尹志強(qiáng),宋月,柴婷婷,王昕璐,賈琪,楊曙明,邱靜

(中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所，農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量與安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京，100081)

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法應(yīng)用于動(dòng)物源性食品中多族藥物篩查確證的研究進(jìn)展

尹志強(qiáng),宋月,柴婷婷,王昕璐,賈琪,楊曙明,邱靜*

(中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所，農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量與安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京，100081)

為了篩查和監(jiān)測(cè)動(dòng)物源性食品中因不當(dāng)或非法使用獸藥以及一些人用藥物而導(dǎo)致的藥物殘留，液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)成為該領(lǐng)域中應(yīng)用最為廣泛的痕量檢測(cè)技術(shù)。該文從樣品前處理凈化方法、最新研究思路、基質(zhì)效應(yīng)評(píng)價(jià)、質(zhì)譜檢測(cè)器選取等方面對(duì)液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法在動(dòng)物源性食品中多族藥物篩查確證應(yīng)用的研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述，并對(duì)這一應(yīng)用的發(fā)展前景進(jìn)行了展望，希望能為相關(guān)研究的開(kāi)展提供參考和啟發(fā)。

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法；動(dòng)物源性食品；獸藥；殘留；篩查；綜述

畜牧生產(chǎn)過(guò)程中，獸藥的廣泛使用在防治畜禽動(dòng)物疾病、降低牲畜發(fā)病率和死亡率、促進(jìn)生長(zhǎng)、改善產(chǎn)品品質(zhì)等方面起到了積極的作用。然而由于存在各類(lèi)獸藥以及人用藥等藥物的濫用、誤用及不遵守休藥期等現(xiàn)象[1]，動(dòng)物源性食品中可能存在大量的藥物殘留，從而對(duì)消費(fèi)者的身體健康造成巨大的潛在危害，如“三致”作用、激素樣作用、耐藥性產(chǎn)生以及引發(fā)過(guò)敏反應(yīng)等[2-3]。

我國(guó)目前針對(duì)動(dòng)物源性食品中藥物殘留檢測(cè)方法主要還是以藥物分類(lèi)檢測(cè)為主，對(duì)于非檢測(cè)項(xiàng)目藥物殘留篩查能力不足，多個(gè)指標(biāo)分項(xiàng)檢測(cè)，耗時(shí)費(fèi)力，難以體現(xiàn)產(chǎn)品整體特征[4]，無(wú)法滿足大批量樣品高效快速測(cè)定的目的，并且無(wú)法對(duì)外源物質(zhì)尤其是未知有害藥物進(jìn)行檢驗(yàn)。而如今，獸藥的使用更趨向于多成分低含量添加代替之前的單一組分高濃度添加，使得動(dòng)物產(chǎn)品的安全監(jiān)控面臨技術(shù)支撐極為不足的問(wèn)題。因此建立快速、有效、覆蓋面廣的動(dòng)物源性食品中藥物殘留的篩查方法對(duì)保障動(dòng)物源性食品質(zhì)量安全、保護(hù)消費(fèi)者健康具有非常重要的意義。

動(dòng)物源性食品中藥物殘留的常用檢測(cè)方法主要包括酶聯(lián)免疫法[5]，分子印跡法[6]，微生物生化法[7]等，但這些方法都或多或少存在一些弊端，比如藥物交叉反應(yīng)、識(shí)別位點(diǎn)易于破壞、靈敏度低等問(wèn)題，使得這些技術(shù)只能進(jìn)行半定量檢測(cè)，而且無(wú)法滿足高通量快速篩查的目的。隨著質(zhì)譜技術(shù)的發(fā)展，液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(LC-MS)得到了廣泛的應(yīng)用，它是集色譜高效快速的分離效果和質(zhì)譜準(zhǔn)確靈敏的定性定量分析能力于一身的分析方法，作為復(fù)雜樣品基質(zhì)中未知物篩查檢測(cè)的重要工具開(kāi)辟了痕量藥物殘留檢測(cè)的新時(shí)代[8-9]。

1 樣品前處理凈化技術(shù)

決定一個(gè)篩查方法與眾不同的地方便是樣品前處理方式的巧妙性，而對(duì)樣品前處理效果影響最大的又是其中的凈化手段。動(dòng)物源性食品基質(zhì)復(fù)雜，大量的磷脂、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生巨大影響，因此在有機(jī)溶劑提取之后的凈化步驟是決定一個(gè)前處理方法是否優(yōu)異的最重要環(huán)節(jié)，同時(shí)也是評(píng)價(jià)所建立方法是否優(yōu)異最重要的因素。固相萃取技術(shù)是凈化階段中最常用的手段，一般包括以下幾種：反向非極性萃取、正向極性萃取、離子交換萃取、共價(jià)萃取、高級(jí)聚合物萃取以及專(zhuān)用固定相等。在動(dòng)物源性食品的多族藥物篩查前處理中，固相萃取大多應(yīng)用在3個(gè)方面，分別是固相萃取(SPE)柱，分散固相萃取(d-SPE)以及快速渦流在線樣品制備和凈化技術(shù)。其中，SPE固相萃取柱凈化效果最好，d-SPE應(yīng)用廣泛操作簡(jiǎn)便，快速渦流在線樣品制備和凈化技術(shù)的效果介于二者之間。除此之外還有SPE與分子印跡進(jìn)行結(jié)合[10]等，但是由于選擇性過(guò)高在大范圍篩查應(yīng)用中顯得更力不從心。

1.1 SPE固相萃取技術(shù)

SPE固相萃取小柱在萃取過(guò)程中的高選擇性使其很難成為多族藥物檢測(cè)的一個(gè)通用方法，因此僅局限于少數(shù)幾類(lèi)性質(zhì)相似藥物同時(shí)檢測(cè)的應(yīng)用，其中，Oasis HLB、Oasis MCX、SCX柱使用得較為廣泛[11]。我國(guó)國(guó)標(biāo)SN/T 2624—2010[12]中對(duì)76種堿性藥物檢測(cè)的前處理方法為使用乙腈、異丙醇和檸檬酸緩沖液進(jìn)行2次提取，提取液加異丙醇旋蒸濃縮，檸檬酸緩沖液潤(rùn)洗梨形瓶，合并的洗液使用MEP柱和MCX柱串接凈化后氮吹濃縮上機(jī)檢測(cè)。雖然數(shù)據(jù)采集僅需要23 min，但是該方法的前處理操作相當(dāng)繁瑣，耗時(shí)長(zhǎng)，難以滿足高通量篩查的目的。HOU[13]等人在檢測(cè)牛奶中的46 種獸藥包括磺胺類(lèi)、喹諾酮類(lèi)和苯并咪唑類(lèi)藥物及其代謝物時(shí)，將提取液經(jīng)過(guò)Oasis MCX固相萃取小柱凈化濃縮，對(duì)于有最大殘留限量(MRL)的分析物，方法的確定限(CCα)為11～115 μg/kg，對(duì)于沒(méi)有MRL的分析物，方法的CCα低至0.01～0.08 μg/kg。YU等人[14]將Oasis HLB柱作為SPE凈化步驟應(yīng)用在雞肉、豬肉和魚(yú)肉中18 種抗生素殘留檢測(cè)前處理中，其中包括大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)、內(nèi)酰胺類(lèi)和喹諾酮類(lèi)抗生素等。方法數(shù)據(jù)采集耗時(shí)20 min，所有藥物的定量限(LOQs)均能低于10 ng/kg，利用此方法可在1天之內(nèi)分析處理30個(gè)未知樣品。同時(shí)，多壁碳納米管(MWCNTs)是作為一種具有高穩(wěn)定性和較強(qiáng)吸附性能的新型納米材料,已被廣泛用于農(nóng)藥殘留和獸藥殘留的檢測(cè)。如，曹慧[15]采用多壁碳納米管固相萃取-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)同時(shí)測(cè)定蜂蜜中的磺胺類(lèi)、喹諾酮類(lèi)、硝基咪唑類(lèi)和四環(huán)素類(lèi)等52種獸藥殘留，該方法將氧化處理后的多壁碳納米管自制成萃取小柱使用，數(shù)據(jù)采集時(shí)間20 min，方法定量限為1.5～7.5 μg/kg，經(jīng)過(guò)評(píng)價(jià)發(fā)現(xiàn)方法自制的新材料SPE小柱與商品化HLB小柱相當(dāng)，盡管重現(xiàn)性稍差，但是由于MWCNTs 材料的廉價(jià)性讓具有一定的應(yīng)用前景。雖然類(lèi)似的關(guān)于固相萃取小柱應(yīng)用的研究有很多，但是由于SPE的選擇性導(dǎo)致方法可同時(shí)檢測(cè)的藥物種類(lèi)和數(shù)目都太少，并且由于SPE繁瑣的操作步驟使得方法前處理耗時(shí)較長(zhǎng)，因此很難成為一個(gè)通用的高通量多殘留篩查檢測(cè)的樣品前處理方法。

1.2 分散固相萃取

分散固相萃取(d-SPE)是作為最簡(jiǎn)單便捷的分散固相萃取廣泛應(yīng)用于QuEchERS方法中。傳統(tǒng)的d-SPE能有效去除各種基質(zhì)中的有機(jī)酸、糖類(lèi)、脂類(lèi)、固醇以及色素，如N-丙基乙二胺(PSA)、石墨化碳和C18等。

1.2.1 QuEchERS技術(shù)

傳統(tǒng)分散固相萃取材料應(yīng)用最廣泛的便是在2003年在美國(guó)誕生的的革新技術(shù)QuEchERS (Quick， Easy，Cheap，Effective，Rugged and Safe)，這是一種快速、簡(jiǎn)便、 價(jià)格低廉的分析方法實(shí)現(xiàn)高質(zhì)量的農(nóng)獸藥多殘留分析[16]。該方法可以去除有機(jī)酸、色素和其他潛在的污染物等，并且具有高樣品通量，低的無(wú)氯溶劑使用率以及寬的應(yīng)用范圍等優(yōu)點(diǎn)。

最原始建立方法主要應(yīng)用在農(nóng)藥殘留檢測(cè)中，在此基礎(chǔ)上，通過(guò)緩沖液和C18的引入，后續(xù)又建立了2個(gè)改良的QuEchERS方法，LEHOTAY 等人在原方法中引入醋酸緩沖體系，該方法目前已成為AOAC官方方法2007.01，ANASTASSIADES 等人在原方法中引入相對(duì)緩沖能力較弱的檸檬酸緩沖體系，該方法目前被歐盟采用列為標(biāo)準(zhǔn)方法EN 15662。3個(gè)方法指南具體操作如圖1所示，但至今仍沒(méi)有統(tǒng)一，但都是經(jīng)過(guò)驗(yàn)證并可以滿足常見(jiàn)農(nóng)藥殘留檢測(cè)的要求。QuEchERS方法最大的優(yōu)勢(shì)是靈活性強(qiáng)，但同時(shí)這也成為建立該方法的最大的困難。盡管最初的QuEchERS方法應(yīng)用在農(nóng)藥殘留檢測(cè)中，但是如今在獸藥的殘留檢測(cè)中也發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。將QuEchERS官方方法作為模板，根據(jù)自身檢測(cè)目標(biāo)物性質(zhì)、基質(zhì)組成、實(shí)驗(yàn)條件等因素，通過(guò)調(diào)節(jié)萃取劑、pH條件、加鹽、改變體積比、加水、改變吸附劑等條件的變化，建立更加量身定制的QuEchERS方法。

圖1 QuEchERS官方標(biāo)準(zhǔn)方法Fig.1 Official standard methods ofQuEchERS

GEORGE STUBBINGS[17]利用 QuEchERS 方法建立了雞肉組織中100種常見(jiàn)抗生素類(lèi)獸藥篩查的 LC-MS/MS方法，該研究評(píng)價(jià)了6種提取方法，2種凈化方法，最終確定的前處理方法為使用含有15 mL 1 %乙酸的乙腈進(jìn)行提取，加入5 g無(wú)水硫酸鈉和500 mg的Bondesil NH2 吸附劑進(jìn)行凈化，提取液濃縮復(fù)溶后上機(jī)檢測(cè)28 min。該方法簡(jiǎn)便快速， ABDALLAH[18]也同樣使用優(yōu)化的 QuEchERS 方法建立了動(dòng)物組織中22種磺胺類(lèi)藥物及其代謝物篩查的混合線性離子阱-串聯(lián)軌道阱質(zhì)譜(HPLC-HRMS)方法，樣品前處理使用水和含1%乙酸的乙腈溶劑進(jìn)行提取，加入無(wú)水硫酸鎂、氯化鈉鹽析，取上清液加入丙基乙二胺(PSA)和無(wú)水MgSO4凈化，最后經(jīng)氮?dú)獯蹈蓮?fù)溶后上機(jī)檢測(cè)，經(jīng)英國(guó)FAPAS分析實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證表明該方法準(zhǔn)確靈敏實(shí)用。類(lèi)似的研究報(bào)道很多，因此，在動(dòng)物源性食品中多族藥物殘留篩查確證的前處理方法中，QuEchERS 這一簡(jiǎn)便快速的通用樣品制備與凈化技術(shù)作為已經(jīng)成為一個(gè)至關(guān)重要的樣品前處理方法，盡管一般SPE小柱的確會(huì)比分散基質(zhì)萃取更能有效去除雜質(zhì)，但會(huì)降低某些極性藥物的回收，同時(shí)也存在無(wú)水MgSO4可能會(huì)堵塞篩板的可能，所以QuEchERS作為一種至關(guān)重要的方法被用在越來(lái)越多領(lǐng)域檢測(cè)各種不同類(lèi)型基質(zhì)的樣品。

1.2.2 新型分散固相萃取材料的應(yīng)用

如今，一些新型吸附劑如納米材料或者實(shí)驗(yàn)室新合成的吸附材料也取得了廣泛的應(yīng)用。如，應(yīng)永飛[19]曾采用MWCNTs 為吸附劑的d-SPE凈化、LC-MS測(cè)定飼料中11種β-受體激動(dòng)劑。與上述曹慧所建立方法不同的是，應(yīng)永飛將MWCNTs作為類(lèi)似PSA那樣的分散固相萃取材料應(yīng)用，盡管依舊采取類(lèi)似洗脫的程序，但是與目前常用的陽(yáng)離子交換固相萃取柱方法比較，大大縮短了檢測(cè)前處理時(shí)間,降低了檢測(cè)成本，但是由于MWCNTs吸附性較強(qiáng)，只適合很少一部分藥物的前處理應(yīng)用。 CASTILLO-GARCA[20]合成了新納米復(fù)合材料應(yīng)用于檢測(cè)肉組織中3種四環(huán)素類(lèi)和3種酸性喹諾酮類(lèi)藥物。該納米復(fù)合材料利用表面包被鋱、銪離子的磁性納米顆粒通過(guò)共沉淀法合成。該方法的原理是在與分析物吸附作用的基礎(chǔ)上，形成相應(yīng)的螯合物，之后通過(guò)合適pH的有機(jī)溶劑進(jìn)行洗脫，可以應(yīng)用在大多數(shù)能夠螯合鋱、銪離子的有機(jī)化合物提取中，但是合成部分太過(guò)繁瑣，方法實(shí)用性并不高。由此可見(jiàn)，盡管一些新型吸附材料操作較復(fù)雜，但是相比其他凈化方法而言，d-SPE簡(jiǎn)便快速，節(jié)省人力物力，可實(shí)現(xiàn)性最高，在多族藥物的篩查前處理應(yīng)用最廣泛，當(dāng)下的趨勢(shì)是尋找更加效率高適用范圍廣的新型d-SPE材料。

1.3 快速渦流在線樣品制備和凈化技術(shù)

快速渦流在線樣品制備和凈化技術(shù)，也稱(chēng)為快速渦流液相色譜(High turbulence liquid chromatography，TurboFlow技術(shù))，是基于色譜原理結(jié)合擴(kuò)散、化學(xué)和體積排除原理的在線樣品制備和凈化技術(shù)。此技術(shù)中的凈化柱以多孔大粒徑填料為吸附劑，不同類(lèi)型的吸附劑表面用不同化學(xué)基團(tuán)修飾使其具有特殊的吸附性。ZHU等人[21]利用TurboFlow結(jié)合LC-MS/MS測(cè)定牛奶中8類(lèi)共88種獸藥殘留。樣品提取液上樣于已經(jīng)被水活化和流動(dòng)相平衡的Turboflow Cyclone TM柱中，使用V(乙腈)∶V(異丙醇)∶V(丙醇)=4∶4∶2淋洗，最后通過(guò)容積環(huán)中的200 μL充滿乙腈和水體積比為6∶4進(jìn)行洗脫進(jìn)入液相色譜分析柱，整個(gè)分析過(guò)程為39 min，方法的LOQ為0.5～10 μg/kg。KATERINA等[22]也同樣使用類(lèi)似的Turboflow Transcend TM TLX-1系統(tǒng)結(jié)合TSQ Quantum Access MAXLC-MS/MS檢測(cè)牛奶中36種7大類(lèi)不同的抗生素。因此，相比傳統(tǒng)的凈化技術(shù)，快速渦流在線樣品制備和凈化技術(shù)結(jié)合液相質(zhì)譜檢測(cè)憑借其高效率方便快捷的優(yōu)勢(shì)已經(jīng)得到非常廣泛的應(yīng)用。

2 當(dāng)下研究的新思路

由于本研究對(duì)同時(shí)檢測(cè)的多族藥物的種類(lèi)和數(shù)量有較高的要求，將彼此之間化學(xué)性質(zhì)相差較大的不同目標(biāo)物一視同仁的做法顯然是無(wú)法滿足要求的，因此，對(duì)計(jì)劃的目標(biāo)物以及應(yīng)用要求進(jìn)行合理分類(lèi)才是解決此問(wèn)題的思路。

MAKI KANDA[23]等人的研究將所選目標(biāo)分析物分為強(qiáng)極性化合物和中等極性化合物，首先強(qiáng)極性化合物使用Na2EDTA-Mcllvain緩沖液進(jìn)行提取，然后中等極性化合物使用含0.1 %甲酸的乙腈提取，接下來(lái)將第1次提取液使用固相萃取柱凈化，將第2次提取液作為洗脫液添加到同一固相萃取柱上，從而可以將強(qiáng)極性化合物和中等極性化合物同時(shí)洗脫下來(lái)上機(jī)檢測(cè)。STEPHEN W C CHUNG和CHI-HO LAM[24]同樣將所選的15類(lèi)78種化合物按照不同極性分類(lèi)，樣品使用乙腈和水混合提取液提取及低溫冷凍分層，之后分別將含有親脂性化合物的乙腈和含有親水性化合物的水分別通過(guò)反相液相色譜(RPLC)和親水作用色譜(HILIC)進(jìn)行分離檢測(cè)。前者的前處理需要大量時(shí)間，數(shù)據(jù)時(shí)間為25 min，后者的雖然前處理相比前者而言操作更節(jié)省一些步驟和時(shí)間，但是由于需要采用不同的色譜柱和不同的采集模式，數(shù)據(jù)采集時(shí)間各為20 min，完成1個(gè)樣品的檢測(cè)需要耗時(shí)80 min。因此，無(wú)論是前處理對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行分類(lèi)處理還是在質(zhì)譜階段對(duì)目標(biāo)物分類(lèi)檢測(cè)都需要額外大量的時(shí)間，無(wú)疑降低了實(shí)驗(yàn)效率，但是為了達(dá)到滿意的覆蓋度這又是一個(gè)迫不得已的選擇，在此啟示的基礎(chǔ)上，建立更簡(jiǎn)便快速的方法成為下一個(gè)研究目標(biāo)。

實(shí)際應(yīng)用中，不僅可以根據(jù)目標(biāo)物進(jìn)行分類(lèi)，還可以根據(jù)檢測(cè)的目標(biāo)與應(yīng)用的要求進(jìn)行分別對(duì)待。WANG等[25]人建立了牛奶中11大類(lèi)共105種獸藥殘留的超高效液相色譜串聯(lián)軌道阱質(zhì)譜(UHPLC-Q-Orbitrap)檢測(cè)方法，其前處理方法為使用優(yōu)化的鹽析液相提取技術(shù)(salting-out supported liquid extraction, SOSLE)，主要步驟包括藥物提取與蛋白沉淀、鹽析分離、SPE凈化以及濃縮等操作。其目標(biāo)物列表分為三大類(lèi)：A、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定的89種藥物；B、13種以青霉素和β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素為主的化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定的藥物，回收率可能小于70%或者大于120%，但是依舊可以進(jìn)行定量；C、包括3種藥物，分別是氨比西林、頭孢拉定和泰樂(lè)菌素B，他們?nèi)呖梢詽M足篩查的要求但是無(wú)法準(zhǔn)確定量。因此，在動(dòng)物源性多族藥物的殘留檢測(cè)中，如果不能保證所有的藥物滿足需要，可以根據(jù)不同的要求對(duì)他們分別對(duì)待，如將一些禁止使用的藥物作為重點(diǎn)考慮對(duì)象，盡可能提高其檢測(cè)靈敏度，而一些不常用的藥物可以放寬其要求標(biāo)準(zhǔn)，能夠滿足篩查的需求即可。

3 基質(zhì)效應(yīng)的評(píng)價(jià)

液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)是基于物質(zhì)的質(zhì)荷比進(jìn)行定性和定量，因此，任何能夠干擾待測(cè)物離子化的物質(zhì)都可能影響結(jié)果的靈敏度，這些基質(zhì)成分一般為提取或分離過(guò)程中產(chǎn)生的共提物和共流出等雜質(zhì)，這些物質(zhì)改變了離子源對(duì)目標(biāo)物離子化的效率，導(dǎo)致離子抑制或增強(qiáng)的產(chǎn)生，即引入了基質(zhì)效應(yīng)的概念[26]。盡管藥物自身的化學(xué)性質(zhì)對(duì)基質(zhì)效應(yīng)的影響相比前處理方法而言更重要，但是通過(guò)對(duì)基質(zhì)效應(yīng)的考察能夠指導(dǎo)前處理方法的建立，并且是評(píng)價(jià)所建立方法靈敏度和選擇性的重要指標(biāo)。目前最直觀評(píng)價(jià)基質(zhì)效應(yīng)的方法主要有2種：(1)柱后灌注法(post-column infusion method)(如圖2所示)，(2)提取后加入法(post-extraction spiking method)[27-28]。

圖2 柱后灌注法示意圖Fig.2 The basic flowsheet of post-column infusion method

RYAN BONFIGLIO[29]設(shè)計(jì)了4部分實(shí)驗(yàn)采用SRM掃描模式評(píng)估3種藥物受到的基質(zhì)效應(yīng)影響，首先是利用流動(dòng)注入模式(FIA)比較溶劑標(biāo)樣和不同前處理方式基質(zhì)空白提取液稀釋標(biāo)樣的響應(yīng)強(qiáng)度差別，以此來(lái)衡量基質(zhì)干擾物是否對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品的響應(yīng)有影響。之后采用柱后進(jìn)樣方式評(píng)價(jià)在2.5 min內(nèi)不同前處理基質(zhì)空白內(nèi)源性干擾的影響情況。第3部分與第2部分除采用混合標(biāo)樣和信號(hào)采集時(shí)間為20 min外操作完全一致，以此評(píng)價(jià)在整個(gè)分析過(guò)程中干擾的基質(zhì)內(nèi)源性物質(zhì)是否被洗脫下來(lái)。最后一部分依舊用柱后灌注的方式模擬實(shí)際進(jìn)樣過(guò)程，將混合標(biāo)樣以每?jī)?min的時(shí)間間隔注入系統(tǒng)，觀察在基質(zhì)效應(yīng)影響條件下信號(hào)恢復(fù)到初始進(jìn)樣強(qiáng)度的快慢。通過(guò)這4部分實(shí)驗(yàn)，可以直觀地評(píng)價(jià)不同前處理，不同極性藥物在最開(kāi)始進(jìn)樣階段以及整個(gè)分析過(guò)程之后的基質(zhì)效應(yīng)，作為選擇最適前處理方法的重要影響因素。對(duì)于多族藥物的篩查研究而言，這種方式可用來(lái)分析少數(shù)幾種基質(zhì)效應(yīng)較明顯的強(qiáng)極性物質(zhì)，能夠?qū)λ麄冊(cè)谡麄€(gè)分析環(huán)節(jié)受到的基質(zhì)效應(yīng)進(jìn)行完整的考量。

YE[30]認(rèn)為磷脂類(lèi)物質(zhì)是造成生物樣品基質(zhì)效應(yīng)的主要因素，他除了同樣利用柱后灌注的方式進(jìn)行評(píng)價(jià)以外，也將一些典型磷脂類(lèi)物質(zhì)如甘油磷酸膽堿與目標(biāo)藥物同時(shí)在MRM模式下檢測(cè)，觀察二者提取流色圖的重疊部分，從而通過(guò)選擇不同的色譜柱、流動(dòng)相以及洗針液使他們各自的提取色譜圖能夠很好的分開(kāi)，從而減輕對(duì)易受影響目標(biāo)物的基質(zhì)效應(yīng)。因此，在多族藥物的篩查研究中，可選取自認(rèn)為可疑的能夠找到MRM離子對(duì)的干擾物，利用這種方式分析其是否會(huì)對(duì)一些敏感目標(biāo)物產(chǎn)生干擾。

LIU[31]通過(guò)觀察空白基質(zhì)在MRM檢測(cè)模式下是否有信號(hào)響應(yīng)推測(cè)對(duì)目標(biāo)物的影響。與YE不同的是，LIU并沒(méi)有將可能干擾物的MRM離子對(duì)列入檢測(cè)列表，而是直接觀察空白提取液是否能產(chǎn)生與目標(biāo)分析物相近質(zhì)荷比的物質(zhì)從而可能造成基質(zhì)干擾。在多族藥物的篩查檢測(cè)中，由于同時(shí)檢測(cè)的目標(biāo)物很多，并且對(duì)基質(zhì)效應(yīng)的關(guān)注更多的是干擾物對(duì)絕大多數(shù)目標(biāo)物的影響，而不是探究干擾物具體是什么或者干擾物對(duì)某幾個(gè)典型目標(biāo)物的影響，因此這種研究方式是最簡(jiǎn)便實(shí)用且直觀的。

另外還可以通過(guò)重量分析法[32]稱(chēng)量前處理凈化前后提取液的基質(zhì)的質(zhì)量來(lái)預(yù)測(cè)基質(zhì)效應(yīng)的影響，重量差越大的前處理方法可能造成的基質(zhì)干擾越小，但是由于具體實(shí)驗(yàn)過(guò)程中水分的控制耗時(shí)較長(zhǎng)，而且結(jié)果可能受環(huán)境以及其他多種條件影響，所以重量分析法使用較少。

在建立多族藥物篩查方法時(shí)采用更多的是提取后加入法，即通過(guò)比較溶劑標(biāo)樣和基質(zhì)標(biāo)樣的擬合曲線的差別來(lái)計(jì)算該目標(biāo)物的信號(hào)比，從而將基質(zhì)效應(yīng)進(jìn)行量化比較。例如，大多數(shù)的喹諾酮類(lèi)藥物(諾氟沙星、奧比沙星、奧索利酸等產(chǎn)生基質(zhì)抑制現(xiàn)象)和磺胺類(lèi)藥物(磺胺多辛產(chǎn)生基質(zhì)抑制，磺胺嘧啶產(chǎn)生基質(zhì)增強(qiáng)等)的基質(zhì)效應(yīng)較?。凰沫h(huán)素類(lèi)、氨基糖苷類(lèi)、林可酰胺類(lèi)抗生素、類(lèi)固醇類(lèi)等易造成基質(zhì)抑制現(xiàn)象；大多數(shù)大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素會(huì)產(chǎn)生基質(zhì)增強(qiáng)現(xiàn)象，少數(shù)如螺旋霉素，替米考星、泰樂(lè)菌素等會(huì)產(chǎn)生基質(zhì)效應(yīng)[23,33]。不同的前處理方式，不同的基質(zhì)，不同的藥物其基質(zhì)效應(yīng)都會(huì)有差別，需要具體情況實(shí)際考量，在此就不一一贅述。

以上這些方式，無(wú)論是可視化的基質(zhì)效應(yīng)的觀察，還是具體基質(zhì)效應(yīng)值的計(jì)算，最根本的目的是通過(guò)選擇不同的色譜柱、流動(dòng)相、洗針液等得到最優(yōu)的前處理方法以及干擾最小的色譜圖。除此之外，降低基質(zhì)效應(yīng)還可以采取優(yōu)化前處理?xiàng)l件、優(yōu)化色譜分離以及質(zhì)譜檢測(cè)條件，以及使用基質(zhì)標(biāo)建立定量擬合曲線、濃縮后更換溶劑復(fù)溶、使用內(nèi)標(biāo)定量等方法。

4 質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)

LC-MS-MS中的質(zhì)譜檢測(cè)器通常分為低分辨質(zhì)譜和高分辨質(zhì)譜兩大類(lèi)，一般低分辨質(zhì)譜中最常用的便是三重四極桿質(zhì)譜(QqQ)和三重四極桿-離子阱串聯(lián)質(zhì)譜(Q-Trap MS)，高分辨質(zhì)譜中常用的是飛行時(shí)間質(zhì)譜(Tof MS 、 Q-Tof MS)和軌道阱質(zhì)譜(Orbitrap Ms)。

QqQ以及Q-Trap MS憑借其高靈敏度和高選擇性成為質(zhì)譜定量方面目前靈敏度最高，選擇性最好，掃描最快的技術(shù)。先進(jìn)的MRM采集方式如Scheduled MRM TM采集方式(AB SCIEX公司)、DMRM(Agilent公司)等能夠智能地利用色譜峰的保留時(shí)間自動(dòng)優(yōu)化MRM的駐留時(shí)間，以達(dá)到最佳的定量結(jié)果[34]，這一點(diǎn)對(duì)于上百種的藥物同時(shí)篩查檢測(cè)具有重要意義[35]。Q-Trap獨(dú)有的MRM3技術(shù)通過(guò)孫離子對(duì)的選擇大大提高復(fù)雜基質(zhì)中的檢測(cè)選擇性和靈敏度。同時(shí)，Q-Trap技術(shù)獨(dú)特的MRM-IDA-EPI掃描方式可以同時(shí)獲得MRM數(shù)據(jù)以及感興趣的二級(jí)全掃描質(zhì)譜圖，通過(guò)自建譜庫(kù)比對(duì)進(jìn)行半未知或完全未知的篩查。周煒等人[36]利用此方式確定了某品牌部分獸藥中非法添加了氯丙那林，但這種方式的缺點(diǎn)是無(wú)法獲得高分辨質(zhì)譜的精確質(zhì)量數(shù)和高通量，并且目前只能依賴(lài)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)及譜庫(kù)的建立，過(guò)程繁瑣又需要長(zhǎng)期積累與維護(hù)，但是為未知藥物的篩查及定性確證提供了一個(gè)有效的思路與方法。

因此低分辨質(zhì)譜在LC/MS檢測(cè)中提供了一個(gè)通用的相當(dāng)大數(shù)量獸藥多殘留檢測(cè)的應(yīng)用。DASENAKI MARILENA E[33]運(yùn)用LC-ESI-MS/MS成功建立了在黃油、牛奶、雞蛋、魚(yú)肉中115種獸藥殘留篩查方法，使用EDTA 0.1%(w/v)-acetonitrile-methanol(1∶1∶1,體積比)對(duì)樣品進(jìn)行提取，經(jīng)過(guò)正己烷除脂，冷凍除雜等凈化步驟后上機(jī)檢測(cè)，方法檢出限0.008-3.15 μg/kg。ANDREIA FREITASI[37]利用UHPLC-MS/MS技術(shù)建立了肌肉組織中7類(lèi)21種抗生素藥物的同時(shí)檢測(cè)確證方法，簡(jiǎn)單的前處理步驟使實(shí)驗(yàn)周期大大縮減，確定限(CCα)和檢測(cè)容量(CCβ)分別確定為0.01-310 μg/kg、0.02-330 μg/kg。XIA[38]等也建立了高效液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)動(dòng)物源性食品組織和肝腎基質(zhì)中23種獸藥的方法，樣品經(jīng)正負(fù)離子掃描快速轉(zhuǎn)化方式進(jìn)行數(shù)據(jù)采集，方法檢出限3～100 μg/kg。這些報(bào)道不勝枚舉，由此可見(jiàn)，LC-MS/MS技術(shù)在動(dòng)物源性食品中多族獸藥殘留的篩查檢測(cè)確證應(yīng)用中憑借其超高的選擇性和靈敏性發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。

QqQ以及Q-Trap MS盡管具有多樣性的功能和高超的定量分析能力，但它對(duì)非目標(biāo)化合物的檢測(cè)和未知物的定性分析則不能完全勝任，通過(guò)利用已知標(biāo)品及其譜庫(kù)的應(yīng)用，只能將其定位成半未知化合物篩查。并且同時(shí)檢測(cè)的化合物數(shù)量受到限制，一味的追求數(shù)量只會(huì)降低每種化合物檢測(cè)的數(shù)據(jù)點(diǎn)數(shù)導(dǎo)致無(wú)法令人滿意的峰形。高分辨質(zhì)譜QTof以及Orbitrap等主要應(yīng)用于全化合物的篩查檢測(cè)和未知物定性分析，在食品安全分析領(lǐng)域有著非常重要的作用[39-40]。高分辨質(zhì)譜可以通過(guò)全掃描的模式采集全部的不受數(shù)量限制的化合物信息，采集的分子質(zhì)量數(shù)和同位素匹配更加精確，并且其數(shù)據(jù)回顧分析功能[41]以及在代謝組學(xué)中的獨(dú)特使得高分辨質(zhì)譜具有無(wú)法比擬的優(yōu)勢(shì)。

MARILENA E等人[42]利用UHPLC-QTOF MS建立了牛奶和魚(yú)肉組織中143種藥物殘留同時(shí)篩查方法，盡管前處理過(guò)程由于震蕩、冷凍、SPE固相小柱萃取以及濃縮等步驟的應(yīng)用導(dǎo)致耗時(shí)長(zhǎng)操作繁瑣，但是數(shù)據(jù)采集時(shí)間僅需要17 min，結(jié)果表明在150 ng/mL(牛奶中)和200 μg/mL(魚(yú)肉中)濃度下，2種基質(zhì)中可成功準(zhǔn)確檢測(cè)出80 %的藥物，當(dāng)檢測(cè)濃度都降低10倍之后，仍可以檢測(cè)定量60%的藥物。JIA[43]利用UHPLC-ESI Q-Orbitrap建立了同時(shí)檢測(cè)嬰兒食品中333種農(nóng)藥和獸藥(其中獸藥包括75種)的法，使用優(yōu)化過(guò)的QuEChERS方法對(duì)樣品進(jìn)行前處理后上機(jī)檢測(cè)15 min，方法的定量限為0.01～9.27 μg/kg。由此可見(jiàn)，利用高分辨質(zhì)譜可以在短時(shí)間內(nèi)高通量檢測(cè)多族藥物，并且在定性的準(zhǔn)確度方面也較低分辨質(zhì)譜更略勝一籌。另一方面對(duì)于獸藥代謝產(chǎn)物等完全未知物研究的應(yīng)用才真正發(fā)揮了高分辨質(zhì)譜之所以能夠與低分辨質(zhì)譜最與眾不同的優(yōu)勢(shì)。例如，ALEXANDRA JUNZA[44]利用LC-TOF和LC-LTQ-Orbitrap研究了不同熱處理生奶中磺胺類(lèi)藥物的代謝物以及熱不穩(wěn)定轉(zhuǎn)化物，共發(fā)現(xiàn)了4種喹諾酮藥物的27種轉(zhuǎn)化產(chǎn)物以及恩諾沙星的24種代謝產(chǎn)物。利用同樣的方法，ALEXANDRA JUNZA還研究了熱處理生奶中四種內(nèi)酰胺類(lèi)化合物以及8種第1次被發(fā)現(xiàn)的來(lái)自水解和脫羧反應(yīng)的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物[26]。盡管動(dòng)物源性食品中藥物的相關(guān)代謝物研究仍十分復(fù)雜，但是，這樣類(lèi)似的研究為日后其他藥物代謝物的研究產(chǎn)生了巨大的指導(dǎo)意義。從以上列舉可以看出，液相色譜-高分辨串聯(lián)質(zhì)譜能進(jìn)行高通量的目標(biāo)物或非目標(biāo)物篩查，能夠?qū)崿F(xiàn)可靠的確證和定量分析，其高穩(wěn)定性和可操作性為前沿研究和常規(guī)檢測(cè)提供了更加先進(jìn)的分析手段。

單一儀器檢測(cè)還不足以使檢測(cè)結(jié)果完全確信，為了使檢驗(yàn)結(jié)果更加真實(shí)可信，建立多套儀器檢測(cè)方法聯(lián)合運(yùn)用，彼此互相補(bǔ)充確證，充分發(fā)揮利用各類(lèi)分析儀器的優(yōu)勢(shì)，將定性和定量需求都能達(dá)到最優(yōu)的結(jié)果，從而大大降低檢測(cè)結(jié)果的假陽(yáng)性率。GARCA-REYES[27]等人建立了LC-TOF-MS和LC-MS/MS結(jié)合篩查確證目標(biāo)和非目標(biāo)農(nóng)藥的方法。其方法基于3步，首先，利用LC-TOF-MS完成快速全面的自動(dòng)化篩選。在實(shí)際樣品分析之前，使用每種農(nóng)藥的單一標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行掃描，確定每種農(nóng)藥的保留時(shí)間、精確質(zhì)量數(shù)以及同位素峰形等信息。然后將樣品結(jié)合之前建立的各種信息進(jìn)行初步鑒定。隨后，將陽(yáng)性樣品通過(guò)LC-TOF-MS精確質(zhì)量掃描，完成定性確認(rèn)。最后，通過(guò)LC-MS/MS在MRM模式下完成定量。雖然此方法的目標(biāo)物是針對(duì)農(nóng)藥，但是同樣對(duì)獸藥殘留篩查檢測(cè)方法的建立具有指導(dǎo)意義.

5 結(jié)論與展望

隨著動(dòng)物源性食品中多族藥物殘留高通量篩查確證技術(shù)研究的不斷發(fā)展和更新，檢測(cè)方法也不斷向著快速、準(zhǔn)確、高效的方向發(fā)展。簡(jiǎn)化復(fù)雜樣品前處理步驟，建立通用性的不同基質(zhì)檢測(cè)方法，提高樣品制備自動(dòng)化程度，增加樣品通量，提高檢測(cè)靈敏度，普遍推廣儀器，將是今后的重要發(fā)展方向。與此同時(shí)應(yīng)該加大各種新興技術(shù)的利用，不僅限于實(shí)驗(yàn)室科研，要發(fā)展成真正在實(shí)際工作中得以利用，使科研真正與實(shí)際需求相結(jié)合，將各種方法有效的在各部門(mén)得以最大程度利用，確保動(dòng)物源食品安全添磚加瓦，為保護(hù)廣大人民群眾身體健康和生命安全貢獻(xiàn)力量。

今后的研究策略：(1)將統(tǒng)計(jì)學(xué)以及模型建立的方法應(yīng)用在前處理?xiàng)l件摸索中，如simplex-lattice mixture design[28]、Doehlert experimental design[45]等這些表面響應(yīng)方法來(lái)優(yōu)化前處理中類(lèi)似體積、pH等影響因素，使最優(yōu)結(jié)果更加形象突出并且具有說(shuō)服力。(2)將目標(biāo)物的范圍不斷擴(kuò)大，同時(shí)不僅僅關(guān)注動(dòng)物源性食品中獸藥以及某些人用藥和其他非法添加物的使用，將農(nóng)藥以及生物毒素等篩查檢測(cè)也列入其中，更大范圍的篩查動(dòng)物源性食品中盡可能多的隱性農(nóng)獸藥殘留以及化學(xué)危害物污染。(3)新材料，新技術(shù)，新儀器的應(yīng)用。如新納米材料EMR或者新填料SPE固相萃取小柱等的試用、高壓液相提取(PLE)的試用、以及快速渦流在線樣品制備和凈化技術(shù)的廣泛使用等。(4)多種儀器檢測(cè)聯(lián)合使用，互相確證，例如將低分辨質(zhì)譜的定量?jī)?yōu)勢(shì)與高分辨質(zhì)譜的定性優(yōu)勢(shì)進(jìn)行有機(jī)結(jié)合，將各自的檢測(cè)結(jié)果互相對(duì)比確證，使檢測(cè)結(jié)果更加真實(shí)可靠。(5)加大組學(xué)在常見(jiàn)獸藥代謝物研究中的應(yīng)用。

[1] MALIK A K, BLASCO C, PICO Y. Liquid chromatography-mass spectrometry in food safety[J]. J Chromatogr A, 2010, 1217(25): 4 018-4 040.

[2] KAUFMANN A, BUTCHER P, MADEN K, et al. Development of an improved high resolution mass spectrometry based multi-residue method for veterinary drugs in various food matrices[J]. Analytica Chimica Acta, 2011, 700(1-2): 86-94.

[3] GRANELLI K, BRANZELL C. Rapid multi-residue screening of antibiotics in muscle and kidney by liquid chromatography-electrospray ionization-tandem mass spectrometry[J]. Analytica Chimica Acta, 2007, 586(1-2): 289-295.

[4] 曾慶方, 趙春杰, 王顏紅, 等. HPLC-MS 指紋圖譜用于牛奶中部分有害藥物的篩查研究[J]. 中南藥學(xué), 2010, 8(6)412-416.

[5] 申惠敏, 杜娟, 賈秀珍. β-受體激動(dòng)劑類(lèi)殘留檢測(cè)方法[J]. 中國(guó)畜牧業(yè), 2014(19):56-57.

[6] 王培龍. β-受體激動(dòng)劑及其檢測(cè)技術(shù)研究[J]. 農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量與安全, 2014(1):44-52.

[7] 李延華, 王偉軍, 張?zhí)m威, 等. 微生物法檢測(cè)牛乳中 β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素殘留的對(duì)比研究[J]. 中國(guó)抗生素雜志, 2009，34(1): 63-64.

[8] BOSCHER A, GUIGNARD C, PELLET T, et al. Development of a multi-class method for the quantification of veterinary drug residues in feedingstuffs by liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A, 2010, 1217(41): 6 394-6 404.

[9] HO Y B, ZAKARIA M P, LATIF P A, et al. Simultaneous determination of veterinary antibiotics and hormone in broiler manure, soil and manure compost by liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A, 2012, 1262(21):160.

[11] WANG Y, LI X, ZHANG Z, et al. Simultaneous determination of nitroimidazoles, benzimidazoles, and chloramphenicol components in bovine milk by ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Food Chemistry, 2016, 192:280-287.

[12] 中華人民共和國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn). SNT 2624—2010動(dòng)物源性食品中多種堿性藥物殘留量的檢測(cè)方法液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜法(76種)[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2010.

[13] HOU X-L, CHEN G, ZHU L, et al. Development and validation of an ultra high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry method for simultaneous determination of sulfonamides, quinolones and benzimidazoles in bovine milk[J]. Journal of Chromatography B, 2014, 962c(7):20-29.

[14] TANG Y Y, LU H F, LIN H Y, et al. Development of a Quantitative Multi-Class Method for 18 Antibiotics in Chicken, Pig, and Fish Muscle using UPLC-MS/MS[J]. Food Analytical Methods, 2012, 5(6): 1 459-1 468.

[15] 曹慧, 陳小珍, 朱巖, 等. 多壁碳納米管固相萃取技術(shù)同時(shí)測(cè)定蜂蜜中多類(lèi)獸藥殘留[J]. 高等學(xué)?；瘜W(xué)學(xué)報(bào), 2013, 34(12): 2 710-2 715.

[16] MARTINS M T, MELO J, BARRETO F, et al. A simple, fast and cheap non-SPE screening method for antibacterial residue analysis in milk and liver using liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Talanta, 2014, 129：374-383.

[17] STUBBINGS G, BIGWOOD T. The development and validation of a multiclass liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) procedure for the determination of veterinary drug residues in animal tissue using a QuEChERS (QUick, Easy, CHeap, Effective, Rugged and Safe) approach[J]. Analytica Chimica Acta, 2009, 637(1-2): 68-78.

[18] ABDALLAH H, ARNAUDGUILHEM C, JABER F, et al. Multiresidue analysis of 22 sulfonamides and their metabolites in animal tissues using quick, easy, cheap, effective, rugged, and safe extraction and high resolution mass spectrometry (hybrid linear ion trap-Orbitrap)[J]. Journal of Chromatography A, 2014, 1355(6)：61-72.

[19] 應(yīng)永飛, 陳慧華, 朱聰英. 多壁碳納米管分散固相萃取結(jié)合 LC-MS/MS測(cè)定飼料中 11 種 β2-興奮劑[J]. 寧波農(nóng)業(yè)科技, 2013(1):2-11.

[20] CASTILLO-GARCA M L, AGUILAR-CABALLOS M P, GMEZ-HENS A. A europium-and terbium-coated magnetic nanocomposite as sorbent in dispersive solid phase extraction coupled with ultra-high performance liquid chromatography for antibiotic determination in meat samples[J]. Journal of Chromatography A, 2015, 1425:73-80.

[21] ZHU W-X, YANG J-Z, WANG Z-X, et al. Rapid determination of 88 veterinary drug residues in milk using automated TurborFlow online clean-up mode coupled to liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Talanta, 2016, 148:401-411.

[22] BOUSOVA K, SENYUVA H, MITTENDORF K. Quantitative multi-residue method for determination antibiotics in chicken meat using turbulent flow chromatography coupled to liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A, 2013, 1274(2):19-27.

[23] KANDA M, NAKAJIMA T, HAYASHI H, et al. Multi-residue Determination of Polar Veterinary Drugs in Livestock and Fishery Products by Liquid Chromatography/Tandem Mass Spectrometry[J]. Journal of AOAC International, 2015, 98(1):230-247.

[24] CHUNG S W C, LAM C-H. Development of a 15-class multiresidue method for analyzing 78 hydrophilic and hydrophobic veterinary drugs in milk, egg and meat by liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Anal Methods, 2015, 7(16):6 764-6 776.

[25] WANG J, LEUNG D, CHOW W, et al. Development and validation of a multiclass method for analysis of veterinary drug residues in milk using ultrahigh performance liquid chromatography electrospray ionization quadrupole orbitrap mass spectrometry[J]. J Agric Food Chem, 2015, 63(41): 9 175-9 187.

[26] JUNZA A, MONTANé A, BARBOSA J, et al. High resolution mass spectrometry in the identification of transformation products and metabolites from β-lactam antibiotics in thermally treated milk[J]. Journal of Chromatography A, 2014, 1368(9):89-99.

[28] DORIVAL-GARCA N, JUNZA A, ZAFRA-GMEZ A, et al. Simultaneous determination of quinolone and β-lactam residues in raw cow milk samples using ultrasound-assisted extraction and dispersive-SPE prior to UHPLC-MS/MS analysis[J]. Food Control, 2016, 60(3)：382-393.

[29] BONFIGLIO R, KING R C, OLAH T V, et al. The effects of sample preparation methods on the variability of the electrospray ionization response for model drug compounds[J]. Rapid Communications in Mass Spectrometry, 1999, 13(12): 1 175-1 185.

[30] YE J-H, PAO L-H. Using Visualized Matrix Effects to Develop and Improve LC-MS/MS Bioanalytical Methods, Taking TRAM-34 as an Example[J]. PLOS ONE, 2015, 10(4)：eD118818.

[31] LIU Y, HAN S, LU M, et al. Modified QuEChERS method combined with ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry for the simultaneous determination of 26 mycotoxins in sesame butter[J]. Journal of Chromatography B, 2014, 970:68-76.

[32] GEIS-ASTEGGIANTE L, LEHOTAY S J, LIGHTFIELD A R, et al. Ruggedness testing and validation of a practical analytical method for >100 veterinary drug residues in bovine muscle by ultrahigh performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. J Chromatogr A, 2012, 1258:43-54.

[33] DASENAKI M E, THOMAIDIS N S. Multi-residue determination of 115 veterinary drugs and pharmaceutical residues in milk powder, butter, fish tissue and eggs using liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Anal Chim Acta, 2015, 880(7):103-21.

[34] SCHREIBER A. AB SCIEX QTRAP 4500系統(tǒng)定量分析和定性確認(rèn)食品中的多殘留農(nóng)藥[J]. 2012年中國(guó)食品與農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用國(guó)際論壇, 2012:166-74.

[35] YIN Z, CHAI T, MU P, et al. Multi-residue determination of 210 drugs in pork by ultra-high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A, 2016, 1 463:49-59.

[36] 周煒, 陳慧華, 應(yīng)永飛, 等. 高效液相色譜-四級(jí)桿/線性離子阱質(zhì)譜法篩查獸藥中非法添加物的研究[C]. 中國(guó)獸藥雜志, 2014.

[37] FREITAS A, BARBOSA J, RAMOS F. Multi-residue and multi-class method for the determination of antibiotics in bovine muscle by ultra-high-performance liquid chromatography tandem mass spectrometry[J]. Meat Science, 2014, 98(1): 58-64.

[38] XIA X, WANG Y, WANG X, et al. Validation of a method for simultaneous determination of nitroimidazoles, benzimidazoles and chloramphenicols in swine tissues by ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A, 2013, 1 292(5):96-103.

[39] 沃特世(WATERS). POSI±IVE SystemTM高通量快速篩查檢測(cè)系統(tǒng)解決方案[J]. 食品安全導(dǎo)刊, 2009, 17(9):38-39.

[40] PETERS R J B, BOLCK Y J C, RUTGERS P, et al. Multi-residue screening of veterinary drugs in egg, fish and meat using high-resolution liquid chromatography accurate mass time-of-flight mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A, 2009, 1216(46):8 206-8 216.

[41] 王海鑒. 使用TripleTOF4600進(jìn)行未知物篩查[J]. 食品安全導(dǎo)刊, 2013(15): 39-40.

[42] DASENAKI M E, BLETSOU A A, KOULIS G A, et al. Qualitative multiresidue screening method for 143 veterinary drugs and pharmaceuticals in milk and fish tissue using liquid chromatography quadrupole-time-of-flight mass spectrometry[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2015, 63(18):4 493-4 508.

[43] JIA W, CHU X, LING Y, et al. High-throughput screening of pesticide and veterinary drug residues in baby food by liquid chromatography coupled to quadrupole Orbitrap mass spectrometry[J]. Journal of chromatography A, 2014, 1347(15):122-128.

[44] JUNZA A, BARBOSA S, CODONY M R, et al. Identification of metabolites and thermal transformation products of quinolones in raw cow′s milk by liquid chromatography coupled to high-resolution mass spectrometry[J]. Journal of agricultural and food chemistry, 2014, 62(8): 2 008-2 021.

[45] JUNZA A, DORIVAL-GARCA N, ZAFRA-GMEZ A, et al. Multiclass method for the determination of quinolones and β-lactams, in raw cow milk using dispersive liquid-liquid microextraction and ultra high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A, 2014, 1356:10-22.

Recent development in multi-residue determination of drugs in animal derived food by ultra-high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry research

YIN Zhi-qiang, SONG Yue, CHAI Ting-ting, WANG Xin-lu, JIA Qi, YANG Shu-ming, QIU Jing*

(Institute of Quality Standards & Testing Technology for Agro-Products, Chinese Academy of Agricultural Sciences; Key Laboratory of Agri-food Quality and Safety, Ministry of Agriculture, Beijing 100081, China)

In order to screen and monitor the residue of veterinary drugs and therapeutic drugs in animal processed food, high-performance liquid chromatography- tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS) has become the most widely method used in the field in trace detection. The research progress of sample preparation, latest research topics, evaluation of matrix effects, and selection of the mass spectrometer were introduced. At the same time, the development prospects of this application was also discussed. This paper is to provide a reference to related research in the future.

high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS); animal derived food; veterinary drugs; residue; screening; review

10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201704045

碩士研究生(邱靜研究員為通訊作者，E-mail：qiujing@caas.cn)。

本文系公益性農(nóng)業(yè)行業(yè)科研專(zhuān)項(xiàng)“動(dòng)物養(yǎng)殖中新型未知添加物篩查與確認(rèn)技術(shù)研究與示范(201203023)”資助

2016-07-23，改回日期：2016-10-10