＊黃忠明 蘇令 金亮 章留留

（揚州聯(lián)博藥業(yè)有限公司研發(fā)中心 江蘇 225127）

鹽酸多西環(huán)素中氯乙烷含量及變化研究

＊黃忠明 蘇令 金亮 章留留*

（揚州聯(lián)博藥業(yè)有限公司研發(fā)中心 江蘇 225127）

鹽酸多西環(huán)素是目前最廣泛使用的抗生素之一。鹽酸多西環(huán)素中檢測到有氯乙烷殘留，因此我們采用氣相色譜法進行跟蹤分析，既分析每個原料中氯乙烷的含量，又分析反應(yīng)過程中氯乙烷的產(chǎn)生量，并得到如下結(jié)論：1、鹽酸多西環(huán)素生產(chǎn)所用的鹽酸乙醇中會帶入氯乙烷至成品中；2、鹽酸多西環(huán)素生產(chǎn)過程中溶解溫度、保溫溫度過高和烘干溫度過高都會產(chǎn)生氯乙烷。

鹽酸多西環(huán)素；氯乙烷；溶劑殘留；氣相色譜

1.引言

鹽酸多西環(huán)素又名鹽酸脫氧土霉素、強力霉素，屬于第二代半合成的四環(huán)素衍生物，是常用的廣譜抗菌藥物之一。具有：組織穿透力強、抗菌活性強、體內(nèi)分布廣、半衰期長、較高生物利用度及無明顯腎毒性等優(yōu)點。主要用于治療敏感的革蘭氏陽性球菌和革蘭氏陰性桿菌所致的上呼吸道感染、扁桃體炎、膽道感染、淋巴炎、老年慢性支氣管炎，也可用于炭疽的治療。鹽酸多西環(huán)素還是常用的動物飼料預混添加劑之一，用于常見動物消化道、呼吸道等疾病的預防。

氯乙烷在醫(yī)療中用于小手術(shù)局部麻醉，也有冷凍麻醉作用，從而使局部產(chǎn)生快速鎮(zhèn)痛效果，但是氯乙烷在皮膚有開放性損傷的時候禁用。氯乙烷有刺激性作用，高濃度氯乙烷會損傷心、肝、腎，還可能會引起運動失調(diào)、知覺消失，循環(huán)和呼吸抑制，因此弄清鹽酸多西環(huán)素中氯乙烷產(chǎn)生及變化尤為重要。在鹽酸多西環(huán)素中檢測到氯乙烷殘留值在300～3000ppm之間波動，以下對鹽酸多西環(huán)素的生產(chǎn)過程中氯乙烷產(chǎn)生的過程進行了研究。先分析了原料中氯乙烷的含量，接著研究了鹽酸多西環(huán)素中氯乙烷產(chǎn)生的原因。

2.實驗方法

(1)實驗儀器

電子天平、HH恒溫水浴鍋、SZCL-2數(shù)顯智能控溫磁力攪拌器、SHZ-111循環(huán)水式真空泵、DEF-6050型真空干燥箱、安捷倫7890A氣相色譜儀、安捷倫G1888頂空進樣器。

(2)鹽酸多西環(huán)素制備方法

①95%乙醇加入三口燒瓶中，開啟攪拌升溫至35℃。當溫度達到35℃后加入一定量的多西環(huán)素一水物，繼續(xù)攪拌并升溫至52℃。②當溫度達到52℃時立即加入鹽酸乙醇，然后繼續(xù)攪拌升溫（加入鹽酸乙醇后，多西環(huán)素一水物會先溶解再結(jié)晶，該點稱為溶解溫度）。③當溫度達到68℃時，開始保溫。1h后再降溫冷卻至25℃。④冷卻至25℃后，抽濾，抽干后用95%乙醇洗滌，再抽干后可得多西環(huán)素鹽酸鹽潮品，并在80℃條件下烘干2h。

(3)氯乙烷含量分析方法與分析結(jié)果

①氯乙烷含量分析方法

分析條件：

柱型：毛細管柱DB-624；規(guī)格：30m×0．32mm×1．8μm S/N；USC460115H；載氣：N2；流速：2．1mL/min。

柱溫箱溫度：初溫35℃，保持10min然后以40℃/min升到230℃保持2min。

進樣口溫度：200℃，分流進樣，分流比20∶1進樣體積1mL。

檢測器溫度：260℃；氫氣流速：40mL/min；空氣流速：400mL/min；尾吹：20mL/min。

頂空條件：瓶溫110℃、定量環(huán)120℃、傳輸管線130℃、瓶加熱平衡時間5min、進樣時間0．5min、瓶壓15PSI。

測定：

A、0．01mg/mL標準溶液的配制：氯乙烷標樣：移取2mg/mL氯乙烷標準溶液0．5mL，用純化水定容至100mL，濃度為0．01mg/mL。

B、樣品的分析：稱取鹽酸多西環(huán)素樣品4g左右至50mL容量瓶，加純化水溶解并定容至刻度。用5mL移液管分別移取三份5mL定容好的鹽酸多西環(huán)素溶液至三個頂空瓶中，依次放入加熱爐中加熱并進行分析。

式中：W—氯乙烷含量；A1—樣品中氯乙烷出峰面積；C1—樣品配制濃度；A2—標樣中氯乙烷出峰面積；C2—標樣中氯乙烷濃度。

②鹽酸多西環(huán)素中氯乙烷含量分析結(jié)果

分別取生產(chǎn)中不同日期的鹽酸多西環(huán)素干品，分析氯乙烷的含量，所得結(jié)果如下表所示：

表1 鹽酸多西環(huán)素中氯乙烷含量分析結(jié)果

由上表可知：鹽酸多西環(huán)素中氯乙烷含量波動幅度較大，而高濃度氯乙烷會損傷心、肝、腎，還可能會引起運動失調(diào)、知覺消失，循環(huán)和呼吸抑制，因此，研究氯乙烷產(chǎn)生過程及如何把氯乙烷含量控制在一定范圍內(nèi)尤為重要。

(4)原料中氯乙烷含量分析結(jié)果

①鹽酸乙醇中氯乙烷含量分析結(jié)果

A．鹽酸乙醇分析氯乙烷時樣品的預處理辦法

B．分析結(jié)果

表2 鹽酸乙醇中氯乙烷含量分析結(jié)果

由上表可知：鹽酸多西環(huán)素中所采用的鹽酸乙醇中含有氯乙烷，波動也比較大，鹽酸多西環(huán)素中的氯乙烷可能是由鹽酸乙醇直接帶入，需要進一步實驗驗證。

②乙醇中氯乙烷含量分析結(jié)果

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表3 乙醇中氯乙烷含量分析結(jié)果

③多西環(huán)素一水物中氯乙烷含量分析結(jié)果

表4 多西環(huán)素一水物中氯乙烷含量分析結(jié)果

由上述表3，4可知：反應(yīng)所用原料多西環(huán)素一水物及乙醇中基本不含氯乙烷，其中乙醇只含3ppm左右的氯乙烷，猜測不會對反應(yīng)所得鹽酸多西環(huán)素中氯乙烷含量產(chǎn)生明顯影響，在下文將用實驗進行驗證。

3.實驗結(jié)果與分析

(1)反應(yīng)溶解溫度、保溫溫度對鹽酸多西環(huán)素中氯乙烷殘留量的影響

在三口燒瓶中，加入一定量的乙醇與多西環(huán)素一水物，按照上述實驗步驟，在溶解溫度分別為46℃、52℃時加入上述分析過的鹽酸乙醇2，保溫溫度分別為60℃、68℃進行反應(yīng)，反應(yīng)后產(chǎn)物潮品用氣相色譜進行分析。

表5 溶解溫度、保溫溫度對鹽酸多西環(huán)素中氯乙烷殘留量的影響

由上表可知：溶解溫度越高，保溫溫度越高，所得強力潮品中氯乙烷含量也越高，這是由于溫度越高，反應(yīng)中鹽酸與乙醇分子間熱運動加劇，增加了碰撞的概率，從而導致氯乙烷的增加。其中保溫溫度對氯乙烷的產(chǎn)生量影響更明顯，反應(yīng)時應(yīng)控制保溫溫度在60℃時，產(chǎn)品中殘留的氯乙烷較少。

(2)原料鹽酸乙醇中氯乙烷含量對鹽酸多西環(huán)素中氯乙烷含量的影響

在三口燒瓶中，加入一定量的乙醇與多西環(huán)素一水物，按照上述實驗步驟，在溶解溫度為52℃時分別加入上述檢測過的鹽酸乙醇、鹽酸（分析純），保溫溫度為68℃進行反應(yīng)，反應(yīng)后產(chǎn)物用氣相色譜進行分析。

表6 鹽酸乙醇中氯乙烷含量對鹽酸多西環(huán)素中氯乙烷含量的影響

由上表可知：用不含氯乙烷的分析純鹽酸反應(yīng)時，所得潮品中氯乙烷含量很低，說明所用乙醇中的氯乙烷含量對產(chǎn)物中的含量影響不大；而采用不同批號的鹽酸乙醇時，所得潮品中氯乙烷含量隨著鹽酸乙醇中氯乙烷含量的升高而升高，鹽酸乙醇中氯乙烷含量越高，帶入到體系中氯乙烷越多，產(chǎn)物中含量就高。

(3)烘干溫度對鹽酸多西環(huán)素中氯乙烷殘留量的影響

將上述實驗2所得強力潮品放入烘箱中烘干，溫度分別為60℃和80℃條件下，烘干2h，考察烘干溫度對氯乙烷殘留量的影響，所得干品用氣相色譜進行分析。

表7 烘干溫度對鹽酸多西環(huán)素中氯乙烷殘留量的影響

由上表可知：鹽酸多西環(huán)素潮品在烘干后，氯乙烷含量會大幅上升，尤其是在80℃條件下，增幅特別明顯，這可能是因為潮品中殘留的鹽酸和乙醇在高溫下分子間熱運動增加，分子間碰撞加劇導致的。

4.結(jié)論

(1)鹽酸多西環(huán)素生產(chǎn)過程中，所用乙醇、多西環(huán)素一水物對產(chǎn)品中氯乙烷的殘留量沒有影響。(2)鹽酸多西環(huán)素生產(chǎn)過程中，所用鹽酸乙醇中含有大量的氯乙烷，并會帶入到反應(yīng)中，對產(chǎn)品中氯乙烷殘留影響較大。應(yīng)對原料鹽酸乙醇中的氯乙烷殘留量進行控制。(3)鹽酸多西環(huán)素生產(chǎn)過程中，溶解溫度和保溫溫度越高，產(chǎn)品中氯乙烷殘留越多。(4)鹽酸多西環(huán)素潮品烘干過程中，烘干溫度越高，產(chǎn)品中氯乙烷殘留越高，尤其在80℃條件下，會劇烈增加。(5)使用氯乙烷含量為1968ppm的鹽酸乙醇，在52℃溶解，60℃保溫，60℃烘干的情況下，所得鹽酸多西環(huán)素干品中氯乙烷含量為410ppm。

[1]劉輝旺,劉義明.多西環(huán)素研究進展[J].獸醫(yī)導刊,2008(1):27-29.

[2]趙嬋娟.多西環(huán)素研究進展[J].湖北畜牧獸醫(yī),2012(12):10-13.

[3]何家康,祝萬菊,周麗光等.鹽酸多西環(huán)素緩釋注射液在豬體內(nèi)的藥物動力學[J].中國獸醫(yī)學報,2008(2):175-180.

[4]王金花,操繼躍,翟克影等.鹽酸多西環(huán)素在豬體內(nèi)的藥物動力學及其殘留[J].中國獸醫(yī)學報,2008(11):1313-1320。

[5]Parker JG.氯乙烷類的毒性[J]國外醫(yī)學(衛(wèi)生學分冊),1980(1):23.

Study of the Content and Change of Anodynon in Doxycycline Hyclate

Huang Zhongming, Su Ling, Jin Liang, Zhang Liuliu*

(Research and Development Center, Yangzhou Lianbo Pharmaceutical Industry Co., ltd, Jiangsu, 225127)

Doxycycline hyclate is one of the widely used antibiotic. There is anodynon residue detected in Doxycycline hyclate, so we have adopted gas chromatography to take the tracking analysis, which not only includes the analysis of anodynon content in each raw material, but also includes the analysis of the production quantity of anodynon in the reaction process. Finally we have got the conclusion that, in the production process of doxycycline hyclate, the used hydrochloric acid contains anodynon, which will be brought into the finished products. Besides, in the production process of doxycycline hyclate, too high solution temperature, holding temperature and drying temperature all will produce anodynon.

doxycycline hyclate；anodynon；solvent residue；gas chromatography

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A

((責任編：王恒)

章留留（1984～），男，揚州聯(lián)博藥業(yè)有限公司研發(fā)中心，研究方向：化學原料藥生產(chǎn)技術(shù)。

黃忠明（1970～），男，揚州聯(lián)博藥業(yè)有限公司研發(fā)中心，研究方向：藥品生產(chǎn)技術(shù)研究。