徐濤 關尚 陳瑞湖 陳玉蓮 李磊邦 李永贊

臺山地區(qū)同步降鈣素原檢測及血培養(yǎng)快速診斷感染

徐濤 關尚 陳瑞湖 陳玉蓮 李磊邦 李永贊

目的探討同步降鈣素原(PCT)檢測與血培養(yǎng)在血流感染患者中快速診斷感染的臨床應用。方法2700例臨床疑似感染住院發(fā)熱患者, 同步進行PCT定量檢測及血培養(yǎng), 觀察血培養(yǎng)結果與血清PCT水平的關系。結果血培養(yǎng)陽性者(陽性組)720例, 血培養(yǎng)陰性者(陰性組)1980例。陽性組的PCT陽性率95.97%明顯高于陰性組45.35%, 差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。PCT在革蘭陰性桿菌、革蘭陽性球菌及假絲酵母菌的陽性率分別為96.24%、95.63%及80.00%。720例血培養(yǎng)陽性患者, 革蘭陰性桿菌中大腸埃希菌PCT陽性率最高, 為97.30%；革蘭陽性球菌中金黃色葡萄球菌PCT陽性率最高,為97.47%；假絲酵母菌中白色假絲酵母菌PCT陽性率為80.00%。結論同步進行PCT定量檢測和血培養(yǎng)對血流感染患者可早期快速診斷感染, 再通過血培養(yǎng)金標準方法驗證, 盡快將經驗治療轉為目標治療, 確保醫(yī)療安全。

降鈣素原；血培養(yǎng)；菌血癥；真菌血癥；感染性因素；非感染創(chuàng)傷因素

感染性疾病始終是人類健康面臨的一大挑戰(zhàn)。血培養(yǎng)是臨床診斷菌血癥的金標準, 陽性結果對明確診斷、對癥治療有極高的應用價值。但血培養(yǎng)結果受采血前抗生素的使用、采血前的消毒、采血時間、采血量、采血次數(shù)、培養(yǎng)瓶的質量、采血后的運送及病原菌的種類等各方面的影響, 血培養(yǎng)時間相對較長, 并且存在陽性率低, 結果滯后等問題, 因此尋求一種快速簡便的方法檢測生物標志物更加迫切。PCT是降鈣素的激素原, 在健康人的外周血中含量很低［1］, 在全身炎癥反應, 尤其是細菌感染導致的炎癥反應時, PCT濃度會顯著升高［2］。本實驗聯(lián)合PCT定量檢測與血培養(yǎng)在血流感染患者中快速診斷感染, 先通過PCT定量檢測將菌血癥的風險評估前移, 再通過血培養(yǎng)金標準方法驗證, 現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集本院2013年6月1日~2016年5月31日臨床疑似感染住院發(fā)熱患者2700例, 同步進行PCT定量檢測及血培養(yǎng)。

1.2 儀器與試劑 mini-VIDAS全自動免疫熒光分析儀與專用原裝試劑盒, 全自動連續(xù)性檢測系統(tǒng)BacT/Alert3D及配套血培養(yǎng)瓶(包括FA成人需氧中和抗生素培養(yǎng)瓶、FN成人厭氧中和抗生素培養(yǎng)瓶)和ATB自動鑒定、藥敏儀及API生化鑒定系統(tǒng)均購自法國生物梅里埃公司。血平板、麥康凱平板、沙氏平板、真菌顯色平板購自廣州迪景生物有限公司。革蘭染色液購自廣東珠海貝索生物試劑有限公司。

1.3 方法 儀器發(fā)出陽性報警時, 立刻用無菌注射器抽取培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)液涂片直接進行革蘭染色鏡檢, 將明確的鏡檢結果按危機值報告程序向臨床報告, 然后接種相應的培養(yǎng)基,放置相應的環(huán)境條件下培養(yǎng), 待菌落形成后, 上相對應的鑒定、藥敏條, 進行鑒定和藥敏試驗。注意：所有轉種、接種等處理步驟均在生物安全柜中進行, 使用生物安全水平為Ⅱ級的接種方法, 防護措施和設備。所有接種過的培養(yǎng)管等必須先經過高壓滅菌后再按醫(yī)療垃圾處理。

1.4 觀察指標 觀察血培養(yǎng)和血清PCT檢測結果及污染菌和血清PCT檢測結果。當血清PCT≥0.5 ng/ml則血清PCT檢測為陽性。

1.5 統(tǒng)計學方法 采用SPSS20.0統(tǒng)計學軟件處理數(shù)據(jù)。計數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 血培養(yǎng)和血清PCT檢測結果 對2700例患者同步進行了血清PCT檢測和血培養(yǎng), 對≥2次PCT檢測的患者只選擇其中一次與血培養(yǎng)同時送檢的檢測結果。血培養(yǎng)陽性者(陽性組)720例, 其中有691例PCT>2.00 ng/ml。血培養(yǎng)陰性者(陰性組)1980例, 其中有654例PCT>2.00 ng/ml。陽性組的PCT陽性率明顯高于陰性組, 差異有統(tǒng)計學意義(χ2=558.66, P<0.05)。見表1。720例血培養(yǎng)陽性患者, 革蘭陰性桿菌中大腸埃希菌PCT陽性率最高, 為97.30%；革蘭陽性球菌中金黃色葡萄球菌PCT陽性率最高, 為97.47%；假絲酵母菌中白色假絲酵母菌PCT陽性率為80.00%。見表2。

2.2 污染菌和血清PCT檢測結果 經研究顯示, 表皮葡萄球菌PCT陽性率為9.1%, 藤黃微球菌PCT陽性率為4.2%, 蠟樣芽胞桿菌和科氏葡萄球菌PCT陽性率均為0, 其他革蘭陽性桿菌PCT陽性率為2.6%。見表3。

表1 2700例患者血培養(yǎng)與PCT檢測結果

表2 720例血培養(yǎng)陽性患者感染病原菌種類及PCT檢測結果

表3 32例污染菌種類與PCT檢測結果

3 討論

PCT分泌由甲狀腺的濾泡旁細胞C細胞, 以及肺和小腸的神經內分泌細胞分泌。部位的神經內分泌腫瘤會使PCT升高。在健康個體中PCT濃度<0.01 ng/ml, 在全身炎癥反應,尤其是細菌感染導致的炎癥反應時, PCT濃度會顯著升高,此時主要由肺、腸道分泌。肺、腸道的感染PCT更容易升高。炎癥狀態(tài)時PCT在2~4 h開始升高, 8~24 h達到峰值, 半衰期20~24 h, 這不僅可以給醫(yī)生早期診斷提供參考, 而且有足夠的時間捕獲到陽性結果［3-6］。

本實驗2700例患者, 720例血培養(yǎng)陽性, PCT陽性率95.97%。其中細菌感染715例, 占99.31%, 其中大腸埃希菌296例、肺炎克雷伯菌126例, 為最常見的兩種革蘭陰性菌。金黃色葡萄球菌79例、凝固酶陰性葡萄球菌68例, 為最常見的2種革蘭陽性菌。白色假絲酵母菌為最常見的假絲酵母菌。720例血培養(yǎng)陽性患者中, 691例患者PCT濃度>2.00 ng/ml。1980例血培養(yǎng)陰性患者中, 654例患者PCT濃度>2.00 ng/ml。1980例血培養(yǎng)陰性但PCT升高者有不同程度的局部感染如呼吸道、泌尿道等。嚴重創(chuàng)傷, 機械性損傷、大范圍的手術, 燒傷等, 都會使機體釋放大量損傷相關分子模式(DAMPs), 引起非感染性炎癥反應, 此時PCT也會升高。也就是說病原相關分子模式(PAMPs)(感染性因素)和DAMPs(非感染創(chuàng)傷因素)都會引起全身炎癥反應和PCT升高。使用PCT檢測的陽性結果來判斷感染事件, 應排除DAMPs(非感染創(chuàng)傷因素)的干擾［7-9］。因血培養(yǎng)結果受采血前抗生素的使用、采血前的消毒、采血時間、采血量、采血次數(shù)、培養(yǎng)瓶的質量、采血后的運送及病原菌的種類等各方面的影響, 所以血培養(yǎng)陰性不能完全排除血流感染。當血培養(yǎng)陰性, PCT升高, 臨床醫(yī)生應結合臨床癥狀及其他檢查綜合分析是否考慮重復送檢血培養(yǎng), 同時進行盲傳或延長孵育時間等, 提高苛養(yǎng)菌等檢出的準確性［10］。

協(xié)助鑒別污染菌, 凝固酶陰性的葡萄球菌是血液培養(yǎng)最常見的皮膚污染細菌, 但也是很常見的感染菌, 正確的鑒別與治療密切相關［11-13］。結合PCT測定可以給醫(yī)生提供很好的參考, 如PCT<2.00 ng/ml［3］, 血培養(yǎng)陽性且病原菌基本是陽性球菌、陽性桿菌, 則可排除菌血癥或敗血癥。

在實驗診斷領域幾乎不存在完美無缺的試驗, 同樣, PCT也不是最完美的細菌感染的標志物, 但相對而言是目前最佳的標志物, PCT仍然是發(fā)現(xiàn)潛在危及生命感染的具有相對較高診斷可靠性的指標, PCT與其他實驗室檢測結果和臨床評估一起用于協(xié)助評估發(fā)生敗血癥的可能性。任何一項檢驗指標都不能替代臨床醫(yī)師的綜合判斷, PCT的解讀要結合病史、體格檢查、微生物血培養(yǎng)結果等綜合分析進行評估［4］,并建議在病程中動態(tài)監(jiān)測, 更有助于診斷的準確性。盡一切可能將經驗治療轉為目標治療, 確保醫(yī)療安全。

綜上所述, 血培養(yǎng)是診斷血流感染的金標準, 能給臨床提供何種細菌或真菌感染及藥物敏感試驗, 但培養(yǎng)時間較長,其培養(yǎng)陽性率受多種因素影響, 不能滿足臨床早期快速診斷感染的要求。PCT定量檢測具有快速、簡便等特點, 對于血流感染具有目前比較理想的高敏感性, PCT可以作為早期診斷感染的試驗依據(jù)之一。因此, 同步進行降鈣素原與血培養(yǎng)聯(lián)合檢測可以起到早期診斷感染的作用。

［1］ 王凱飛, 沈定霞, 劉朝軍, 等.血清降鈣素原定量檢測與血培養(yǎng)結果的比較.中華檢驗醫(yī)學雜志, 2012, 35(3):243-246.

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Rapid diagnosis of infection by synchronous procalcitonin detection and blood culture in Taishan area

XU Tao, GUAN Shang, CHEN Rui-hu, et al.
Department of Laboratory Medicine, Guangdong Taishan City People’s Hospital, Taishan 529200, China

ObjectiveTo investigate clinical application of synchronous procalcitonin (PCT) detection and blood culture for rapid diagnosis of infection.MethodsA total of 2700 hospitalized fever patients with suspected infection

synchronous PCT quantitative detection and blood culture.Observation was made on relationship between blood culture outcome and serum PCT level.ResultsThere were 720 patients with positive blood culture (positive group) and 1980 patients with negative blood culture (negative group).The positive group had obviously higher positive PCT rate as 95.97% than 45.35% in the negative group, and the difference had statistical significance (P<0.05).Positive PCT rate in gram negative bacilli, gram positive bacilli, and candida mycoderma bacteria was respectively 96.24%, 95.63% and 80.00%.Among the 720 patients with positive blood culture, escherichia coli showed the highest positive PCT rate in gram negative bacilli as 97.30%, staphylococcus aureus showed the highest positive PCT rate in gram positive bacilli as 97.47%, and candida albicans showed the highest positive PCT rate in candida mycoderma bacteria as 80.00%.ConclusionSynchronous PCT quantitative detection and blood culture can provide early and rapid diagnosis of infection for bloodstream infection patients.Blood culture golden standard was used to verify the diagnosis outcome for converting experiential therapy to target therapy, and guaranteeing medical safety.

Procalcitonin; Blood culture; Bacteremia; Fungemia; Infective factors; Non-infective traumatic factors

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.10.011

2017-03-30］

廣東省江門市科技計劃項目(項目編號：江科【2013】89號--10)

529200 廣東省臺山市人民醫(yī)院檢驗科