李曉峰 楊生虎 韓 云 楊立平 秦 偉

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院腹部腔鏡外科，青海 西寧 810001)

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結(jié)腸腺癌中叉頭框蛋白M1表達(dá)及其與上皮型黏附蛋白的關(guān)系

李曉峰 楊生虎 韓 云 楊立平 秦 偉

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院腹部腔鏡外科，青海 西寧 810001)

目的 檢測(cè)叉頭框蛋白(FOX)M1在結(jié)腸腺癌中的表達(dá)，探討其與上皮型黏附蛋白(E-cadherin)的關(guān)系。方法 結(jié)腸腺癌組(觀察組)和正常結(jié)腸黏膜組(對(duì)照組)術(shù)后的標(biāo)本，應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)兩組中FOXM1和E-cadherin的表達(dá)，觀察FOXM1和E-cadherin在不同臨床特征中的表達(dá)差別，分析FOXM1和E-cadherin相關(guān)性。結(jié)果 觀察組中FOXM1表達(dá)的陽性率明顯高于對(duì)照組，觀察組中E-cadherin表達(dá)的陽性率明顯低于對(duì)照組。觀察組中FOXM1過表達(dá)、E-cadherin低表達(dá)均與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和微血管浸潤密切相關(guān)。FOXM1過表達(dá)與腫瘤體積密切相關(guān)。線性相關(guān)分析顯示觀察組中FOXM1和E-cadherin表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性。結(jié)論 FOXM1過表達(dá)可以促進(jìn)結(jié)腸腺癌的發(fā)生和發(fā)展，F(xiàn)OXM1過表達(dá)可以在一定程度上下調(diào)E-cadherin的表達(dá)，對(duì)細(xì)胞間的黏附進(jìn)行調(diào)節(jié)，促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展。

結(jié)腸腺癌；叉頭框蛋白(FOX)M1；上皮型黏附蛋白(E-cadherin)

叉頭框蛋白(FOX)M1是叉頭框轉(zhuǎn)錄因子家族成員之一，具有保守性翼狀螺旋DNA結(jié)構(gòu)域，在細(xì)胞由G1期進(jìn)入S期中發(fā)揮重要作用〔1，2〕。FOXM1在促進(jìn)腫瘤進(jìn)展中有明顯作用〔3〕。上皮型黏附蛋白(E-cadherin)是細(xì)胞間連接的黏附蛋白，在正常上皮中高表達(dá)，當(dāng)腫瘤性病變形成和進(jìn)展時(shí)，E-cadherin的表達(dá)下降或丟失，使細(xì)胞間連接的黏附作用減弱，細(xì)胞易于遷移〔4，5〕。本研究觀察結(jié)腸腺癌中FOXM1的表達(dá)，探討FOXM1和E-cadherin表達(dá)的臨床病理特征，關(guān)注二者的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 觀察組為2014年1～12月我院確診為結(jié)腸腺癌，并行根治手術(shù)的患者，術(shù)后常規(guī)留取蠟塊組織，共85例，年齡34～82歲，平均56.1歲，其中男45例，女40例，均簽署知情同意書。術(shù)前均未行放化療。納入均符合WHO中關(guān)于結(jié)腸腺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并由病理醫(yī)師確診并分級(jí)。對(duì)照組為上述患者中距腫物邊緣>5 cm的正常結(jié)腸黏膜組織共38例作為對(duì)照組，年齡38～75歲，平均54.4歲，其中男19例，女19例。兩組常規(guī)資料無明顯差異。

1.2 FOXM1和E-cadherin的檢測(cè)方法 兩組術(shù)后標(biāo)本均應(yīng)用甲醛溶液固定、脫水、浸蠟、包埋、切片后，應(yīng)用免疫組化二步法檢測(cè)FOXM1和E-cadherin蛋白的表達(dá)，二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色，嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作，做好質(zhì)控工作，減少人為誤差。

1.3 FOXM1和E-cadherin結(jié)果的判斷方法 FOXM1的陽性顯色部位主要是細(xì)胞核和(或)細(xì)胞質(zhì)中，E-cadherin的陽性顯色部位是細(xì)胞膜，以染成深棕黃色為陽性細(xì)胞，隨機(jī)計(jì)數(shù)5個(gè)400倍上皮細(xì)胞分布的區(qū)域，計(jì)算陽性率，取平均值作為最終結(jié)果，以陽性率<10%定為陰性，以陽性率≥10%定為陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)和線性相關(guān)性分析。

2 結(jié) 果

2.1 兩組FOXM1和E-cadherin表達(dá)比較 兩組FOXM1和E-cadherin表達(dá)陽性率差異顯著(P<0.05)。見表1。

表1 兩組FOXM1和E-cadherin陽性表達(dá)比較〔n(%)〕

2.2 觀察組不同臨床特征中FOXM1和E-cadherin表達(dá)的比較 觀察組中FOXM1過表達(dá)、E-cadherin低表達(dá)均與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和微血管浸潤密切相關(guān)，F(xiàn)OXM1過表達(dá)與腫瘤體積密切相關(guān)。兩者均與浸潤深度及分化程度無相關(guān)性。見表2。

2.3 觀察組FOXM1和E-cadherin相關(guān)性 FOXM1和E-cadherin表達(dá)負(fù)相關(guān)(r=-0.43，P=0.039 8)。

表2 觀察組不同臨床特征中FOXM1和E-cadherin陽性表達(dá)的比較〔n(%)〕

3 討 論

FOXM1為Forkhead轉(zhuǎn)錄因子家族的重要成員之一，其特征是具有一個(gè)長110個(gè)氨基酸的保守的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域，在細(xì)胞由G1期進(jìn)入S期及維持染色體穩(wěn)定方面具有重要作用〔6，7〕。人的FOXM1具有三類剪切體，A類包含兩個(gè)外顯子，B類不含外顯子，C類只包含外顯子A1〔8〕。研究認(rèn)為FOXM1是一個(gè)典型的與增生有關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子，過表達(dá)時(shí)可以有效推動(dòng)有絲分裂，同時(shí)對(duì)DNA修復(fù)、染色質(zhì)重組及蛋白合成有一定的影響〔9〕。近年來學(xué)者關(guān)注FOXM1在腫瘤中的作用〔10〕。榮曉云等〔11〕通過觀察宮頸癌及癌前病變組織中FOXM1和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)FOXM1與VEGF呈正相關(guān)，認(rèn)為二者參與了宮頸癌病變的形成過程，即FOXM1可能對(duì)間質(zhì)的血管生成有一定作用。馮亞光〔6〕觀察FOXM1在胃腺癌中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)腫瘤中FOXM1表達(dá)升高，認(rèn)為FOXM1的高表達(dá)可能與胃癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，且FOXM1與Gli1有相互調(diào)節(jié)作用，二者的聯(lián)合檢測(cè)可以成為胃癌檢測(cè)、判斷預(yù)后的指標(biāo)。E-cadherin是細(xì)胞間重要的黏附蛋白，對(duì)細(xì)胞間緊密連接有重要作用，同時(shí)對(duì)細(xì)胞間功能也有重要作用〔12〕。正常黏膜上皮中E-cadherin高表達(dá)，而在腫瘤性病變和腫瘤進(jìn)展時(shí)E-cadherin的表達(dá)下調(diào)，此時(shí)腫瘤細(xì)胞易于離開原發(fā)灶，形成播散〔13〕。

本研究提示FOXM1、E-cadherin二者異常表達(dá)對(duì)結(jié)腸黏膜的癌變過程有一定的促進(jìn)作用。FOXM1是一種原癌基因，其表達(dá)上調(diào)后顯著提高了癌細(xì)胞對(duì)組織增殖、浸潤及轉(zhuǎn)移的潛能〔14，15〕。FOXM1信號(hào)在細(xì)胞發(fā)育途徑中可以調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖與凋亡之間的動(dòng)態(tài)平衡，即FOXM1機(jī)能失調(diào)會(huì)阻止細(xì)胞分化，最終將引起未分化細(xì)胞向惡性腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)變〔16，17〕。FOXM1、E-cadherin二者異常表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生，也可以促進(jìn)腫瘤對(duì)微血管的侵襲。當(dāng)E-cadherin的表達(dá)下調(diào)時(shí)，細(xì)胞間黏附能力下降，細(xì)胞連接較為松散，易于脫落，此種腫瘤細(xì)胞的體積常較小，移動(dòng)性強(qiáng)，對(duì)形成浸潤灶及播散有一定幫助〔18〕。研究顯示在E-cadherin表達(dá)下降或丟失后，可以啟動(dòng)相連的相關(guān)連環(huán)蛋白的異常表達(dá)，促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展〔19〕。FOXM1過表達(dá)可以引起腫瘤的生長，這與FOXM1對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用有密切關(guān)系〔20〕。本文提示FOXM1和E-cadherin二者具有負(fù)向協(xié)同作用，也提示FOXM1可能對(duì)細(xì)胞間黏附有一定的調(diào)控作用。

綜上，F(xiàn)OXM1過表達(dá)可以促進(jìn)結(jié)腸腺癌的發(fā)生和發(fā)展，F(xiàn)OXM1過表達(dá)可以在一定程度上下調(diào)E-cadherin的表達(dá)，對(duì)細(xì)胞間黏附進(jìn)行調(diào)節(jié)，促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展。

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〔2015-03-21修回〕

(編輯 苑云杰)

李曉峰(1972-)，男，副主任醫(yī)師，主要從事腹部腔鏡研究。

R735

A

1005-9202(2016)22-5628-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.22.061