譚真+王善宗+葛運貞

【摘要】 目的：探討肺癌組織中HMGN5基因的表達水平及與臨床病理特征的相關(guān)性，為肺癌的診斷和治療提供依據(jù)。方法：采用RT-PCR法檢測HMGN5基因在觀察組45例肺癌組織及對照組35例癌旁正常組織中的表達，分析HMGN5基因的表達水平與肺癌組織臨床病理特征相關(guān)性。結(jié)果：觀察組肺癌患者HMGN5基因轉(zhuǎn)錄mRNA水平明顯高于對照組的癌旁正常組織，比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。肺癌組織中HMGN5基因與性別、年齡以及肺癌的病理類型無顯著相關(guān)性（P>0.05）；與患者的病理分級和分期以及是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有著顯著的相關(guān)性（P<0.05）。結(jié)論：肺癌組織中HMGN5基因的表達水平與臨床病理特征顯著相關(guān)，并與病理分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及臨床分期呈顯著有關(guān)，這可能提示HMGN5基因的表達水平與肺癌的發(fā)生、發(fā)展有著密切的關(guān)系。

【關(guān)鍵詞】 肺癌； HMGN5基因； 臨床病理特征； 相關(guān)性

Expression of HMGN5 Gene in Lung Cancer and Its Correlation with Clinicopathological Features/TAN Zhen，WANG Shan-zong，GE Yun-zhen.//Medical Innovation of China，2017，14（10）：122-125

【Abstract】 Objective：To explore the expression of HMGN5 gene in lung cancer and its correlation with clinicopathological features，and to provide the basis for the diagnosis and treatment of lung cancer.Method：RT-PCR

was used to detect the expression of HMGN5 gene in observation group of 45 cases with lung cancer tissues and control group of 35 cases with corresponding non-tumor normal lung tissue.The correlation between HMGN5 gene expression and clinicopathological features of lung cancer were analyzed.Result：The expression of HMGN5 mRNA in observation group was significantly higher than that in the control group，the difference was statistically significant（P<0.05）.HMGN5 gene in observation group of gender，age and pathological types had no significant correlation（P>0.05）；pathological grading，clinical staging，and whether there was lymph node metastasis were significantly correlated（P<0.05）.Conclusion：The expression level of HMGN5 gene in lung cancer is significantly correlated with clinicopathological features of pathological grading，lymph node metastasis and clinical stage.This may suggest that the expression level of HMGN5 gene has a close relationship with the occurrence and development of lung cancer.

【Key words】 Lung cancer； HMGN5 gene； Clinicopathological features； Relevance

First-authors address：Linyi in Shandong Province Economic and Technological Development Zone Peoples Hospital，Linyi 276023，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.10.034

隨著全球環(huán)境改變及霧霾天氣的加劇，肺癌的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升趨勢?，F(xiàn)有數(shù)據(jù)表明，傳統(tǒng)化療、放療和手術(shù)等手段對肺癌的療效都較為有限[1]。但早期診斷和治療，在某種程度上可延長患者長期生存率，故如何早期發(fā)現(xiàn)及診斷是醫(yī)學研究的重點所在[2]。研究證實，核小體結(jié)合蛋白-1（HMGN5）在胞質(zhì)內(nèi)定位和含量高低與細胞增殖周期有著顯著的相關(guān)性[3-5]，而肺癌患者已被證實其惡性增殖細胞周期調(diào)控機制明顯異常，故通過檢測肺癌組織中HMGN5基因的表達水平可能對肺癌的診斷有著一定的作用。本組研究通過肺癌組織及癌旁組織中HMGN5基因的表達與臨床病例特征相關(guān)性進行研究，為肺癌早期診斷及治療提供相關(guān)依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機選取本院2014年12月-2016年6月經(jīng)病理證實的肺癌標本45例（術(shù)前均未接受放、化療）為觀察組，男32例，女13例；年齡48～76歲，平均（63.2±4.9）歲；病理分型：鱗癌26例，小細胞肺癌12例，腺癌7例；解剖分型：中央型肺癌24例，周圍型肺癌21例，其中32例有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；TNM分期：Ⅰ～Ⅱ期21例，Ⅲ～Ⅳ期24例。同時選取肺癌癌旁正常組織35例為對照組，男23例，女12例；年齡47～75歲，平均（63.4±4.8）歲；病理分型：鱗癌19例，小細胞肺癌11例，腺癌5例；解剖分型：中央型肺癌19例，周圍型肺癌16例，其中28例有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；TNM分期：Ⅰ～Ⅱ期13例，Ⅲ～Ⅳ期12例。兩組患者TMN分期及病理分型等資料比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 總RNA的提取 觀察組患者術(shù)后切除大小為0.5 cm×0.5 cm×0.5 cm腫瘤組織，放入凍存管中進行液氮保存。對照組患者切除同樣大小的癌旁正常組織塊進行對照，同樣方法保存。將腫瘤組織和正常組織各100 mg研磨至勻漿離心后棄去上清液，提取總RNA。采用TrizoI一步法，但在總RNA提取過程中，需要保持RAase-free進行操作，并且由同一人進行操作[6]。

1.2.2 HMGN5基因mRNA表達水平檢測 采用Real-time PCR法檢測肺癌組織和癌旁正常組織，取2 μL cDNA模板和20 μL的反應體系以HMGN5和β-actin特異引物擴增相應基因，引物退火溫度均為60 ℃。取2.0 μg RNA和1 μL Oligo加入離心管中，補充去離子水，將其充分混勻后，72 ℃水10 min；取出后立即放置在0 ℃冰水浴中，使模板和Oligo退火；再將其放置在42 ℃水浴中1 h，通過72 ℃水浴對RT酶進行滅活處理，水浴10 min。以逆轉(zhuǎn)錄制備cDNA行Real-time PCR反應，程序為：95 ℃預變性2 min，95 ℃變性15 s，60 ℃變性1 min，循環(huán)45次；95 ℃變性1 min，變性后冷卻至55 ℃，讀取CT值，計算RNA相對表達量[7]。

1.3 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 19.0軟件進行數(shù)據(jù)處理，計量資料以（x±s）表示，比較采用t檢驗，計數(shù)資料用率（%）表示，比較采用 字2檢驗，相關(guān)性分析采用Person，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者HMGN5基因轉(zhuǎn)錄mRNA水平的表達比較 觀察組肺癌患者HMGN5基因轉(zhuǎn)錄mRNA水平明顯高于對照組癌旁正常組織，比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表1。

2.2 HMGN5基因mRNA表達與肺癌臨床病理特征的相關(guān)性 本組研究對肺癌患者年齡、性別、病理類型、病理分級、分期、是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等進行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)肺癌組織中HMGN5基因與性別、年齡、肺癌病理類型無顯著相關(guān)性（P>0.05），但與患者的病理分級、分期、是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有著顯著的相關(guān)性（P<0.05），見表2。

3 討論

肺癌的發(fā)病率及死亡率均位居我國各種惡性腫瘤之首，以非小細胞肺癌最為常見，占肺癌的80%左右[8-9]。目前針對肺癌的治療無較好的療法，其遠期生存率較低，故早期診斷及早期治療對肺癌的預后有顯著意義[1-10]。

研究證實，HMG參與多種腫瘤的浸潤轉(zhuǎn)移，在腫瘤發(fā)生發(fā)展中起重要作用，HMGN5為HMG成員，在乳腺癌、膀胱癌等組織中表達水平顯著升高，HMGN5基因重排、斷裂與胃腸道腫瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤及生殖系統(tǒng)腫瘤等發(fā)生密切相關(guān)[11-12]。研究還發(fā)現(xiàn)，采用RNA干擾沉默HMGN5基因，可明顯抑制肺癌細胞增殖，因此抑制HMGN5基因表達可能是治療肺癌的有效療法[13-14]。故探討肺癌組織中HMGN5基因的表達水平及與臨床病理特征的相關(guān)性有重要意義。

本組研究發(fā)現(xiàn)，肺癌組織中HMGN5基因轉(zhuǎn)錄mRNA水平明顯高于對照組癌旁正常組織，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），與目前文獻[15]報道類似。

文獻[16]報道，影響肺癌療效及遠期生存率的因素較多，如TNM分期、病理分級、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等，還有如基礎疾病、吸煙等患者自身因素。但研究發(fā)現(xiàn)，影響肺癌預后的獨立危險因素主要為肺癌的病理分級和分期以及是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等[17-18]。

為進一步探討肺癌組織中HMGN5基因的表達水平及與臨床病理特征的相關(guān)性，本組研究對肺癌患者年齡、性別、病理類型、病理分級、分期，是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，肺癌組織中HMGN5基因與性別、年齡、病理類型無顯著相關(guān)性（P>0.05）；但與病理分級和分期及是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有顯著相關(guān)性（P<0.05），與目前文獻[19]報道類似。

綜上所述，肺癌組織中HMGN5基因的表達水平及與臨床病理特征顯著相關(guān)，并與病理分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期呈顯著有關(guān)，這可能提示HMGN5基因的表達水平與肺癌的發(fā)生、發(fā)展有著密切的關(guān)系[20]。

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