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仔豬鏈球菌的分離鑒定

2017-05-30 18:00謝冰
畜牧獸醫(yī)科學(xué) 2017年9期
關(guān)鍵詞:分離鑒定鏈球菌仔豬

謝冰

摘要:某養(yǎng)豬場,45日齡的斷奶仔豬1200頭,其中,20多頭45日齡的斷奶仔豬,出現(xiàn)精神沉郁,食欲廢覺,發(fā)燒41~42℃,發(fā)病后的2~3d,出現(xiàn)了嚴(yán)重的食欲廢覺,個(gè)別的45日齡的斷奶仔豬出現(xiàn)了神經(jīng)癥狀,典型的癥狀后肢關(guān)節(jié)對(duì)稱性腫脹,有的45日齡的斷奶仔豬不表現(xiàn)任何的癥狀出現(xiàn)突然死亡。為了確定引起45日齡的斷奶仔豬發(fā)病及突然死亡的病原菌,首先對(duì)突然死亡的45日齡的斷奶仔豬進(jìn)行剖檢,從無菌采集肝臟、肺臟、腎臟、心血、淋巴結(jié)等病料組織中分離1株病原菌,對(duì)分離1株病原菌通過培養(yǎng)特性鑒定、細(xì)菌形態(tài)學(xué)觀察、生化特性等鑒定等方法,從45日齡斷奶仔豬的體內(nèi)分離到的1株病原菌被鑒定為鏈球菌。將從45日齡仔豬體內(nèi)分離的鏈球菌肌肉注射攻毒給小白鼠結(jié)果顯示,從45日齡仔豬體內(nèi)分離的鏈球菌具有很強(qiáng)的致病性。因此,用K-B藥敏紙片法對(duì)從45日齡仔豬體內(nèi)分離的鏈球菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)分析其耐藥性,結(jié)果顯示,分離菌株對(duì)頭孢曲松、氨芐西林、阿莫西林、頭孢他定、青霉素6種藥物高度敏感。

關(guān)鍵詞:仔豬;鏈球菌;分離鑒定;

中圖分類號(hào):S858.28 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B 文章編號(hào):2096-3637(2017)09-0071-01

一般的豬的相關(guān)的傳染性疾病主要包括病毒性、細(xì)菌性疾病。其中,鏈球菌病是斷奶仔豬急性死亡和關(guān)節(jié)腫脹的主要病原菌,仔豬感染了鏈球菌后,死亡率均較高能達(dá)到50%以上,仔豬的鏈球菌病,嚴(yán)重危害著養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。因此,斷奶仔豬的鏈球菌病成為臨床上常見的細(xì)菌性傳染性疾病之一,仔豬鏈球菌病是由鏈球菌引起不同階段豬的一種急性、熱性、敗血性傳染病,可以感染不同階段的豬,感染率和死亡率均較高。尤其對(duì)仔豬的致病性最強(qiáng),危害最嚴(yán)重。鏈球菌病發(fā)病無明顯的季節(jié)性,常年均有引發(fā)仔豬發(fā)病,臨床上主要表現(xiàn)為急性敗血癥,關(guān)節(jié)腫脹等,表現(xiàn)神經(jīng)癥狀,渾身抽搐,麻痹死亡。

1發(fā)病情況

某一養(yǎng)豬場,45日齡的斷奶仔豬1200頭,其中,20多頭45日齡的斷奶仔豬,出現(xiàn)精神沉郁,食欲廢覺,發(fā)燒41~42℃,發(fā)病后的2~3d,出現(xiàn)了嚴(yán)重的食欲廢覺,個(gè)別的45日齡的斷奶仔豬出現(xiàn)了神經(jīng)癥狀,典型的癥狀后肢關(guān)節(jié)對(duì)稱性腫脹,有的45日齡的斷奶仔豬不表現(xiàn)任何的癥狀出現(xiàn)突然死亡。

2.臨床證狀

45日齡的斷奶仔豬1200頭,其中,20多頭45日齡的斷奶仔豬出現(xiàn)了精神沉郁,發(fā)熱41~42℃,食欲開始減少,到后期出現(xiàn)了食欲廢絕,出現(xiàn)神經(jīng)癥癥狀,四肢呈現(xiàn)了游泳樣運(yùn)動(dòng),抽搐麻痹而死,關(guān)節(jié)腫大。

3.病理剖檢變化

對(duì)45日齡斷奶死亡的仔豬進(jìn)行病理組織學(xué)剖檢,觀察其病理組織學(xué)變化。剖檢變化可見,肝臟腫大、出血,形成出血斑,呈藍(lán)紫色;頜下淋巴結(jié)、腹股溝管淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)腫大、出血;腹腔均有淡黃色滲出液,氣管、喉頭有不同程度的腫脹、出血;45日齡斷奶出現(xiàn)了肺臟腫脹、出血;胃底部區(qū)及腸道有出血點(diǎn),腸壁變薄,腸黏膜脫落;關(guān)節(jié)炎腫脹,切開后,有炎性滲出物滲出,關(guān)節(jié)面腫脹。

3細(xì)菌分離培養(yǎng)與形態(tài)學(xué)觀察

無菌采集45日齡斷奶死亡的仔豬的肝臟、腎臟、心血、關(guān)節(jié)滲出液等病料組織接種于7%綿羊脫纖血液營養(yǎng)培養(yǎng)基上, 37℃培養(yǎng)12~16h后,在7%綿羊脫纖血液營養(yǎng)培養(yǎng)基生長出菌落,生長出來的菌落呈淡灰色、大小一致透明、圓形小菌落,呈現(xiàn)典型的β溶血現(xiàn)象,挑起7%綿羊脫纖血液營養(yǎng)培養(yǎng)基上,呈現(xiàn)典型的β溶血現(xiàn)象的菌落,革蘭氏染色觀察,分離菌株呈單個(gè)的或者雙排列的陽性球菌。

4分離菌株的生化鑒定

挑取7%綿羊脫纖血液營養(yǎng)培養(yǎng)基上單個(gè)菌落接種于含5% 血清的TSB 培養(yǎng)基里, 37℃震蕩培養(yǎng)12~16h后,按照說明加入鑒定鏈球菌Raid ID 32 STREP試紙條中, 37℃培養(yǎng)24h后,進(jìn)行生化試驗(yàn)鑒定,鏈球菌Raid ID 32 STREP試紙條結(jié)果顯示,分離菌株為鏈球菌。

5細(xì)菌的的致病性試驗(yàn)

挑取7%綿羊脫纖血液營養(yǎng)培養(yǎng)基上單個(gè)菌落接種于含5% 血清的TSB 培養(yǎng)基里, 37℃震蕩培養(yǎng)12~16h后,調(diào)整菌液濃度(105cfu /mL),將10只小白鼠分為2組,1組每只小白鼠肌肉注射分離菌株0.5 mL,2組,肌肉注射口服等量的生理鹽水,攻毒12h,觀察7d,記錄每組小鼠的死亡數(shù)和發(fā)病情況,結(jié)果顯示,在攻毒后的48h,1組小鼠出現(xiàn)全部死亡,2組健康存活,因而,證實(shí)了從45日齡斷奶死亡的仔豬體內(nèi)分離鏈球菌具有很強(qiáng)的致病性。

6藥敏試驗(yàn)

用K-B藥敏紙片法對(duì)仔豬源鏈球菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn),結(jié)果顯示,分離菌株對(duì)頭孢曲松、氨芐西林、阿莫西林、頭孢他定、青霉素6種藥物高度敏感。

7結(jié)論

從病死的45日齡的斷奶仔豬體內(nèi)分離到的病原菌為致病性鏈球菌,致病性鏈球菌,藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示,致病性鏈球菌對(duì)頭孢曲松、氨芐西林、阿莫西林、頭孢他定、青霉素6種藥物高度敏感,當(dāng)發(fā)生該病時(shí),應(yīng)選擇敏感的藥物進(jìn)行治療。

參考文獻(xiàn)

[1]張廣斌,李舫,袁東芳,等.豬鏈球菌2型的分離鑒定及豬場帶菌情況調(diào)查[J].中國動(dòng)物疫,2017,(09):92-95.

[2]惠艷華,丁寧,沈莉萍,等.一例豬鏈球菌2型感染的病原分離鑒定及藥敏試驗(yàn)[J].中國動(dòng)物檢疫,2017,34(08):97-99.

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