許 立,吳鴛鴦,壽林均,周明昊,,*

(1.浙江工業(yè)大學(xué)化學(xué)工程學(xué)院,浙江杭州 310014;2.浙江省食品藥品檢驗(yàn)研究院,浙江杭州 310052)

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高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定減肥類保健食品中27種違法添加化學(xué)藥品

許 立1,吳鴛鴦2,壽林均1,周明昊1,2,*

(1.浙江工業(yè)大學(xué)化學(xué)工程學(xué)院,浙江杭州 310014;2.浙江省食品藥品檢驗(yàn)研究院,浙江杭州 310052)

目的:建立一種高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC-MS/MS)同時(shí)測(cè)定減肥類保健食品中27種違法添加化學(xué)藥品的方法。方法:采用Agilent Eclipse Plus C18色譜柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm),以10 mmol/L乙酸銨(用甲酸調(diào)節(jié)pH至4.0)溶液為流動(dòng)相A,乙腈為流動(dòng)相B,梯度洗脫，流速為0.2 mL/min。通過(guò)HPLC-MS/MS系統(tǒng)中多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式(MRM)對(duì)減肥類保健食品中27種違法添加化學(xué)藥品進(jìn)行定性和定量分析。結(jié)果:該方法線性R2均大于0.99,精密度相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于8.0%,不同質(zhì)量濃度樣品平均回收率為74.5%～106.7%,檢出限為0.2～204.2 ng/g。結(jié)論:此方法測(cè)定快速、準(zhǔn)確、靈敏度高、分離度高,可用于減肥類保健食品中27種違法添加化學(xué)藥品的檢測(cè)。

高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜,減肥類保健食品,違法添加,化學(xué)藥品

隨著人們生活品質(zhì)的不斷提高,肥胖逐漸成為一種社會(huì)性問(wèn)題。肥胖患者通?；加刑悄虿　⒏哐獕?、脂代謝紊亂和冠心病等并發(fā)癥[1]。減肥類保健食品作為一種具有輔助減肥功能的食品,市場(chǎng)需求量較大,但同時(shí)也出現(xiàn)了一系列問(wèn)題[2]。一些不法廠家為了使他們的減肥類保健食品的功效顯著,在其中添加具有減肥作用的化學(xué)藥品。這些化學(xué)藥品通常具有較大的副作用,不知情下長(zhǎng)期服用,會(huì)嚴(yán)重?fù)p害人體健康。

圖1 27種化學(xué)藥品的化學(xué)結(jié)構(gòu)式Fig.1 Chemical structures of the 27 chemical drugs

目前,減肥類保健食品違法添加的主要檢驗(yàn)方法有薄層色譜法[3,4]、毛細(xì)管電泳法[5]、高效液相色譜法[6-8]、氣相色譜-質(zhì)譜法[9]、高效液相色譜-質(zhì)譜法[10-13]等。國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局藥品檢驗(yàn)補(bǔ)充檢驗(yàn)方法和檢驗(yàn)項(xiàng)目批準(zhǔn)件(批準(zhǔn)件編號(hào)2006004)采用液質(zhì)法檢測(cè)西布曲明、麻黃堿、芬氟拉明;國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局食藥監(jiān)辦許[2010]114號(hào)文附件2采用液質(zhì)法同時(shí)檢測(cè)咖啡因、呋塞米、鹽酸芬氟拉明、酚酞、鹽酸西布曲明;國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局藥品檢驗(yàn)補(bǔ)充檢驗(yàn)方法和檢驗(yàn)項(xiàng)目批準(zhǔn)件(批準(zhǔn)件編號(hào)2012005)采用液質(zhì)法檢測(cè)酚酞、西布曲明、N-去甲基西布曲明、N,N-雙去甲基西布曲明;上述方法檢測(cè)的化學(xué)藥品共計(jì)8種,種類、數(shù)量都比較少,已不能滿足實(shí)際監(jiān)管需要。因此,根據(jù)藥品的療效、重新篩選保健食品中違法添加的化學(xué)藥品,建立一種較大容量、能夠同時(shí)檢測(cè)減肥類保健食品中多種違法添加化學(xué)藥品的檢測(cè)方法非常有必要。

依據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)[2,8,14-18]及藥品的藥理性質(zhì),選擇了27種具有減肥作用的化學(xué)藥品(化學(xué)結(jié)構(gòu)式見圖1)作為研究對(duì)象,這些藥品包括食欲抑制劑(西布曲明、N-去甲基西布曲明、N,N-雙去甲基西布曲明、芬氟拉明、利莫那班、安非拉酮、綠卡色林、苯佐卡因);抗抑郁劑(氟西汀、安非他酮、帕羅西汀、氫溴酸西酞普蘭、奈法唑酮)、瀉藥(酚酞、大黃素)、利尿劑(呋塞米、螺內(nèi)酯、氫氯噻嗪、吲達(dá)帕胺、布美他尼、氨苯蝶啶)、能量消耗劑(茶堿、麻黃堿、咖啡因、甲基安非他明、克倫特羅)、降糖類(苯乙雙胍)等。本文建立了液質(zhì)法同時(shí)測(cè)定減肥類保健食品中27種違法添加化學(xué)藥品的方法。并采用該法對(duì)120批減肥類保健食品進(jìn)行了測(cè)定。

表1 27種化學(xué)藥品多反應(yīng)監(jiān)測(cè)離子對(duì)及質(zhì)譜參數(shù)Table 1 MRM ions pair and MS patameters of the 27 chemical drugs

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

鹽酸西布曲明(純度100%)、鹽酸麻黃堿(純度99.7%)、鹽酸芬氟拉明(純度100%)、酚酞(純度100%)、呋塞米(純度99.7%)、咖啡因(純度99.9%)、氨苯蝶啶(純度100%)、鹽酸氟西汀(純度100%)、氫溴酸西酞普蘭(純度100%)、鹽酸帕羅西汀(純度96.4%)、茶堿(純度100%)、鹽酸甲基安非他明(純度100%)、鹽酸安非他酮(純度100%)、螺內(nèi)酯(純度100%)、氫氯噻嗪(純度99.8%)、吲達(dá)帕胺(純度99.8%)、布美他尼(純度99.3%)、大黃素(純度98.7%)、鹽酸克倫特羅(純度100%)、鹽酸苯乙雙胍(純度99.7%)、苯佐卡因(純度100%) 中國(guó)食品藥品檢定研究院;N,N-雙去甲基西布曲明(純度100%)、N-單去甲基西布曲明(純度100%) 英國(guó)LGC有限公司;鹽酸安非拉酮(純度97.0%) 上海陶素生化科技有限公司;鹽酸綠卡色林(純度98.0%)上海阿拉丁生化科技有限公司;鹽酸奈法唑酮(純度98.0%) 美國(guó)SIGMA公司;利莫那班(純度95.0%) 百靈威科技有限公司;甲醇、乙腈(均為色譜純) 德國(guó)Merck公司;乙酸銨、甲酸(均為色譜純) 美國(guó)Sigma公司。120批減肥類保健食品:包括減肥茶(顆粒劑)、膠囊及片劑 來(lái)源于浙江省市場(chǎng)抽檢樣品。

1290-6460QQQ HPLC-MS/MS聯(lián)用儀(配有電噴霧離子源及MassHunter數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)) 美國(guó)Agilent公司;Genpure UV/UF超純水儀 美國(guó)熱電公司;Elmasonic P300H超聲波清洗器 德國(guó)Elma公司;Delta 320pH計(jì)、XPE 205分析天平 瑞士梅特勒公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 色譜條件 色譜柱:Agilent Eclipse Plus C18柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm);流速:0.2 mL/min;柱溫:30 ℃;進(jìn)樣量:1 μL;流動(dòng)相A:10 mmol/L乙酸銨溶液(用甲酸調(diào)節(jié)pH至4.0);流動(dòng)相B:乙腈;梯度洗脫程序:0～6.0 min,12% B;6.0～6.1 min,12%～30% B;6.1～10.0 min,30%～32% B;10.0～10.1 min,32%～33% B;10.1～19.0 min,33% B;19.0～19.1 min,33%～40% B;19.1～22.0 min,40% B;22.0～22.1 min,40%～80% B;22.1～23.0 min,80% B;23.0～23.1 min,80%～98% B;23.1～26.0 min,98% B;26.0～26.1 min,98%～12% B;26.1～30.0 min,12% B。

1.2.2 質(zhì)譜條件 離子化方式:電噴霧(ESI)離子源;掃描方式:多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM),正(ESI+)、負(fù)(ESI-)離子模式;干燥氣(N2)溫度250 ℃,干燥氣流量6.0 L/min;鞘氣(N2)溫度350 ℃,鞘氣流量11 L/min;毛細(xì)管電壓:正3500 V,負(fù)4000 V;噴嘴電壓:正1500 V,負(fù)1500 V。各化學(xué)藥品監(jiān)測(cè)離子對(duì)及質(zhì)譜參數(shù)見表1。

續(xù)表

注:*.定量離子;其中,茶堿、氫氯噻嗪、呋塞米、吲達(dá)帕胺、大黃素采用負(fù)離子模式,其他目標(biāo)化合物均采用正離子模式。1.2.3 對(duì)照品溶液制備 精密稱取各對(duì)照品約10 mg,用100%甲醇超聲(10 min,37 kHz)溶解并定容至10 mL容量瓶(其中鹽酸綠卡色林用乙腈溶解并定容),得到每1 mL各含1 mg的對(duì)照品儲(chǔ)備液,置于-4 ℃冰箱中保存?zhèn)溆?。精密吸取各?duì)照品儲(chǔ)備液適量混合,用甲醇稀釋成一系列不同濃度的對(duì)照品混合溶液。

1.2.4 供試品溶液的配制 膠囊:取出內(nèi)容物,必要時(shí)研細(xì),混合均勻后,精密稱取樣品適量(約一次服用量);片劑及減肥茶(實(shí)為顆粒劑):取待測(cè)樣品研細(xì)并混勻后,精密稱取粉末適量(約一次服用量);液體:精密量取樣品適量(約一次服用量);將上述所取樣品置50 mL容量瓶中,加入適量甲醇,在室溫,37 kHz頻率條件下超聲10 min,用甲醇定容至刻度,混勻,過(guò)0.22 μm有機(jī)濾膜后待測(cè)。

圖2 27種化學(xué)藥品(混標(biāo)線性最高點(diǎn))的總離子流圖Fig.2 Total ion chromatogram of the 27 chemical drugs (mixed standard linear highest point)注:圖2中色譜峰編號(hào)1～27對(duì)應(yīng)的目標(biāo)化合物見表1。

1.2.5 定性測(cè)定 在1.2.1和1.2.2的色譜、質(zhì)譜條件下測(cè)定對(duì)照品溶液和樣品溶液,按照歐盟委員會(huì)指令2002/657/EC對(duì)質(zhì)譜定性分析的要求,如果樣品溶液檢出的色譜峰的保留時(shí)間與對(duì)照品溶液中的對(duì)應(yīng)色譜峰的保留時(shí)間一致,并且所選擇的兩對(duì)子離子的質(zhì)荷比相同,且相對(duì)離子豐度的相對(duì)偏差不超過(guò)表2規(guī)定的范圍,則可確定樣品中含有該物質(zhì)。

表2 定性時(shí)相對(duì)離子豐度的最大允許偏差Table 2 Maximum allowable deviation of the relative ion abundance when determining

1.2.6 定量測(cè)定 在1.2.1和1.2.2的色譜、質(zhì)譜條件下,對(duì)1.2.3制備的對(duì)照品溶液進(jìn)樣,以各目標(biāo)物質(zhì)的響應(yīng)信號(hào)強(qiáng)度(y,峰面積)為縱坐標(biāo),對(duì)應(yīng)物質(zhì)的濃度(x,ng/mL)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。樣品溶液中各待測(cè)物質(zhì)響應(yīng)值均應(yīng)在測(cè)定的線性范圍內(nèi)。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜柱

根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道[6-8,10-13],上述目標(biāo)化合物通常采用反相色譜柱(C18柱)進(jìn)行分離分析。因此,本課題選擇了填料粒徑較小的色譜柱進(jìn)行優(yōu)化，如:A柱為Agilent SB C18柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm);B柱為Agilent Extend C18(2.1 mm×100 mm,1.8 μm);C柱為Agilent Eclipse Plus C18(2.1 mm×100 mm,1.8 μm)。結(jié)果表明:使用A柱分離時(shí)整體出峰較少且多個(gè)色譜峰出現(xiàn)拖尾;使用B柱分離時(shí)安非拉酮和苯乙雙胍不能分離,呋塞米和安非他酮色譜峰重疊;使用C柱分離時(shí)27種目標(biāo)化合物分離效果良好,且峰形對(duì)稱(見圖2),所以選擇C柱為本實(shí)驗(yàn)的色譜柱。

2.2 流動(dòng)相的選擇

本實(shí)驗(yàn)分析的目標(biāo)化合物較多,極性差異較大,文獻(xiàn)[8,11-12]中所采用的流動(dòng)相也各有不同,如以乙腈-0.1%甲酸10 mmol/L乙酸銨溶液為流動(dòng)相測(cè)定茶堿、咖啡因、螺內(nèi)酯、氫溴酸西酞普蘭等25種藥品的含量[8],以乙腈-0. 1%甲酸溶液為流動(dòng)相測(cè)定西布曲明、芬氟拉明等六種化學(xué)藥品的含量[11],以甲醇-10.0 mmol/L乙酸銨溶液為流動(dòng)相測(cè)定利莫那班的含量[12];國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局藥品檢驗(yàn)補(bǔ)充檢驗(yàn)方法和檢驗(yàn)項(xiàng)目批準(zhǔn)件(批準(zhǔn)件編號(hào)2012005)采用了乙腈-10 mmol/L乙酸銨溶液(用乙酸調(diào)節(jié)pH至4.0)檢測(cè)酚酞、西布曲明、N-去甲基西布曲明、N,N-雙去甲基西布曲明的含量。參考以上情況,首先對(duì)乙腈-水二元流動(dòng)相進(jìn)行考察,發(fā)現(xiàn)分離效果較差,且較多組分的色譜峰出現(xiàn)嚴(yán)重拖尾現(xiàn)象?？紤]到質(zhì)譜條件的影響,選擇乙酸銨(揮發(fā)性緩沖鹽)溶液為水相,抑制色譜峰拖尾,改善峰形。故考察了乙腈-5、10、15、20 mmol/L乙酸銨(乙酸銨溶液會(huì)抑制某些化合物的電離,且高濃度的乙酸銨溶液在高比例乙腈中容易析出)溶液為流動(dòng)相,發(fā)現(xiàn)當(dāng)采用10 mmol/L乙酸銨為流動(dòng)相時(shí),整體峰形良好,但是大黃素、N-單去甲基西布曲明和N,N-雙去甲基西布曲明的色譜峰重疊。進(jìn)一步考察10 mmol/L乙酸銨(用甲酸調(diào)節(jié)pH=3.0、3.5、4.0、4.5)為流動(dòng)相水相條件對(duì)27種化合物的分離情況,結(jié)果表明:當(dāng)pH≤3.5時(shí),嚴(yán)重抑制負(fù)離子響應(yīng);當(dāng)pH=4.0和pH=4.5時(shí),整體響應(yīng)良好,相比之下,pH=4.0時(shí)27種化合物的分離效果更好。最終,該實(shí)驗(yàn)采用乙腈-10 mmol/L乙酸銨(用甲酸調(diào)pH至4.0)為流動(dòng)相。

2.3 柱溫的選擇

本實(shí)驗(yàn)考察了柱溫(30、35、40、45 ℃)對(duì)分離度的影響。結(jié)果表明:在30 ℃時(shí),安非拉酮和苯乙雙胍實(shí)現(xiàn)良好分離,且其他目標(biāo)化合物的色譜峰也保持良好的分離狀態(tài)。隨著柱溫的升高安非拉酮和苯乙雙胍這對(duì)色譜峰保留時(shí)間逐漸接近,當(dāng)柱溫大于40 ℃時(shí),兩峰完全重疊。因此本實(shí)驗(yàn)柱溫最終定為30 ℃。

2.4 質(zhì)譜條件的選擇

本實(shí)驗(yàn)所采用的電噴霧離子源是質(zhì)譜常見的一種離子源,可適用于極性小分子化合物的分析。呋塞米、氫氯噻嗪、吲達(dá)帕胺、大黃素、茶堿在負(fù)離子模式下易失去氫形成帶負(fù)電荷的[M-H]-離子峰,螺內(nèi)酯在正離子模式下易脫去乙?；蚧蒻/z為341.0的帶正電荷的穩(wěn)定離子峰[19-20],其余21種目標(biāo)化合物在正離子模式下均易得到氫形成帶正電荷的[M+H]+離子峰,故該實(shí)驗(yàn)采用正、負(fù)離子模式進(jìn)行分析。為了提高實(shí)驗(yàn)的靈敏度和準(zhǔn)確度,在確定母離子的前提下,采用子離子掃描,分別對(duì)各目標(biāo)化合物進(jìn)行了碰撞能和碎裂電壓的優(yōu)化,得到兩個(gè)穩(wěn)定性好、響應(yīng)高、質(zhì)量較大的二級(jí)離子碎片(見表1)。其中響應(yīng)較高的離子作為定量離子,再根據(jù)保留時(shí)間和離子豐度比來(lái)對(duì)各目標(biāo)物質(zhì)進(jìn)一步定性。

2.5 樣品前處理?xiàng)l件的優(yōu)化

本實(shí)驗(yàn)研究的27種化學(xué)藥品中鹽酸麻黃堿、鹽酸綠卡色林、大黃素、鹽酸克倫特羅等多種藥品難溶或不溶于水,易溶于極性有機(jī)溶劑甲醇、乙醇、乙腈等。通常片劑、膠囊等口服制劑添加有淀粉(淀粉在水中的溶解性較好)作為輔料。根據(jù)以上因素,考察不同體積分?jǐn)?shù)的甲醇-水、乙醇-水、乙腈-水溶液對(duì)減肥類保健食品(減肥茶、膠囊、片劑)的提取效果。并對(duì)超聲時(shí)間(10、15、20 min)和超聲頻率(37、80 kHz)進(jìn)行比較。結(jié)果表明:當(dāng)采用50%、70%、90%和100%乙醇-水溶液為提取溶劑時(shí),鹽酸麻黃堿、咖啡因、氫氯噻嗪、氨苯蝶啶、呋塞米和利莫那班的提取效率低于采用同比例的甲醇-水溶液為提取溶劑時(shí)的提取效率,因?yàn)樯鲜鰩追N化合物在甲醇中的溶解性更好;當(dāng)采用70%、90%和100%乙腈-水溶液提取時(shí),出峰較早的茶堿和氫氯噻嗪出現(xiàn)色譜峰分叉甚至出現(xiàn)雙峰,可能是提取溶劑與流動(dòng)相初始比例的差異,出現(xiàn)了嚴(yán)重的溶劑效應(yīng)。當(dāng)采用甲醇-水溶液(10 min,37 kHz)提取時(shí),隨著甲醇比例的提高,減肥茶和片劑中麻黃堿、克倫特羅和綠卡色林的回收率逐漸增大,膠囊和片劑中甲基安非他明和大黃素的回收率也有所提高。70%、90%和100%甲醇-水溶液對(duì)于不同基質(zhì)的部分目標(biāo)化合物的提取效率見圖3(選取部分提取效率差異較大的目標(biāo)化合物)。結(jié)果表明:甲醇作為兩性有機(jī)溶劑,對(duì)該實(shí)驗(yàn)27種化合物(極性差異較大)的整體提取效果較好。另外，超聲時(shí)間為10 min時(shí)的提取效率與15、20 min的提取效率基本一致；與超聲頻率為80 kHz相比，當(dāng)超聲頻率為37 kHz時(shí)的整體提取效率較好。故片劑、膠囊和顆粒劑均用100%甲醇超聲(10 min,37 kHz)提取。

圖3 不同濃度甲醇對(duì)回收率的影響Fig.3 Effect of different concentrations of methanol on the recovery rate注:圖中橫坐標(biāo)編號(hào)2,5,9,10,16,26對(duì)應(yīng)目標(biāo)化合物見表1。

2.6 方法學(xué)考察

表3 27種化學(xué)藥品的檢出限、線性范圍、回歸方程、相關(guān)系數(shù)及保留時(shí)間Table 3 Limits of detection(LODs),linear ranges,linear equations, correlation coefficients(R2)and retention times of the 27 chemical drugs

2.6.1 檢出限及線性范圍 取膠囊陰性樣品為空白基質(zhì),分別加入適量對(duì)照品,按1.2.4制備方法制備供試品,以信噪比為3(S/N=3)計(jì)算方法檢出限(LOD);采用1.2.3制備的系列混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,在1.2.1和1.2.2的色譜、質(zhì)譜條件下,分別以各目標(biāo)物質(zhì)的響應(yīng)信號(hào)強(qiáng)度(y,峰面積)對(duì)其質(zhì)量濃度(x,ng/mL)作標(biāo)準(zhǔn)曲線,記錄相關(guān)系數(shù)。結(jié)果見表3。

2.6.2 精密度 取1.2.3制備的系列混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,配制標(biāo)準(zhǔn)曲線內(nèi)較低、中、較高3種濃度水平的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,按1.2.1和1.2.2的色譜、質(zhì)譜條件重復(fù)測(cè)定6次,27種目標(biāo)化合物的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.5%～7.3%。

表4 不同空白樣品中3個(gè)加標(biāo)水平下的27種化學(xué)藥品的回收率及精密度(n=3)Table 4 Recoveries and repeatablities of the 27 chemical drugs spiked in different blank samples at 3 levels(n=3)

續(xù)表

續(xù)表

2.6.3 準(zhǔn)確度 因減肥茶的原料中通常含有茶葉和決明子(中藥材),其中茶葉中含有茶堿和咖啡因;決明子中含有蒽醌類化合物——大黃素,故本實(shí)驗(yàn)采用減肥茶(不含24種(除茶堿、咖啡因、大黃素)目標(biāo)化合物)、減肥膠囊和片劑樣品(不含27種目標(biāo)化合物)作為空白基質(zhì),(供試品制備見1.2.4),添加標(biāo)準(zhǔn)曲線內(nèi)較低、中、較高三個(gè)濃度水平的標(biāo)準(zhǔn)溶液平行測(cè)定3次,分別計(jì)算加標(biāo)回收率,結(jié)果見表4。

2.7 樣品測(cè)定

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)120批減肥類保健食品(減肥膠囊樣品稱量時(shí),將膠囊殼粉碎同內(nèi)容物一起稱量,以防膠囊殼中有違法添加物),

表5 部分陽(yáng)性樣品的檢驗(yàn)結(jié)果(mg/g)Table 5 Detection results of some positive samples(mg/g)

續(xù)表

注:-：未檢出。結(jié)果表明:檢出率較高的是西布曲明(54批,含量為0.26～113.22 mg/g)、酚酞(30批,含量為0.07～87.17 mg/g)、N,N-雙去甲基西布曲明(10批,含量為0.40～1.74 mg/g)和N-單去甲基西布曲明(38批,含量為0.03～0.94 mg/g),另外氟西汀(3 批,含量為1.80～100.08 mg/g)和綠卡色林(1批,含量為22.90 mg/g)也有檢出。部分陽(yáng)性樣品(根據(jù)樣品檢出化學(xué)藥品的種類及檢出含量范圍，列舉了37批樣品的檢出情況)的檢驗(yàn)結(jié)果見表5。

3 結(jié)論

減肥類保健食品中違法添加化學(xué)藥品的情況較為復(fù)雜,本文從化合物的藥理特性(包括副作用)出發(fā),重新確定并擴(kuò)大了目標(biāo)化合物范圍。除檢出已有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的違法添加物外,在120批樣品中還檢出的鹽酸氟西汀(抗抑郁藥,有抑制食欲的副作用)和鹽酸綠卡色林(新型食欲抑制劑),這兩種化合物目前尚無(wú)針對(duì)性的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。本法能在30 min內(nèi)完成對(duì)27種目標(biāo)化合物的分離定量,與現(xiàn)有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法(僅能檢測(cè)8種)相比,本法的檢測(cè)容量更大,適用范圍更廣,具有更好的應(yīng)用前景。

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Simultaneous determination of 27 chemical drugs illegally addedin slimming health food by high performance liquidchromatography-tandem mass spectrometry

XU Li1,WU Yuan-yang2,SHOU Lin-jun1,ZHOU Ming-hao1,2,*

1.College of Chemical Engineering,Zhejiang University of Technology,Hangzhou 310014,China;2.Zhejiang Institute for Food and Drug Control,Hangzhou 310052,China)

Objective:To develop detection method for the simultaneous screening and confirmation of 27 illegally added in slimming health food using high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry(HPLC-MS/MS).Methods:The chemical drugs were separated on an Agilent Eclipse Plus C18chromatographic column(2.1 mm×100 mm,1.8 μm)with acetonitrile and aqueous solution of 10 mmol/L ammonium acetate(adjust to pH4.0 with formic acid)as mobile phase under gradient elution at a flow rate of 0.2 mL/min.The 27 illegally added in slimming health food were conducted qualitatively and quantitatively analysis by tandem mass spectrometry under multiple reaction monitoring(MRM)mode. Results:The method was linear with correlation coefficients(R2)which were not less than 0.99,and the precision expressed as relative standard deviations(RSDs)were not more than 8.0%.The recoveries of 27 drugs illegally added in slimming health food at different spiked concentrations ranged from 74.5% to 106.7%.The limits of detection(LODs)were in the range of 0.2～204.2 ng/g. Conclusion:This method is rapid,accurate and sensitive with a high degree of separation,and can be used for the detection of the 27 illegally added chemicals in slimming health foods.

high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry(HPLC-MS/MS);slimming health food;illegally added;chemical drugs

2017-02-14

許立(1991-)，男，碩士，研究方向：保健食品及化妝品質(zhì)量分析，E-mail:1460151279@qq.com。

*通訊作者:周明昊(1971-)，男，碩士，主任藥師，研究方向：保健食品、化妝品及藥品質(zhì)量分析，E-mail:zmh888@hotmail.com。

TS207.3

A

1002-0306(2017)13-0248-10

10.13386/j.issn1002-0306.2017.13.047