李美珠，林 靜

（佛山市第一人民醫(yī)院，廣東 佛山 528000）

宮頸癌屬于比較常見的女性惡性腫瘤疾病，近年來，患者的發(fā)病人數(shù)不斷增多，加強(qiáng)對此類患者的篩選具有必要性，而人乳頭瘤病毒檢查屬于篩選宮頸癌的重要手段，檢驗(yàn)人乳頭瘤病毒的方法有多種[1]。筆者研究樣本資料是2014年4月～2017年4月本院收治的100例宮頸炎或是疑似人乳頭瘤病毒感染的患者，研究將PCR熒光法和PCR-反向點(diǎn)雜交法應(yīng)用于人乳頭瘤病毒檢驗(yàn)的效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料

筆者將2014年4月～2017年4月本院收治的100例宮頸炎或是疑似人乳頭瘤病毒感染的患者歸于研究樣本，年齡21～58歲，計(jì)算并統(tǒng)計(jì)年齡平均值是（34.33±2.05）歲。

1.2 方法

PCR-反向點(diǎn)雜交法檢驗(yàn)方法：能檢出十八種高危型人乳頭瘤病毒DNA亞型及五種低危型人乳頭瘤病毒DNA亞型，應(yīng)用的引物是HPV L1基因，基因有452bp。應(yīng)用的引物MY 09序列是5'-CGTCCMARRG-GAWACTGATC-3'，應(yīng)用的引物MY l1序列是5'-GCMCAGGGWCATAAYAATGG-3'，其中，M代表A加C，R代表A加G，W代表A加T，Y代表C加T。依據(jù)試劑盒相關(guān)說明書執(zhí)行相關(guān)操作步驟，主要是含有DNA的提取步驟、PCR擴(kuò)增步驟、雜交步驟、洗膜步驟、顯色步驟。PCR熒光法檢驗(yàn)方法：能檢出十三種高危型人乳頭瘤病毒DNA亞型，相關(guān)操作步驟主要是，DNA的提取步驟、PCR擴(kuò)增步驟(總的反應(yīng)體系有25ul，DNA的模板有2ul)。相關(guān)循環(huán)參數(shù)是94℃預(yù)變性5分鐘，94℃保持15秒，60℃保持45秒，開展四十個(gè)循環(huán)。

1.3 指標(biāo)觀察

（1）統(tǒng)計(jì)100例宮頸炎或是疑似人乳頭瘤病毒感染的患者不同檢驗(yàn)方法的陽性檢出合計(jì)值。（2）統(tǒng)計(jì)100例宮頸炎或是疑似人乳頭瘤病毒感染的患者不同檢驗(yàn)方法的結(jié)果符合總計(jì)值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS21.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，采用x2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以例數(shù)（n）、采用百分?jǐn)?shù)（%）表示，采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 100例患者不同檢驗(yàn)方法的陽性檢出合計(jì)值比較

PCR-反向點(diǎn)雜交法檢驗(yàn)的陽性檢出合計(jì)值29.00%與PCR熒光法檢驗(yàn)17.00%相對比更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表1 100例患者不同檢驗(yàn)方法的陽性檢出合計(jì)值對比

2.2 100例患者不同檢驗(yàn)方法的結(jié)果符合總計(jì)值

PCR熒光法檢驗(yàn)結(jié)果和PCR-反向點(diǎn)雜交法檢驗(yàn)結(jié)果相對比，檢查陰性符合總計(jì)值是70.00%（14/20），檢查陽性符合總計(jì)值是93.02%（80/86），檢查總符合總計(jì)值是94.00%（94/100）。

表2 100例患者不同檢驗(yàn)方法的結(jié)果符合總計(jì)值分析

3 討 論

宮頸癌具有比較高的發(fā)病率，對宮頸癌患者健康帶來重要危害[2]。而大多數(shù)宮頸癌均是因受到人乳頭瘤病毒的感染而致病，所以，檢測人乳頭瘤病毒屬于對宮頸癌進(jìn)行篩查的重要方式[3-4]。

PCR-反向點(diǎn)雜交法能檢出十八種高危型人乳頭瘤病毒DNA亞型及五種低危型人乳頭瘤病毒DNA亞型，PCR熒光法能檢出十三種高危型人乳頭瘤病毒DNA亞型，PCR-反向點(diǎn)雜交法的檢出范圍更廣，不過，PCR-反向點(diǎn)雜交法屬于定性檢測，一般不可用作治療效果相關(guān)判定指標(biāo)。PCR熒光法一般可用作治療效果相關(guān)判定指標(biāo)，且不需完成分子雜交過程和洗脫過程等，可減少檢測耗時(shí)。筆者結(jié)果呈現(xiàn)，PCR-反向點(diǎn)雜交法檢驗(yàn)的人乳頭瘤病毒陽性檢出合計(jì)值顯著高于PCR熒光法檢驗(yàn)，出現(xiàn)P＜0.05統(tǒng)計(jì)數(shù)值差異，PCR熒光法檢驗(yàn)結(jié)果和PCR-反向點(diǎn)雜交法檢驗(yàn)結(jié)果相對比，檢查陰性符合總計(jì)值是70.00%（14/20），檢查陽性符合總計(jì)值是93.02%（80/86），檢查總符合總計(jì)值是94.00%（94/100）。

綜上所述，PCR熒光法和PCR-反向點(diǎn)雜交法用于人乳頭瘤病毒檢驗(yàn)具有比較高的相符性，而且，PCR-反向點(diǎn)雜交法檢驗(yàn)的陽性檢出率更高。

[1] 馮瑞梅,陳 汶,喬友林,等.高危型人乳頭瘤病毒核酸體外檢測試劑盒臨床功能驗(yàn)證的中美指導(dǎo)原則解讀[J].中華腫瘤雜志,2017,39(7):553-557.

[2] 余花艷,任統(tǒng)偉.人乳頭瘤病毒感染宮頸疾病患者外周血中MDSC、Treg、Th17細(xì)胞變化研究[J].中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志,2017,37(8):586-593.

[3] 趙旭曄,崔 勇,姜淑芳,等.高危型人乳頭瘤病毒E6/E7mRNA檢測在宮頸癌篩查中的意義[J].中華醫(yī)學(xué)雜志,2014,94(43):3432-3435.

[4] 張 洋,胡爾西旦·尼亞孜,趙化榮,等.新疆不同民族頭頸部鱗狀細(xì)胞癌組織中人乳頭瘤病毒的感染情況及病毒載量分析[J].中華腫瘤雜志,2014,36(11):849-850.