于夢(mèng)迪，王明霞，王海東

(河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院藥學(xué)部，河北 石家莊 050011)

肺癌是全球范圍內(nèi)發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤，其中非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)約占所有肺癌類型的85%，超過70%的NSCLC患者在確診時(shí)已處于晚期，且傳統(tǒng)的放化療效果一直不理想，緩解率僅達(dá)30%左右[1]。近年來(lái)，靶向藥物的發(fā)展為NSCLC治療帶來(lái)了新的希望。靶向藥物主要分為以表皮生長(zhǎng)因子受體(epidermal growth factor receptor , EGFR)為靶點(diǎn)的藥物，一類如小分子酪氨酸激酶抑制劑(tyrosine kinase inhibitor, TKI)吉非替尼或厄洛替尼等，另一類為抗EGFR的單克隆抗體，如西妥昔單抗等；以棘皮動(dòng)物微管結(jié)合蛋白4與間變性淋巴瘤激酶形成的融合基因(echinoderm microtuble-associated protein like 4-anaplastic lymphoma kinase, EML4-ALK)為靶點(diǎn)的藥物，如克唑替尼和色瑞替尼等；以血管生成相關(guān)基因?yàn)榘悬c(diǎn)的藥物，如抗血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)/血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體(vascular endothelial growth factor receptor ,VEGFR)藥物貝伐珠單抗等。靶向藥物的治療明顯改善了NSCLC患者無(wú)進(jìn)展生存期和客觀有效率，除了部分患者對(duì)靶向藥物治療先天不敏感外，幾乎所有患者在應(yīng)用其一段時(shí)間后都不可避免地發(fā)生耐藥。因此，耐藥問題成為靶向藥物發(fā)展的重大障礙。

姜黃素是一種酚類色素，源自姜黃屬植物的塊根或塊莖，是中藥姜黃的主要活性成分。多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)表明[2-4]，姜黃素對(duì)多種類型的腫瘤治療有逆轉(zhuǎn)耐藥作用。然而，目前姜黃素逆轉(zhuǎn)NSCLC靶向藥物耐藥的報(bào)道并不多見。本文總結(jié)了國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)，對(duì)靶向藥物主要耐藥機(jī)制和姜黃素對(duì)其相關(guān)作用的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 以EGFR為靶點(diǎn)治療藥物的耐藥機(jī)制

1.1EGFR-TKI以吉非替尼和厄洛替尼為代表的表皮生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶抑制劑(EGFR TKI)為NSCLC患者的治療帶來(lái)了明顯的療效。然而，除了部分患者對(duì)EGFR-TKI原發(fā)性耐藥，對(duì)EGFR-TKI高度敏感的患者在接受治療一段時(shí)間后也不可避免地發(fā)生耐藥。EGFR-TKI的耐藥機(jī)制是多方面的，如某些特定基因或蛋白異常表達(dá)，信號(hào)分子異常激活等，它們之間既相互獨(dú)立，又存在復(fù)雜的交互聯(lián)系。本文將對(duì)其主要獲得性耐藥機(jī)制進(jìn)行綜述。

1.1.1EGFR靶基因突變 最常見的是EGFR T790M突變，Kobayashi等[5]2005年報(bào)道了EGFR基因二次突變學(xué)說(shuō)，即EGFR 20號(hào)外顯子第790位密碼子的錯(cuò)義突變，位于第790位密碼子發(fā)生了C-T轉(zhuǎn)換，致使蛋氨酸取代了原本處于相應(yīng)位置的蘇氨酸。由于蛋氨酸較蘇氨酸空間占位大，因此形成空間位阻，改變了EGFR激酶區(qū)ATP的親和性，導(dǎo)致了EGFR-TKI類小分子藥物不能有效阻斷EGFR活化信號(hào)，從而失去對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用。該突變是TKI獲得性耐藥的主要機(jī)制，在耐藥患者中超過50%[6]。

1.1.2旁路信號(hào)的激活 c-Met擴(kuò)增：c-Met是一種原癌基因，c-Met蛋白是肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(hepatocyte growth factor, HGF)的唯一已知受體，它可導(dǎo)致EGFR-TKI耐藥。有研究證實(shí)，c-Met擴(kuò)增是直接通過ErbB3磷酸化激活PI3K/Akt通路，即耐藥細(xì)胞通過c-Met/ErbB3/PI3K信號(hào)通路向細(xì)胞內(nèi)傳遞生存信號(hào)，從而繞開EGFR信號(hào)通路，產(chǎn)生獲得性耐藥，其中，約20%的患者耐藥的原因是c-Met基因擴(kuò)增[7-8]。

HGF高表達(dá)：研究發(fā)現(xiàn)，HGF可誘導(dǎo)EGFR突變耐藥株對(duì)多種靶向藥物耐藥，機(jī)制可能是避開了EGFR介導(dǎo)的PI3K/Akt/mTOR通路，通過激活c-Met，從而維持PI3K/Akt/mTOR通路活化，保持細(xì)胞對(duì)靶向藥物的耐藥[7]。

人表皮生長(zhǎng)因子受體-2(human epidermal growth factor receptor-2,Her-2)擴(kuò)增：Takezawa等[9]對(duì)26例吉非替尼或厄洛替尼治療后發(fā)生耐藥的肺腺癌組織進(jìn)行FISH檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)12%的(3例)耐藥病例中出現(xiàn)Her-2擴(kuò)增，同時(shí)對(duì)99例未經(jīng)吉非替尼或厄洛替尼治療的肺腺癌組織進(jìn)行FISH檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)Her-2擴(kuò)增出現(xiàn)率僅為1%(1例)。據(jù)此表明，Her-2擴(kuò)增可能是第一代EGFR-TKI獲得性耐藥機(jī)制之一。

1.1.3下游信號(hào)通路的激活 存在影響下游信號(hào)的基因突變，如PTEN(phosphatase and tensin homolog deleted onchromosometen)基因表達(dá)的缺失或下調(diào)，即第10號(hào)染色體磷酸酶和張力蛋白同源缺失基因。PTEN缺失導(dǎo)致Akt依賴的信號(hào)失調(diào)，在惡性腫瘤進(jìn)展中扮演重要角色。研究顯示厄洛替尼在PTEN缺失的NSCLC細(xì)胞中不能下調(diào)Survivin的表達(dá)，是由于PTEN表達(dá)缺失或下調(diào)，可使PI3K/Akt通路過度激活，從而導(dǎo)致Akt過度表達(dá)將抵抗凋亡[10]。

胰島素樣生長(zhǎng)因子I受體(insulin-like growth factor-I receptor, IGF-IR)信號(hào)通路激活：IGF-IR是一跨膜酪氨酸激酶受體，在許多腫瘤中過度表達(dá)，使原癌基因轉(zhuǎn)錄翻譯，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)。有研究表明，在EGFR-TKI敏感細(xì)胞系A(chǔ)431通過ErbB3激活PI3K/Akt信號(hào)通路，而在耐吉非替尼的A431GR細(xì)胞系中，胰島素生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)表達(dá)下調(diào)，進(jìn)而激活I(lǐng)GFIR/PI3K-Akt通路，使其能夠繞過ErbB3來(lái)激活PI3K/Akt通路產(chǎn)生耐藥[7]。

1.1.4其他可能機(jī)制 ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白： ATP結(jié)合超家族(ATP-binding cassette superfamily，ABC)成員中P-糖蛋白(P-gp)和乳腺癌耐藥蛋白(BCRP)在化療藥物耐藥機(jī)制的報(bào)道中最為廣泛，因其具有ATP依賴的藥物外排作用，可借助ATP水解釋放能量將細(xì)胞內(nèi)藥物泵出細(xì)胞，致使細(xì)胞內(nèi)藥物濃度降低不能殺滅腫瘤細(xì)胞而導(dǎo)致耐藥產(chǎn)生。ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白不僅參與化療藥物耐藥也介導(dǎo)腫瘤靶向藥物耐藥 ，靶向藥物酪氨酸激酶抑制劑主要是通過競(jìng)爭(zhēng)性抑制ATP與酪氨酸激酶結(jié)合產(chǎn)生抗癌作用，但同時(shí)又能作為轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的底物與ATP依賴的主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白相互作用，影響藥物在細(xì)胞內(nèi)外的分布。Noguchi等[11]報(bào)道，ABCG2/BCRP可以保護(hù)依賴EGFR通路的腫瘤細(xì)胞暴露于吉非替尼時(shí)免于死亡，這種保護(hù)作用能被抑制劑所逆轉(zhuǎn)，從而提示ABCG2可通過主動(dòng)外排吉非替尼而導(dǎo)致耐藥。

NF-κB信號(hào)途徑的激活：核轉(zhuǎn)錄因子kappa B(nuclear factor-κB，NF-κB)信號(hào)途徑的激活也會(huì)引起NSCLC對(duì)厄洛替尼耐藥。在具有EGFR突變的肺癌模型中，使用基因?qū)W或藥理學(xué)方法對(duì)NF-κB信號(hào)通路進(jìn)行抑制后可增加突變腫瘤細(xì)胞對(duì)厄洛替尼治療的敏感性，表明NF-κB信號(hào)途徑的過度激活可能是EGFR突變的NSCLC患者耐藥原因之一[12]。

上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymanl transition，EMT)是指在多種因素刺激下，細(xì)胞由上皮表型向間質(zhì)表型轉(zhuǎn)化的一種現(xiàn)象，以鈣黏蛋白、連環(huán)蛋白等上皮型標(biāo)志蛋白的減少或缺失，以及波形蛋白、纖維黏連蛋白等間質(zhì)表型標(biāo)志蛋白的表達(dá)增多為主要特征。EMT能降低腫瘤細(xì)胞間的黏附性，促進(jìn)細(xì)胞有絲分裂，誘導(dǎo)上皮遷移、侵襲及血管生成，從而影響腫瘤細(xì)胞對(duì)EGFR-TKIs的敏感性[13]。

1.2抗EGFR單克隆抗體西妥昔單抗(cetuximab)屬于人鼠嵌合型IgG1單克隆抗體，可選擇性作用于EGFR。因其與EGFR-TKI作用靶點(diǎn)相同，故耐藥機(jī)制也相似。主要包括受體旁路信號(hào)通路的激活(EGFR被阻斷后，其他受體能夠替代EGFR的主要功能來(lái)維持細(xì)胞存活)，EGFR基因特異性突變和靶點(diǎn)缺失(EGFR基因特異性突變引起EGFR表達(dá)缺失和功能改變)，EGFR下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的持續(xù)活化(導(dǎo)致相關(guān)基因直接擴(kuò)增、下游效應(yīng)蛋白過度表達(dá)，以及PTEN功能缺失或失活)等[14]。

2 以ALK為靶點(diǎn)的治療藥物的耐藥機(jī)制

EML4-ALK融合基因是新發(fā)現(xiàn)的NSCLC驅(qū)動(dòng)基因，是NSCLC治療的新靶點(diǎn)，其代表藥物為克唑替尼和色瑞替尼。盡管ALK陽(yáng)性NSCLC患者在服藥后預(yù)后有了很大程度的改觀，但與其他酪氨酸激酶抑制劑類似，患者在服藥后1年左右會(huì)出現(xiàn)耐藥[15]，因此討論其耐藥機(jī)制具有重要的臨床意義。

2.1ALK激酶區(qū)突變ALK激酶區(qū)突變是克唑替尼耐藥的主要原因，其中包括ALK激酶區(qū)二次突變和ALK融合基因拷貝數(shù)擴(kuò)增。2010年，Choi等[16]首次報(bào)道對(duì)克唑替尼發(fā)生耐藥的NSCLC患者，對(duì)其進(jìn)行基因測(cè)序分析同時(shí)發(fā)現(xiàn)了激酶域的L1196M和C1156Y突變。之后，發(fā)現(xiàn)多種ALK激酶區(qū)的二次突變類型，包括G1202R、S1206Y、1151Tins、F1174L、L1152R、C1156Y、G2302R等，體內(nèi)外研究也證實(shí)了這些突變可引起不同程度的耐藥[17]。這些激酶域的突變通過增加空間位阻，活化ALK構(gòu)象，使ALK永久磷酸化等途徑來(lái)影響藥物與活性位點(diǎn)的結(jié)合。

ALK融合基因拷貝數(shù)擴(kuò)增首次是在ALK+細(xì)胞系出現(xiàn)對(duì)克唑替尼耐藥時(shí)發(fā)現(xiàn)，隨后在克唑替尼耐藥的ALK+NSCLC患者標(biāo)本中也發(fā)現(xiàn)了拷貝數(shù)增加。Katamyama等[18]報(bào)道了18例克唑替尼耐藥的肺癌患者，其中有1/4伴有ALK融合基因擴(kuò)增。同樣，相應(yīng)的體外實(shí)驗(yàn)也證實(shí)了ALK融合基因拷貝數(shù)擴(kuò)增可以導(dǎo)致ALK+腫瘤細(xì)胞對(duì)克唑替尼的耐藥。這些結(jié)果表明，ALK融合基因大量擴(kuò)增可能導(dǎo)致ALK抑制劑耐藥產(chǎn)生[19]。

2.2驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)化ALK對(duì)腫瘤細(xì)胞的作用主要是通過ALK及其下游信號(hào)通路來(lái)控制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和遷移。當(dāng)使用克唑替尼阻斷該信號(hào)通路時(shí)，腫瘤細(xì)胞會(huì)通過另外一些機(jī)制(如轉(zhuǎn)換驅(qū)動(dòng)基因)來(lái)激活其他信號(hào)通路，取代腫瘤細(xì)胞對(duì)ALK及其下游信號(hào)的依賴，導(dǎo)致克唑替尼不能有效地抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。這些轉(zhuǎn)換驅(qū)動(dòng)基因中最為常見的是EGFR突變或磷酸化、KRAS突變和c-KIT擴(kuò)增[19]。

2.3其他可能機(jī)制EMT：Kim等[20]在EML4-ALK陽(yáng)性的H2228細(xì)胞和誘導(dǎo)克唑替尼耐藥的H2228CR中，對(duì)比了EMT標(biāo)志蛋白和細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力的差異，結(jié)果表明EMT可能是克唑替尼耐藥機(jī)制之一。

ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白：非小細(xì)胞肺癌患者易發(fā)生腦轉(zhuǎn)移，Kort等[21]研究發(fā)現(xiàn)，多藥耐藥轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白P-糖蛋白和ABCG2影響克唑替尼在腦部的蓄積，從而影響療效，產(chǎn)生耐藥。

3 以VEGF受體為靶點(diǎn)治療藥物的耐藥機(jī)制

VEGF通過與VEGFR結(jié)合，促進(jìn)異常腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞增生、遷移并增加異常血管的通透性，而抗血管生成劑起到修剪和正?；[瘤新生血管作用。貝伐珠單抗是人源化抗VEGF藥物，通過結(jié)合VEGF使VEGFR喪失活化的機(jī)會(huì)，進(jìn)而發(fā)揮抗血管生成作用[22]。然而，由于該類藥物價(jià)格昂貴，在初始治療時(shí)并未納入一線使用，以至于關(guān)于其耐藥相關(guān)機(jī)制的報(bào)道較少。

有研究將人類膠質(zhì)母細(xì)胞瘤與逆轉(zhuǎn)錄病毒編碼Notch delta樣配體4(DLL4)相結(jié)合，在小鼠體內(nèi)接種進(jìn)行腫瘤異種移植，然后使用VEGF-A抑制劑貝伐珠單抗治療小鼠腫瘤，結(jié)果表明DLL4可以介導(dǎo)腫瘤對(duì)貝伐珠單抗耐藥作用。其機(jī)制可能是DLL4 Notch信號(hào)促使血管形成，增加了腫瘤的血流供應(yīng)，從而對(duì)貝伐珠單抗的敏感度降低所致[23]。

4 姜黃素逆轉(zhuǎn)靶向藥物耐藥及機(jī)制

姜黃素是源自于植物姜黃的一種天然酚類色素，對(duì)多種腫瘤類型具有生物學(xué)活性。姜黃素能調(diào)節(jié)腫瘤信號(hào)通路的多個(gè)蛋白靶點(diǎn)，包括轉(zhuǎn)錄因子、受體、激酶、細(xì)胞因子、酶和生長(zhǎng)因子。但姜黃素幾乎不溶于水，容易氧化，在體內(nèi)吸收差，生物利用度低，限制了其在臨床的直接推廣應(yīng)用。多項(xiàng)國(guó)內(nèi)外研究表明,姜黃素具有良好的逆轉(zhuǎn)抗腫瘤藥物耐藥的作用：如姜黃素通過調(diào)節(jié)CXC趨化因子/NF-κB信號(hào)通路來(lái)介導(dǎo)結(jié)在直腸癌治療中對(duì)奧沙利鉑獲得性耐藥的逆轉(zhuǎn)作用[2]；國(guó)內(nèi)研究發(fā)現(xiàn)，姜黃素可能通過調(diào)節(jié)EMT途徑逆轉(zhuǎn)結(jié)腸癌細(xì)胞對(duì)伊立替康的耐藥性[3]，Shah等[4]用姜黃素作用于人急性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)，姜黃素可以抑制耐藥基因MDR1、LRP、BCRP的表達(dá)。但是對(duì)于姜黃素逆轉(zhuǎn)非小細(xì)胞肺癌靶向藥物耐藥的研究并不多見。最近，祝燁[24]發(fā)現(xiàn)低濃度(細(xì)胞存活率80%以上)姜黃素能增加H1975(T790M突變)對(duì)吉非替尼的敏感性，但具體機(jī)制不明。而Lee等[25]發(fā)現(xiàn)姜黃素能夠明顯抑制EGFR-TKI的耐藥肺腺癌細(xì)胞系的增殖，且有濃度依賴性，并能降低靶向藥的胃腸道毒副作用，為姜黃素對(duì)靶向藥的逆轉(zhuǎn)耐藥的作用帶來(lái)了新的方向。以下我們結(jié)合國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)對(duì)其逆轉(zhuǎn)靶向藥物耐藥的可能相關(guān)機(jī)制進(jìn)行論述。

4.1姜黃素抑制膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白作用金鑫[26]采用吉非替尼耐藥的非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株NCI-H1975(EGFR T790M突變)，研究了姜黃素對(duì)吉非替尼耐藥細(xì)胞的影響。實(shí)驗(yàn)分為4個(gè)處理組，分別是單藥姜黃素、單藥吉非替尼、姜黃素聯(lián)合吉非替尼和空白對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，小劑量姜黃素可降低T790M二次突變引起的TKI耐藥細(xì)胞株的耐藥性，提示姜黃素可能具有逆轉(zhuǎn)EGFR-TKI耐藥的作用；單藥姜黃素及姜黃素聯(lián)合吉非替尼組細(xì)胞膜表面P-糖蛋白的表達(dá)均明顯低于空白對(duì)照組和單藥吉非替尼組，提示姜黃素可降低腫瘤細(xì)胞膜表面的P-糖蛋白表達(dá)。張楠等[27]以攜帶原發(fā)性耐藥的A549肺癌細(xì)胞為研究對(duì)象，采用吉非替尼單藥和姜黃素聯(lián)合吉非替尼分組處理細(xì)胞，結(jié)果顯示，與單獨(dú)用藥組相比，吉非替尼低濃度時(shí)，姜黃素可以在一定程度上升高吉非替尼在A549細(xì)胞內(nèi)的藥物濃度，聯(lián)合用藥組明顯提高了對(duì)A549細(xì)胞增殖的抑制作用。該研究表明，低濃度的吉非替尼是ABC蛋白家族成員ABCG2/BCRP(乳腺癌耐藥蛋白)的底物，ABCG2可以將吉非替尼轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞膜外，造成胞內(nèi)藥物濃度降低，而姜黃素是ABCG2表達(dá)水平的有效抑制劑。

4.2姜黃素逆轉(zhuǎn)HGF誘導(dǎo)耐藥詹建偉等[28]通過HGF刺激構(gòu)建肺癌耐藥模型，并用姜黃素進(jìn)行處理。其研究結(jié)果顯示，通過HGF刺激可誘導(dǎo)肺癌PC9細(xì)胞對(duì)吉非替尼耐藥，同時(shí)細(xì)胞的遷移能力增強(qiáng)，出現(xiàn)EMT，且c-Met/Akt/mTOR磷酸化水平增加。而加入吉非替尼可抑制EGFR/Akt/mTOR信號(hào)通路，但對(duì)HGF激活的c-Met/Akt/mTOR信號(hào)通路并無(wú)抑制作用，而加入姜黃素后，可明顯抑制c-Met/Akt/mTOR通路的磷酸化水平。故認(rèn)為姜黃素可逆轉(zhuǎn)HGF誘導(dǎo)的PC9肺癌細(xì)胞對(duì)吉非替尼的耐藥性，其機(jī)制可能是通過抑制c-Met/Akt/mTOR通路實(shí)現(xiàn)的。

4.3姜黃素影響EGFR下游信號(hào)通路盛琦等[29]以吉非替尼耐藥的非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系PC9/G2為研究對(duì)象，研究姜黃素逆轉(zhuǎn)吉非替尼的耐藥作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)無(wú)毒劑量下的姜黃素能提高吉非替尼的細(xì)胞毒作用，姜黃素聯(lián)合吉非替尼組細(xì)胞存活率比單用吉非替尼組低，表明姜黃素對(duì)PC9/G2細(xì)胞株具有明顯逆轉(zhuǎn)耐藥作用。該研究檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，PI3K的表達(dá)水平明顯下降，而caspase-3凋亡蛋白活性明顯升高。因此，其逆轉(zhuǎn)作用機(jī)制可能是通過下調(diào)EGFR下游信號(hào)通路中PI3K的表達(dá)水平，從而誘導(dǎo)更多的凋亡蛋白caspase-3而實(shí)現(xiàn)的。Li等[30]采用非小細(xì)胞肺癌敏感細(xì)胞系H1650和耐藥細(xì)胞系H1975研究了姜黃素逆轉(zhuǎn)厄洛替尼的耐藥作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)姜黃素在2個(gè)細(xì)胞系中均能增敏厄洛替尼對(duì)EGFR突變的NSCLC細(xì)胞的細(xì)胞毒性，促進(jìn)厄洛替尼誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，表明姜黃素能在EGFR突變的NSCLC細(xì)胞中提高厄洛替尼的抗腫瘤活性，在耐藥的細(xì)胞中逆轉(zhuǎn)厄洛替尼耐藥。該研究還發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合姜黃素和厄洛替尼與二者單藥治療相比增加了凋亡蛋白caspase-3和caspase-9的釋放，生存素表達(dá)明顯減少，而PI3K/Akt通路可調(diào)節(jié)生存素的表達(dá)，故其逆轉(zhuǎn)機(jī)制可能是下調(diào)PI3K的表達(dá)水平，抑制生存素的表達(dá)，增加凋亡蛋白的釋放而實(shí)現(xiàn)的[30]。

4.4姜黃素抑制NF-κB活性NF-κB是一種分布和作用均十分廣泛的真核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子，在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起著重要的作用。姜黃素通過抑制NF-κB活性，下調(diào)由NF-κB調(diào)節(jié)的相關(guān)基因，從而抑制細(xì)胞增殖，使細(xì)胞周期阻滯，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[31]。Li等[30]也發(fā)現(xiàn)，在厄洛替尼耐藥的NSCLC細(xì)胞中，姜黃素明顯抑制p-p65(分子質(zhì)量65 ku的基質(zhì)磷蛋白)的表達(dá)，但厄洛替尼不影響p-p65的表達(dá)。這些結(jié)果表明抑制NF-κB活性可能是姜黃素克服厄洛替尼耐藥的機(jī)制之一。Yoshikane等[32]在非小細(xì)胞肺癌PC9細(xì)胞加入姜黃素和厄洛替尼進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示姜黃素在裸鼠的異種移植PC-9細(xì)胞中能增強(qiáng)厄洛替尼對(duì)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用，其原因可能是姜黃素的加入使得IκB的表達(dá)提高。因此，姜黃素可能是通過維持IκB的表達(dá)水平來(lái)抑制NF-κB的誘導(dǎo)激活來(lái)發(fā)揮逆轉(zhuǎn)耐藥作用。

4.5姜黃素干預(yù)EMT過程陳灝等[33]采用體外姜黃素作用于耐吉非替尼人肺腺癌PC9/ZD細(xì)胞，檢測(cè)姜黃素對(duì)該細(xì)胞的EMT過程的影響。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與親代耐藥細(xì)胞比較，經(jīng)姜黃素處理的耐吉非替尼肺腺癌細(xì)胞對(duì)吉非替尼的敏感性明顯改善；轉(zhuǎn)移和侵襲能力也相應(yīng)減弱；EMT標(biāo)志蛋白——波形蛋白表達(dá)下調(diào)，E-鈣黏蛋白表達(dá)上調(diào)。以上結(jié)果均說(shuō)明姜黃素可改變耐吉非替尼肺腺癌細(xì)胞的生物學(xué)行為，甚至是逆轉(zhuǎn)其上皮間質(zhì)化過程。

5 小結(jié)與展望

近年來(lái)，靶向藥物正廣泛應(yīng)用于臨床，但耐藥問題一直是其應(yīng)用的重要阻礙，姜黃素作為天然產(chǎn)物且具有耐藥的逆轉(zhuǎn)作用，對(duì)其發(fā)展為靶向藥物治療的耐藥逆轉(zhuǎn)劑展現(xiàn)了希望。姜黃素與以往耐藥逆轉(zhuǎn)劑相比，中藥成分相對(duì)復(fù)雜，其耐藥機(jī)制具有多靶點(diǎn)、不良反應(yīng)小、毒性低、安全性好、價(jià)格便宜、容易獲得等優(yōu)點(diǎn)。但是，姜黃素幾乎不溶于水、容易氧化的理化特性限制了其在臨床上的廣泛應(yīng)用。 為了克服這些局限性，需增加其水溶性、穩(wěn)定性、口服生物利用度等。研究者發(fā)現(xiàn)了新的納米給藥技術(shù)，借助納米傳遞載體將姜黃素與靶向藥物聯(lián)合應(yīng)用，將是未來(lái)姜黃素逆轉(zhuǎn)靶向藥耐藥的一個(gè)新方向[31]。

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