孫昌華，劉 毅，肖 英，魏 霞，祝清芬

(山東省食品藥品檢驗(yàn)研究院，濟(jì)南 250101)

探討藥物GLP試驗(yàn)用Beagle犬檢疫驗(yàn)收的技術(shù)要點(diǎn)

孫昌華，劉 毅，肖 英，魏 霞，祝清芬

(山東省食品藥品檢驗(yàn)研究院，濟(jì)南 250101)

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的檢疫驗(yàn)收是一項(xiàng)控制動(dòng)物在流通環(huán)節(jié)免受污染、防止疫病發(fā)生和傳播的重要工作，是實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化的關(guān)鍵。Beagle犬因其遺傳穩(wěn)定，對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力和抗病力較強(qiáng)，在試驗(yàn)中反應(yīng)一致性好，是被國(guó)際所公認(rèn)的專(zhuān)用實(shí)驗(yàn)犬，在藥物安全性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用廣泛。建立藥物GLP機(jī)構(gòu)試驗(yàn)用Beagle犬檢疫驗(yàn)收的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，細(xì)化檢疫驗(yàn)收的技術(shù)要點(diǎn)，加強(qiáng)檢疫人員的技術(shù)培訓(xùn)，努力提高檢疫水平，最終確保實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量。

GLP；Beagle犬；檢疫

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的健康是保證動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性，實(shí)現(xiàn)動(dòng)物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化的基礎(chǔ)。在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)與應(yīng)用條件標(biāo)準(zhǔn)化的基礎(chǔ)上， 防止實(shí)驗(yàn)動(dòng)物流通環(huán)節(jié)免受污染、切斷傳播途徑、淘汰非健康實(shí)驗(yàn)動(dòng)物顯的尤為重要。同時(shí)，“以檢促防”嚴(yán)格的檢疫驗(yàn)收也是對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物供給單位的有效監(jiān)督[1]。優(yōu)良實(shí)驗(yàn)室規(guī)范(Good Laboratory Practice，GLP)是用于規(guī)范與人類(lèi)健康和環(huán)境有關(guān)的非臨床安全性研究的一整套組織管理體系，包括機(jī)構(gòu)設(shè)置、人員資質(zhì)、試驗(yàn)計(jì)劃、試驗(yàn)實(shí)施過(guò)程、試驗(yàn)的監(jiān)督、記錄、檔案和報(bào)告的管理[5]。GLP的目的是組織、規(guī)范和管理科學(xué)技術(shù)人員的研究行為，促進(jìn)科研人員提高實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的質(zhì)量和完整性，從而避免出現(xiàn)假陰性或假陽(yáng)性結(jié)果，保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性、完整性和可重復(fù)性[2]。在試驗(yàn)實(shí)施過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的檢疫驗(yàn)收是試驗(yàn)即將開(kāi)始的第一步，做好動(dòng)物的檢疫驗(yàn)收工作，對(duì)動(dòng)物質(zhì)量進(jìn)行把關(guān)，也是保證實(shí)驗(yàn)順利開(kāi)展的重要一步。

Beagle犬(比格犬)，又叫小獵兔犬，原產(chǎn)英國(guó)，是獵犬中較小的一種。1880年引入美國(guó)，體型小(成年體重為7～10 kg，體長(zhǎng)為30～49 cm)，短毛和體質(zhì)均一，性溫和，具有性成熟期早(8～12個(gè)月)，產(chǎn)仔數(shù)多等優(yōu)點(diǎn)，而且對(duì)環(huán)境的適應(yīng)力強(qiáng)、抗病力強(qiáng)[3，4]。Beagle犬在試驗(yàn)中反應(yīng)一致性好，是目前生命科學(xué)領(lǐng)域中最標(biāo)準(zhǔn)的犬種，是被國(guó)際所公認(rèn)的專(zhuān)用實(shí)驗(yàn)犬，在藥物安全性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)中獲得廣泛應(yīng)用[5]。結(jié)合本中心的在實(shí)際工作中的情況，現(xiàn)將Beagle犬在檢疫驗(yàn)收環(huán)節(jié)的經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行交流，相互學(xué)習(xí)，共同進(jìn)步。

1 Beagle犬的采購(gòu)

實(shí)驗(yàn)專(zhuān)題負(fù)責(zé)人根據(jù)實(shí)驗(yàn)方案填寫(xiě)《動(dòng)物申購(gòu)書(shū)》，動(dòng)物管理負(fù)責(zé)人依據(jù)《動(dòng)物申購(gòu)書(shū)》，選擇有動(dòng)物生產(chǎn)許可資質(zhì)、質(zhì)量合格、管理體制健全、信譽(yù)好[6]和具有一定規(guī)模的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物供應(yīng)單位。如果初次建立供求關(guān)系，可以提前安排人員到供應(yīng)單位進(jìn)行實(shí)地考察或參考兄弟單位的意見(jiàn)。獸醫(yī)應(yīng)依據(jù)實(shí)驗(yàn)方案和/或《動(dòng)物申購(gòu)書(shū)》提前了解供應(yīng)單位情況及所購(gòu)進(jìn)Beagle犬的數(shù)量、年齡、性別、體重范圍等基本信息。

2 Beagle犬的運(yùn)輸

國(guó)家科學(xué)技術(shù)委員會(huì)1988年發(fā)布的《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》第21條規(guī)定，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的運(yùn)輸應(yīng)當(dāng)有專(zhuān)人負(fù)責(zé)，運(yùn)裝工具應(yīng)當(dāng)安全、可靠，不得將不同品種、品系或者不同等級(jí)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物混合裝運(yùn)[7]。國(guó)家科技部2006年發(fā)布的《關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見(jiàn)》關(guān)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)輸?shù)膬?nèi)容已經(jīng)相對(duì)完備[8，9]?！秾?shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境及設(shè)施》國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)運(yùn)輸籠具、運(yùn)輸工具、運(yùn)輸動(dòng)物都做了明確的規(guī)定，在運(yùn)輸途中，運(yùn)輸工具應(yīng)配備空調(diào)等設(shè)備，使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物周?chē)h(huán)境的溫度和濕度維持在正常范圍內(nèi)，以保證動(dòng)物的質(zhì)量。如果運(yùn)輸時(shí)間超過(guò)6 h，應(yīng)保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在運(yùn)輸途中有充足的符合要求的飼料和飲水[10，11]。此外，《中華人民共和國(guó)動(dòng)物防疫法》[12]，《中華人民共和國(guó)野生動(dòng)物保護(hù)法》[13]，《國(guó)家重點(diǎn)保護(hù)野生動(dòng)物馴養(yǎng)繁殖許可證管理辦法》[14]等法律法規(guī)從各方面對(duì)全部或特定的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的運(yùn)輸提出了監(jiān)管要求。

3 運(yùn)輸工具、運(yùn)輸籠具的檢查

動(dòng)物管理負(fù)責(zé)人應(yīng)與動(dòng)物運(yùn)輸負(fù)責(zé)人保持暢通的聯(lián)系，安排相關(guān)人員進(jìn)行動(dòng)物接收。當(dāng)動(dòng)物到達(dá)目的地后，動(dòng)物管理負(fù)責(zé)人和獸醫(yī)應(yīng)對(duì)運(yùn)輸工具和籠具進(jìn)行檢查，查看運(yùn)輸條件是否符合要求，檢查車(chē)廂內(nèi)的溫濕度、運(yùn)輸密度。運(yùn)輸犬的籠具要堅(jiān)固耐用，內(nèi)外角圓滑，籠內(nèi)無(wú)尖銳的突起，保證犬的安全[3]。同時(shí)，檢查籠具內(nèi)有無(wú)飲水用具及動(dòng)物飲水情況。

4 Beagle犬的驗(yàn)收檢查

動(dòng)物管理人員按照《動(dòng)物申購(gòu)書(shū)》的要求，結(jié)合供應(yīng)商提供的《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證》復(fù)印件、《動(dòng)物質(zhì)量合格證》、《動(dòng)物健康檔案》、《動(dòng)物檢疫合格證》，認(rèn)真核對(duì)相關(guān)信息。信息核對(duì)完畢無(wú)誤后，動(dòng)物管理人員將全部動(dòng)物資料移交獸醫(yī)。新入室的動(dòng)物應(yīng)由獸醫(yī)進(jìn)行檢疫[15]，獸醫(yī)是藥物安全性評(píng)價(jià)單位中的檢疫驗(yàn)收的負(fù)責(zé)人，負(fù)責(zé)整個(gè)檢疫驗(yàn)收環(huán)節(jié)。

犬常用的標(biāo)識(shí)方法主要有掛牌法和針刺法。掛牌法是指用金屬或其他材質(zhì)等制作的標(biāo)牌，寫(xiě)上編號(hào)掛在動(dòng)物的頸部、耳朵等部位，但掛牌可能使動(dòng)物感到不適，常會(huì)用前爪搔抓號(hào)牌而使掛牌的部位損傷。針刺法則是采用人工或機(jī)器針刺號(hào)碼打號(hào)，然后涂以酒精黑墨即可，通常選擇耳部進(jìn)行標(biāo)記。供應(yīng)商所選擇的動(dòng)物標(biāo)識(shí)方式各不相同，通常情況下大多選擇犬耳廓內(nèi)側(cè)針刺標(biāo)記法識(shí)別。

由于在運(yùn)輸過(guò)程中Beagle犬處于一種特殊的不斷變化的環(huán)境之中，非常容易遭遇驚恐、疲勞或?qū)е骂~外的痛苦或損傷，以及病原微生物的感染。此外，運(yùn)輸也會(huì)對(duì)犬造成一定的應(yīng)激，因此在卸車(chē)時(shí)一定要輕卸輕放，動(dòng)物卸車(chē)由動(dòng)物管理負(fù)責(zé)人統(tǒng)籌安排，卸車(chē)過(guò)程切不可著急，以井然有序?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)。動(dòng)物卸車(chē)后工作人員及時(shí)向獸醫(yī)報(bào)告動(dòng)物編號(hào)，獸醫(yī)根據(jù)動(dòng)物編號(hào)逐一核查《動(dòng)物質(zhì)量合格證》、《動(dòng)物檢疫合格證》、《健康檔案》的信息，隨后進(jìn)行動(dòng)物個(gè)體進(jìn)行驗(yàn)收檢查。

4.1 動(dòng)物整體及一般狀態(tài)檢查

4.1.1 體格發(fā)育、營(yíng)養(yǎng)程度的檢查：體格、發(fā)育狀況通?？筛鶕?jù)骨骼與肌肉的發(fā)育程度及各部的比例關(guān)系來(lái)判定。體格分為體格強(qiáng)壯、體格中等和體格纖弱；發(fā)育狀況可分為發(fā)育良好和發(fā)育不良[16]。營(yíng)養(yǎng)程度通常根據(jù)肌肉的豐滿(mǎn)度，特別是皮下脂肪的蓄積量來(lái)判定，被毛的狀態(tài)和光澤，也可作為參考。動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)，是動(dòng)物體營(yíng)養(yǎng)代謝情況的標(biāo)志[17]。通常情況下將營(yíng)養(yǎng)程度分為營(yíng)養(yǎng)過(guò)肥和營(yíng)養(yǎng)不良。

首先對(duì)Beagle犬做一個(gè)初步的檢查，包括軀體結(jié)構(gòu)的勻稱(chēng)度，肌肉結(jié)實(shí)度。下一步用手緊貼皮膚觸摸其軀干部，感受皮膚的彈性、肌肉的豐滿(mǎn)度。正常狀態(tài)犬應(yīng)表現(xiàn)為軀體勻稱(chēng)、發(fā)育良好、肌肉豐滿(mǎn)、被毛光澤；反之病理狀態(tài)則表現(xiàn)為軀體矮小、結(jié)構(gòu)不勻稱(chēng)、消瘦、被毛蓬亂無(wú)光澤、皮膚缺乏彈性等，多提示為營(yíng)養(yǎng)不良或慢性消耗性疾病的表現(xiàn)。

4.1.2 精神狀態(tài)、姿勢(shì)與體態(tài)的檢查：動(dòng)物的精神狀態(tài)，是其中樞神經(jīng)機(jī)能的標(biāo)志，可根據(jù)其對(duì)外界刺激的反應(yīng)能力及其行為表現(xiàn)進(jìn)行判定[17]。犬有不同的神經(jīng)類(lèi)型，導(dǎo)致不同的性格。巴甫洛夫?qū)⑷譃樗姆N神經(jīng)類(lèi)型：均衡的靈活性，即多血質(zhì)(活潑型)；均衡的遲鈍型，即黏液質(zhì)(安靜型)；不均衡，興奮占優(yōu)勢(shì)的興奮型，即膽汁質(zhì)(不可抑制型)；興奮和抑制不發(fā)達(dá)，即憂(yōu)郁質(zhì)(衰弱型)[18]。因此，在檢疫驗(yàn)收過(guò)程中應(yīng)與其他檢查項(xiàng)目相結(jié)合進(jìn)行綜合考慮和分析。

姿勢(shì)與體態(tài)則是指動(dòng)物在相對(duì)靜止或運(yùn)動(dòng)過(guò)程中的空間位置和呈現(xiàn)的姿態(tài)。此項(xiàng)檢查相對(duì)來(lái)講比較直觀(guān)，很容易發(fā)現(xiàn)，主要是犬姿勢(shì)的自然、動(dòng)作的靈活性。若犬在站立或行走時(shí)，四肢軟弱無(wú)力，四肢強(qiáng)拘，不敢負(fù)重，多數(shù)情況下表明四肢有異常；如果犬躺臥不起，體軀蜷縮，頭置于腹下或臥姿不自然，不時(shí)翻動(dòng)，則表明有腹痛癥狀。

4.1.3 表被狀態(tài)、淺表淋巴結(jié)的檢查：表被狀態(tài)的檢查，主要注意被毛、鼻尖、皮膚、皮下組織的變化，以及表在外科病變的有無(wú)情況。犬的淺表淋巴結(jié)檢查通常選擇下頜淋巴結(jié)。

正常情況下，犬每年春、秋季節(jié)會(huì)脫換新毛。健康的犬被毛平順而富有有光澤，病理狀態(tài)下被毛蓬松粗亂、失去光澤、容易脫毛，多伴有精神不振等表現(xiàn)。通常情況下，病理性脫毛現(xiàn)象分營(yíng)養(yǎng)性脫毛和皮膚病及外寄生蟲(chóng)病脫毛。

正常犬鼻尖呈油狀滋潤(rùn)，能靈敏反應(yīng)其全身的健康狀況，人以手背觸其鼻尖有涼感，若發(fā)現(xiàn)鼻尖如滋潤(rùn)，手背觸其無(wú)涼感，或有熱感，則將得病，或以得病[18]。

犬的汗腺不發(fā)達(dá)，僅鼻尖有一種鼻鏡腺和腳(枕部)有汗腺。在炎熱的季節(jié)，犬常常將舌頭伸出口外做喘式呼吸[1,18,19]。健康犬皮膚濕度觸診時(shí)表現(xiàn)不濕不粘。皮膚溫度觸診時(shí)最好用手背，因手背對(duì)溫度比較敏感，并應(yīng)與鄰近部位相比較，這樣感覺(jué)更準(zhǔn)確。皮膚的彈力與皮膚的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)、肌纖維的收縮力量以及皮下脂肪含量的多少有密切關(guān)系[17]。臨床上常把皮膚彈力減退程度作為判定機(jī)體脫水的指標(biāo)之一[17]。臨診上根據(jù)皺褶恢復(fù)的速度進(jìn)行判定，皮膚彈性良好則立即恢復(fù)原狀，皮膚彈性減退則恢復(fù)原狀緩慢[16]。在藥物非臨床研究機(jī)構(gòu)中，依據(jù)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局頒布的《藥物重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》要求，應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)期限和臨床擬用人群確定動(dòng)物年齡，Beagle犬6～12月齡[20]。獸醫(yī)依據(jù)《動(dòng)物申購(gòu)書(shū)》的年齡要求綜合考慮，幼齡及營(yíng)養(yǎng)好的犬皮膚富有彈性。

犬皮下組織與表在外科病變通常一起檢查，獸醫(yī)通過(guò)觸診方式主要檢查是否有局灶性的腫物、疝、創(chuàng)傷等。

淺表淋巴結(jié)的檢查犬主要以下頜淋巴結(jié)為主，觸診下頜支內(nèi)側(cè)，感觸其大小、形狀、硬度、敏感性及活動(dòng)性。

4.1.4 眼睛、可視粘膜的檢查：健康犬雙眼明亮、不羞明、不流淚、眼瞼無(wú)腫脹、眼瞼無(wú)外傷、眼角物分泌物?？梢曊衬さ臋z查通常以檢查眼結(jié)膜為主，因其具有豐富的毛細(xì)血管，顏色變化除反應(yīng)其局部的病變外，還可推斷全身的血液循環(huán)狀態(tài)及血液某些成分的改變[21]。可視粘膜檢查可以在光線(xiàn)良好的條件下或光線(xiàn)不好借助于器械進(jìn)行檢查。通常用兩手的拇指和食指配合打開(kāi)上下眼瞼進(jìn)行檢查[16]。健康犬的眼結(jié)膜呈淡紅色，病理情況下可表現(xiàn)為潮紅、蒼白、黃染、發(fā)紺。

4.1.5 呼吸系統(tǒng)的觀(guān)察：呼吸系統(tǒng)主要以觀(guān)察呼吸方式和呼吸是否困難為主。健康動(dòng)物一般為胸腹式呼吸，即在呼吸時(shí)，胸壁和腹壁的運(yùn)動(dòng)很協(xié)調(diào)，強(qiáng)度也大致相等，因此亦可稱(chēng)為混合式呼吸。只有犬例外，正常時(shí)即以胸式呼吸占優(yōu)勢(shì)[17]。

4.1.6 消化、泌尿系統(tǒng)的觀(guān)察：消化、泌尿系統(tǒng)主要以觀(guān)察是否有嘔吐?tīng)顩r、糞尿情況為主。因犬是非常容易嘔吐的動(dòng)物，尤其是在機(jī)體不適的情況下，主要觀(guān)察是否有嘔吐?tīng)顩r，如有嘔吐，注意嘔吐物的數(shù)量、氣味及性質(zhì)。此外，還應(yīng)注意糞尿的氣味、色澤、性狀等。

獸醫(yī)對(duì)新購(gòu)入的Beagle犬進(jìn)行整體及一般狀態(tài)檢查完畢后，詳細(xì)填寫(xiě)《動(dòng)物檢疫書(shū)》，對(duì)檢查合格的犬進(jìn)行檢疫驗(yàn)收的下一個(gè)環(huán)節(jié)，對(duì)檢查有異常或有疑似疾病傾向的犬及時(shí)匯報(bào)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)題負(fù)責(zé)人，并與動(dòng)物運(yùn)輸負(fù)責(zé)人進(jìn)行溝通，做好Beagle犬的退還工作。

4.2 驅(qū)蟲(chóng)

Beagle犬整體及一般狀態(tài)檢查合格后進(jìn)入檢疫室之前，先進(jìn)入洗浴室進(jìn)行體外驅(qū)蟲(chóng)。GLP機(jī)構(gòu)購(gòu)進(jìn)的Beagle犬，絕大部分是普通級(jí)犬，供應(yīng)單位在每只犬的健康檔案中詳細(xì)記錄了疫苗接種、驅(qū)蟲(chóng)等情況。為了更好的保護(hù)動(dòng)物自身的健康，有效的保障動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的生物安全和實(shí)驗(yàn)人員的人身安全，及時(shí)安排體外驅(qū)蟲(chóng)還是非常有必要的。

體外寄生蟲(chóng)是指寄生于動(dòng)物體外并暫時(shí)性吸取營(yíng)養(yǎng)的寄生蟲(chóng)。如蚊、白蛉、蚤、虱、蜱等，吸血時(shí)與宿主體表接觸，多數(shù)飲飽后即離[22]。犬常見(jiàn)的體外寄生蟲(chóng)主要分為蚤和螨兩大類(lèi)。其中感染犬的跳蚤以貓?jiān)闉槌Ｒ?jiàn)；感染犬的螨類(lèi)主要包括耳癢螨、疥螨、虱子、蜱蟲(chóng)。

隨著驅(qū)蟲(chóng)藥的研發(fā)和使用，犬的體外驅(qū)蟲(chóng)方式也有較多的選擇。傳統(tǒng)的體外驅(qū)蟲(chóng)方法主要以藥浴為主，藥物價(jià)格比較便宜，以雙甲脒溶液等為代表，此藥為接觸性廣譜殺蟲(chóng)劑，驅(qū)蟲(chóng)效果好但具有一定的毒性，在使用時(shí)一定要掌握好用藥劑量及注意事項(xiàng)。另一種為非藥浴方式，即使用噴劑或滴劑驅(qū)蟲(chóng)藥。此類(lèi)藥具有使用方便、療效好等特點(diǎn)，價(jià)格比傳統(tǒng)藥浴方式要高。代表藥品為輝瑞的大寵愛(ài)、梅里亞的福來(lái)恩、英國(guó)的埃爾金等。噴劑主要是逆毛噴灑，讓犬全身濕透，注意保護(hù)眼睛和口鼻(避免接觸藥物)；滴劑給藥部位主要選擇犬頸背部，撥開(kāi)毛發(fā)，直接將藥物滴在皮膚上即可。兩種體外驅(qū)蟲(chóng)方式需要注意的是藥浴方式洗完后需要用吹風(fēng)機(jī)吹干；非藥浴方式最好不用吹風(fēng)機(jī)，自然晾干驅(qū)蟲(chóng)效果更好。

4.3 體重稱(chēng)量

犬體外驅(qū)蟲(chóng)結(jié)束后進(jìn)行體重稱(chēng)量，獸醫(yī)應(yīng)結(jié)合《動(dòng)物申購(gòu)書(shū)》認(rèn)真核對(duì)《動(dòng)物健康檔案》中的體重記錄，填寫(xiě)《動(dòng)物檢疫書(shū)》，查找最大體重和最小體重，核對(duì)《動(dòng)物申購(gòu)書(shū)》中所要求的體重范圍，如有異常及時(shí)匯報(bào)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)題負(fù)責(zé)人。

4.4 移入檢疫室

犬稱(chēng)重完畢后，雌雄區(qū)分，依次放入檢疫室內(nèi)，進(jìn)行單籠檢疫期飼養(yǎng)。

4.5 籠卡標(biāo)識(shí)

犬進(jìn)入檢疫室后，依據(jù)《實(shí)驗(yàn)方案》要求進(jìn)行檢疫期籠卡標(biāo)識(shí)。

4.6 完善檢疫記錄

犬進(jìn)入檢疫室后獸醫(yī)檢查標(biāo)識(shí)籠卡，核對(duì)籠卡與犬耳廓內(nèi)側(cè)刺青標(biāo)編號(hào)，核對(duì)雌雄犬飼養(yǎng)位置及數(shù)量，檢查《動(dòng)物檢疫書(shū)》中需要詳細(xì)記錄的內(nèi)容，完善檢疫記錄，確認(rèn)簽字后方可離開(kāi)檢疫室。

5 Beagle犬的檢疫檢查

Beagle犬通過(guò)驗(yàn)收環(huán)節(jié)移入檢疫室后，進(jìn)入了檢疫期檢查及馴化飼養(yǎng)階段。《藥物重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》要求，給藥前應(yīng)對(duì)動(dòng)物進(jìn)行適應(yīng)性飼養(yǎng)，非嚙齒類(lèi)動(dòng)物不少于2周[20]。犬經(jīng)過(guò)至少2周的檢疫期及馴化飼養(yǎng)階段，首先讓其適應(yīng)新的生活環(huán)境，其次通過(guò)一定時(shí)間的飼養(yǎng)觀(guān)察能及早發(fā)現(xiàn)動(dòng)物潛在的病癥，最后動(dòng)物得到了飼養(yǎng)員、試驗(yàn)員的馴化，增加了與人的親密度，性情也趨于溫順，便于試驗(yàn)的順利開(kāi)展。

檢疫期內(nèi)獸醫(yī)應(yīng)在每天上班后、飼養(yǎng)人員清理衛(wèi)生前，進(jìn)行大體觀(guān)察并詢(xún)問(wèn)飼養(yǎng)人員動(dòng)物的飲水、采食情況，邊觀(guān)察邊記錄。大體觀(guān)察事項(xiàng)主要包括：營(yíng)養(yǎng)狀況、自發(fā)活動(dòng)、步態(tài)、神經(jīng)癥狀、皮膚、呼吸、糞便、尿液、眼睛分泌物、飲食、飲水等情況。此外犬在檢疫期內(nèi)還應(yīng)進(jìn)行至少2次體溫、血液學(xué)、血液生化和至少1次地心電圖檢測(cè)[20]。獸醫(yī)詳細(xì)記錄觀(guān)察結(jié)果，發(fā)現(xiàn)問(wèn)題時(shí)及時(shí)向動(dòng)物管理負(fù)責(zé)人和/或?qū)嶒?yàn)專(zhuān)題負(fù)責(zé)人匯報(bào)，共同討論處理措施。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量限于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)單位控制微生物的程度。在藥物非臨床研究機(jī)構(gòu)中所使用的Beagle犬主要以普通級(jí)犬為主，在市場(chǎng)供需關(guān)系的調(diào)控下，如何把握好犬檢疫驗(yàn)收的尺度，如何把握好檢疫驗(yàn)收的質(zhì)量控制點(diǎn)，是關(guān)系檢疫驗(yàn)收工作成敗的關(guān)鍵。期盼在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理部門(mén)、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)和使用單位以及從事實(shí)驗(yàn)動(dòng)物工作的人員共同努力下，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的檢疫驗(yàn)收工作會(huì)不斷開(kāi)創(chuàng)新的局面。

[1] 胡楚元. 試論如何在實(shí)踐中做好實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的檢疫驗(yàn)收 [J]. 中國(guó)畜禽種業(yè), 2010, 6(11): 24-25.

[2] 張偉, 楊威, 李波, 等.中國(guó)藥物GLP理論與實(shí)踐 [M]. 北京, 中國(guó)醫(yī)藥科技出版社, 2013.

[3] 何誠(chéng). 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué) [M]. 北京, 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社, 2007: 95-99.

[4] 竇如海, 金東慶, 郝君良, 等. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù) [M]. 濟(jì)南, 山東科學(xué)技術(shù)出版社, 2006: 28-30.

[5] 楊光, 呂耀中. 藥物安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)中普通級(jí)Beagle犬的管理 [J]. 中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志, 2013, 27(S1): 350-351.

[6] 李松濱, 李寶龍. GLP試驗(yàn)用 Beagle犬的飼養(yǎng)管理 [J]. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué), 2015, 32(3): 54-55.

[7] 山東省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理政策法規(guī)匯編. 2010年出版. 濟(jì)南: 山東省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心, 2010: 2-7.

[8] 梁春南, 李明, 李保文, 等. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)輸中的福利保障 [J]. 中國(guó)動(dòng)物保健, 2012, 14(9): 20-23.

[9] 國(guó)科發(fā)財(cái)(2006)398號(hào). 關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見(jiàn). 中華人民共和國(guó)科學(xué)技術(shù)部關(guān)于發(fā)布《關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見(jiàn)》的通知, 2006.

[10] 王寧, 王簫, 王金林. 基于動(dòng)物福利的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理 [J]. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展, 2010, 31(12): 148-152.

[11] GB/14925-2001.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境及設(shè)施 [S].

[12] 中華人民共和國(guó)主席令第七十一號(hào). 中華人民共和國(guó)動(dòng)物防疫法. 2007.

[13] 中華人民共和國(guó)主席令第二十四號(hào). 中華人民共和國(guó)野生動(dòng)物保護(hù)法. 2004.

[14] 國(guó)家林業(yè)局令第37號(hào).《國(guó)家重點(diǎn)保護(hù)野生動(dòng)物馴養(yǎng)繁殖許可證管理辦法》. 2015.

[15] 蔣婀娜, 張春光, 劉兆平. GLP實(shí)驗(yàn)中的動(dòng)物福利 [J]. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué), 2008, 25(4): 76-77.

[16] 執(zhí)業(yè)獸醫(yī)資格考試應(yīng)試指南(下冊(cè)) [M]. 中國(guó)獸醫(yī)協(xié)會(huì). 北京, 中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社, 2010: 899-911.

[17] 陸承平. 獸醫(yī)碩士專(zhuān)業(yè)學(xué)位獸醫(yī)基礎(chǔ)知識(shí)全國(guó)統(tǒng)一(聯(lián)合)考試大綱及復(fù)習(xí)指南[M]. 北京, 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社, 2004: 324-376.

[18] 秦川. 醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué) [M]. 北京, 人民衛(wèi)生出版社, 2008: 110-113.

[19] 孫德明, 李根平, 鄭振輝, 等. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物從業(yè)人員上崗培訓(xùn)教材 [M]. 北京,中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社. 2015：3: 95-99.

[20] 國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局.藥物重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則[S].北京: 2014.

[21] 李國(guó)江.動(dòng)物普通病 [M]. 北京, 中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社.2001：8: 14-40.

[22] 劉光磊, 劉景利, 李一經(jīng), 等. 犬常見(jiàn)的體外寄生蟲(chóng)及驅(qū)蟲(chóng)藥的選擇 [J]. 畜牧獸醫(yī)科技信息, 2015, (08): 112.

Main technical points of quarantine inspection of Beagle dogs used for drug GLP experiment

SUN Chang-hua,LIU Yi, XIAO Ying, WEI Xia, ZHU Qing-fen

(Shandong Institute for Food and Drug Control, Jinan 250101, China)

The quarantine inspection and acceptance of laboratory animals is an important work, which can protect animals from pollution, occurrence and spread of diseases in the surounding area, and it is the key point to realize the quality standardization of laboratory animals. Beagle dogs are acknowledged widely as specialized laboratory dogs which is widely employed in experiments of drug safety evaluation because of the good genetic stability, environmental adaptability, disease resistance and consistency testing in the experiments. Establishment of standard operating procedures of beagle dog quarantine acceptance check for drug GLP organization tests, refining technical points, strengthen the technical training of quarantine officers, and efforts to improve the level of quarantine are needed to finally ensure the quality of laboratory animals.

Good laboratory practice; Beagle dog；Quarantine; Drug safety evaluation; Laboratory animals

孫昌華(1984-)，男，獸醫(yī)學(xué)博士，國(guó)家執(zhí)業(yè)獸醫(yī)師，研究方向：食品藥品安全性評(píng)價(jià)， E-mail： sunchanghuavip@163.com。

祝清芬(1973-)，男，藥理學(xué)博士，主任藥師，研究方向：藥檢藥理及食品藥品安全性評(píng)價(jià)， E-mail： zhuqingfen73@163.com。

經(jīng)驗(yàn)交流

R-33

A

1671-7856(2017) 06-0063-05

10.3969.j.issn.1671-7856. 2017.06.013

2016-12-07