(河南省信陽市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河南信陽464000)

河南信陽副豬嗜血桿菌病血清流行病學(xué)調(diào)查

馬超鋒

(河南省信陽市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河南信陽464000)

為了解信陽市副豬嗜血桿菌(Haemophilus parasuis，Hps)感染情況，應(yīng)用IHA方法對(duì)113家豬場(chǎng)的3 589份血樣進(jìn)行了調(diào)查。結(jié)果顯示，副豬嗜血桿菌病陽性豬場(chǎng)71個(gè)，占受檢測(cè)豬場(chǎng)總數(shù)的62.8%，血清樣品總體陽性率為21.0%，其中，母豬、公豬、哺乳仔豬、保育豬及育肥豬陽性率分別為21.8%、19.9%、18.3%、23.9%和19.9%。檢測(cè)結(jié)果顯示，各個(gè)生長(zhǎng)階段豬群感染率差異不顯著，Hps感染率季節(jié)性差異不顯著。鑒于Hps在信陽市已普遍存在，今后要加強(qiáng)對(duì)該病的防控，有效控制其流行。

副豬嗜血桿菌;正向間接血凝試驗(yàn);感染率;調(diào)查

副豬嗜血桿菌病是由副豬嗜血桿菌(Hps)引起的豬的多發(fā)性漿膜炎和關(guān)節(jié)炎，該病于1902年由Glasser首次報(bào)道，呈世界性分布，是對(duì)豬群危害極大的一種動(dòng)物疫病。副豬嗜血桿菌是豬上呼吸道常在菌，在機(jī)體遭受應(yīng)激或感染病毒性疾病(如豬瘟、高致病性豬藍(lán)耳病、豬圓環(huán)及豬瘟等)導(dǎo)致機(jī)體免疫力下降時(shí)可引起發(fā)病，屬于典型的“機(jī)會(huì)性”病原［1］。Hps主要通過空氣傳播，一年四季均可感染，2周齡到4月齡的豬易感，以5～8周齡斷奶后和保育階段豬群多發(fā)。Hps發(fā)病率一般在10%～15%，嚴(yán)重時(shí)死亡率可達(dá)50%以上。發(fā)病豬主要臨床癥狀為咳嗽、發(fā)熱、呼吸困難、關(guān)節(jié)腫大、跛行及被毛粗亂至最后消瘦而死，病例剖檢可見胸膜炎、心肌炎、腹膜炎、多發(fā)性漿膜炎、關(guān)節(jié)炎和腦膜炎等變化。Hps血清型復(fù)雜，應(yīng)用瓊脂擴(kuò)散血清分型方法至少可將Hps分為15個(gè)血清型，另外還有20%以上的菌株無法定型，我國(guó)流行的血清型以1、4、5型和13型為主，河南的以4型和5型居多［2］。信陽作為河南省養(yǎng)豬大市，生豬存欄量和出欄量居全省前列，Hps對(duì)我市豬群健康危害極大，每年給豬場(chǎng)帶來較大的經(jīng)濟(jì)損失。為了解我市豬群副豬嗜血桿菌感染情況和流行概況，信陽市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心組織人員歷時(shí)21個(gè)月采用正向間接血凝試驗(yàn)對(duì)我市豬場(chǎng)進(jìn)行調(diào)查，為防控副豬嗜血桿菌病提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣品來源2014年3月-2015年11月，3589份待檢血清來自信陽市轄區(qū)內(nèi)平橋區(qū)、浉河區(qū)、光山縣、羅山縣、商城縣、新縣、息縣、潢川縣和淮濱縣未免疫副豬嗜血桿菌疫苗的113家不同規(guī)模豬場(chǎng)的不同生長(zhǎng)階段豬群，所有樣品冷凍保存?zhèn)錂z。

1.2 主要檢測(cè)試劑及儀器副豬嗜血桿菌正向間接血凝診斷試劑盒，購自中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所;TDZ5-WS臺(tái)式低速離心機(jī)(長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司);Eppendorf 10－1000 μL單道移液器及25－300 μL多道移液器(德國(guó)Eppendorf公司);微量振蕩器;303系列電熱恒溫培養(yǎng)箱(上海樹立儀器儀表有限公司)。

1．3 方法副豬嗜血桿菌病抗體檢測(cè)采用正向間接血凝試驗(yàn)(IHA)，檢測(cè)方法按照試劑盒說明書內(nèi)容進(jìn)行。

副豬嗜血桿菌病抗體檢測(cè)結(jié)果判定:判定標(biāo)準(zhǔn):“++++”紅細(xì)胞全部凝集，形成一層均勻膜，布滿整個(gè)孔底;“+++”紅細(xì)胞在孔底形成一層薄膜，面積比前者稍小;“++”紅細(xì)胞在孔底形成薄膜凝集，邊緣松散或呈鋸齒狀;“+”紅細(xì)胞在孔底呈稀薄、散在、少量凝集，孔底有小圓點(diǎn);“+”紅細(xì)胞沉于孔底，但周圍不光滑或中心有空斑;“－”紅細(xì)胞完全沉于孔底，呈光滑的圓點(diǎn);“++”以上凝集者判為陽性。

在陽性對(duì)照血清滴度不低于1∶128(第7孔)，陰性對(duì)照血清除第1孔允許存在前滯現(xiàn)象(+)外，其余各孔均為(－)，稀釋液對(duì)照為(－)的前提下，對(duì)被檢血清進(jìn)行判定，否則應(yīng)重試。

被檢血清判定標(biāo)準(zhǔn)血清效價(jià)≥1∶8(++)者判為陽性，效價(jià)≤1∶4者判為陰性。

數(shù)據(jù)分析采用SPSS19.0軟件分析檢測(cè)結(jié)果，利用χ2檢驗(yàn)分析數(shù)據(jù)差異顯著性，P＜0.05時(shí)差異顯著，P＜0.01差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 不同縣區(qū)豬場(chǎng)副豬嗜血桿菌流行病學(xué)調(diào)查情況見表1。

表1 樣品來源及Hps檢測(cè)情況

本次副豬嗜血桿菌病調(diào)查共檢測(cè)豬場(chǎng)113個(gè)，陽性場(chǎng)71個(gè)，陽性場(chǎng)率為62．8%，統(tǒng)計(jì)分析表明，各縣區(qū)間豬場(chǎng)陽性率差異極顯著(P＜0.001)，其中平橋區(qū)陽性場(chǎng)率最高，為76.9%，其次為商城縣的73.3%，最低的息縣為53.8%;檢測(cè)樣品3 589份，樣品陽性率為21%，各縣區(qū)之間樣品陽性率差異極顯著(P＜0.001)，息縣檢出率最高為26%，最低的新縣為14.3%。

2．2 不同類別豬群副豬嗜血桿菌流行病學(xué)調(diào)查情況見表2。

表2 不同類別豬群Hps檢測(cè)情況

本次副豬嗜血桿菌感染情況調(diào)查覆蓋母豬、公豬、哺乳仔豬、保育豬和育肥豬5個(gè)生長(zhǎng)階段豬群，能夠較好的反映出我市Hps感染狀況。由表2可知，保育階段豬群感染率最高，為23．9%;母豬、育肥豬、公豬次之，分別為21．8%、19．9%、19．9%;哺乳仔豬最低為18．3%。

統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果表明，5個(gè)生長(zhǎng)階段Hps陽性率不存在顯著差異(P=0.07)。

2．3 不同季節(jié)副豬嗜血桿菌流行病學(xué)調(diào)查情況見表3。

表3 不同月份豬群Hps檢測(cè)情況

由表3可以看出，全年各個(gè)月份均有Hps陽性檢出，其中，7月份Hps感染率最高，達(dá)到26．2%，8月份次之，為24.0%;3月份感染率最低，為16.0%，1月份次低，為16．9%。對(duì)不同月份Hps感染率進(jìn)行χ2檢驗(yàn)分析差異顯著性，各月份間Hps感染率不存在顯著差異(P=0.088)

3 討論與分析

3.1 副豬嗜血桿菌是我國(guó)造成哺乳和保育階段仔豬感染、死亡的重要原發(fā)或繼發(fā)病原，特別是在飼養(yǎng)管理?xiàng)l件不好的豬場(chǎng)能夠造成豬只的大量死亡，給豬場(chǎng)帶來較大的經(jīng)濟(jì)損失。由于副豬嗜血桿菌十分嬌嫩，實(shí)驗(yàn)室細(xì)菌分離與檢測(cè)比較困難［3］。本次調(diào)查了信陽市七縣兩區(qū)113個(gè)不同規(guī)模豬場(chǎng)，能夠代表我市Hps的感染情況。從檢測(cè)結(jié)果來看，副豬嗜血桿菌在我市豬場(chǎng)中場(chǎng)感染率為62.8%，說明該病在我市普遍存在，這與吳鳳筍等［2］2012年調(diào)查的河南省部分豬場(chǎng)感染率41.7%(25/60)高將近20個(gè)百分點(diǎn)，低于新疆石河子(91.67%)［4］、河北唐山(100%)［5］很多。本次調(diào)查3 589份樣品，平均個(gè)體感染率為21.0%，比吳鳳筍等［2］2012年調(diào)查的河南省部分豬場(chǎng)感染率31.25%低10個(gè)百分點(diǎn)，比王海玉［6］2014年調(diào)查的河南洛陽感染率47.2%低20多個(gè)百分點(diǎn)，比韓瑞明［7］調(diào)查的河南濮陽的14.8%高6個(gè)百分點(diǎn);與國(guó)內(nèi)其他省份相比，低于新疆石河子(60.30%)［4］、河北唐山(52.30%)［5］，高于福建(6.5%)［8］、四川(10%)［9］、重慶渝西地區(qū)(12.75%)［10］，與廣東(23.8%)［12］、青海(25.19%)［13］相近。分析造成信陽市副豬嗜血桿菌感染率較高的原因:一是盲目引種，而對(duì)所引豬群健康狀況缺少了解;二是飼養(yǎng)管理水平不高，我市大部分豬場(chǎng)規(guī)模不大，缺乏有效的生物安全管理措施，應(yīng)激發(fā)病因素較大;三是重治療輕防疫。

3．2 本次調(diào)查的5個(gè)生長(zhǎng)不同階段豬群均有Hps陽性檢出。母豬、公豬、哺乳仔豬、保育豬及育肥豬陽性率分別為21.8%、19.9%、18.3%、23.9%和19.9%，保育豬感染率最高，但不同階段豬群陽性率差異不顯著(P=0.07，P＞0.05)。臧瑩安［11］的研究發(fā)現(xiàn)，母豬、保育豬和育肥豬陽性率分別為31%、29%、33.6%，育肥豬陽性率高于其他階段豬群;逯忠新［12］調(diào)查結(jié)果顯示，后備母豬感染率最高，為35.56%，其次為育肥豬的32%和保育豬的31.58%;馮小明［9］的研究表明，保育豬感染率最高，為25%，與本次調(diào)查結(jié)果相近。Hps雖然感染率較高，但在大群臨床上不表現(xiàn)明顯癥狀，基本上都是隱性感染，主要在育肥和保育階段發(fā)病較多，出現(xiàn)四肢關(guān)節(jié)腫大及多發(fā)性漿膜炎，如果混合感染圓環(huán)病毒或藍(lán)耳病，則會(huì)出現(xiàn)皮膚藍(lán)紫色、咳嗽、氣喘等癥狀。分析造成該階段豬群Hps發(fā)病較多的原因如下:1，當(dāng)前免疫抑制性疾病在豬場(chǎng)普遍存在，如PCV-2、PRRS及PR等，會(huì)使豬群的抵抗力和免疫力下降，從而造成副豬嗜血桿菌病的發(fā)生;2，更換飼料、斷奶、氣候變化及轉(zhuǎn)群等應(yīng)激因素都可誘發(fā)Hps的發(fā)生。

3．3 從本次調(diào)查結(jié)果看，Hps一年四季均可感染豬群，7－9月份感染率最高，12－3月份感染率最低，不同月份間有差異，但差異不大。臧瑩安［11］的研究發(fā)現(xiàn)，冬季Hps陽性檢出率高于秋季;馮小明［9］的調(diào)查顯示，Hps發(fā)病率秋冬季節(jié)明顯要高于夏秋季節(jié)，均與本次調(diào)查結(jié)果不同。分析信陽市Hps感染率夏季高于秋冬季節(jié)原因:本市豬場(chǎng)規(guī)模不大，環(huán)境條件較差，技術(shù)設(shè)施落后，缺乏有效的保溫、降溫、降濕及通風(fēng)設(shè)備;免疫程序混亂，購買的種豬往往攜帶有病原體;夏季高溫高濕，豬群易受外界不良環(huán)境影響，誘發(fā)嚴(yán)重的應(yīng)激，造成發(fā)病。

3．4 鑒于副豬嗜血桿菌病對(duì)養(yǎng)豬業(yè)的危害，我們必須采取綜合性措施來防控該病的發(fā)生:對(duì)副豬嗜血桿菌病發(fā)病較嚴(yán)重的豬場(chǎng)實(shí)施免疫接種。目前，市場(chǎng)上國(guó)內(nèi)外廠家生產(chǎn)的Hps疫苗眾多，Hps的血清型比較多，目前已知有15個(gè)血清型，且不同血清型的菌株之間缺乏交叉保護(hù)，因此選擇適合本場(chǎng)血清型的疫苗非常重要。改善飼養(yǎng)管理?xiàng)l件。豬群實(shí)行“全進(jìn)全出”的生產(chǎn)模式，調(diào)整飼養(yǎng)密度、減少應(yīng)激、加強(qiáng)場(chǎng)舍及豬場(chǎng)周圍環(huán)境的消毒，發(fā)現(xiàn)發(fā)病豬只立即淘汰、隔離飼養(yǎng)直至出欄。選擇敏感性藥物(如阿莫西林、替米考星等)定期給全群預(yù)防性投用，對(duì)于耐藥性豬場(chǎng)，可以通過藥敏試驗(yàn)篩選適合本場(chǎng)的藥物。

［1］王建，邵衛(wèi)星，呂占軍，等．2012年我國(guó)部分省市規(guī)?；i場(chǎng)副豬嗜血桿菌分離鑒定及菌株血清分型［J］．動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2014，35(3):48-52．

［2］吳鳳筍，李文剛，張桂云，等．河南副豬嗜血桿菌病流行病學(xué)調(diào)查［J］．中國(guó)獸醫(yī)雜志，2012，48(10):9-12．

［3］Ikjae Kang，Duyeol Kim，Kiwon Han，et al．Optimized protocol for multiplex nested polymerase chain reaction to detect and differentiate Haemophilus parasuis，Streptococcus suis，and Mycoplasma hyorhinis in formalin-fixed，paraffin-embedded tissues from pigs with polyserositis［J］．Can J Vet Res，2012，76(3):195-200．

［4］李大明，聶疆，李石，等．石河子部分規(guī)模豬場(chǎng)副豬嗜血桿菌病的血清學(xué)調(diào)查［J］．黑龍江畜牧獸醫(yī)，2012，17:95-96．

［5］李天艷，穆懷明，張子佳，等．唐山地區(qū)規(guī)模豬場(chǎng)副豬嗜血桿菌病流行情況調(diào)查［J］．中國(guó)動(dòng)物保健，2012，08:17-19．

［6］王海玉．洛陽地區(qū)副豬嗜血桿菌病的血清流行病學(xué)調(diào)查分析［J］．河南農(nóng)業(yè)，2014，11:45-46．

［7］韓瑞明．河南省濮陽市副豬嗜血桿菌病的診斷與防治［D］．南京:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，2007．

［8］賀英，趙萍，儲(chǔ)岳峰，等．福建省部分地區(qū)副豬嗜血桿菌病的流行病學(xué)調(diào)查［J］．貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，02:130-131．

［9］馮小明，薛慧文，儲(chǔ)岳峰，等．四川省部分地區(qū)副豬嗜血桿菌血清學(xué)調(diào)查［J］．貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，08:135-136+139．

［10］魏光河，黃偉．重慶市渝西地區(qū)副豬嗜血桿菌的血清學(xué)調(diào)查及藥敏比較試驗(yàn)［J］．中國(guó)獸醫(yī)科學(xué)，2012，42(12):1302-1308．

［11］臧瑩安，龐木生，黃彩梅，等．廣東部分豬場(chǎng)副豬嗜血桿菌病的流行病學(xué)調(diào)查［J］．中國(guó)獸醫(yī)雜志，2012，48(4):18-20．

［12］逯忠新，高鵬程，賀英，等．青海省部分地區(qū)副豬嗜血桿菌流行病學(xué)研究［J］．華北農(nóng)學(xué)報(bào)，2009，S1:236-239．

S852．61

B

0529-6005(2017)01-0039-04

2015-12-31

信陽市科技攻關(guān)項(xiàng)目

馬超鋒(1981-)，男，高級(jí)獸醫(yī)師，碩士，主要從事動(dòng)物疫病防治工作，E-mail:machaofeng5@163．com