1-29)。受精后約 90 h,胚胎尾向腹面彎曲加長(zhǎng),并逐漸接近心臟,肌肉也開始顫動(dòng),聽泡形成(圖1-30)。受精后約95 h,心臟呈大“C”狀,尾的末端扁平(圖1-31)。受精后約 101 h,尾末端繼續(xù)伸長(zhǎng)并接觸頭部,胚胎在卵內(nèi)轉(zhuǎn)動(dòng)(圖1-32)。該階段組織切片圖可見體節(jié)的出現(xiàn)(圖2-18、2-19),眼囊期(圖2-20)、聽囊期(圖2-21)、腦分化期(圖2-22)以及圍心腔和消化管形成(圖2-23、2-24)。
1.剛受精的卵;2.卵裂期,形成3細(xì)胞;3.卵裂期,形成6細(xì)胞;4.卵裂期,形成7細(xì)胞;5~9.卵裂期,動(dòng)物極細(xì)胞分裂不均等;10.胚孔閉合不完全;11.神經(jīng)管閉合異常;12.頭部發(fā)育異常;13~15.尾牙發(fā)育異常;16~18.頭部、肌節(jié)、尾牙的發(fā)育異常;19.胚胎死亡圖3 全人工繁殖達(dá)氏鱘胚胎異常發(fā)育Fig.3 Abnormality of embryonic development on artificially-bred A. dabryanus Dumeril
2.2.7 出膜階段 受精后113 h,尾的末端略過頭部,尾部鰭?cǎi)拮儗?;尾牙游離(圖2-25)。卵黃囊上血管明顯,心跳搏動(dòng)加快;胚體在膜內(nèi)自由地扭動(dòng) (圖1-33)。受精后大約在 129 h,尾的末端達(dá)到間腦,進(jìn)入出膜前期(圖2-26、2-27),隨后仔魚開始孵出(圖1-34),至159 h同批次魚卵全部孵出。剛孵出的仔魚全長(zhǎng)9.0~1.02 mm。
3.1 胚胎發(fā)育特征
達(dá)氏鱘的卵裂方式為特殊的輻射狀卵裂,這種卵裂方式與真骨魚類的端黃卵不同,其表現(xiàn)在前3次卵裂均為經(jīng)裂,第4次卵裂為緯裂,這種卵裂方式可能是鱘形目魚類普遍存在的卵裂方式[10-14,18]。與其它鱘形目魚類胚胎發(fā)育過程中所不同的是,在達(dá)氏鱘胚胎發(fā)育過程中細(xì)胞分裂8細(xì)胞期,同時(shí)能夠觀察到第一次卵裂溝僅達(dá)到赤道下方和在植物極閉合;而西伯利亞鱘[10]、匙吻鱘[18]、施氏鱘[13]在細(xì)胞分裂8細(xì)胞期觀察到第一次卵裂溝在植物極閉合,中華鱘[11]在細(xì)胞分裂8細(xì)胞期觀察到第一次分裂溝越過卵的赤道,擴(kuò)展到植物極。在心跳期,達(dá)氏鱘的心臟呈“C”型,尾牙變扁平,而施氏鱘與中華鱘心臟呈“S”型,尾牙分離變細(xì)??傮w而言,鱘魚胚胎發(fā)育過程早期階段有較高的相似性。
成熟達(dá)氏鱘卵呈球形、灰褐色或淡黃色、不透明、魚卵受精后數(shù)分鐘出現(xiàn)粘性,與前人[9]報(bào)道的一致。全人工繁殖的達(dá)氏鱘魚卵與其它鱘魚魚卵相比較小(表2)且全人工繁殖的達(dá)氏鱘魚卵卵徑小于與野生拴養(yǎng)繁殖[9]的(表3),這與王丙乾[19]等對(duì)人工培育與野生史氏鱘的胚胎發(fā)育結(jié)果一致,均顯示出人工培育卵徑較小,這可能與初產(chǎn)魚、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)積累量有關(guān)。
3.2 胚胎發(fā)育時(shí)間和積溫
全人工繁殖的達(dá)氏鱘胚胎發(fā)育所需積溫較其它鱘魚高(表2),且高于野生拴養(yǎng)繁殖[9]的(表3)。這個(gè)結(jié)果與王丙乾等[19]比較人工培育與野生史氏鱘胚胎發(fā)育結(jié)果相似,均表現(xiàn)出人工培育卵的胚胎發(fā)育時(shí)間較野生卵的發(fā)育時(shí)間長(zhǎng),積溫也較高。這可能與親魚培育過程中的營(yíng)養(yǎng)需求和卵黃沉積度有一定的關(guān)系。
3.3 胚胎異常發(fā)育現(xiàn)象
在胚胎發(fā)育過程中,還觀察到部分受精卵在剛受精、卵裂期、神經(jīng)胚階段及器官形成時(shí)期等階段均異常發(fā)育。剛受精的卵,有的偏移動(dòng)物極中央而在一側(cè)集中多數(shù)細(xì)胞質(zhì)(圖3-1);卵裂期,部分胚胎從第二次分裂期至多細(xì)胞期形成,動(dòng)物極分裂不均等,出現(xiàn)3細(xì)胞(圖3-2),6細(xì)胞、10細(xì)胞(圖3-3至3-9)。在卵裂期,部分胚胎形成的卵裂溝也異常,有的卵裂溝不明顯,有的僅在動(dòng)物極形成卵裂,植物極未分裂。在神經(jīng)胚階段,觀察到少量胚胎的胚孔閉合不完全(圖3-10、3-11),神經(jīng)管閉合異常;器官形成期,頭部、尾牙以及肌節(jié)的發(fā)育異常均有觀察到(圖3-12至3-18)。連續(xù)觀察上述異常發(fā)育的受精卵,發(fā)現(xiàn)均無一例外的在后期停止發(fā)育,胚胎死亡(圖3-19)。造成這種異常發(fā)育的原因還有待進(jìn)一步研究。
致 謝:在研究過程中受到四川農(nóng)業(yè)大學(xué)趙柳蘭、楊淞老師、 肖青同學(xué),西南大學(xué)蒲德永老師的幫助,特此感謝。
[1]陳細(xì)華. 鱘形目魚類生物學(xué)與資源現(xiàn)狀[M]. 北京:海洋出版社,2007:53-57.
[2]魯雪報(bào),倪 勇,饒 軍,等. 達(dá)氏鱘的資源現(xiàn)狀及研究進(jìn)展[J]. 水產(chǎn)科技情報(bào),2012,39(5):251-257.
[3]杜 軍,趙 剛,龔 全,等. 達(dá)氏鱘親魚池塘人工培育試驗(yàn)[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2009,22(3):824-827.
[4]何 斌,陳先均,杜 軍,等. 人工養(yǎng)殖條件下達(dá)氏鱘生長(zhǎng)特性的研究[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2011,24(1):335-339.
[5]劉 濤. 達(dá)氏鱘子二代全人工繁殖首獲成功[J]. 水產(chǎn)科技情報(bào),2007,3(4):139-139.
[6]魯雪報(bào),倪 勇,饒 軍,等. 達(dá)氏鱘的資源現(xiàn)狀及研究進(jìn)展[J]. 水產(chǎn)科技情報(bào),2012,39(5):251-257.
[7]Zhuang Ping, Ke Fu’en, Wei Qiwei, et al. Biology and life history of Dabry’s sturgeon,Acipenserdabryanus, in the Yangtze River[J]. Environmental Biology of Fishes, 1997,48(1-4): 257-264.
[8]Kynard Boyd, Zhuang Ping, Zhang Tao, et al. Ontogenetic behavior and migration of Dabry’s sturgeon,Acipenserdabryanus, from the Yangtze River, with notes on body color and development rate[J]. Environmental Biology of Fishes, 2003,66(1): 27-36.
[9]四川省長(zhǎng)江水產(chǎn)資源調(diào)查組. 長(zhǎng)江鱘魚類生物學(xué)及人工繁殖研究[C]. 成都:四川科學(xué)技術(shù)出版社, 1988:232-247.
[10]宋 煒,宋佳坤,范純新,等. 全人工繁殖西伯利亞鱘的早期胚胎發(fā)育[J]. 水產(chǎn)學(xué)報(bào),2010,34(5):777-785.
[11]陳細(xì)華. 中華鱘胚胎發(fā)育和性腺早期發(fā)育的研究[D]. 廣州:中山大學(xué)博士論文,2004:27-102.
[12]杰特拉弗T A,金茲堡A C. 鱘魚類的胚胎發(fā)育與其養(yǎng)殖問題[M]. 北京:科學(xué)出版社,1958:68-168.
[13]劉洪柏,宋蘇祥,孫大江,等. 施氏鱘的胚胎及胚后發(fā)育研究[J]. 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué),2000(3):5-10.
[14]吳興兵,朱永久,陳建武,等. 小體鱘胚胎發(fā)育特征觀察[J]. 淡水漁業(yè),2012,42(6):61-67.
[15]佟學(xué)紅,馬道遠(yuǎn),徐世宏,等. 大菱鲆胚胎發(fā)育的形態(tài)學(xué)和組織學(xué)研究[J]. 海洋與湖沼,2011,42(6):844-849.
[16]劉 美,李鳳超,穆淑梅,等. 半滑舌鰨胚胎發(fā)育組織學(xué)觀察[J]. 四川動(dòng)物,2008,27(5):737-739.
[17]薛俊增,堵南山,賴 偉. 三疣梭子蟹胚胎發(fā)育早期的組織學(xué)研究[J]. 動(dòng)物學(xué)研究,2001,22(1):69-73.
[18]楊華蓮,何 川,馬立鳴,等. 匙吻鱘受精卵胚胎發(fā)育的研究[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2012,25(4):1489-1494.
[19]王丙乾,曲秋芝,邱嶺泉,等. 人工培育與野生史氏鱘精、卵生物學(xué)及胚胎發(fā)育的比較分析[J]. 大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào),2003,18(4):246-251.
[20]唐國(guó)盤. 中華鱘胚胎發(fā)育和早期生活史階段耗氧量的研究[D]. 武漢:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士論文,2005:19-26.
(責(zé)任編輯 陳 虹)
Morphological and Histological Observation of Embryonic Developmentof Artificially-bredAcipenserdabryanusDumeril
LIU Ya,GONG Quan,LI Qiang,DU Jun,ZHAO Gang
(Fishery Institute of Sichuan Academy of Agricultural Sciences,Sichuan Chengdu 611730,China)
【Objective】The present study was conducted to investigate the morphological characteristics and embryonic development schedule of artificially-bredA.dabryanusDumeril.【Method】The morphological and embryonic histological of fertilized eggs of artificially-bredAcipenserdabryanusDumeril were observed by Leica EZ4 HD and Leica DM2500.【Result】The mature eggs were spherical, beige or pale yellow, opaque and 2.6-3.2 mm in diameter. Under the temperature of 16-18 ℃, its embryonic development lasted for 159 hours. The whole embryonic development of it could be divided into seven stages, including fertilized egg stage, cell division stage, blastula stage, gastrula stage, neurula stage, organ formation stage and hatching stage, and contained thirty four developing phases. The total accumulated temperature of its embryonic development required was 2322-2544 ℃·h.【Conclusion】 In general, the cleavage way ofA.dabryanusDumeril was radial cleavage which was common in sturgeon, indicating that its embryo development in early stage had a high similarity with other sturgeon.
AcipenserdabryanusDumeril;Reproduction;Embryonic development;Morphology;Histology
1001-4829(2017)7-1686-07
10.16213/j.cnki.scjas.2017.7.039
2016-07-10
四川省科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2016NYZ0047);四川省重點(diǎn)研發(fā)項(xiàng)目(2017SZ0083)
劉 亞(1982-),女,碩士研究生,助理研究員,主要從事水產(chǎn)養(yǎng)殖和分子生物學(xué)方面研究,E-mail:liuya2343@163.com,Tel:18080812343。
S917
A