謝 偉， 景春梅

2010－2015年重慶市某三甲兒童醫(yī)院新生兒感染細(xì)菌的變遷及耐藥性分析

謝 偉， 景春梅

目的 了解2010－2015年重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院所在地區(qū)新生兒感染細(xì)菌的變遷特征及耐藥性，為臨床合理使用抗菌藥物和預(yù)防控制醫(yī)院感染提供依據(jù)。方法 分析該期間檢出病原菌的構(gòu)成和前幾位病原菌對抗菌藥物的耐藥性，采用BD Phoenix 100儀器結(jié)合紙片擴散法進(jìn)行藥敏試驗，按CLSI標(biāo)準(zhǔn)判斷結(jié)果。結(jié)果 2010－2015年檢出病原菌10 569株，其中革蘭陰性菌8 540株，占80.8 %；以肺炎克雷伯菌為主，其次是大腸埃希菌、鮑曼不動桿菌、陰溝腸桿菌、銅綠假單胞菌，檢出率分別為29.3 %、16.7 %、9.9 %、8.6 %、3.3 %。革蘭陽性菌1 490株，占14.1 %；以金黃色葡萄球菌為主，其次是表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌，檢出率分別為7.8 %、2.2 %、1.8 %。腸桿菌科細(xì)菌對亞胺培南、美羅培南耐藥率＜10%，其次是銅綠假單胞菌＞10 %，而鮑曼不動桿菌耐藥率均＞20 %； 碳青霉烯類耐藥的肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌比例分別接近8.4 %和2.9 %。未檢出耐萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺的革蘭陽性菌。結(jié)論 該醫(yī)院所在地區(qū)新生患兒感染細(xì)菌以肺炎克雷伯菌居多，呼吸道感染最為常見，鮑曼不動桿菌檢出率呈逐年上升趨勢，其余細(xì)菌未見趨勢性變化。耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌較多。

新生兒感染； 細(xì)菌變遷； 細(xì)菌耐藥性

新生兒由于免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育完善，特別是伴有基礎(chǔ)疾病的新生兒，隨著侵襲性操作的增多、住院時間的延長，新生兒醫(yī)院感染一直是造成新生兒死亡的重要原因之一。由于大量或（和）不合理使用廣譜抗生素，使耐藥病原菌日趨增多，導(dǎo)致住院治療時間延長、治療費用增加等。因此，合理使用抗菌藥物治療新生兒感染性疾病，具有重要的價值。本文對2010－2015年我院新生兒標(biāo)本中分離的細(xì)菌進(jìn)行回顧性分析，了解其分布特點和耐藥性，以期為有效治療新生兒細(xì)菌感染、指導(dǎo)臨床合理用藥、減少耐藥菌產(chǎn)生、預(yù)防醫(yī)院感染提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 菌株來源

收集2010年1月1日－2015年12月31日就診于我院的新生兒各類臨床標(biāo)本培養(yǎng)出的細(xì)菌，剔除同一患者相同部位的重復(fù)分離菌株。

1.2 細(xì)菌培養(yǎng) / 鑒定 / 藥敏試驗

按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第3版進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng)，細(xì)菌鑒定與藥敏試驗采用BD Phoenix 100全自動微生物鑒定 / 藥敏系統(tǒng)，藥敏結(jié)果按照CLSI標(biāo)準(zhǔn)判讀。質(zhì)控菌株為大腸埃希菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC29213，白念珠菌ATCC14053，購自衛(wèi)生部臨床檢驗中心。

1.3 統(tǒng)計分析

采用 WHONET 5.6分析前5位革蘭陰性菌、前3位革蘭陽性菌的耐藥性。2010－2015年新生兒細(xì)菌的檢出構(gòu)成、在不同標(biāo)本中的分布、各年份細(xì)菌耐藥率均采用計數(shù)資料進(jìn)行統(tǒng)計分析，相對數(shù)用率表示。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)菌構(gòu)成

2010－2015 年新生兒各類臨床標(biāo)本中共分離10 569株細(xì)菌。革蘭陰性菌8 540株，占80.8 %，主要為肺炎克雷伯菌肺炎亞種，其次是大腸埃希菌、鮑曼不動桿菌、陰溝腸桿菌、銅綠假單胞菌，檢出株數(shù)和檢出率（占總菌數(shù)）分別為3 102株（29.3 %）、1 768株（16.7 %）、1 043株（9.9 %）、910株（8.6 %）、347株（3.3 %）。鮑曼不動桿菌檢出率呈逐年上升趨勢，其余細(xì)菌未見趨勢性變化。革蘭陽性菌1 490株，占14.1 %；主要為金黃色葡萄球菌827株，其次是表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌，檢出株數(shù)分別為233株、192株，檢出率占總菌數(shù)7.8 %、2.2 %、1.8 %。見表1。

2.2 標(biāo)本來源分布

10 569株細(xì)菌中，呼吸道痰標(biāo)本分離出9 527株，占90.2 %，靜脈血、尿、分泌物、膿液、腦脊液、其他檢出株數(shù)分別為812株（7.7 %）、80株（0.8 %）、61株（0.6 %）、19株（0.2 %）、18株（0.2 %）、52株（0.5 %）。

2.3 腸桿菌科細(xì)菌藥敏結(jié)果

2010－2015 年腸桿菌科細(xì)菌對亞胺培南、美羅培南、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、阿米卡星、慶大霉素敏感率高，在78.8 %～99.0 %；頭孢菌素類的藥敏顯示除頭孢他啶外耐藥率均＞50 %。碳青霉烯類藥物耐藥的肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌、陰溝腸桿菌占各自菌的比率為8.4 %、2.9 %、1.1 %；產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶（ESBL）菌株的檢出率分別為47.5 %、45.8 %、2.6 %。ESBL菌株藥敏結(jié)果未修正。3種主要腸桿菌科細(xì)菌對受試抗菌藥物的總耐藥率見表2。

2.4 不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌藥敏結(jié)果

2010－2015 年鮑曼不動桿菌對抗菌藥物敏感率在73.5 %～92.1 %，對碳青霉烯類耐藥率＞20.0 %；銅綠假單胞菌對抗菌藥物的敏感率在71.3 %～98.4 %，對亞胺培南耐藥率＞20.0 %；流感嗜血桿菌對頭孢菌素類、氨芐西林-舒巴坦、阿奇霉素敏感率在86.2 %～99.6 %。氨芐西林敏感率＜30 %。見表3。

2.5 革蘭陽性菌藥敏結(jié)果

未檢出耐萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺的革蘭陽性菌。對青霉素、氨芐西林耐藥率均＞95 %，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）檢出率占該菌的11.3 %；表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌耐甲氧

西林檢出率占各自菌的67.2 %、90.4 %。前3位革蘭陽性菌對受試抗菌藥物的總耐藥率見表4。

表1 2010－2015年新生兒標(biāo)本中細(xì)菌分布及構(gòu)成比Table 1 Distribution of pathogenic bacteria from 2010 to 2015

表2 2010－2015年肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌、陰溝腸桿菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 2 Overall antimicrobial susceptibility pro fi le of top three Enterobacteriaceae species from 2010 to 2015（ %）

表3 2010－2015年鮑曼不動桿菌、銅綠假單胞菌、流感嗜血桿菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 3 Overall antimicrobial susceptibility prof i le of Acinetobacter， P. aeruginosa and H. inf l uenzae from 2010 to 2015（ %）

3 討論

我院是中國西部最大的綜合性兒童醫(yī)療中心，患者主要來自重慶主城區(qū)及周邊區(qū)縣。2010－2015年我院從新生兒送檢的臨床標(biāo)本中分離出10 569株細(xì)菌，以革蘭陰性菌為主（占80.8 %），與蔣鴻超等[1]報道以革蘭陰性菌為主的82.6 %基本一致。革蘭陰性菌主要為肺炎克雷伯菌，與章小芳等[2]報道的肺炎克雷伯菌是醫(yī)院感染新生兒肺炎的主要病原菌一致。革蘭陽性菌感染以金黃色葡萄球菌為主，分離的主要病原菌種類與王紅梅等[3]的報道基本一致。連續(xù)6年，呼吸道標(biāo)本中細(xì)菌檢出率占90.1 %，說明呼吸道感染是新生兒感染的主要途徑，這可能與新生兒皮膚黏膜屏障功能不完善，上呼吸道發(fā)育沒有健全，免疫力較低有關(guān)。

藥敏結(jié)果顯示革蘭陰性菌對亞胺培南、美羅培南耐藥率低，可以優(yōu)先考慮應(yīng)用。前5位陰性菌對四環(huán)素類、喹諾酮類、磺胺類耐藥率相對較低，但應(yīng)盡量避免使用[4]，因為該類藥物對新生兒的牙齒、骨骼、關(guān)節(jié)軟骨、中樞神經(jīng)系統(tǒng)等的不良反應(yīng)較大。前5位革蘭陰性菌對慶大霉素、阿米卡星的耐藥率＜30.0 %，可以慎重使用，但在用藥時應(yīng)該特別注意對新生兒產(chǎn)生的不良反應(yīng)。腸桿菌科肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌耐藥率較高（＞50 %），應(yīng)根據(jù)藥敏結(jié)果應(yīng)用；這2種細(xì)菌產(chǎn)ESBL檢出率分別為47.5 %和45.8 %，低于王紅梅等[3]報道的66.5 %和66.6 %，這可能與地域環(huán)境有關(guān)。肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌對哌啦西林耐藥率高＞75.0 %，提示新生兒感染這兩種細(xì)菌時應(yīng)避免使用青霉素類。碳青霉烯類耐藥的肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌分別占各自菌種的8.4 %和2.9 %，其他地區(qū)未發(fā)現(xiàn)碳青霉烯類耐藥的菌株[5]，說明重慶地區(qū)耐碳青霉烯類藥物的腸桿菌較多。對新生兒常用的頭孢菌素類抗生素，鮑曼不動桿菌和銅綠假單胞菌的敏感率約在70 %，可以選用[6]。需特別注意新生兒鮑曼不動桿菌的感染，從表1的數(shù)據(jù)顯示，鮑曼不動桿菌的檢出有逐年上升趨勢，不容忽視。其對所有受試抗菌藥物耐藥率均在20 %～30 %，對碳青霉烯類藥物耐藥率達(dá)22.2 %，與唐震海等[7]報道的22.0 %一致，說明鮑曼不動桿菌的耐藥性日趨嚴(yán)重。銅綠假單胞菌對哌啦西林耐藥率為19.4 %，對亞胺培南耐藥率＞20.0 %，對銅綠假單胞菌的感染可以適當(dāng)謹(jǐn)慎應(yīng)用。流感嗜血桿菌對頭孢菌素類、氨芐西林-舒巴坦、阿奇霉素敏感率高在86.2 %～99.6 %，可以選用[6]，而對氨芐西林敏感率＜30 %，要慎用。

未檢出耐萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺的革蘭陽性菌。萬古霉素是目前治療耐甲氧西林葡萄球菌全身感染最有效的藥物，但新生兒應(yīng)慎用。金黃色葡萄球菌對以紅霉素為代表的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素耐藥率達(dá)52.7 %，但因該藥抗菌譜廣，越來越廣泛應(yīng)用于新生兒期及圍產(chǎn)期疾病中[3]。對青霉素、氨芐西林耐藥率均＞95 %，與郭瑞林等[8]報道的一致。金黃色葡萄球菌對苯唑西林耐藥率為11.3 %，與李善秀等[9]報道的10.5 %一致。表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌中耐甲氧西林菌株分別為67.2 %和90.4 %，凝固酶陰性葡萄球菌耐甲氧西林株檢出率高且呈多重耐藥，可能與近年來廣泛使用第三代頭孢菌素有關(guān)，并在藥敏試驗中易檢出耐甲氧西林葡萄球菌株[10]。因此，應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格執(zhí)行醫(yī)護(hù)工作人員手衛(wèi)生、控制抗生素使用級別、頻率、時間，減少醫(yī)院感染機會。

總之，本次研究顯示，新生兒感染、多重耐藥病原菌呈上升趨勢。因此，應(yīng)加強新生兒患兒病原菌分布及其耐藥性監(jiān)測，臨床在治療過程中，應(yīng)根據(jù)細(xì)菌鑒定結(jié)果和藥敏試驗合理使用抗菌藥物，同時積極預(yù)防醫(yī)院感染。

表4 2010－2015年前3位革蘭陽性菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 4 Overall antimicrobial susceptibility pro fi le of top three gram-positive bacteria from 2010 to 2015（ %）

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Analysis of clinically isolated bacterial tendency and drug resistance from neonatal ward in a tertiary children’s hospital in Chongqing during 2010-2015

XIE Wei, JING Chunmei. （Department of Laboratory Medicine, Children's Hospital of Chongqing Medical University; Key Laboratory of Developmental Diseases in Childhood, Ministry of Education; Chongqing Key Laboratory of Pediatrics, Chongqing International Science and Technology Cooperation Center for Child Development and Disorders, Chongqing 400014, China）

Objective The changing patterns of pathogenic isolates and antibiotic susceptibility in Chongqing’s neonates between 2010 and 2015 were investigated for the purpose to provide evidence for rational use of antibiotics and control of nosocomial infections. Methods The distribution of pathogenic bacteria and antibiotic susceptibility were analyzed. Identification and antibiotic susceptibility testing were carried out using BD Phoenix 100 automated system and the conventional Kirby-Bauer method. The results were interpreted in accordance with the breakpoints of the Clinical and Laboratory Standards Institute. Results A total of 10 569 pathogenic bacterial strains were isolated during the period, most of which were gram-negative bacteria (80.8 %, 8 540/10 569), primarily Klebsiella pneumoniae (29.3 %), followed by Escherichia coli (16.7 %), Acinetobacter baumanmii (9.9 %), Enterobacter cloacae (8.6 %) and Pseudomonas aeruginosa (3.3 %). Gram-positive strains accounted for 14.1 % (1 490/10 569), mainly Staphylococcus aureus (7.8 %), Staphylococcus epidermidis (2.2 %), and Staphylococcus haemolyticus (1.8 %). Imipenem and meropenem showed high activity against Enterobacteriaceae (＜10 % resistant), followed by P. aeruginosa (＞10 % resistant), and A. baumannii (＞20 % resistant). The prevalence of carbapenem-resistantstrains was 8.4 % in K. pneumoniae and 2.9 % in E. coli isolates. No gram-positive isolates were resistant to vancomycin, teicoplanin or linezolid. Conclusions K. pneumoniae was the most frequently isolated pathogen in the neonates treated in Children’s Hospital of Chongqing Medical University. The prevalence of A. baumannii isolates is increasing. Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae strains are emerging.

neonatal infection; changing pattern of pathogenic bacteria; antimicrobial resistance

R378

A

1009-7708 ( 2017 ) 04-0428-05

10.16718/j.1009-7708.2017.04.014

2016-11-25

2017-03-13

重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院檢驗科，兒童發(fā)育疾病研究教育部重點實驗室，兒科學(xué)重慶市重點實驗室， 重慶市兒童發(fā)育重大疾病診治與預(yù)防國際科技合作基地，重慶 400014。

謝偉（1979—），女，本科，主管技師，主要從事細(xì)菌耐藥方面的研究。

景春梅，E-mail：444524718@qq.com。