梁廣津+潘金華+張壯志+趙楠+孫娟+史良+劉鑫蓬+李曉捷

摘 要：采用種質(zhì)庫內(nèi)保存的多肋藻[Costaria costata （C. Agardh） Saunders]雌雄配子體，進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)，然后利用雌雄配子體進(jìn)行人工苗種繁育，并在自然海區(qū)進(jìn)行栽培。2015年8月3日開始育苗，經(jīng)過75 d培育，多肋藻幼苗生長至0.83 cm，出庫下海暫養(yǎng)。下海后，經(jīng)過40 d生長，幼苗生長至平均長度約25 cm，開始分苗養(yǎng)殖，分苗后每隔25～30 d觀測藻體長度和寬度生長變化，并同步監(jiān)測海水溫度。至2016年4月20日觀測到多肋藻平均長度達(dá)到最大值，約228.3 cm，此時(shí)海水溫度約9.4 ℃，藻體平均寬度約29.3 cm，平均鮮重量約528.4 g，平均干重約79.7 g，鮮干比約6.6。得出結(jié)論：多肋藻適合在我國北方海區(qū)進(jìn)行人工育苗并養(yǎng)殖，最佳收獲期在4月下旬前后。

關(guān)鍵詞：多肋藻（Costaria costata）；育苗；海區(qū)栽培

多肋藻隸屬于褐藻門（Phaephyta）、褐子綱（Phaeosporeae）、海帶目（Laminariales）、海帶科（Laminariaceae）、多肋藻屬（Costaria），并且是多肋藻屬中唯一種。多肋藻是一種具有較高經(jīng)濟(jì)價(jià)值的大型褐藻，富含碘和多種人體必需微量元素，營養(yǎng)價(jià)值較高，多肋藻在日本被稱為筋布，具有悠久的食用歷史[1]。多肋藻在太平洋沿岸北部潮間帶或者潮下帶的淺海區(qū)多有分布，其中朝鮮半島東北部、日本北海道及本土、俄羅斯遠(yuǎn)東的鄂霍次克海、大彼得灣均有其分布[2-4]。2014至2016年，筆者先后數(shù)次在我國大連沿海和長島海域礁石發(fā)現(xiàn)野生多肋藻的存在。國內(nèi)學(xué)者在多肋藻常溫人工育苗（成熟孢子體為母藻） [5]、早期發(fā)育[6]和活性物質(zhì)方面有研究報(bào)道[7-8]。本單位自2012年12月份從日本北海道采集多肋藻配子體帶回國內(nèi)進(jìn)行種質(zhì)保存和擴(kuò)大培養(yǎng)，自2014年開始進(jìn)行多肋藻配子體克隆育苗（夏苗培育）并人工養(yǎng)殖，已經(jīng)連續(xù)3年時(shí)間。本研究旨在闡明采用多肋藻配子體進(jìn)行夏苗培育和人工養(yǎng)殖技術(shù)，以期為多肋藻夏苗培育和海區(qū)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)化提供一定的技術(shù)參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

本試驗(yàn)中多肋藻夏苗培育所采用的配子體克隆，為2012年12月采集自日本北海道根室沿海礁石野生多肋藻。采集游孢子附著于蓋玻片后帶回國內(nèi)，進(jìn)行多肋藻雌、雄配子體分離、純化，用于多肋藻種質(zhì)保存。種質(zhì)庫內(nèi)多肋藻配子體種質(zhì)資源較為豐富，可隨時(shí)根據(jù)實(shí)際育苗需求進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)。本次試驗(yàn)共用多肋藻雌配子體6 g，雄配子體3 g。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 多肋藻配子體克隆夏苗培育

雌雄配子體準(zhǔn)備：將雌雄配子體克隆按2∶1的比例混合，給予光照刺激，光暗周期是L∶D=12 h ∶12 h。

苗簾準(zhǔn)備：以紅棕繩為附著基編織苗簾，苗簾規(guī)格 20 cm×15 cm，單個(gè)苗簾總繩長4 m。

配子體附苗：雌雄混合配子體，經(jīng)過組織搗碎機(jī)（型號：DS-1）打碎離解，用400目篩絹在海水中搓洗過濾，透過400目篩絹網(wǎng)的配子體細(xì)胞段分布于制冷海水中制成配子體混合液，攪拌均勻后，即可放入苗簾附著。靜置附著三天后開始換水。每個(gè)苗簾用配子體約0.15 g（雌0.1 g，雄0.05 g）

幼苗培育：培育海水水溫8～10 ℃，初始光強(qiáng)2 000 lx，根據(jù)配子體和孢子體的發(fā)育階段，給予不同的光強(qiáng)。前期一般毎10 d提光一次，中后期每隔一周提光一次，每次的提光幅度為300～500 lx。光照周期設(shè)為L∶D=12 h∶12 h。

1.2.2 多肋藻海上養(yǎng)殖

幼苗下海：一般在10月中旬，自然海區(qū)水溫下降并穩(wěn)定在20 ℃以下時(shí)，幼苗開始出庫下海暫養(yǎng)。采用泡沫箱低溫冷藏的方式運(yùn)輸?shù)胶Ｉ橡B(yǎng)殖區(qū)。將苗簾拆解，毎3股截成一段（每股20 cm，3股約60 cm），采用垂養(yǎng)的方式暫養(yǎng)，水層苗繩最上端距離水面60 cm，5～7 d后提至30 cm。

夾苗：在海上暫養(yǎng)40 d左右，幼苗平均長度生長至約25 cm左右，達(dá)到夾苗規(guī)格。利用維尼綸繩夾苗（常規(guī)海帶養(yǎng)殖苗繩），每繩夾苗40株。

海區(qū)養(yǎng)殖：浮式筏架水平養(yǎng)殖，每繩間距100 cm，養(yǎng)殖水層深度約60 cm。

海上觀測：夾苗后25～30 d開始觀測，以后每25～30 d觀測一次。主要觀測長度、寬度，以及整體生長狀況等，做好測量和拍照記錄。

2 結(jié)果

2.1 多肋藻配子體克隆夏苗培育

雌雄配子體混合刺激12 d后（圖1 A），開始進(jìn)行混合配子體克隆附著苗簾，合計(jì)育苗6簾。附著15 d后，幼孢子體多數(shù)發(fā)育至2列細(xì)胞，個(gè)別4列細(xì)胞（通過玻璃片觀察）。附著36 d后，苗繩上的幼孢子體生長至16列細(xì)胞狀態(tài)。經(jīng)過75 d的育苗，多肋藻幼苗生長至約0.6～1 cm，平均長度約0.83 cm出庫下海暫養(yǎng)。

2.2 多肋藻海上養(yǎng)殖

多肋藻幼苗于2015年10月18日下海暫養(yǎng)，至11月28日，經(jīng)過40 d的生長，多肋藻幼苗生長至平均長度約25 cm，最大長度約35 cm（圖2 A、B），此時(shí)開始分苗，將多肋藻苗夾在養(yǎng)殖繩上，每繩長度約2.5 m，夾苗40株。至2016年4月20日觀測到多肋藻長度達(dá)到約228.3 cm（圖2 C和圖3），此時(shí)海水溫度約9.4 ℃，藻體寬度約29.3 cm（圖4）。此時(shí)多肋藻平均鮮重量約528.4 g，平均干重約79.7 g，鮮干比約6.6。自4月下旬以后，隨著水溫的升高，多肋藻藻體逐步成熟，藻體開始逐漸脫落，藻體長度和寬度開始呈現(xiàn)下降趨勢，至5月31日時(shí)，養(yǎng)殖區(qū)海水溫度達(dá)到19.8 ℃，藻體長度和寬度分別下降至144.3 cm（圖3）和25 cm（圖4）。

3 討論

本文采用多肋藻配子體進(jìn)行育苗試驗(yàn)，并且取得了成功，進(jìn)一步驗(yàn)證了海帶目生活史具有配子體階段的藻類利用無性繁殖克隆系擴(kuò)培后的雌雄配子體進(jìn)行苗種繁育的可行性。日本本土北海道和本土北部的青森縣、巖手縣等沿海地區(qū)的肋藻藻體長為一般為1～2 m，寬約30 cm[9-10]，本文研究中，多肋藻于4月下旬達(dá)到最大藻體長度約2.28 m，藻體長度稍大于其本土原始生長地。而在遼東半島地區(qū)的人工養(yǎng)殖多肋藻長度可達(dá)3.5 m左右，可能與該海區(qū)優(yōu)質(zhì)海況條件有關(guān)[5]。通過本文在桑溝灣的養(yǎng)殖試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在此海區(qū)多肋藻最適生長期為4月下旬之前，當(dāng)水溫達(dá)到10 ℃以上時(shí)，生長緩慢并逐步趨于停滯。因此實(shí)際生產(chǎn)中，多肋藻建議在5月之前進(jìn)行收獲。

通過本文試驗(yàn)觀測數(shù)據(jù)不難發(fā)現(xiàn)，多肋藻和國內(nèi)主流養(yǎng)殖海帶以及裙帶菜等北方常見的人工養(yǎng)殖海藻類似，高溫耐受力較差，多肋藻的人工養(yǎng)殖面臨幼苗安全渡夏的問題。海帶夏苗培育技術(shù)的開發(fā)和應(yīng)用，有效地解決了這一問題，大大提高了我國海帶養(yǎng)殖技術(shù)，并將我國海帶養(yǎng)殖業(yè)推向世界藻類養(yǎng)殖業(yè)的頂峰[11]，海帶夏苗培育法的推廣應(yīng)用使海帶孢子體的適宜生長期大大延長，從而促進(jìn)產(chǎn)量急劇增加[12-13]。本研究已經(jīng)自2014年連續(xù)2年在山東榮成桑溝灣海區(qū)進(jìn)行養(yǎng)殖試驗(yàn)，穩(wěn)定可靠，可以推廣應(yīng)用于生產(chǎn)。

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