王躍斌，胡則輝，胡成碩，柴學軍

（浙江省海洋水產(chǎn)研究所，浙江海洋大學海洋與漁業(yè)研究所，浙江省海水增養(yǎng)殖重點實驗室，農(nóng)業(yè)部重點漁場漁業(yè)資源科學觀測實驗站，浙江舟山 316021）

配合飼料與冰鮮橈足類對大黃魚稚魚生長、氨基酸及脂肪酸組成的影響

王躍斌，胡則輝，胡成碩，柴學軍

（浙江省海洋水產(chǎn)研究所，浙江海洋大學海洋與漁業(yè)研究所，浙江省海水增養(yǎng)殖重點實驗室，農(nóng)業(yè)部重點漁場漁業(yè)資源科學觀測實驗站，浙江舟山 316021）

設置人工配合飼料、橈足類及二者交替投喂（2 h：2 h）三個飼料組飼養(yǎng)大黃魚稚魚[初始體長為（8.18±1.41）mm，體質(zhì)量為（6.83±1.02）mg]，研究三個飼料組對大黃魚稚魚生長性能、氨基酸與脂肪酸組成的影響，養(yǎng)殖周期為8周。結果顯示，混合組大黃魚稚魚存活率及生長性能優(yōu)于配合飼料組，并明顯優(yōu)于橈足類組（P＜0.05）；三飼料組大黃魚稚魚氨基酸組成差異不明顯；配合飼料組和混合組稚魚脂肪酸組成明顯優(yōu)于橈足類組（P＜0.05），但二者之間差異不明顯。由研究結果可知，大黃魚稚魚培育期間完全使用配合飼料或橈足類不能取得最為理想的培育效果，而橈足類與配合飼料混合使用可以提高大黃魚稚魚的成活率，促進大黃魚稚魚生長。

大黃魚；配合飼料；橈足類；生長；營養(yǎng)

大黃魚Pseudosciaena crocea屬近海集群暖溫性洄游魚類，主要分布于我國黃海南部、東海、南海等海域，是我國傳統(tǒng)的“四大海產(chǎn)魚類”之一，具有重要的經(jīng)濟價值[1]。然而由于過度捕撈，大黃魚資源急劇衰退，前景堪憂[1]。為保護大黃魚資源，從上世紀80年代起，人們開始研究大黃魚人工繁育技術，至今已取得諸多成果，對大黃魚資源的豐富起到了重要作用[2-3]。目前，國內(nèi)外海水魚類的人工育苗主要使用輪蟲（Rotifer）、鹵蟲（Anemia）、橈足類（Copepod）等生物餌料[4]。生物餌料在改善魚類苗種培育效果方面起到了重要作用，但其存在營養(yǎng)成分不豐富、均衡，易攜帶致病菌，供應不穩(wěn)定等缺點[4]。在傳統(tǒng)的大黃魚苗種繁育過程中需要使用橈足類，其也存在生物餌料的上述缺點，如浙江省舟山海域受地理環(huán)境的制約，橈足類等生物餌料很難在自然海域中獲取，而需要大量的在外地購買，這直接導致了大黃魚育苗的不穩(wěn)定性及不確定性。開發(fā)取代生物餌料的人工配合飼料是魚類苗種繁育的發(fā)展趨勢，但以配合飼料替代橈足類飼喂大黃魚稚魚的報道仍然很少，本文對配合飼料與橈足類飼喂大黃魚稚魚存活、生長及氨基酸、脂肪酸組成的影響進行了研究，以期豐富配合飼料替代橈足類在大黃魚苗種繁育中的應用方法，同時也為人工配合飼料的開發(fā)提供一定參考。

1 材料與方法

1.1 實驗用魚

實驗魚為2015年3月人工繁育苗種，選取體質(zhì)健壯、規(guī)格一致的稚魚用于實驗，體長為（8.18±1.41）mm，體質(zhì)量為（6.83±1.02）mg。

1.2 實驗設計與飼養(yǎng)管理

實驗于2015年4月11日至2015年6月6日在浙江省海水增養(yǎng)殖重點實驗室西軒基地進行，實驗周期為8周。實驗用養(yǎng)殖容器為有效容積200 L（直徑70 cm，高70 cm）的圓形塑料缸。設置3個飼料組，其中配合飼料組、冰鮮橈足類組為24 h內(nèi)每隔2 h投喂1次；另1組混合組為配合飼料與冰鮮橈足類24 h內(nèi)交替投喂，每2 h交替投喂1次，每次均為飽食投喂。每組3個平行，每個平行組放置大黃魚稚魚300 ind。實驗期間水溫24.8～25.2℃，鹽度26～27，pH 7.8～8.1，自然光照，連續(xù)24 h充氣，保持水中溶解氧含量5.0 mg/L以上。每天吸污2次，100%換水1次。實驗所用配合飼料購自日本林兼產(chǎn)業(yè)株式會社，所用橈足類為購買的冰鮮餌料。其一般營養(yǎng)成分及氨基酸、脂肪酸組成分別見表1、表2和表3。

表1 實驗飼料一般營養(yǎng)成分（干重）Tab.1 Nutrition composition of the experimental diets(dry matter) %

表2 實驗飼料氨基酸組成（干重）Tab.2 Amino acids composition of the experimental diets(dry matter) %

表3 實驗飼料脂肪酸組成（干重）Tab.3 Fatty acids composition of the experimental diets(dry matter)%

1.3 樣品采集與測定

實驗結束后停飼24 h，每缸隨機取30 ind魚測量體質(zhì)量、體長。采用以下公式計算生長參數(shù)：

成活率（survival ratio，SR，%）=終末魚數(shù)量/初始魚數(shù)量×100%；

日均增長量（average daily length growth，DLG，mm/d）=（終末魚體長-初始魚體長）/飼養(yǎng)天數(shù)

相對增長率（relative growth rate of body length，RGRL，%）=（終末魚體長-初始魚體長）/初始魚體長× 100%

瞬時增長率（Instantaneous growth rate，IGR，%）=（ln終末魚體長-ln初始魚體長）/飼養(yǎng)天數(shù)×100%

特定增長率（specific growth rate，SGR，%）=（ln終末平均體質(zhì)量-ln初始平均體質(zhì)量）/飼養(yǎng)天數(shù)×100%

絕對增長率（absolute growth rate，AGR，mg/d）=（終末平均體質(zhì)量-初始平均體質(zhì)量）/飼養(yǎng)天數(shù)

每缸隨機取18 ind魚采用組織搗碎機進行勻漿作為全魚樣本，每6 ind分別用于測定常規(guī)營養(yǎng)成分、氨基酸及脂肪酸組成，全魚樣品于-20℃保存待用。

水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分采用國標方法（GB/T 6435-1986、GB/T6432-1994、GB/T 6433-1994、GB/ T6438-1992）測定。

氨基酸的測定采用酸水解法，取樣品0.5 g，用6 mol/L的鹽酸于110℃下水解22 h過濾定容至50 mL，取0.5 mL真空干燥制作成樣品，使用氨基酸自動分析儀（BECKMANR ，121MB，USA）測定樣品氨基酸組成。

脂肪酸測定采用安捷倫GC—7820氣相色譜儀測定，稱取適量的樣品，放入組織搗碎機中攪碎，真空干燥，干燥樣品用苯—石油醚（體積比1:1）提取脂肪后，用0.4 mol/L氫氧化鉀—甲醇液酯化30 min，然后熱水浴濃縮，加水分層，上層液使用氣相色譜法檢測分析，并按面積歸一化法計算脂肪酸各組分含量。氣相色譜條件：30 m×0.320 mm×0.25 μm Agilent 19091J-413 GC Columns，柱箱溫度210℃，檢測器溫度（FID）300℃，進樣器溫度250℃，載氣為高純N2，尾吹30 mL/min，氫氣40 mL/min，空氣450 mL/min。

1.4 數(shù)據(jù)處理

實驗結果以平均值±標準差（Mean±SD）表示。所有數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進行Independent samples T-Test和One-way ANOVA分析，當P<0.05時為顯著差異。

2 結果

2.1 配合飼料與橈足類對大黃魚稚魚生長性能的影響

配合飼料與橈足類對大黃魚稚魚生長性能的影響見表4。結果顯示，混合組大黃魚稚魚成活率、絕對增長率最高，且與橈足類及配合飼料組均呈顯著性差異（P＜0.05）。混合組日均增長量、相對增長率、瞬時增長率、特定增長率大于配合飼料組，但無顯著性差異（P＞0.05）；橈足類組稚魚各項生長參數(shù)與混合組、配合飼料組相比均最低，且呈顯著性差異（P＜0.05）。

表4 配合飼料與橈足類對大黃魚稚魚生長性能的影響Tab.4 Effect of formula feed and copepod on growth performance of juvenile P.crocea

2.2 配合飼料與橈足類對大黃魚稚魚一般營養(yǎng)成分的影響

配合飼料與橈足類對大黃魚稚魚一般營養(yǎng)成分的影響見表5。結果顯示，橈足類組、混合組及配合飼料組大黃魚稚魚（干重）粗蛋白、粗脂肪、灰分含量接近，相互間無顯著性差異（P＞0.05）。

表5 配合飼料與橈足類對大黃魚稚魚一般營養(yǎng)成分的影響（干重）Tab.5 Effect of formula feed and copepod on proximate composition of juvenile P.crocea(dry matter)

2.3 配合飼料與橈足類對大黃魚稚魚氨基酸組成的影響

配合飼料魚橈足類對大黃魚稚魚全魚氨基酸組成的影響見表6。結果顯示，橈足類組大黃魚稚魚脯氨酸、甘氨酸、胱氨酸、蛋氨酸、酪氨酸、精氨酸含量較高，但與其它兩組無顯著性差異（P＞0.05）?；旌辖M稚魚天冬氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、谷氨酸、丙氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、組氨酸含量較高，但與其它兩組無顯著性差異（P＞0.05）。配合飼料組稚魚各氨基酸含量較低，但與其它兩組無顯著性差異（P＞0.05）?；旌辖M必需氨基酸與總氨基酸含量均最高，配合飼料組最低，但三飼料組之間無顯著性差異（P＞0.05）。

表6 配合飼料與橈足類對大黃魚稚魚氨基酸組成的影響Tab.6 Effect of formula feed and copepod on amino acids composition of juvenile P.crocea %

配合飼料與橈足類對大黃魚稚魚全魚脂肪酸組成的影響見表7。結果顯示，配合飼料組大黃魚稚魚各飽和脂肪酸含量及總飽和脂肪酸含量均較其它兩組高，配合飼料組與混合組間無顯著性差異（P＞0.05），但二者均顯著高于橈足類組（P＜0.05）。配合飼料組大黃魚稚魚單不飽和脂肪酸中C14:l n-5、C16:l n-7、C18: l n-9c、C20:1含量及總單不飽和脂肪酸含量均較其它兩組高，配合飼料組與混合組間無顯著性差異（P＞0.05），但二者均顯著高于橈足類組（P＜0.05）。配合飼料組大黃魚稚魚EPA、DHA含量均高于其它兩組，EPA含量與混合組無顯著性差異（P＞0.05），但二者均顯著高于橈足類組（P＜0.05），DHA含量則顯著高于混合組與橈足類組（P＜0.05）。配合飼料組大黃魚稚魚n-3多不飽和脂肪酸總含量與多不飽和脂肪酸總含量均高于其它兩組，n-3多不飽和脂肪酸總含量與混合組無顯著性差異（P＞0.05），但二者均顯著高于橈足類組，多不飽和脂肪酸總含量則顯著高于混合組與橈足類組（P＜0.05）。

3 討論

配合飼料與生物餌料對魚類的生長與存活會產(chǎn)生一定影響。趙金柱等[1]研究了微粒飼料替代生物餌料對大黃魚稚魚存活、生長的影響，發(fā)現(xiàn)微粒飼料替代生物餌料顯著影響大黃魚稚魚存活、生長與體成分。張雅芝等[5]采用不同餌料飼喂的花鱸Lateolabrax japonicus稚魚生長發(fā)育及存活進行了研究，發(fā)現(xiàn)配合飼料組花鱸稚魚的生長及生活率等各項指標均較生物餌料組低。史會來等[6]發(fā)現(xiàn)飼喂配合飼料的舟山牙鲆Paralichthys olivaceus仔稚魚成活率與飼喂生物餌料的稚魚成活率間無顯著性差異。本研究中，混合組大黃魚稚魚成活率最高，配合飼料組次之，橈足類組最低，且三者成活率呈顯著性差異（P＜0.05）；混合組生長參數(shù)總體上高于配合飼料組，并顯著高于橈足類組（P＜0.05）?？梢?，采用配合飼料與橈足類混合投喂比單一投喂配合飼料或橈足類更有利于提高大黃魚稚魚存活及生長速度，具體的混合比例與投喂策略有待進一步研究。

表7 配合飼料與橈足類對大黃魚稚魚脂肪酸組成的影響Tab.7 Effect of formula feed and copepod on fatty acids composition of juvenile P.crocea %

蛋白質(zhì)是魚類生長所必需的營養(yǎng)物質(zhì)，而魚類對蛋白質(zhì)的需要其實主要是對必需氨基酸的需要。必需氨基酸（essential amino acid）是指在體內(nèi)不能合成，或合成的量不能滿足機體需要，必須從外界攝入的氨基酸。魚類必需氨基酸主要有精氨酸（Arg）、組氨酸（His）、異亮氨酸（Ile）、亮氨酸（Leu）、賴氨酸（Lys）、蛋氨酸（Met）、苯丙氨酸（Phe）、蘇氨酸（Thr）、纈氨酸（Val）、色氨酸（Trp）[7]，魚類對必需氨基酸需要量之間存在一定的比例關系，使魚體蛋白質(zhì)沉積達到最大的必需氨基酸比例稱為魚的最佳氨基酸模式[8-9]。不同飼料往往具有不同的營養(yǎng)組成，對魚體氨基酸組成等會造成一定影響[10-12]。本研究中三飼料組大黃魚稚魚粗蛋白含量接近，差異不顯著（P＞0.05）。并且，實驗所用配合飼料蛋白總量、氨基酸含量及必需氨基酸含量最高，混合組次之，橈足類組最低，混合組大黃魚稚魚必需氨基酸組成略高，但各實驗組稚魚的必需氨基酸及非必需氨基酸組成沒有顯著性差異（P＞0.05），即單獨使用配合飼料或橈足類及二者混合投喂均沒有對大黃魚稚魚各氨基酸含量造成明顯影響。氨基酸與蛋白質(zhì)合成及其它生理活動密切相關，不同飼料組大黃魚稚魚各氨基酸含量無明顯差異，說明各飼料組稚魚氨基酸代謝生理狀態(tài)可能較為接近。在氨基酸代謝生理狀態(tài)較為接近的情況下，混合組成活率及生長性能最好，則可能是因為在本實驗條件下決定大黃魚稚魚成活率及生長性能的因素并非飼料的蛋白質(zhì)營養(yǎng)組成，而是其它因素，如飼料的其它營養(yǎng)成分、氨基酸模式、飼料的物理特性等。

徐樹德等[13]使用不同飼料飼喂黃斑籃子魚Siganus canaliculatus幼魚發(fā)現(xiàn)不同飼料的黃斑籃子魚幼魚肌肉脂肪酸含量有所不同。朱慶國等[14]通過飼料中添加不同水平的n-3HUFA飼喂斜帶石斑魚Epinephlus coioides幼魚，發(fā)現(xiàn)斜帶石斑魚幼魚肌肉中n-3HUFA隨飼料n-3HUFA水平的增加而增加。易新文等[15]發(fā)現(xiàn)菜籽油替代魚油對大黃魚肌肉脂肪酸造成了顯著影響?？梢婔~體脂肪酸含量會受到飼料的影響。本研究中，橈足類組、混合組、配合飼料組脂肪酸含量依次增加，各組大黃魚稚魚脂肪酸含量也表現(xiàn)出增加趨勢，大黃魚稚魚隨著飼料中脂肪酸含量的增加體內(nèi)脂肪酸組成也受到了影響。諸多研究表明，n-3高度不飽和脂肪酸是海水仔稚魚生長發(fā)育所必需的脂肪酸，仔稚魚不能合成，只能從飼料中獲取，其中DHA、EPA最為重要[16]。n-6系列中的ARA在仔稚魚的生長發(fā)育中也有一定作用[17-18]。本研究中，橈足類組大黃魚稚魚EPA、DHA含量顯著低于混合組及配合飼料組（P＜0.05），配合飼料組大黃魚稚魚DHA含量顯著高于混合組（P＜0.05），ARA含量三組間無顯著性差異（P＞0.05），多不飽和脂肪酸總量也以配合飼料組大黃魚稚魚為最高，說明配合飼料與混合組比單獨投喂橈足類更能促進大黃魚稚魚脂肪酸的積累，可能更滿足大黃魚稚魚對脂肪酸的需求。配合飼料組大黃魚稚魚體內(nèi)脂肪酸含量雖然較其它兩飼料組高，但該組成活率及生長參數(shù)卻低于混合組。可見，配合飼料雖然營養(yǎng)成分豐富，較橈足類有一定優(yōu)勢，但在大黃魚稚魚培育期間完全使用配合飼料不能取得最為理想的培育效果，而橈足類與配合飼料混合使用可以提高大黃魚稚魚的成活率，促進大黃魚稚魚生長，配合飼料與橈足類的混合比例與投喂策略值得深入研究。

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Effects of Formula Feed and Copepod on Growth Performance, Amino Acid and Fatty Acid Composition of Larvae Pseudosciaena crocea

WANG Yue-bin,HU Ze-hui,HU Cheng-shuo,et al
(Zhejiang Marine Fisheries Research Institute,Marine and Fishery Research Institute of Zhejiang Ocean University,Zhejiang Key Lab of Mariculture&Enhancement,Scientific Observation and Experiment Station of Fishery Resources in Key Fishing Grounds,Ministry of Agriculture,Zhoushan 316021,China)

An 8-week experiment was conducted to investigate the effects of formula feed and copepod on growth,amino acid and fatty acid composition of larvae Pseudosciaena crocea [initial average body length of (8.18±1.41)mm and initial average weight of(6.83±1.02)mg]cultured in round plastic cylinder with an effective volume of 200 L.The larvae were fed with three different diets in the experiment.The larvae in group A were fed with formula feed,those of group B with the alternative of formula feed and copepod(2 h:2 h)and those of group C with copepod.Each diet group had three repetitions,300 ind in each repetition.The fish wasfed to satiation everyday.The temperature ranged from 24.8 to 25.2℃,salinity from 26 to 27,pH from 7.8 to 8.1 and the dissolved oxygen was kept above 5 mg/L during the experiment period.The results showed that survival rates and growth performance of group B were significantly higher than that of group C(P＜0.05),but no significant difference with group A.There was no significant difference among the three diet groups in amino acid composition.The fatty acids composition of group A and B was significantly higher than that of group C (P＜0.05),but no significance was found between group A and group B.It can be concluded from the experimental results that combination of formula feed and copepod improved better growth performance and higher survival rate of P.crocea than those of artificial feed or copepod alone.

Pseudosciaena crocea;formula feed;copepod;growth;nutrition

S965.322

A

1008－830X(2016)03－0215－07

2016-02-20

舟山市公益類科技項目（2014C31062）；2015年浙江省海洋與漁業(yè)局項目

王躍斌（1983-），男，浙江寧海人，工程師，研究方向：海水增養(yǎng)殖.E-mail:wybin@126.com

柴學軍，教授級高級工程師.E-mail:chaixj6530@sohu.com