楊蘭馬凌珍

1 新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團第二師庫爾勒醫(yī)院 （新疆 巴音郭楞 841000 ）

2 新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團第二師焉耆醫(yī)院 （新疆 巴音郭楞 841000）

全自動生化分析儀試劑交叉污染的檢測方法

楊蘭1馬凌珍2

1 新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團第二師庫爾勒醫(yī)院 （新疆 巴音郭楞 841000 ）

2 新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團第二師焉耆醫(yī)院 （新疆 巴音郭楞 841000）

目的：探討采用全自動生化分析儀檢測某些試劑存在的交叉污染。方法：分別選取三酰甘油（GT）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）為研究依據(jù)，直接檢測膽紅素（DBIL）后，檢測ALT，依次監(jiān)測高密度（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）后檢測TG，觀察DBLL試劑對ALT產(chǎn)生的影響，HDL-C、LDL-C試劑對TC檢測的影響。結(jié)果：DBIL試劑會對ALT檢測結(jié)果存在明顯的負(fù)干擾，而HDL-C和LDL-C兩種試劑對TG沒有明顯的正干擾。結(jié)論：使用全自動生化分析儀過程中，部分生化試劑之間會出現(xiàn)交叉污染，為盡量減少試劑交叉污染，不僅要加強洗滌試劑針，也要合理安排各項目間的組合順序。

全自動生化分析儀 試劑交叉污染 檢測方法

使用全自動生化分析儀能為臨床檢驗工作帶來諸多便利，但其用于臨床前，必須對所用儀器的性能狀態(tài)實施準(zhǔn)確評估。其中，試劑出現(xiàn)交叉污染是展開評估的重要一環(huán)，它關(guān)系各種測試項目試劑安放位置、測試順序等內(nèi)容。為盡可能減少全自動生化分析儀試劑中出現(xiàn)交叉污染，筆者開展一系列的測試，具體內(nèi)容如下。

1.材料與方法

1.1 儀器設(shè)備

采用美國雅培公司生產(chǎn)的C16000型全自動生化分析儀，這種儀器能對340～380nm波長進(jìn)行雙波或單波測量，并對多項參數(shù)實施檢查，每1h能完成多達(dá)2000個測試。同時，使用雅培ALT試劑、TG試劑進(jìn)行檢測，并由四川新健康成提供的HDL-C、LDL-C試劑通過直接法完成檢測。

1.2 方法

隨機挑選本院8種健康體檢標(biāo)本當(dāng)做混合血清，依次采用ALT、TG為對象，采用DBIL試劑當(dāng)做檢測ALT的干擾項；TG檢測以HDL-C、LDL-C試劑作為干擾項，通過下列方法進(jìn)行檢測：（1）單獨測定TG、ALT水平；（2）依次在設(shè)定干擾項后檢測研究對象；（3）作干擾項目后，采用200μl水沖試劑針后進(jìn)行檢測；（4）分別做干擾項目后，增設(shè)2項對研究對象不存在干擾的項目測定后再次檢測。每種方法檢測3次，取平均值，以此降低偶然誤差帶來的影響。

2.結(jié)果

由表1可知，與單獨檢測ALT相比，檢測DBIL后再檢測ALT存在顯著差異。表明DBIL時間對ALT檢測結(jié)果產(chǎn)生負(fù)干擾，而單獨對ALT檢測與增設(shè)2項對其無干擾項目后再測結(jié)果之間無統(tǒng)計學(xué)差異。檢測HDL-C后所得TG與單獨檢測TG結(jié)果之間具有明顯差異，說明HDL-C試劑對TG結(jié)果產(chǎn)生正干擾。但單一檢測TG與增加2項無干擾項后所得檢測結(jié)果并未差異。與單一檢測TG相比，檢測LDL-C后TG的檢測結(jié)果存在一定差異，證實LDL-C試劑對TG檢測結(jié)果會出現(xiàn)正干擾。單獨對TG檢測與增加2項對研究結(jié)果無干擾項目所得結(jié)果無差異，上述三種干擾均為單純加水沖洗試劑針后，對干擾有不同程度的改善，但與單獨結(jié)果之間還有差異。

表1. 對比不同方法檢測ALT、TG結(jié)果

3.討論

隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展和進(jìn)步，醫(yī)學(xué)生化檢驗進(jìn)入現(xiàn)代化狀態(tài)。全自動生化分析儀能為臨床生化檢驗工作提供快速、準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)，交叉污染是生化檢驗中的重要課題，也是出現(xiàn)誤診的關(guān)鍵。眾所周知，全自動生化分析儀進(jìn)行檢測過程中容易出現(xiàn)交叉污染，分析其原因為：這種儀器是根據(jù)預(yù)先設(shè)置的指令自動完成檢測工作，吸樣針自動沖洗中可能并未洗干凈，在吸取下一個樣本時，極易污染該項目的試劑[1]。進(jìn)行檢測之前，要檢查哪些項目之間具有一定的干擾性，可采用干擾項目的試劑當(dāng)做被干擾項目標(biāo)本進(jìn)行檢測，觀察所得結(jié)果就能判定二者之間是否存在干擾。本次研究表明，DBIL對ALT的檢測結(jié)果有一定負(fù)干擾，是由于DBIL試劑內(nèi)的酒石酸鹽緩沖液會影響ALT，對最終的檢測結(jié)果產(chǎn)生負(fù)干擾，而HDL-C和LDL-C試劑對TC檢測結(jié)果產(chǎn)生顯著地正干擾。有學(xué)者研究指出，HDL-C試劑、LDL-C試劑包含膽固醇脂酶和氧化酶，這些物質(zhì)會與標(biāo)本內(nèi)的膽固醇反應(yīng)生成H2O2，而三酰甘油氧化酶法用于Trinder反應(yīng)[2～3]。因此，檢測出來的是二者綜合結(jié)果，導(dǎo)致所得結(jié)果偏高。雖然HDL-C與LDL-C試劑均有膽固醇脂酶、膽固醇氧化酶，但HDL-C含在R2試劑內(nèi)，LDL-C處在R1試劑內(nèi)。借助HDL-C（R2）試劑作為TG測量樣本，基本不發(fā)生反應(yīng)；而使用LDL-C（R1）當(dāng)做TG檢測樣本，會出現(xiàn)明顯的反應(yīng)，可達(dá)到38.10mmol/L。

必須注意，影響全自動生化分析儀檢測交叉污染的項目，并不止本文提及的內(nèi)容，項目之間交叉污染也比較復(fù)雜。想要更好地解決這個問題，可通過增加洗滌次數(shù)、合理挑選洗滌液等方法消除交叉污染[4～5]。本研究結(jié)果證實，單從增加用水清洗試劑針難以完全洗干凈，也會在不同程度上影響全自動化分析儀的工作效率，這是日常工作無法接受的。因此，運用全自動生化分析儀進(jìn)行檢測時，不僅要防止某些項目之間的交叉污染，也不能影響其正常的工作效率。筆者研究發(fā)現(xiàn)，最佳的方法是合理安排交叉項目順序，把容易出現(xiàn)交叉污染的項目隔開，或在具有交叉污染項目之間插入2個及以上的非污染項目[6～8]。但最徹底的方法是把干擾項目放在干擾項目通道前，進(jìn)一步消除試劑之間出現(xiàn)干擾的可能。即使如此，有干擾項目間還會相遇，因此，在自動生化分析儀進(jìn)行檢測時，順序容易被打亂，為固定檢測項目的順序，與傳統(tǒng)組合方法相同，像腎和肝功能、心肌酶等組合，盡可能預(yù)防感染項之間遇到[5]。

綜上所述，全自動生化分析儀檢測中極易出現(xiàn)交叉污染，這就要求工作者詳細(xì)了解生化分析儀器的工作流程、檢測項目試劑等內(nèi)容，合理設(shè)置各項參數(shù)及程序，進(jìn)一步防止出現(xiàn)交叉污染。同時，定期對試劑針進(jìn)行清洗，不單要考慮選取的單個樣本項目，也要考慮某一樣本最后一項與下個樣本試劑間出現(xiàn)交叉污染的情況，避免發(fā)生交叉污染。

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1006-6586(2017)06-0027-02

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