袁軍海，韓翠仙，高青云，喬 兵，曹克強(qiáng)

(1.河北北方學(xué)院農(nóng)林科技學(xué)院，河北 張家口 075000；2.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院，河北 保定 071001)

6種殺菌劑對蘋果蠅糞病菌室內(nèi)毒力測定

袁軍海1，韓翠仙1，高青云1，喬 兵1，曹克強(qiáng)2

(1.河北北方學(xué)院農(nóng)林科技學(xué)院，河北 張家口 075000；2.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院，河北 保定 071001)

目的 尋找防治蘋果蠅糞病的新型低毒高效殺菌劑。方法 選擇4種三唑類和2種甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑，運(yùn)用菌絲生長速率法，對蘋果蠅糞病菌進(jìn)行了室內(nèi)毒力測定。結(jié)果 氟硅唑EC50為0.320 0 μg·mL-1，抑菌效果最好；其次是硝苯菌酯、抑霉唑和苯醚甲環(huán)唑，EC50分別為0.410 0 μg·mL-1、0.620 0 μg·mL-1和0.800 0 μg·mL-1，再次是四氟咪唑，EC50為6.250 0 μg·mL-1；吡唑醚菌酯抑菌效果最差，EC50為15.000 0 μg·mL-1。結(jié)論 推薦用氟硅唑、硝苯菌酯、抑霉唑和苯醚甲環(huán)唑防治蘋果蠅糞病。

蘋果;蠅糞病;毒力測定;氟硅唑;硝苯菌酯;抑霉唑;苯醚甲環(huán)唑

蠅糞病是蘋果的主要病害之一，在美國東南部發(fā)生嚴(yán)重[1]，中國云南和四川也比較常見[2]。筆者調(diào)查發(fā)現(xiàn)，該病在張家口市也有零星發(fā)生，以涿鹿縣南部蟒石口鄉(xiāng)最為嚴(yán)重，當(dāng)?shù)爻O果外，梨、山楂、海棠和葡萄等也有類似癥狀[3]。病菌形成蠅糞或略大的圓形小黑點(diǎn)，附著在果實(shí)表面，往往數(shù)十個(gè)聚集成片，重者布滿整個(gè)果面，難以擦去，且常常與黑色的煤污病混發(fā)，雖對產(chǎn)量和品質(zhì)影響不大，但嚴(yán)重影響賣相，降低蘋果的商品性[4]。

由于主要危害果實(shí)，故套袋是防治此病最有效、簡便和環(huán)保的措施。但隨著農(nóng)村勞動(dòng)力的下降及蘋果樹種植面積的增加，套袋的人工成本越來越高，已占到種植總成本的1/3多，故不再套袋已是大勢所趨(國家蘋果產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系內(nèi)部資料)。清除病殘?bào)w、芽前噴灑石硫合劑和收獲后噴灑有機(jī)殺菌劑等，有利于降低菌量，減輕病害發(fā)生，但許多果園實(shí)際上很少進(jìn)行[5，6]。這樣，生長期噴藥就成了最主要的防治措施。和鳴等[2]認(rèn)為，生長期噴灑2次百菌清或波爾多液防效可達(dá)90%以上。但波爾多液在陰雨天和幼果期易產(chǎn)生藥害，后期對果面有污染，且不宜久置；百菌清為保護(hù)劑，需提前均勻周到施用才能達(dá)到效果。因此，有必要篩選出新型低毒高效的內(nèi)吸性殺菌劑，以應(yīng)對摘袋可能導(dǎo)致的病害加重。

三唑類殺菌劑是20世紀(jì)70年代后開發(fā)的新型藥劑，可阻止真菌細(xì)胞膜上甾醇的合成，具有內(nèi)吸、保護(hù)和治療作用，抗藥性產(chǎn)生慢，因而廣泛用于子囊菌、擔(dān)子菌等真菌所致病害的防治[7]。甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑出現(xiàn)在20世紀(jì)90年代后，作用于真菌的線粒體呼吸鏈中的細(xì)胞色素bel復(fù)合物，阻止電子傳遞從而抑制真菌生長，具有保護(hù)、治療、鏟除和滲透作用，殺菌譜廣、市場前景廣闊[8]。目前尚未發(fā)現(xiàn)2類殺菌劑應(yīng)用于蘋果蠅糞病防治的報(bào)道。故本試驗(yàn)在前人工作的基礎(chǔ)上，選擇4種三唑類和2種甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑，在室內(nèi)對蘋果蠅糞病菌的毒力進(jìn)行測定，為病害田間防治奠定理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料供試藥劑

1)400 g·L-1氟硅唑乳油(商品名：福星)，美國杜邦農(nóng)化有限公司生產(chǎn)；2)36%硝苯菌酯乳油(商品名：卡拉生)，美國陶氏益農(nóng)公司生產(chǎn)；3)500 g·L-1抑霉唑乳油(商品名：維鮮)，比利時(shí)楊森制藥公司生產(chǎn)；4)10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑(商品名：世高)，瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司生產(chǎn)；5)4%四氟咪唑水乳劑(商品名：朵麥可)，意大利意賽格公司生產(chǎn)；6)250 g·L-1吡唑醚菌酯乳油(商品名：凱露)，山東科大創(chuàng)業(yè)生物有限公司生產(chǎn)。

試驗(yàn)菌種：從涿鹿縣蟒石口鄉(xiāng)穆家莊村采集病果，室內(nèi)分離培養(yǎng)獲得，經(jīng)柯赫氏法則驗(yàn)證，確定為蠅類病的病原物。

表1 6種殺菌劑對蘋果蠅糞病菌菌絲生長的抑制作用

1.2 試驗(yàn)方法

本試驗(yàn)采用菌絲生長速率法[9-12]：用無菌水將供試藥劑稀釋成5個(gè)濃度梯度，在無菌操作條件下，吸取3 mL，加入27 mL滅菌后稍冷卻的PDA培養(yǎng)基中，充分搖勻，然后倒入滅菌培養(yǎng)皿，制成含藥平板，每皿10 mL，共3皿，即各處理重復(fù)3次。無菌水為空白對照。在培養(yǎng)好的病原物菌落邊緣打取直徑為0.4 cm的菌餅，接種到含藥平板中央，置25 ℃恒溫箱中培養(yǎng)4 d左右，用十字交叉法測量菌落直徑、計(jì)算抑菌率并轉(zhuǎn)換成幾率值，藥液濃度轉(zhuǎn)換成濃度對數(shù)，以濃度對數(shù)為自變量x、幾率值為因變量y，求得回歸方程y=ax+b，用回歸方程計(jì)算出各藥劑的有效濃度EC50。

2 結(jié)果與分析

在所選6種殺菌劑中，氟硅唑的EC50最小，為0.320 0 μg·mL-1，說明抑制效果最好；硝苯菌酯、抑霉唑和苯醚甲環(huán)唑的EC50分別為0.410 0 μg·mL-1、0.630 0 μg·mL-1和0.800 0 μg·mL-1，略高于氟硅唑，抑菌效果略差；四氟咪唑的EC50值6.250 0 μg·mL-1，約為氟硅唑的19.5倍，吡唑醚菌酯的EC50值15.000 0 μg·mL-1，約為氟硅唑的46.9倍，說明抑菌效果較差。在4種三唑類殺菌劑中，氟硅唑抑制效果最好，其次是抑霉唑和苯醚甲環(huán)唑，四氟咪唑效果最差；2種甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑中，硝苯菌酯的抑菌效果明顯好于吡唑醚菌酯(見表1)。

3 結(jié)論與討論

采用菌絲生長速率法，測定了4種三唑類、2種甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑，對蘋果蠅糞病菌的室內(nèi)毒力。結(jié)果表明，三唑類殺菌劑氟硅唑的抑菌效果最好，其次是甲氧基丙烯酸酯類的硝苯菌酯及三唑類的抑霉唑和苯醚甲環(huán)唑，再次是三唑類的四氟咪唑，甲氧基丙烯酸酯類的吡唑醚菌酯抑菌效果最差。

室內(nèi)毒力測定與田間藥效試驗(yàn)的結(jié)果往往不完全一致。如郭曉峰等[9]發(fā)現(xiàn)，在所選的5種藥劑中，海藻酸對蘋果樹腐爛病菌的室內(nèi)毒力最差，但田間防效卻最好。再如，在司天桃等[13]的試驗(yàn)中，氯溴異氰尿酸對番茄細(xì)菌性潰瘍病的室內(nèi)毒力，在7種藥劑中最差，但在田間試驗(yàn)中則排名第四；53.8%的氫氧化銅在室內(nèi)毒力測定中排名第四，在田間試驗(yàn)中則排名第二；46%的氫氧化銅，無論室內(nèi)毒力測定還是田間藥效試驗(yàn)，效果均最好。所以，室內(nèi)毒力測定的結(jié)果可以參考，在田間的防治效果仍需試驗(yàn)證實(shí)。

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[責(zé)任編輯：劉守義 英文編輯：劉彥哲]

Toxicological Test of 6 Fungicides Against Apple Flyspeck in Laboratory

YUAN Jun-hai1,HAN Cui-xian1,GAO Qing-yun1,QIAO Bing1,CAO Ke-qiang2

(1.School of Agriculture and Forestry Science and Technology,Heibei North University,Xuanhua,Hebei 075131，China; 2.College of Plant Protection,Hebei Agricultural University,Baoding,Hebei 071001,China)

Objective To screen novel high efficiency fungicides with low toxicity for the treatment of apple flyspeck.Method By means of mycelium growth,4 triazoles and 2 strobilurins were selected into toxicological test against apple flyspeck in vitro.Results The EC50of flusilazole,0.3200 μg·mL-1,showed the best inhibiting effect；and the next were famoxadone,imazalil and difenoconazole,with EC500.4100 μg·mL-1, 0.6200 μg·mL-1and 0.8000 μg·mL-1，respectively；and the third was tetraconazole,with EC506.2500 μg·mL-1,and the EC50of pyraclostrobin,15.0000 μg·mL-1,presented the worst inhibiting effect.Conclusion Flusilazole,famoxadone,imazalil and difenoconazole were recommended for the control of apple flyspeck.

apple;flyspeck;toxicological test;flusilazole;famoxadone;imazalil;difenoconazole

國家蘋果產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項(xiàng)目(CARS-28)；公益性行業(yè)專項(xiàng)果樹腐爛病防控技術(shù)研究與示范(201203034)

袁軍海(1969-),男，河北無極縣人，教授，博士，主要從事植物抗病性與病害流行研究。

S 436.611

A

10.3969/j.issn.1673-1492.2017.01.012

來稿日期：2016.05.20