向邦全

一、大腸桿菌的耐藥機制

1、 靶位改變

大腸桿菌旋轉(zhuǎn)酶由A、B兩個亞單位組成，分別由gyaA和grrB基因編碼。早在80年代通過比較敏感菌和自發(fā)耐藥菌、人工誘變耐藥菌的染色體，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了編碼旋轉(zhuǎn)酶的基因突變，graA 和gyrB基因無論哪個發(fā)生突變都可導(dǎo)致大腸桿菌對氟喹諾酮類藥物產(chǎn)生抗生。另一方面，抗生素作用位點的改變或藥物作用表位的過度表達(dá)，可能是大腸桿菌對某一類具有相同或相似結(jié)構(gòu)抗生素耐藥的最主要因素，例如氟喹諾酮類藥物作用位點一編碼旋轉(zhuǎn)酶的gyrA、gyrB基因、編碼拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅳ 的parC、parE基因的點突變是大腸桿菌對喹諾酮類耐藥的最主要原因 。

2、 外膜滲透性障礙

由于細(xì)胞壁的障礙或細(xì)胞膜通透性的改變，抗生素?zé)o法進入細(xì)胞內(nèi)達(dá)到作用靶位而發(fā)揮抗菌效能。大腸桿菌細(xì)胞膜上存在著多種孔蛋白，為親水性藥物唯一的通道，細(xì)菌發(fā)生突變失去某種特異孔蛋白即可導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性。

3、 藥物外輸作用引起的耐藥性

多藥外輸泵降低藥物在菌體內(nèi)蓄積，是藥物的主動排出系統(tǒng)，即細(xì)菌的細(xì)胞膜上一類蛋白在能量的支持下將藥物選擇性或非選擇性地排出細(xì)胞外，降低抗菌藥物在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的積累，導(dǎo)致細(xì)菌低水耐藥。大腸桿菌的外溢泵主要是carA、tolC系統(tǒng)，該系統(tǒng)屬于RND家族，可對萘啶酸、氨必西林、利福平、氟喹諾酮等多種制劑產(chǎn)生耐藥性，如果使該系統(tǒng)失活，菌株可從多重耐藥狀態(tài)變?yōu)橄鄬γ舾袪顟B(tài)。

4、細(xì)菌生物被膜的形成

細(xì)菌生物被膜是指細(xì)菌粘附于固體或有機腔道表面，形成微菌落，并分泌細(xì)胞外多糖蛋白復(fù)合物將自身包裹其中而形成的膜狀物。常見的形成細(xì)菌生物被膜的臨床致病菌有銅綠假單胞菌、表皮葡萄球菌、大腸埃希菌等，細(xì)菌形成生物被膜后，往往對抗菌藥物產(chǎn)生耐藥性。

5、β-內(nèi)酰胺酶的產(chǎn)生

大腸桿菌對β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥主要是由于產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶，使其β-內(nèi)酰胺環(huán)的酰胺鍵斷裂而失去抗菌活性。根據(jù)氨基酸和核苷酸組成的不同可分為A組β-內(nèi)酰胺酶、B組β-內(nèi)酰胺酶和C組β-內(nèi)酰胺酶。A組β-內(nèi)酰胺酶主要水解青霉素類、C組β-內(nèi)酰胺酶主要水解頭孢類。

二、鴨大腸桿菌常用藥物

1、 β-內(nèi)酰胺類抗生素

β-內(nèi)酰胺類抗生素為化學(xué)結(jié)構(gòu)中含有β-內(nèi)酰胺環(huán)一類抗生素，主要包括青霉素類、頭孢菌素類、β-內(nèi)酰胺酶抑制劑。抗病作用機理均為抑制細(xì)胞壁的合成。

（1）青霉素類 防治禽大腸桿菌病的青霉素類抗生素主要為半合成廣譜抗生素氨芐西林、阿莫西林。氨芐西林、阿莫西林均耐酸、不耐酶，內(nèi)服或肌注易吸收。阿莫西林耐酸較氨芐西林強，該藥抗菌譜廣，殺菌力強，作用迅速，阿莫西林的血清濃度比氨芐西林高1.5-3倍。阿莫西林對大腸桿菌有較強的抗菌作用，其體外抗菌譜等同于氨芐西林，但體內(nèi)效果則增強2-3倍。

（2） 頭孢菌素類 為廣譜半合成抗生素，具殺菌力強、抗菌譜廣、毒性小、對酸和β-內(nèi)酰胺酶比青霉素類穩(wěn)定等優(yōu)點，第三、四代頭孢菌素對大腸桿菌具有較強的抗菌作用，因價格較貴而多用于寵物、種畜禽及貴重動物。臨床上應(yīng)用的有頭孢噻呋、頭孢噻肟、頭孢唑肟、頭孢曲松、頭孢哌酮、頭孢他啶、頭孢吡肟。

（3） β-內(nèi)酰胺酶抑制劑 大腸桿菌通過耐藥性質(zhì)粒介導(dǎo)產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶破壞β-內(nèi)酰胺類抗生素而使之失去抗菌活性。目前獸醫(yī)臨床上使用的β-內(nèi)酰胺酶抑制劑有克拉維酸和舒巴坦。

2、四環(huán)素類

四環(huán)素類藥物的作用機理是干擾細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成，其對蛋白質(zhì)合成的抑制作用較氨基糖苷類弱，對大腸桿菌的作用不如氨基糖苷類和氯霉素類。臨床上常用的有土霉素、四環(huán)素、金霉素、多西環(huán)素。

3、 氟喹諾酮類

本類藥物的作用機理是抑制細(xì)菌脫氧核酸（DNA）回旋酶，干擾DNA復(fù)制使細(xì)菌死亡。具有抗菌譜廣，殺菌力強，吸收快，體內(nèi)分布廣泛，與其他抗菌無交叉耐藥性，使用方便，不良反應(yīng)小等優(yōu)點。用于治療禽大腸桿菌病均具較好效果。在獸醫(yī)臨床應(yīng)用的有：氟甲喹、諾氟沙星、培氟沙星、氧氟沙星、環(huán)丙沙星、洛美沙星、恩諾沙星、達(dá)氟沙星、二氟沙星、沙拉沙星、麻保沙星等。

三、 鴨大腸桿菌耐藥現(xiàn)狀

研究表明禽源大腸桿菌的耐藥性復(fù)雜，各地報道的敏感藥物和耐藥性都有所不同；各地不同時間分離的菌株的耐藥性也有較大差異，耐藥性變化快。

3.1 河南地區(qū)分離的l7株細(xì)菌經(jīng)培養(yǎng)特性及生化試驗，鑒定為大腸桿菌。用臨床上常用的12種抗菌素紙片對分離菌株進行藥敏試驗。結(jié)果表明，頭孢唑啉、慶大霉素、卡那霉素等對雞大腸桿茵抑茵效果較好。而對桿菌肽、復(fù)方新諾明、四環(huán)素及青霉素具有耐藥性，特別是對桿菌肽及復(fù)方新諾明其耐藥率分別達(dá)到了100%和94.12%。

3.2 于學(xué)輝等人對四川、重慶、云南集約化養(yǎng)殖場分離的207株鴨大腸桿菌采用紙片法進行了藥敏試驗，并對藥敏試驗結(jié)果進行統(tǒng)計、分析。結(jié)果顯示：在所選的29種抗生素中，鴨源大腸桿菌耐藥性非常嚴(yán)重，平均耐藥率28.83%，以多重耐藥為主，耐10-18種藥物的菌株占59.4%，有一定地區(qū)性?？傮w上耐藥率最高的是氯唑西林67.1%、四環(huán)素66.7%、氟甲喹60.3%、氯霉素57%、替米考星42.13%、恩諾沙星35.23%。

3.3 2006年10月—2008年5月，從國內(nèi)5個省的9個規(guī)模型鴨場的發(fā)病鴨或死亡鴨分離、鑒定大腸桿菌67株，采用肉湯稀釋法測定其對頭孢3代、4代，碳青霉烯類、單環(huán)β-內(nèi)酰胺環(huán)類和氟喹諾酮類藥物的敏感性。結(jié)果表明，試驗菌株對以上藥物的耐藥率分別為頭孢曲松鈉（56.7 %） 、頭孢噻呋（71.6%） 、頭孢吡肟（31.3%） 、頭孢噻肟（49.3%） 、左氧氟沙星（50.3%） 、環(huán)丙沙星（71.6 %） 、加替沙星（62.7%） 、亞胺培南（0%） 、氨曲南（56.7%），鴨致病性大腸桿菌的耐藥性比較嚴(yán)重，且同類藥物的交叉耐藥不容忽視。

3.4 從廣州市番禺區(qū)發(fā)生大腸桿菌病的3個蛋鴨場分離的135 株大腸桿菌，通過紙片法分別進行耐藥性檢測，分離菌對青霉素類，四環(huán)素類及磺胺類抗菌藥試驗結(jié)果顯示已普遍產(chǎn)生耐藥性，耐藥率超過60%，喹諾酮類耐藥性率也超過了40%。

（作者單位：404155重慶三峽職業(yè)學(xué)院動物科技系）