◎苗沐霖

植物細胞有絲分裂實驗體會

◎苗沐霖

觀察植物細胞有絲分裂是高中時期生物學科的重要實驗之一，在實驗中能夠讓我們清楚地觀察到植物細胞有絲分裂中不同時期展現(xiàn)出來的特點，幫助提高我們對于有絲分裂的理解，提高生物學習興趣。本文分析了植物細胞有絲分裂實驗的描述和體會，希望能夠讓植物細胞有絲分裂實驗的變得更加完善和精準。

植物細胞的有絲分裂是把母細胞中的遺傳物質(zhì)，通過分裂的方式平均分配到兩個字細胞中的過程。母細胞的遺傳物質(zhì)主要是存在于細胞核的染色體上，在有絲分裂過程中，染色體形態(tài)并不是固定的，而是連續(xù)變化的，因此染色體的有絲分裂分為間期、前期、中期、后期等階段，不同的是其中染色體的差別比較大，因此通過實驗，能夠讓我們更加清晰的觀察和理解植物細胞有絲分裂的變化過程。

實驗材料選擇

大蒜根尖培養(yǎng)。想要看到染色體的行為變化，選擇材料是最關鍵的一步，材料選擇中需要考慮各種因素，例如說洋蔥，生長容易受到季節(jié)的影響，同時染色體的體積較小，因此在這次試驗中我選擇了大蒜作為實驗材料，大蒜的根尖細胞中染色體的體積比較大，便于觀察，同時培養(yǎng)期比較短，不用受到季節(jié)的限制。在室內(nèi)溫度15-26℃的環(huán)境中，大蒜根部生長速度較快，首先把蒜瓣用鐵絲串號，放在裝滿水的韶陂上，這趟能夠讓大蒜的底部接觸到水面同時不會被水淹沒，然后把燒杯放到25℃的恒溫箱中，每隔六個小時就需要換睡衣次，不到兩天的時間，根部就會長出根尖。必須要注意經(jīng)常換水，否則容易因為陽氣不足導致生長緩慢或者是腐爛。

取得大蒜根尖。不同的植物根尖細胞在同一天中分裂的時刻都各有不同，因此取材的時間也要根據(jù)不同的植物種類來選擇最佳的時間。大蒜的根尖細胞常溫一般是在18℃，在實驗中我通過觀察發(fā)現(xiàn)，早晨的10點左右大蒜根尖細胞的分裂比較旺盛，因此在跟腱成長到2-3cm時我在上午10點進行取材，取材長度為3mm左右。

試驗中根尖的固定和解離環(huán)節(jié)

想要軟化細胞壁，可以使用酸解或者是酶解，兩種方式都能夠很好的把細胞分散開。酸解使用起來比較經(jīng)濟，同時效果也非常好，于是在試驗中我選擇了用酸解來軟化細胞。按照生物課本的講解，我選擇的是質(zhì)量分數(shù)為15%的鹽酸和體積分數(shù)為95%的酒精混合液體，把這兩種液體用1:1的形式混合在一起，針對打算的根尖進行解離，首先需要先把大蒜根尖進行固定，這一步驟能夠把根尖細胞殺死，這樣根尖生長分區(qū)的細胞就能夠固定在不同的生長周期，避免了染色體在接力過程中發(fā)生狀態(tài)的變化。根尖的解離能夠幫助除去細胞中的果膠和纖維素，軟化細胞壁。根尖解離過程是都能夠順利進行，直接影響到了染色的效果還有壓片時細胞是否能夠分散開來，讓我們清晰地看到有絲分裂的效果。我先把取下來的根尖放入到固定液當中，這樣把固定的時間設置為3-5個小時，選擇常用的FFA固定劑，固定好的材料可以放在70%的酒精溶液中保存。在解離過程中，一定要注意把握好街里的時間，如果解離的時間太短，細胞則不會完整的分散，如果解離時間太長，根尖則會進入完全的酥麻狀態(tài)，無法進行詳細觀察。解離液選擇使用15%的鹽酸來代替10%的鹽酸，能夠有效縮短接力實踐。把固定好的大蒜根尖取出來，永清數(shù)進行沖洗，干凈之后放入到培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)皿中放入15%的鹽酸離析液，解離時間為5分鐘即可，等待根尖已經(jīng)變成了白色略帶透明，這時候的根尖壓片效果才會呈現(xiàn)出最佳狀態(tài)。

染色。為了能夠觀察出細胞核中染色體的形態(tài)變化過程，需要使用染色液，針對染色體進行著色，DNA呈現(xiàn)的是酸性，所以需要使用堿性染料，在染色實驗中，我加入了1%的龍膽紫溶液和少量的10%醋酸，這時候的溶液就呈現(xiàn)出了限量的紫色，這樣調(diào)配出來的染色劑，醋酸起到了一定的分色作用，能夠幫助加強細胞核和軟色提的選擇性著色，有效避免細胞核中被染成一片深紫色，幫助我們更好的觀察實驗結(jié)果。先用鑷子把大蒜的根尖取出來，在經(jīng)過清水清洗，之后放在在玻璃片上，去掉根尖前端的烏白色的根管，然后用聶子尖把打算的根部捏碎，再用之前調(diào)配好的染色劑進行染色，這樣的好處是能夠讓大多數(shù)的細胞都能夠充分的得到染色。五分鐘之后染色結(jié)束。先需要蓋上蓋玻片，再用2層吸水紙同樣蓋在玻璃片上，用木質(zhì)輕輕地擠壓，這樣能夠讓跟家細胞均勻的呈現(xiàn)出擴散的片狀，吸水紙能夠幫助把四周出現(xiàn)的多余水分吸收掉，這樣就能夠在顯微鏡下進行詳細的觀察了。

觀察。觀察階段，先用10倍的物鏡進行觀察，找到呈現(xiàn)出正方形的、排列狀態(tài)比較密集的分生區(qū)細胞，在找到分布比較均勻、染色效果比較好、分裂細胞比較多的區(qū)域。通過仔細的觀察之后，把需要觀察的細胞轉(zhuǎn)移到物鏡視野的中間，然后轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，選擇40倍的物鏡，調(diào)整好細準焦螺旋直到能夠清晰的觀察到細胞。輕輕地移動裝片，就能夠觀察到整個植物細胞有絲分裂的各個時期的各個形態(tài)特點了。

實驗結(jié)論

取材和固定的時間比較長，需要6個小時以上，因此是在課后完成的，解離、染色和觀察是在課堂上完成的，解離和染色的時間用了10-12分鐘，能夠在過程中充分的尋找、觀察植物細胞的有絲分裂狀態(tài)。我發(fā)現(xiàn)按照課本中的面熟規(guī)定的2-3mm對根尖進行剪出，得到的根尖乳白色的箭頭在解離處理中已經(jīng)有所軟化，如果在進行后期的染色和解離環(huán)節(jié)有可能會破壞根尖的細胞形態(tài)，如果發(fā)現(xiàn)不及時的話，有可能對于整個觀察實驗的效果產(chǎn)生一定的影響，因此我認為可以再剪取實驗材料根尖是適當?shù)念A留出一定的長度，擴大到5-6mm。

通過實驗可以得出，植物細胞的有絲分裂活動是有節(jié)律性的，受到了實踐的制約，帶不同的實踐當中，細胞分裂活動最旺盛的時間是上午的10-11點之間，因此在不同的時間中取得的大蒜根尖制作出來的觀察結(jié)果肯定效果也不同。

（作者單位：濮陽市第一高級中學）