朱海艷

(江蘇省淮安市第一人民醫(yī)院兒科， 江蘇 淮安 223300)

清熱解毒方對小兒難治性支原體肺炎患者IFN-γ IL-4 IL-6水平的影響

朱海艷

(江蘇省淮安市第一人民醫(yī)院兒科， 江蘇 淮安 223300)

目的：探究清熱解毒方治療小兒難治性支原體肺炎及對IFN-γ、IL-4、IL-6水平的影響。方法:選取2014年10月至2016年6月間收治的RMPP患兒共90例，按照數(shù)字隨機表法分為對照組和觀察組，各45例，選取同期于我院進行體檢的健康兒童45例作為健康組。對照組使用阿奇霉素治療，觀察組在對照組治療基礎上使用清熱解毒方進行治療。分別檢測兩組治療前后及健康組血清CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IL-6、IFN-γ、IL-4水平以及BALF中IL-6、IFN-γ、IL-4水平。結(jié)果:治療前對照組和觀察組血清CD4+、CD4+/CD8+水平均低于健康組，CD8+水平高于健康組(P<0.05)。治療后，兩組血清CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平均有改善(P<0.05)，其中觀察組優(yōu)于對照組(P<0.05)。治療前對照組和觀察組血清以及BALF中IFN-γ、IL-4、IL-6水平均高于健康組(P<0.05)。治療后，兩組患者血清及BALF中三項指標均降低(P<0.05)，并且觀察組患者低于對照組(P<0.05)。結(jié)論:清熱解毒方可有效改善RMPP患兒血清以及BALF內(nèi)的細胞因子及炎癥因子的水平，提高患兒免疫力。

清熱解毒方； 難治性支原體肺炎； IFN-γ； IL-4； IL-6

肺炎支原體肺炎(Mycoplasma Pneumoniae Pneumonia，MPP)是社區(qū)獲得性肺炎(Community Acquired Pneumonia，CAP)的一種，主要由肺炎支原體(Mycoplasma Pneumoniae，MP)引起[1]。MPP若得不到有效治療，會引發(fā)難治性支原體肺炎(Refractory Mycoplasma Pneumoniae Pneumonia，RMPP)。研究發(fā)現(xiàn)RMPP發(fā)病率在近年來有逐年上升的趨勢，同時RMPP也是小兒常見的肺炎之一[2]。臨床上用于治療RMPP的西藥主要包括糖皮質(zhì)激素、免疫球蛋白等，但是經(jīng)常會出現(xiàn)免疫過度、支原體耐藥等情況。近年來中醫(yī)中藥治療RMPP得到越來越多的重視，中藥治療RMPP具有多途徑、多靶點和細菌-內(nèi)毒素-炎性介質(zhì)并治的特點[3]。清熱解毒方同時具有清熱解毒、宣肺化痰、止咳平喘以及提高免疫力的功效[4]。研究發(fā)現(xiàn)炎癥因子與MPP的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)，當機體發(fā)生炎癥反應時，白細胞介素6(Interleukin-6，IL-6)是反應最為及時的炎癥指標，IL-6的大量分泌可引起干擾素γ(Interferon-γ，IFN-γ)、白細胞介素4(Interleukin-4，IL-4)的改變[5,6]。目前關(guān)于血清中IL-6、IFN-γ、IL-4的表達研究較多，但關(guān)于支氣管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar Lavage Fluid，BALF)中IL-6、IFN-γ、IL-4的研究較少[7]。本次研究應用清熱解毒方治療小兒RMPP，探究對血清免疫細胞以及炎癥因子以及BALF中的炎癥因子的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料:選取2014年10月至2016年6月于我院兒科進行診斷和治療的RMPP的患兒共90例，其中男50例，女40例，年齡1～10歲，平均(5.37±1.68)歲。將以上患兒按照數(shù)字隨機表法將患者隨機分為對照組和觀察組，各45例。對照組男25例，女20例，年齡1～10歲，平均(5.29±1.75)歲；觀察組男25例，女20例，年齡2～10歲，平均(5.41±1.58)歲；選取同期于我院進行常規(guī)體檢的健康兒童共45例為健康組，男24例，女21例，年齡1～10歲，平均(5.29±1.93)歲。三組患者一般資料差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。本次研究已獲得我院倫理委員會知情同意批準。

1.2 納入及排除標準:納入標準：①同時符合RMPP的西醫(yī)診斷標準[8]以及RMPP的中醫(yī)診斷標準[9]；②年齡在1～10歲；③患兒及家長具有良好的順應性，配合研究；④簽署知情同意書。本次研究的排除標準為：①合并嚴重肝腎疾??；②合并嚴重心血管疾??；③合并自身免疫疾??；④在近兩個月內(nèi)使用過抗生素或免疫抑制類藥物。

1.3 治療方法:對照組患者使用阿奇霉素(Pfizer Inc.，H20120326)進行治療，給藥方法為靜脈滴注，劑量為：10mg·kg-1·d-1，1次/d，連用3d后停用4d為1療程，共4個療程。觀察組在對照組治療基礎上使用清熱解毒方：生石膏30g、魚腥草30g、蒲公英30g、白花蛇舌草30g、連翹20g、苦杏仁20g、炙麻黃8g。加入100mL水煎口服，2mL·kg-1·d-1，2次/d，早晚各1次，治療時間與對照相同。

1.4 觀察指標及方法

1.4.1 血清標本采集及CD4+、CD8+及CD4+/CD8+:分別在入院第2天及治療后2d抽取對照組、觀察組空腹靜脈血，以及健康組空腹靜脈血，離心取上層血清，-80℃保存以備后續(xù)檢測。使用流式細胞儀(Epics-XLⅡ，Beckman-Coulter)對CD4+、CD8+及CD4+/CD8+進行檢測。

1.4.2 BALF標本采集:分別對兩組患兒進行支氣管肺泡灌洗術(shù)，患兒取仰臥位，靜脈注射咪達唑侖(江蘇恩華藥業(yè)股份有限公司，國藥準字H10980025)0.1mg/kg，使用生理鹽水對鼻腔進行清洗；麻醉方法為表面麻醉，用2%利多卡因(山東華信制藥集團股份有限公司，國藥準字H20045249)噴鼻咽。使用合適型號纖維支氣管鏡，使用37℃無菌生理鹽水進行灌洗，并回收BALF。將BALF離心10min(1800r/min)，-80℃保存以備后續(xù)實驗。

1.4.3 炎癥指標:使用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測血清樣品和BALF樣品的IL-6、IFN-γ、IL-4水平，試劑盒購買于上海西唐生物科技有限公司，嚴格按照說明書步驟操作。

2 結(jié) 果

2.1 三組血清CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平對比:治療前，對照組和觀察組血清CD4+、CD4+/CD8+水平均低于健康組(P<0.05)，CD8+水平高于健康組(P<0.05)。治療后，兩組血清CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平均有改善(P<0.05)，其中觀察組三項指標均優(yōu)于對照組(P<0.05)，見表1。

表1 三組血清CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平對比

注：a表示與健康組相比，P<0.05;b表示與同組治療前比，P<0.05;c表示與對照組治療后比，P<0.05

2.2 各組血清IFN-γ、IL-4、IL-6水平對比:治療前，對照組和觀察組血清IFN-γ、IL-4、IL-6水平均高于健康組(P<0.05)。治療后，兩組患者血清三項指標均降低(P<0.05)，并且觀察組患者低于對照組(P<0.05)，見表2。

表2 三組IFN-γ、IL-4、IL-6水平比較

注：a表示與健康組相比，P<0.05;b表示與同組治療前比，P<0.05;c表示與對照組治療后比，P<0.05

2.3 三組BALF中IFN-γ、IL-4、IL-6水平比較:治療前，對照組和觀察組BALF中IFN-γ、IL-4、IL-6水平均高于健康組(P<0.05)。治療后，兩組患者BALF中三項指標均降低(P<0.05)，并且觀察組患者低于對照組(P<0.05)，見表3。

表3 三組BALF中IFN-γ、IL-4、IL-6水平比較

注：a表示與健康組相比，P<0.05;b表示與同組治療前比，P<0.05;c表示與對照組治療后比，P<0.05

3 討 論

MPP是小兒常患的疾病之一，MPP易發(fā)展為RMPP。現(xiàn)階段臨床上用于治療小兒RMPP的藥物主要為大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，具有一定的療效，但是近期發(fā)生了一系列的耐藥現(xiàn)象，出現(xiàn)了難治性肺炎[10]。RMPP不但會對肺部造成傷害，還可能引發(fā)多臟器損傷。目前MPP的發(fā)病機制尚不完全明確，MP感染是引起MPP的主要機制之一，MP感染會引起機體的免疫炎癥反應，過往研究也顯示RMPP的發(fā)病機制與細胞因子、炎癥因子密切相關(guān)[11]。

中藥治療可以從多種途徑輔助治療RMPP，清熱解毒方具有多種有效成分，可以從多種途徑治療RMPP，清熱解毒方可具有清熱解毒、宣肺化痰的功效，改善患兒的臨床癥狀，改善患兒舒適度；清熱解毒方的有效成分還具有抑菌抗菌、提高機體免疫力的能力。T淋巴細胞是機體免疫功能的重要參與者，T淋巴細胞指標主要包括CD4+、CD8+、CD4+/CD8+等，研究發(fā)現(xiàn)這些指標也與RMPP的發(fā)生發(fā)展有關(guān)[12]。本次研究結(jié)果顯示對照組和觀察組血清CD4+、CD4+/CD8+水平均低于健康組(P<0.05)，CD8+水平高于健康組(P<0.05)，說明患兒患有RMPP后體內(nèi)免疫細胞因子會發(fā)生巨大改變。治療后，兩組血清CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平均有改善，并且觀察組三項指標均優(yōu)于對照組(P<0.05)，這說明阿奇霉素可以在一定程度上改善機體免疫水平，并且清熱解毒方的使用可有效幫助患兒機體免疫水平的恢復，這與清熱解毒方中具有增加機體免疫力的物質(zhì)。

IFN-γ、IL-4、IL-6是體液免疫的重要參與者，IL-6是感染出現(xiàn)的最早炎性指標，當機體受到感染時，IL-6的水平會顯著升高，會直接導致IFN-γ、IL-4的水平異常[13,14]。本次研究發(fā)現(xiàn)血清IFN-γ、IL-4、IL-6水平與BALF中IFN-γ、IL-4、IL-6變化具有相似性。治療前，兩組患者的三項指標均高于健康組(P<0.05)，說明RMPP患兒體內(nèi)炎癥因子會發(fā)生巨大變化。治療后，血清以及BALF中指標均顯著改善，其中觀察組各項指標均優(yōu)于對照組(P<0.05)，這說明清熱解毒方可有效提高機體的免疫力，對于治療RMPP具有幫助效果。清熱解毒方中含有的麻黃、魚腥草以及白花蛇草等具有抑菌、抗炎功效。

本次研究表明清熱解毒方可有效幫助患兒血清中T細胞亞群水平的恢復，并且可以改善血清中以及BALF中炎癥因子的水平，可有效提高患兒免疫力。

[1] Waites K B, Balish M F, Atkinson T P. New insights into the pathogenesis and detection of mycoplasma pneumoniae infections[J].Future Microbiology, 2017, 3(6): 635～648.

[2] Zhengxiu Luo MD PhD, Jian L M, Enmei Liu MD PhD, et al. Effects of prednisolone on refractory mycoplasma pneumoniae pneumonia in children[J].Pediatric Pulmonology, 2014, 49(4): 377～380.

[3] Inamura N, Miyashita N, Hasegawa S, et al. Management of refractory Mycoplasma pneumoniae pneumonia: utility of measuring serum lactate dehydrogenase level[J].Journal of Infection & Chemotherapy, 2014, 20(4): 270～273.

[4] 王勤, 朱珊,趙義紅,等.清肺活血方聯(lián)合阿奇霉素治療難治性小兒支原體肺炎的平行對照研究[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志,2015,35(5):545～548.

[5] Wang M, Wang Y, Yan Y, et al. Clinical and laboratory profiles of refractory mycoplasma pneumoniae pneumonia in children[J].International Journal of Infectious Diseases Ijid Official Publication of the International Society for Infectious Diseases, 2014, 29C(C): 18～23.

[6] You S Y, Jeong J H, Yang E A, et al. Effects of methylprednisolone pulse therapy on refractory mycoplasma pneumoniae pneumonia in children[J].Allergy Asthma & Immunology Research, 2014, 6(1): 22～26.

[7] Shu L H, Shang Y X, Cai X X, et al. Alterations of SP-A, SP-D and KL-6 in serum and bronchoalveolar lavage fluid in children with mycoplasma pneumoniae pneumonia[J].Zhonghua Er Ke Za Zhi, 2013, 51(10): 779～782.

[8] 李柏,廖素雯,趙健,等.肺炎支原體肺炎的診治[J].中國實用兒科雜志,2008,34(8):3643～3643.

[9] 中華人民共和國中醫(yī)藥行業(yè)標準.中醫(yī)病癥診斷療效標準[M].北京:國家中醫(yī)藥管理局,1995.126.

[10] Dong X P, Dong Y Q, Ma L, et al. Surveillance of drug-resistance in mycoplasma pneumoniae and analysis of clinical features of Mycoplasma pneumoniae pneumonia in childhood[J].2013, 126(22): 4339.

[11] Wu P S, Chang L Y, Lin H C, et al. Epidemiology and clinical manifestations of children with macrolide-resistant mycoplasma pneumoniae pneumonia in Taiwan[J].Pediatric Pulmonology, 2013, 48(9): 904～911.

[12] Chu W, Hui X U, Gao S, et al. Clinical significance of high sensitive C-reactive protein and immune function in children with mycoplasma pneumoniae pneumonia[J].Journal of Clinical Pediatrics, 2014, 32(5): 456～458.

[13] 童曉萍,蔡彥,王維亮,等.成人肺炎支原體肺炎中醫(yī)證候分析及與炎癥指標的關(guān)系[J].廣東醫(yī)學,2014,35(2):291～292.

[14] 車穎悟,佟曉輝,黃曉娟.自擬中藥方聯(lián)合阿奇霉素治療小兒支原體肺炎的療效觀察[J].中國藥房,2013,15(20):1875～1876

Effect of Qingrejiedu prescription on the Level of IFN-γ IL-4 and IL-6 of Children with Refractory Mycoplasma Pneumonia

ZHUHaiyan

(Huai'anFirstPeople'sHospital,JiangsuHuaian223300,China)

Objective:To investigate the effect of Qingrejiedu prescription on the level of IFN-, IL-4 and IL-6 of children with refractory mycoplasma. Methods: 90 patients with RMPP were enrolled in this study during January 2015 to June 2016. All the patients were divided into control group and observation group, 45cases in each group according to the number of random table method. 45 healthy children who were admitted to our hospital for the same period were selected as health group. The children in control group were treated with azithromycin. The children in the observation group were treated with Qingrejiedu on the basis of the control group. The levels of CD4+, CD8+, CD4+/ CD8+, IL-6, IFN-γ, IL-4 in serum and IL-6, IFN-γ and IL-4 in BALF were measured before and after treatment. Results: The levels of CD4+, CD4+/ CD8+in the control group and the observation group were significantly lower than those in the healthy group (P<0.05), and the levels of CD8 + were significantly higher than those in the healthy group (P<0.05) before treatment. After treatment, the levels of CD4+, CD8+, CD4+/CD8+in the two groups were significantly improved (P<0.05), and the observation group was significantly better than that of control group (P<0.05). The levels of IFN-γ, IL-4 and IL-6 in the serum and BALF of the control group and the observation group were significantly higher than those in the healthy group before treatment (P<0.05) before treatment. After treatment, the serum and BALF of the two groups were significantly improved (P<0.05), and the observation group was significantly lower than those of control group (P<0.05). Conclusion: Qingrejiedu can effectively improve the level of cytokines and inflammatory factors in children with RMPP, improving immunity system of children.

Qingrejiedu; Refractory mycoplasma pneumonia; IFN-γ; IL-4; IL-6

1006-6233(2017)07-1132-04

江蘇省衛(wèi)生廳資助基金項目，(編號：2013010218)

A

10.3969/j.issn.1006-6233.2017.07.023