分子生物學方法在食品微生物檢測中的應用
近年來,我國曝光出一系列食品安全事件,造成消費者嚴重的恐慌,對食品安全問題關注程度逐漸提升。微生物污染作為一項嚴重的食品污染問題,可能導致食物變質,引發(fā)食物中毒,所以為了避免這一問題的發(fā)生,應采取科學、合理的方法,對食物進行檢測,以此保證食物的安全。分子生物學方法與食品病原微生物傳統(tǒng)檢測方法相比具有良好的優(yōu)勢,大大提高了食品微生物檢測水平。
分子生物學方法是指通過分子水平,深入研究細胞成分的理化性質,同時還應對細胞成分變化下的生命現(xiàn)象進行研究。在食品微生物檢測中,采用分子生物學方法,包括許多的常用技術,主要有以下幾種技術:PCR技術。采用PCR技術進行檢測時,其理論基礎為變性和復性,在使用該技術時在體外使用DNA聚合酶,并結合引物引導和dNTP使用,通過對引物引導和dNTP使用,可以使得模板在數(shù)小時內得到百萬倍的擴增,同時可以使DNA進行選擇和放大,因此增強了食品檢測的準確性以及及時性。因此PCR技術在食品檢測中應用得越來越廣泛。但是需要注意的是,想要提高PCR技術的水平,必須對引物進行合理的設計,同時應對靶序列進行準確選擇,這樣可以有效保證檢測的特性以及靈敏性,保證結果的準確性。在PCR技術基礎之上進行發(fā)展,獲得了熒光定量PCR技術,該技術可以實現(xiàn)定時定量檢測,因此與原有的PCR技術相比,檢測更加的快速、準確。熒光定量PCR技術可以直接測定PCR期間變化的熒光信號,同時通過對專用軟件動態(tài)監(jiān)測的應用,對擴增產物進行自動定量,以此保證獲得的檢測結果更加及時、準確。在對阪崎腸桿菌、沙門氏菌以及乳酸菌等微生物檢測過程中,經(jīng)常采用熒光定量PCR技術。核酸探針技術。核酸探針技術是一種重要地檢測技術,也可以稱為核酸交雜法。在檢測過程中,主要通過結合某微生物核算以及DNA,實現(xiàn)對微生物的檢測。具體是在被檢、已變形的DNA樣品中,加入DNA探針,實現(xiàn)DNA樣品與同源序列相同DNA區(qū)段進行雜交,以此完成檢測。在乳酸菌、產腸毒素以及沙門氏菌等檢測中,經(jīng)常使用核酸探針技術,由于該技術具有無放射性以及特異的特點,因此具有良好的應用前景。基因芯片技術與核酸探針技術原理相似,在檢測過程中,基因芯片技術通過對顯微打印,采用核算探針,將其固化在支持物的表面,并使得核算探針與標記樣品進行雜交,以此實現(xiàn)快速檢測。該技術具有許多的優(yōu)勢,包括高精密度、精確度以及靈敏度等,在有害微生物檢測過程中,基因芯片技術是最為有效的方法之一。DNA指紋圖譜技術。DNA指紋圖譜技術還包括RAPD技術、DGGE技術等,其中RAPD技術,在檢測過程中,通過PCR反應,在隨機引物的作用下進行DNA的擴增,并獲得一定數(shù)量和大片段DNA,并對其進行分析,對食品微生物類型進行確定。采用DCGE技術進行檢測時,首先應對食品中的RNA或DNA進行提取以及擴增同時利用凝膠電泳的合理使用,獲得有效的譜帶,并通過分析獲得檢測結果。
目前我國食品安全問題是人們的關注重點,食品微生物檢測對人們的生命健康具有重要影響,所以在食品微生物檢測過程中,應合理采用食品微生物檢測方法,保證食品微生物檢測的精度,不斷提高分子微生物檢測水平,以此保障食品安全,進而促進我國和諧發(fā)展。
□劉倩瑛 湖北出入境檢驗檢疫局技術中心