沈偉+韋玉英+岑湘濤

摘 要：為了探討艾葉、大青葉、訶子及連翹4種中草藥熏蒸對組培室空氣消毒的效果，篩選出對組培室空氣消毒效果最佳的中藥品種及用量，該研究采用平板沉降法進(jìn)行采樣和培養(yǎng)，對4種中草藥煙熏消毒效果進(jìn)行現(xiàn)場消毒試驗(yàn)。結(jié)果表明：艾葉、大青葉、訶子、連翹4種中草藥對組培室空氣的滅菌率分別為74.4%、76.8%、85.7%、97.8%，因而連翹為最佳消毒中草藥；并且當(dāng)連翹的用量為2.0g/m3、熏蒸時(shí)間為1h時(shí)消毒效果最佳。

關(guān)鍵詞：中草藥；熏蒸；組培室；空氣消毒

中圖分類號(hào) R187 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-7731（2016）23-0045-02

組培苗在培養(yǎng)過程中容易受微生物污染，污染直接影響生產(chǎn)成本及效率，打亂生產(chǎn)計(jì)劃，因此，減少培養(yǎng)環(huán)境的微生物污染對降低組培室的污染率至關(guān)重要，空氣消毒是切斷微生物傳播途徑，將污染降低的有力措施。中草藥在我國擁有著悠久的歷史，是我國醫(yī)學(xué)上的珍寶，中藥功效各異，抗菌消炎是其中的重要功效之一，中草藥煙熏消毒是古時(shí)最流行的一種空氣消毒方法。隨著環(huán)保意識(shí)觀念的增強(qiáng)，近年來人們在對消毒制劑的選擇上越來越傾向于天然、無不良反應(yīng)、消毒效果強(qiáng)的中草藥，將中草藥用于組培室的空氣消毒少有報(bào)道，但在各大醫(yī)院消毒中卻時(shí)常有報(bào)道[1-4]，可見中草藥在空氣消毒方面有其獨(dú)特的效果。本研究利用4種中草藥艾葉、大青葉、訶子及連翹對組培室進(jìn)行熏蒸消毒，從品種、用量及熏蒸時(shí)間3個(gè)方面探索中草藥對培養(yǎng)室空氣消毒的效果，旨在克服常規(guī)消毒方法的不足，開辟綠色健康、安全可靠的組培室空氣消毒新技術(shù)、新方法，為中草藥在組培室空氣消毒中的應(yīng)用及發(fā)展提供理論依據(jù)和技術(shù)參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 供試材料艾葉、大青葉、訶子、連翹購買于中藥房。試劑與儀器：95%乙醇、MS培養(yǎng)基、瓊脂、恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、超凈工作臺(tái)、培養(yǎng)皿、燒杯、滅菌鍋、托盤、打火機(jī)、量筒、pH試紙、鑷子。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)材料的處理 艾葉可直接點(diǎn)燃；大青葉和訶子及連翹須與95%乙醇按1∶2的比例密閉浸泡24h備用。

1.2.2 試驗(yàn)場所 本試驗(yàn)以百色學(xué)院化生樓組培室為消毒對象，組培室大小為92.48m3。在使用4種中草藥對組培室進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)室內(nèi)溫度、相對濕度均相同。在進(jìn)行中草藥熏蒸試驗(yàn)前將組培室打掃干凈，關(guān)閉組培室門窗，除操作人員外，其他人員禁止入內(nèi)。

1.2.3 采樣方法 將9個(gè)直徑為95mm含有MS培養(yǎng)基的平板放置在組培室的各個(gè)角落及中間位置，打開培養(yǎng)皿蓋使平板暴露在空氣中采用自然沉降法收集空氣中菌落數(shù)[6]，采樣時(shí)間為30min，采樣期間禁止人員走動(dòng)。將消毒前后采樣的平板置于30℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h后觀察培養(yǎng)皿中菌落數(shù)，并做好實(shí)驗(yàn)記錄。采樣前后用75%酒精擦拭雙手，避免手上所帶菌落污染平板，影響試驗(yàn)結(jié)果。

1.2.4 不同中草藥熏蒸對組培室消毒效果影響 本試驗(yàn)使用培養(yǎng)基為組織培養(yǎng)常用MS培養(yǎng)基。艾葉、大青葉、訶子、連翹4種中草藥的用量均為2.0g/m3。試驗(yàn)期間不能使用其他消毒劑或物理方法對組培室進(jìn)行消毒。試驗(yàn)前根據(jù)試驗(yàn)用量及處理方式準(zhǔn)備好藥品。將中草藥置于托盤中在組培室中分5個(gè)點(diǎn)燃燒，使中藥中的有效成分揮發(fā)至空氣中，熏蒸1h后取樣，以熏蒸前30min采樣為對照，每組試驗(yàn)重復(fù)4次，用平均滅菌率比較滅菌情況，從中篩選出消毒效果最佳的中草藥。

1.2.5 最適中草藥用量及最適消毒時(shí)間的確定 將篩選出的最佳消毒效果中藥進(jìn)行最適中草藥用量及最適消毒時(shí)間試驗(yàn)，試驗(yàn)用量分別為1.0g/m3、2.0g/m3和3.0g/m3，消毒時(shí)間按煙熏后0.5h、1h、1.5h、2h的時(shí)間分別進(jìn)行采樣，以熏蒸前30min采樣為對照，每組試驗(yàn)重復(fù)4次，用平均滅菌率比較滅菌情況。

1.3 菌落的檢測與統(tǒng)計(jì) 菌落檢測：在觀察結(jié)果時(shí)，根據(jù)菌落外觀按霉菌、細(xì)菌進(jìn)行菌落的分類。菌落統(tǒng)計(jì)：統(tǒng)計(jì)好試驗(yàn)前后各培養(yǎng)皿菌落數(shù)，根據(jù)奧氏公式分別計(jì)算熏蒸前和熏蒸后組培室空氣中的含菌量，奧氏公式為：

空氣菌落總數(shù)（cfu/m3）=50000N/A×T

式中：A為培養(yǎng)皿面積（cm2）；

T為培養(yǎng)皿暴露時(shí)間（min）；

N為培養(yǎng)皿平均菌落（cfu/皿）。

2 結(jié)果與分析

2.1 4種中草藥熏蒸對組培室滅菌率效果的影響 由表1可知，使用艾葉、大青葉、訶子、連翹4種中草藥分別對組培室進(jìn)行熏蒸消毒，消毒前后，空氣中菌落數(shù)分別減少了74.4%、76.5%、85.7%、97.8%，但對霉菌和細(xì)菌的滅菌效果存在差異，4種中草藥對于霉菌的滅菌率分別為76.7%、78.9%、89.5%、98.4%，對細(xì)菌的滅菌效果分別為64.0%、66.6%、72.7%、90.5%。對比4種中草藥對于霉菌和細(xì)菌的滅菌效果可知，4種中草藥對于霉菌的滅菌效果均高于對細(xì)菌的滅菌作用，總滅菌率由高到底依次為連翹>訶子>大青葉>艾葉，艾葉、大青葉、訶子、連翹4種中草藥用于組培室空氣消毒時(shí)均起到了滅菌作用，綜合考慮霉菌和細(xì)菌滅菌率，連翹為4種中草藥中最佳。

3 結(jié)論與討論

紫外線消毒、甲醛+高錳酸鉀熏蒸、過氧化氫、84消毒液、乙酸、乙醇都是目前組培室中常用的消毒方法[5]，這些方法對各種菌類具有快速殺滅的作用，但藥效持續(xù)時(shí)間短，具有毒性，安全性差，操作需要有防護(hù)措施，不利于在有人的環(huán)境下操作，消毒后異味殘留時(shí)間長，長時(shí)間使用會(huì)對人體產(chǎn)生巨大傷害[7]。中藥有治療人體疾病的功能，同時(shí)許多中藥又具備了很強(qiáng)的殺菌的功效，本研究采用艾葉、大青葉、訶子及連翹對組培室進(jìn)行空氣消毒，結(jié)果表明，連翹為4種中草藥中最適用于熏蒸消毒中草藥，且當(dāng)連翹的用量為2.0g/m3、熏蒸時(shí)間為1h消毒效果最佳。在燃燒過程中產(chǎn)生的煙霧彌漫在組培室的各個(gè)角落，不存在死角，當(dāng)人接觸到這些煙時(shí)，沒有任何的不適感。中草藥熏蒸用于組培室空氣消毒克服了組培室中常規(guī)消毒方法存在的消毒死角、對人體危害、具有刺激性氣味、成本高、操作具有危險(xiǎn)性等缺點(diǎn)，是一種安全、可靠的新的消毒方式。

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