李建霞

摘要：通過對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和沙門氏菌的MIC值檢測(cè)和MBC值檢測(cè)，比較戊癸消，戊二醛癸甲溴銨溶液，復(fù)方戊二醛溶液，安立消，百毒殺，月芐三甲氯銨溶液等六種常用消毒劑的抑菌效果，綜合評(píng)價(jià)以安立消和百毒殺效果最好，安立消對(duì)沙門氏菌的消滅作用最強(qiáng)。

關(guān)鍵詞：病原菌、MIC值檢測(cè)、MBC值檢測(cè)

中圖分類號(hào)：S 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：2096-3637（2017）07-0034-02

1試驗(yàn)材料

1.1病原菌

山東省安丘市官莊鎮(zhèn)某雞場(chǎng)糞便培養(yǎng)的雜菌，主要包括大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌，大腸桿菌及沙門氏菌標(biāo)準(zhǔn)株（安丘市畜牧檢測(cè)中心保存）。

1.2消毒劑

戊癸消，戊二醛癸甲溴銨溶液，復(fù)方戊二醛溶液，安立消，百毒殺，月芐三甲氯銨溶液等六種常用消毒劑。

1.3其它材料

無菌平皿、營(yíng)養(yǎng)肉湯、營(yíng)養(yǎng)瓊脂、TSB（胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基）、胎牛血清、微量移液器。

2試驗(yàn)方法

2.1消毒劑對(duì)細(xì)菌的MIC值檢測(cè)

（1） 將雜菌接種到盛有10ml肉湯的試管中，置于37℃溫箱過夜培養(yǎng)，將培養(yǎng)好的菌液稀釋100倍。（2）將制備好的菌液進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)并測(cè)定菌液OD600值，然后用液體培養(yǎng)基稀釋，使試驗(yàn)菌液的含菌量為5×105～5×106cfu/ml；（3）取96孔微量反應(yīng)板，每孔加入100μL滅菌純化水；（4）于第一孔加稀釋l00倍的消毒劑，混勻后，倍比稀釋直至第10孔，混勻后取出100μL棄去，第11孔不加消毒劑作為陰性對(duì)照，第12孔作為陽性對(duì)照；（5）將稀釋到106cfu/mL的100μL菌液加入到1～11孔，混勻；（6）置37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 h，若發(fā)生混濁即表示有細(xì)菌生長(zhǎng)。

2.2消毒劑對(duì)細(xì)菌的MBC值檢測(cè)

（1）將制備的菌懸液進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，然后用無菌水稀釋成106 ～107cfu/mL；

（2）于第一孔加稀釋250倍的消毒劑100μL，混勻后，倍比稀釋至第五孔，消毒劑稀釋倍數(shù)分別為500倍、1000倍、2000倍、4000倍、8000倍，設(shè)置陽性對(duì)照；（3）將稀釋好的菌液加入到消毒劑中，室溫作用30min后進(jìn)行涂板檢驗(yàn)；

（4）置37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 h；（5）進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，計(jì)算殺菌率。

3試驗(yàn)結(jié)果與分析

由表1可以看出，安立消、百毒殺對(duì)金黃色葡萄球菌抑菌作用最好（1：25600）

3.1金黃色葡萄球菌MIC值檢測(cè)結(jié)果

3.2大腸桿菌分離株MIC值檢測(cè)結(jié)果

由表2可以看出，戊二醛癸甲溴銨溶液，安立消，百毒殺，月芐三甲氯銨溶液4種產(chǎn)品對(duì)大腸桿菌抑菌作用都較好（1：51200）

3.3沙門氏菌MIC值檢測(cè)

3.4殺菌效果分析

由表3可以看出，復(fù)方戊二醛，安立消，百毒殺三種產(chǎn)品對(duì)沙門氏菌的抑菌作用最強(qiáng)（1：51200）

從表4中得出在1：2000倍稀釋時(shí)這4種消毒劑都能將金黃色葡萄球菌分離株100%殺死。

從表5中得出在1：2000倍稀釋時(shí)這4種消毒劑都能將大腸桿菌分離株100%殺死。

從表6中得出在1：2000倍稀釋時(shí)這4種消毒劑都能將沙門氏菌100%殺死，產(chǎn)品1，產(chǎn)品4，產(chǎn)品6在1：4000開始有細(xì)菌生長(zhǎng)，在1：8000時(shí)安立消作用最強(qiáng)。產(chǎn)品6殺滅作用最差。

4討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，6種消毒劑對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌均有不同程度的抑制和殺滅作用，其中安立消和百毒殺對(duì)3種細(xì)菌的抑制作用都很好；將消毒劑1：2000倍稀釋和1：4000倍稀釋時(shí)都能將3種細(xì)菌100%殺死，在對(duì)沙門氏菌的殺滅試驗(yàn)中，安立消作用最強(qiáng)。