韓秀峰(HAN Xiu-feng)，胡志東(HU Zhi-dong)

(1天津市紅橋醫(yī)院，天津 300131； 2 天津醫(yī)科大學(xué)研究生院，天津 300070； 3 天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院，天津 300052)

連續(xù)四年金黃色葡萄球菌耐藥性和克林霉素誘導(dǎo)型耐藥分析

韓秀峰(HAN Xiu-feng)1，2，胡志東(HU Zhi-dong)3

(1天津市紅橋醫(yī)院，天津 300131； 2 天津醫(yī)科大學(xué)研究生院，天津 300070； 3 天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院，天津 300052)

目的 了解某院金黃色葡萄球菌(SAU)耐藥性和克林霉素誘導(dǎo)型耐藥情況，指導(dǎo)臨床醫(yī)生合理使用抗菌藥物。方法 回顧性分析該院2011—2014年臨床分離的233株SAU標(biāo)本分布與藥敏結(jié)果，并進(jìn)行克林霉素誘導(dǎo)耐藥試驗(yàn)(D-試驗(yàn))。 結(jié)果 共分離233株SAU，標(biāo)本來源以痰為主，其次是傷口分泌物；科室以重癥監(jiān)護(hù)病房(ICU)和呼吸內(nèi)科為主。藥敏結(jié)果顯示233株SAU對(duì)青霉素和氨芐西林的耐藥率最高，分別為95.71%、90.99%；對(duì)紅霉素、克林霉素、環(huán)丙沙星、慶大霉素的耐藥率分別為83.26%、67.81%、47.21%、43.78%，均>40%；對(duì)四環(huán)素、頭孢唑林、復(fù)方磺胺甲口惡唑的耐藥率分別為33.48%、27.04%、26.18%；對(duì)萬古霉素100%敏感。233株SAU 中MRSA檢出率為30.47%，2011—2014年MRSA檢出率分別為39.78%、34.43%、17.95%、15.00%；D-試驗(yàn)陽性菌株13株，占總菌株的5.58%。結(jié)論 加強(qiáng)細(xì)菌耐藥性監(jiān)測，利用D-試驗(yàn)檢測克林霉素誘導(dǎo)型耐藥，對(duì)指導(dǎo)臨床醫(yī)生合理使用抗菌藥物具有重要意義。

金黃色葡萄球菌； 耐甲氧西林金黃色葡萄球菌； 克林霉素誘導(dǎo)耐藥試驗(yàn)； 抗藥性，微生物； 耐藥率

金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus，SAU)廣泛存在于空氣、水及人的體表、鼻咽部和腸道,可引起多種感染，已經(jīng)成為醫(yī)院感染的主要病原菌之一。隨著抗菌藥物的大量使用，臨床分離的SAU耐藥性也越來越嚴(yán)重，尤其是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin-resistantStaphylococcusaureus,MRSA)和紅霉素誘導(dǎo)克林霉素耐藥菌株引起的感染，給臨床醫(yī)生治療帶來了困難。為了解天津市紅橋醫(yī)院SAU的耐藥性和克林霉素誘導(dǎo)型耐藥情況，指導(dǎo)臨床醫(yī)生合理使用抗菌藥物，筆者回顧性分析了本院2011—2014年臨床分離的233株SAU，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 菌株來源 233株SAU均分離自本院2011—2014年所有住院患者送檢的各類合格標(biāo)本。同一例患者同時(shí)期培養(yǎng)的相同菌株只計(jì)1株。

1.2 菌株鑒定與藥敏試驗(yàn) 233株SAU的分離培養(yǎng)，觸酶試驗(yàn)和血漿凝固酶試驗(yàn)嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(第三版)》進(jìn)行，以上菌株均使用上海復(fù)星佰珞生物技術(shù)有限公司的BIOFOSUN微生物鑒定藥敏分析儀進(jìn)行鑒定和藥敏試驗(yàn)，并按照美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)標(biāo)準(zhǔn)判讀結(jié)果。鑒定板、藥敏板和其他配套試劑均購自該公司。質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌ATCC 25923和ATCC 29213。

1.2.1 MRSA檢測 采用頭孢西丁紙片法，在M-H平皿上接種0.5麥?zhǔn)蠁挝坏腟AU菌懸液，貼30 μg頭孢西丁藥敏紙片，經(jīng)35℃培養(yǎng)24 h后判讀結(jié)果，抑菌圈直徑≤19 mm為陽性。

1.2.2 克林霉素誘導(dǎo)耐藥試驗(yàn)(D-試驗(yàn)) 將濃度為0.5麥?zhǔn)蠁挝坏腟AU菌懸液均勻涂布于M-H平皿上，然后貼上紅霉素紙片(15 μg)和克林霉素紙片(2 μg)，兩紙片中心點(diǎn)相距15 mm，經(jīng)35℃培養(yǎng)24 h，觀察在靠近紅霉素紙片一側(cè)的克林霉素的抑菌環(huán)有無截平現(xiàn)象，即D型環(huán)形成，有D型環(huán)形成者為陽性，無D型環(huán)形成者為陰性。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析 應(yīng)用本院Lis系統(tǒng)軟件中的統(tǒng)計(jì)報(bào)表功能對(duì)233株SAU的臨床分布與藥敏結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。

2 結(jié)果

2.1 標(biāo)本分布及構(gòu)成 233株SAU主要分離自痰及傷口分泌物標(biāo)本，分別占56.65%(132株)、26.61%(62株)；分布科室以重癥監(jiān)護(hù)病房(ICU)和呼吸內(nèi)科為主，分別占40.77%(95株)、28.76%(67株)。

2.2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果 233株SAU對(duì)12種抗菌藥物的耐藥情況見表1。233株SAU中MRSA檢出率為30.47%，4年間MRSA檢出率依次為39.78%、34.43%、17.95%、15.00%，呈下降趨勢(χ2=12.39，P=0.006)。

表1 2011—2014年SAU對(duì)抗菌藥物的耐藥情況[耐藥菌株(%)]

2.3 D-試驗(yàn)結(jié)果 233株SAU中E-R/C-S菌株(E為紅霉素,C為克林霉素,R為耐藥,S為敏感)36株，其中D試驗(yàn)陽性的菌株為13株，占總菌株的5.58%(13/233)，占E-R/C-S菌株的36.11%(13/36)。

3 討論

本院2011—2014年SAU主要分離自呼吸道(痰)標(biāo)本，占56.65%，其次是傷口分泌物，占26.61%,此結(jié)果與利嘉琦等[1]報(bào)道的結(jié)果相似；與馬玲等[2]報(bào)道的分泌物為主,占53.7%，痰次之(占15.2%)結(jié)果不相符?？剖曳植家訧CU、呼吸內(nèi)科為主，分別占40.77%、28.76%，提示該菌在本院以呼吸道感染為主,其次為傷口感染，而ICU和呼吸內(nèi)科是該菌耐藥性與醫(yī)院感染監(jiān)測的重點(diǎn)科室。

SAU是引起醫(yī)院感染最常見的條件致病菌之一, 其在醫(yī)院感染的革蘭陽性病原菌中排在首位[3]。隨著臨床抗菌藥物使用的增加，其耐藥越來越嚴(yán)重，尤其是MRSA和克林霉素誘導(dǎo)型菌株引起的感染給臨床治療帶來了困難。MRSA主要是產(chǎn)生了青霉素結(jié)合蛋白2a(PBP2a)，PBP2a由位于葡萄球菌染色體mec盒(SCCmec)上的mecA基因編碼[4]；而大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的耐藥機(jī)制是因erm基因編碼的23S rRNA甲基化可導(dǎo)致核糖體構(gòu)型的改變，導(dǎo)致大環(huán)內(nèi)酯類、林可酰胺類、鏈陽菌素類與細(xì)菌核糖體靶位的結(jié)合能力下降。由于上述抗生素均具有相同的或重疊的靶位作用位點(diǎn)，故細(xì)菌可同時(shí)對(duì)此三類抗生素交叉耐藥，被稱為MLSB耐藥[5]。而紅霉素耐藥克林霉素敏感的誘導(dǎo)型耐藥菌株，只有通過試驗(yàn)才能檢測出[6]。

本組結(jié)果顯示，SAU對(duì)青霉素與氨芐西林耐藥率最高，分別為95.71%、90.99%，與馬瑛[7]報(bào)道的結(jié)果相近，建議臨床醫(yī)生停止使用該類藥物治療SAU感染；對(duì)紅霉素、克林霉素、環(huán)丙沙星、慶大霉素的耐藥率分別為83.26%、67.81%、47.21%、43.78%，耐藥率均>40%,可依據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果合理選擇抗菌藥物；對(duì)四環(huán)素、頭孢唑林、復(fù)方磺胺甲口惡唑的耐藥率分別為33.48%、27.04%、26.18%，可用于經(jīng)驗(yàn)性治療該菌引起的感染；萬古霉素100%敏感,與曹敏[8]報(bào)道的結(jié)果相符，建議在治療由該菌引起的嚴(yán)重感染，或MRSA菌株引起的感染時(shí)，可首選對(duì)該菌保持高敏感性的糖肽類藥物萬古霉素。本組SAU中MRSA檢出率為30.47%，低于王鳳玲等[9]報(bào)道的55.4%，高于馬玲等[2]報(bào)道的20.3%；2011—2014年4年間MRSA檢出率依次為39.78%、34.43%、17.95%、15.00%，呈下降趨勢，可能與本院近幾年嚴(yán)格執(zhí)行多重耐藥菌管理制度有關(guān)。另外，由于克林霉素具有口服吸收好，對(duì)胃腸道刺激小，對(duì)腎臟毒性低等特點(diǎn)，臨床上也常用來治療SAU引起的感染，但本院常規(guī)的藥敏試驗(yàn)檢測不出克林霉素誘導(dǎo)型耐藥菌株，給臨床治療帶來困難。233株SAU中D-試驗(yàn)陽性菌株有13株，占E-R/C-S菌株的36.11%，此結(jié)果低于王鳳玲等[10]報(bào)道的63.6%。因此，建議微生物檢驗(yàn)人員對(duì)紅霉素耐藥克林霉素敏感的菌株，做D-試驗(yàn)，陽性菌株及時(shí)提示臨床醫(yī)生，避免使用克林霉素治療，可依據(jù)藥敏結(jié)果合理選用抗菌藥物。

總之，準(zhǔn)確及時(shí)地分析細(xì)菌耐藥性，對(duì)指導(dǎo)臨床醫(yī)生治療感染，控制和延緩耐藥菌株的增加均有重要的意義。

[1] 利嘉琦，張莉滟，鄒偉民，等.金黃色葡萄球菌臨床感染與耐藥性分析[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33(23)：2879-2880,2882.

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[8] 曹敏.78株耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的耐藥分析[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2014，35(24)：3388-3389.

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(本文編輯：張瑩)

Antimicrobial resistance and inducible clindamycin resistance inStaphylococcusaureusfor four consecutive years

(1 Tianjin Hongqiao Hospital, Tianjin 300131, China; 2 Graduate School, Tianjin Medical University, Tianjin 300070, China; 3 Tianjin Medical University General Hospital, Tianjin 300052, China)

2016-06-23

韓秀峰(1979-),男(漢族),河北省武安市人，檢驗(yàn)技師，主要從事臨床微生物檢驗(yàn)研究。

韓秀峰 E-mail:hanxiufeng0826@163.com

10.3969/j.issn.1671-9638.2017.03.021

R446.5

B

1671-9638(2017)03-0270-03