駱宏機(jī)
(惠州仲愷高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)中心,廣東惠州 516006)
小鵝瘟的臨床癥狀及綜合防控措施
駱宏機(jī)
(惠州仲愷高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)中心,廣東惠州 516006)
小鵝瘟是由小鵝瘟細(xì)小病毒引起的主要侵害20日齡以內(nèi)雛鵝或番鴨的一種急性、敗血性傳染病,具有傳播快、發(fā)病率高、死亡率高的特點(diǎn)。其臨床萎靡不振、腸道敗血等癥狀。本文從病理角度、臨床分析等方面多方位研究,并根據(jù)研究結(jié)果提出了加強(qiáng)關(guān)鍵設(shè)施消毒、加強(qiáng)疫苗免疫等方法,用預(yù)防和控制雙結(jié)合的方式解決小鵝瘟防治的問(wèn)題。
小鵝瘟 臨床癥狀 預(yù)防控制
南方土地少,多水網(wǎng),有養(yǎng)殖水禽的習(xí)慣。往往一個(gè)魚(yú)塘要養(yǎng)上一批鵝或鴨子,實(shí)現(xiàn)魚(yú)禽混養(yǎng),起到綜合利用的效果。此類養(yǎng)殖模式有效提高了土地利用率,提高了經(jīng)濟(jì)效益,但是在養(yǎng)殖過(guò)程中也伴隨著疫病的多樣化。小鵝瘟是一種發(fā)病率極高的鵝細(xì)小病毒引起雛鵝和雛番鴨的一種高度接觸性和致死性的急性敗血性[1]傳染病,主要染病鵝群年齡為3~30日齡的雛鵝。在我國(guó),該病毒發(fā)病范圍大、傳播速度快、死亡率高,難以得到有效控制,是危害水禽養(yǎng)殖業(yè)穩(wěn)步發(fā)展的最嚴(yán)重的傳染病之一,發(fā)病嚴(yán)重時(shí)可造成大量經(jīng)濟(jì)損失,更甚者導(dǎo)致養(yǎng)殖場(chǎng)鵝群90%~100%的死亡。
小鵝瘟于1956年由我國(guó)著名生物學(xué)家方定一教授首次于揚(yáng)州市的水禽群體中發(fā)現(xiàn)。1961年從病死雛鵝體中提取到病毒,并對(duì)病毒的各種特性進(jìn)行了全面的深入研究。1966年匈牙利科學(xué)家Derzsy’s用鵝胚首次分離到病毒,1974年,世界家禽協(xié)會(huì)將該水禽類流行病命名為Derzsy’s病,在中國(guó)我們習(xí)慣稱為小鵝瘟。
小鵝瘟病毒按照傳統(tǒng)生物學(xué)分類是屬于細(xì)小病毒科細(xì)小病毒屬,病毒顆粒直徑在20~22nm之間,不能凝集禽類、哺乳動(dòng)物和人類的紅細(xì)胞,病原具有相對(duì)單一性。病毒對(duì)外界因素的抵抗力很強(qiáng),能抵抗氯仿、胰酶、乙醚、P H3等化學(xué)試劑和56℃下3h作用處理,-20℃環(huán)境下能存活2年??乖治霰砻?,國(guó)內(nèi)外所有GPV分離株屬于同一個(gè)血清型。GPV可在鵝胚、番鴨胚及其細(xì)胞上適應(yīng)和培養(yǎng)。
小鵝瘟病毒生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)感染雛鵝或雛番鴨實(shí)驗(yàn),病毒在體內(nèi)呈廣泛分布,尤其在肝臟、脾臟、哈德斯腺、胸腺和法氏囊中病毒含量較高。因此,感染個(gè)體的心臟、肝臟、脾臟、腦及腸管和腸內(nèi)容物均可用于病毒分離。病毒制樣后在37℃恒溫箱內(nèi)孵育30min,接種12~15日齡鵝胚絨毛尿囊膜(CAM)或尿囊腔,接種后3~7d,鵝胚死亡。死亡鵝胚病變表現(xiàn)為CAM增厚并有灰白色壞死點(diǎn),鵝胚全身充血,翅尖、趾、頸部和喙旁有嚴(yán)重的出血點(diǎn)。肝臟出血,心肌、后腦出血,頭部、頸部及兩肋皮下均有水腫。
根據(jù)發(fā)病癥狀和速度可分為最急性、急性、亞急性三種。最急性型常發(fā)生在1周內(nèi)的雛鵝,癥狀為急性敗血癥狀,潛伏期為3~5d,病程只有1d左右,感染個(gè)體表現(xiàn)為精神萎靡、反應(yīng)遲鈍、絕食等癥狀后即告死亡,死亡率可達(dá)100%。1~2周內(nèi)發(fā)病個(gè)體,通常表現(xiàn)為急性型,表現(xiàn)為步態(tài)不穩(wěn),或者伏地不肯起立;呼吸困難,鼻孔流漿液性分泌物;伴隨有腹瀉,排泄物呈現(xiàn)黃綠色或灰白色米泔水糊狀并混有氣泡,肛門(mén)突出被毛潮濕并帶黏稠性;1~2d陸續(xù)死亡,瀕死前頭頸伏地、兩支麻痹,或?yàn)l死前扭頸抽搐,或是出現(xiàn)勾頭、仰頭、角弓反張等神經(jīng)癥狀。亞急性型通常出現(xiàn)在2周齡以上發(fā)病個(gè)體身上,尤其是3~4周齡雛鵝,以精神萎靡不振、反應(yīng)遲鈍、縮頭垂翅、消瘦和拉稀為主,病程為3~5d或更長(zhǎng),個(gè)別能自行康復(fù)。
不同類型癥狀的發(fā)病個(gè)體略有不同。最急性小鵝瘟的特征性病變剖檢不明顯,主要是小腸發(fā)生急性卡他性-纖維素性壞死性腸炎。急性型解剖病變樣本發(fā)現(xiàn)腸管外觀極度膨脹,質(zhì)地堅(jiān)實(shí),長(zhǎng)約2~15cm開(kāi)后可見(jiàn)灰色或淡黃色的栓子將腸管全部塞滿,有異味。切開(kāi)栓子,中心為深褐色干燥的腸內(nèi)容物,外面包圍有纖維素性滲出物和壞死物凝固形成的外衣。心臟變圓,心肌松軟,肝臟腫大,瘀血,胰腺充血,脾臟瘀血或充血,膽囊腫大。有些病例在小腸內(nèi)形成帶狀,似絳蟲(chóng)樣纖維素性凝固物。小腸黏膜與假膜脫落后,仍保持其光滑的表面,無(wú)潰腸,腸壁菲薄,結(jié)構(gòu)完全破壞。腸壁平滑肌纖維發(fā)生實(shí)質(zhì)變性和空泡變性以致蠟樣壞死。直腸黏膜腫脹充血,有明顯的出血點(diǎn)或出血斑。
小鵝瘟病毒可以感染各種鵝類,包括白鵝、灰鵝、獅頭鵝雁鵝及番鴨。南方地區(qū)多發(fā)生在春夏季節(jié),小鵝瘟主要發(fā)生于3~30日齡雛鵝。雛鵝通常3~5日齡發(fā)病,2~3d速蔓延至全群,在7~10日齡發(fā)病率和死亡率達(dá)到高峰,死亡率在50%以上,甚至更高,以后逐漸下降。年齡大的感染群體,其病癥較輕,感染時(shí)間較長(zhǎng)。病雛鵝和帶毒的成年鵝是本病的主要傳染源,在自然條件下,主要是通過(guò)消化道感染。另外,本病可以通過(guò)種蛋傳播,被帶毒污染的種蛋孵化室和孵化器材對(duì)該病的傳播起到很關(guān)鍵的作用。采食被病鵝、帶毒鵝排泄物污染的飼料、飲水及接觸被污染的用具和環(huán)境(如鵝舍、炕坊等)都可以引起本病的傳播。
根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀和解剖樣品,小鵝瘟一般不難做出診斷,但GP的發(fā)生特點(diǎn)已變得不典型,GP過(guò)去一般多發(fā)生在3周齡以下的雛鵝,現(xiàn)在其發(fā)病年齡有增大的趨勢(shì),出現(xiàn)非典型或者潛伏感染的現(xiàn)象,常規(guī)診斷方法難以確診。GP的確診需要借助實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的檢查,用于本病實(shí)驗(yàn)室診斷的方法有:病毒分離、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、ELISA、免疫熒光、中和試驗(yàn)、免疫電鏡、核算探針和PCR等。實(shí)驗(yàn)室診斷方法中,單抗介導(dǎo)的間接免疫熒光試驗(yàn)是檢測(cè)該病病原特異、簡(jiǎn)便和快速的診斷方法,能在2h內(nèi)確診。有學(xué)者利用重組VP3蛋白建立了VP3-ELISA,可以快速、特異檢測(cè)鵝GPV或番鴨MDPV感染抗體及監(jiān)測(cè)疫苗免疫抗體。環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(LAMP)是一種簡(jiǎn)單、快速(1~2h)、特異性強(qiáng)和耗費(fèi)低的核算擴(kuò)增技術(shù),可以在等溫條件下一步完成,該方法的檢測(cè)靈敏度達(dá)到28拷貝/μl具有較高的應(yīng)用前景。
近些年,水禽疫病呈上升趨勢(shì),鵝的病毒性疾病除了小鵝瘟以外,又相繼出現(xiàn)了雛鵝新型病毒性腸炎、鵝副黏病毒病、鵝禽流感和鵝的鴨瘟等病,在臨床病例中既有單一感染,也有混合感染,需進(jìn)行鑒別診斷。鮮思美等(2009)建立了檢測(cè)DPV(鴨瘟病毒)、GPV(小鵝瘟病毒)、MDPV(番鴨細(xì)小病毒)和GPMV(鵝副黏病毒)等的基因芯片檢測(cè)方法,該方法對(duì)DPV、GPV、MDPV和GPMV的檢測(cè)具有同步檢測(cè)和鑒別診斷的功能。
要搞好養(yǎng)殖,首先要抓好消毒環(huán)節(jié),不從疫區(qū)引進(jìn)雛鵝和種蛋,對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)及周邊環(huán)境和生產(chǎn)用具進(jìn)行全面徹底的消毒。種蛋在進(jìn)入孵化環(huán)節(jié)要用高錳酸鉀或者甲醛進(jìn)行熏蒸消毒。環(huán)境和場(chǎng)所的消毒,可用強(qiáng)堿性或者強(qiáng)氧化性的消毒水,每周或半個(gè)月進(jìn)行一次全面徹底的消毒,孵化車間的消毒要比其他地方的消毒頻次、消毒濃度高,每次生產(chǎn)前也要消毒紫外線燈消毒處理,將病毒阻隔在外。
(1)種鵝免疫根據(jù)小鵝瘟的流行規(guī)律,免疫種鵝使其后代雛鵝從母鵝體獲得天然被動(dòng)免疫力(即母源抗體)是主要的途徑,即在產(chǎn)蛋前15~30d,以小鵝瘟活疫苗給種鵝行肌肉注射(1 羽份,1ml/只)。從注射疫苗后12~100d,母鵝所產(chǎn)的種蛋孵出的雛鵝,均可獲得抵抗小鵝瘟病毒的堅(jiān)強(qiáng)抵抗力。種鵝在產(chǎn)蛋前30d內(nèi)進(jìn)行2次活疫苗免疫(間隔2周),雛鵝的保護(hù)期可延長(zhǎng)至免疫后5個(gè)月。
(2)雛鵝免疫來(lái)源于非免疫種鵝群或免疫后期種群孵化的雛鵝,在出殼后48h內(nèi),應(yīng)用小鵝瘟活疫苗(SYG41-50株)進(jìn)行免疫,免疫后7d內(nèi)嚴(yán)格隔離飼養(yǎng),防止強(qiáng)毒感染。已感染發(fā)病的雛鵝進(jìn)行免疫注射無(wú)明顯預(yù)防效果。需要注意的是小鵝瘟主要通過(guò)污染孵坊傳播,因此孵坊中的一切用具和設(shè)備在每次使用后,必須進(jìn)行消毒滅源。
(3)目前獲得注冊(cè)并取得生產(chǎn)文號(hào)的小鵝瘟疫苗主要有3種:小鵝瘟活疫苗(SYG26-35株,種鵝用)、小鵝瘟活疫苗(SYG41-50株,雛鵝用)和小鵝瘟活疫苗(GD株,種鵝用)。
(4)新型疫苗研究方面有兩個(gè)方向,一個(gè)是亞單位疫苗,一個(gè)基因工程疫苗。①亞單位疫苗是利用桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)在昆蟲(chóng)細(xì)胞中分別表達(dá)GPV結(jié)構(gòu)蛋白VP1、VP2和VP3,具有良好免疫原性,可作為重組亞單位疫苗。GPVVLPs加入50%礦物油佐劑免疫4日齡雛鵝能產(chǎn)生高滴度的中和抗體,抗體滴度高于滅活疫苗和活疫苗。利用桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)GPV結(jié)構(gòu)蛋白VP2,加佐劑,免疫9日齡番鴨鴨,首次免疫后14d進(jìn)行二次免疫,產(chǎn)生良好抗體應(yīng)答。②基因工程苗。有研究表明pcDNA-GPVVP3免疫雛鵝后能在免疫部位皮膚、心肌和各腸段中表達(dá)并能夠誘導(dǎo)鵝體產(chǎn)生良好的細(xì)胞免疫和體液免疫,基因疫苗免疫鵝血清抗體從第14d開(kāi)始升高,第28d達(dá)最大值,第217d仍然顯著高于對(duì)照組,基因疫苗誘導(dǎo)鵝體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的能力與弱毒疫苗相當(dāng)。
從1956年小鵝瘟被發(fā)現(xiàn)至今,全世界學(xué)者對(duì)小鵝瘟這個(gè)水禽流行病的研究已經(jīng)趨于成熟,提出了很多有效的方法確保養(yǎng)殖安全,疫苗的研究也日新月異。但是至今在特效藥這一塊仍比較空缺,有待進(jìn)一步加強(qiáng)。經(jīng)過(guò)深入的研究分析發(fā)現(xiàn),總體來(lái)說(shuō)小鵝瘟雖然可怕,但仍然是可以做到可防可控的。
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