摘 要:本研究的研究目的:對于天然植物型抑菌劑的配制方法及抗菌性能進行研究。研究方法:選擇幾種天然植物,從這些植物中提取抑菌劑,然后就這些抑菌劑的抗菌性能進行評價,選擇的是豆蔻、肉桂、貫葉連翹、甘草及迭迭香等幾種香辛料,然后采用無水乙醇進行提取,測定提取液對于大腸桿菌,金黃色葡萄球菌,鼠傷寒沙門氏菌等的最小抑制濃度。研究結果:經(jīng)過分析表明,豆蔻提取液的MIC濃度為0.5%,肉桂的相對較少為0.2%,其他香辛料的MIC濃度均為0.5%,經(jīng)過大量的實驗表明,所選擇的香辛料,除了豆蔻之外,其他香辛料所配置的天然植物型抑菌劑對于本研究所選擇的菌種都有明顯的抑菌效果,并且抑菌效率高達95%以上。
關鍵詞:天然植物;植物抑菌劑;配置;抗菌性能
隨著社會的發(fā)展,人生生活水平質量的提高,人們越來越崇尚“綠色”,所以對于殺菌抑菌劑也更加傾向于研究新型的從植物體內提取的天然抑菌劑。相比較化學合成的抑菌劑,從植物體內提取的抑菌劑效果好,并且毒副作用低,所以受到了廣泛的推崇,將從植物體內提取的抑菌劑應用到化妝品或者食品中,不僅能夠起到良好的抑菌效果,還能夠保障這些產(chǎn)品的安全性。一般作為抑菌劑的植物源是一些天然的香辛料,這些香辛料不僅能夠豐富食品的味道,還能夠抑制食品的特殊氣味,并且天然香辛料也具有很好的殺菌防腐的效果,所以受到了人們越來越多的喜愛。本研究選擇多種具有抗菌性能的香辛料植物提取液,作為天然植物抑菌劑,分析其具體的抗菌性能。
1 實驗材料和實驗方法
1.1 實驗材料和實驗儀器
1.1.1 植物原料
選擇的植物原料有甘草、豆蔻、百里香、貫葉連翹、意大利雛菊等。
1.1.2 參加實驗的菌種以及培養(yǎng)基
菌種選擇大腸桿菌,金黃色葡萄球菌,鼠傷寒沙門氏菌,肺炎克雷比氏菌,枯草芽孢桿菌。培養(yǎng)基選擇普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和普通營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基。
1.1.3 實驗過程使用的主要儀器
試驗過程使用的儀器主要有:高壓蒸汽滅菌鍋MLS3010型,生化培養(yǎng)箱LRH300型,水浴恒溫振蕩器SHAC型,全溫空氣搖床QYC200型,高分辨透射電子顯微鏡JEM2100型,熱場發(fā)射掃描電子顯微鏡JSM7002型。
1.2 配制植物提取液
配置植物提取液,選擇本次研究的7種香辛料,采用電子天平分別精確的稱取10.0g,然后將香辛料放置在廣口瓶中,向其中加入90ml無水乙醇,然后將廣口瓶密封好,放置在40℃的恒溫水浴振蕩器中48小時,然后進行過濾,離心,蒸發(fā)處理,最終得到純度較高的植物提取液,并且標注好,待使用。
1.3 對于植物提取液最小抑菌濃度的測定
吸取植物提取液,選擇不同的額濃度梯度吸取,然后置于無菌平板上,同加熱后的培養(yǎng)基進行混合,攪拌均勻,然后得到5種含有體積濃度為0.1%.0.2%以及0.5%的植物提取液的無菌平板,等到這些提取液都凝固之后在每一個平板上采用劃線法均勻的在四個不同區(qū)域分別接種參加實驗的菌種,大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、鼠傷寒沙門氏菌以及副溶血性弧菌,在恒溫培養(yǎng)箱中倒置過來進行培養(yǎng),連續(xù)培養(yǎng)48小時,然后結合細菌生長的痕跡判斷植物提取液的MIC數(shù)值,如果最低濃度的香辛料提取液處沒有菌種生長的跡象,則表明為該種香辛料對于參試菌種的MIC值。
1.4 配制天然植物型抑菌劑
本次研究所選擇的香辛料,除了豆蔻意外,其余六中均具有加好的抑菌效果,具體的天然植物型抑菌劑的配制方法為,體積濃度為0.01%,的香辛料乙醇提取物,0.1%的檸檬酸,005%的能錳酸鈉,15%的乙醇加入到無菌水中,搖晃均勻。
1.5 關于天然植物型抑菌劑對于幾種致病菌抗菌性能的測定
分別向六支潔凈的試管中加入10ml的天然植物型抑菌劑,然后在加入六種參試細菌,然后再取六只試管,試管中加入10mL的磷酸鹽緩沖液,同樣加入?yún)⒃嚲?,作為對照組,然后在恒溫培養(yǎng)搖床中震蕩培養(yǎng),每隔一定的時間對于試管中的活菌數(shù)量進行測定,分別在0.5,1,4,6,8,12,24小時的時候測定。
1.6 分析天然植物型抑菌劑的機理
選擇經(jīng)過天然植物抑菌劑作用后的大腸桿菌以及金黃色葡萄球菌的樣品進行透射電鏡及掃描電鏡樣品制備,然后進行電鏡的觀察分析。
2 研究結果分析
2.1 天然植物提取液的MIC指標測定
本研究所選擇的7種香辛料對于四種參加實驗菌種的MIC研究結果,經(jīng)過分析表明,百里香、甘草、迭迭香及意大利蠟菊,貫葉連翹等植物的提取物對于四種致病細菌有非常明顯的抑制效果,其MIC數(shù)值均為0.5%,而肉桂提取液對于大腸桿菌及金黃色葡萄球菌的MIC為0.2%,有較好的抑菌效果,但是豆蔻的植物提取液的MLC大于0.5%,說明其抑菌效果不理想。
2.2 評價天然植物型抑菌劑對幾種致病菌抗菌性能的評價
本研究所配置的天然植物抑菌劑對四種致病菌的抑制效果明顯,但是對于金黃色葡萄球菌及肺炎克雷巴試菌的抑制效果更為明顯,根據(jù)大量的實驗分析表明,天然植物型抑菌劑對于這幾種常見的致病菌的抑制效果明顯,有效殺菌率可高達95%以上。
2.3 天然植物型抑菌劑的機理
通過相關資料不難看出,健康活躍的金黃色葡萄球菌以及大腸桿菌的細菌形態(tài)比較完整,并且細菌的菌落結構相對清晰,單個細菌的生長狀況良好,如果經(jīng)過天然植物型的抑菌劑處理之后細菌的細胞膜被破壞,使得細菌的結構變得散亂不堪,細胞質流出,發(fā)生組織變質,通過透射電鏡圖及掃描電鏡圖可以清晰的看出,天然植物型的抑菌劑中抑菌成分能夠將細菌的細胞膜損傷,將細胞形態(tài)破壞,導致細胞質流出,從而使得細胞完全瓦解破壞。
3 結語
本研究選擇豆蔻,意大利臘菊,貫葉連翹,甘草,迭迭香等七種香辛料做為試驗對象,采用無水乙醇提出抗菌物質,測定MIC分析除了豆蔻之外其余六種香辛料的抗菌性能都比較良好,通過還分析了具體的抗菌原理,對于食品行業(yè)及化妝品行業(yè)的發(fā)展點名了方向,使得天然植物型的抑菌劑能夠得到更加廣泛的應用。
參考文獻:
[1]崔海英.天然植物型抑菌劑的配制及抗菌性能評價[J].食品與機械,2014(09).
作者簡介:陳婷婷(1993),女,漢族,新疆昌吉人,化學類本科,研究方向:應用化學(生物制藥)。