林　想，劉改玲，楊紅梅，蔡　沖

（安徽科立華化工有限公司，安徽宿州234000）

66.5%二甲四氯鈉·4%唑草酮可濕性粉劑的高效液相色譜分析

林想，劉改玲，楊紅梅，蔡沖

（安徽科立華化工有限公司，安徽宿州234000）

采用高效液相色譜法測定66.5%二甲四氯鈉·4%唑草酮可濕性粉劑的有效成分含量，外標法定量。以甲醇-水（體積比85∶15）為流動相，在280nm波長下對二甲四氯酸、唑草酮進行分離和定量。二甲四氯酸、唑草酮的線性相關(guān)系數(shù)為0.9985、0.9996；標準偏差為0.14、0.05；變異系數(shù)為0.21%、1.20%；平均回收率為99.34%、99.146%。該方法具有簡便、快速、分離效果好等特點。

二甲四氯鈉；唑草酮；高效液相色譜法；分析

在我國，長期以來存在著使用單一除草劑的現(xiàn)象，使得很多雜草越來越具有抗藥性。伴隨著各種混生雜草的不斷演變，使用某種單一除草劑，有時可能會起不到除草的作用，更加不能防治混生雜草的危害，因而合理復配的除草劑越來越引起人們的重視。合理復配的除草劑不僅可以增加藥效，擴大殺草譜，延長施藥的適用期，降低在各種農(nóng)作物和土壤中的殘留，還可以減輕農(nóng)藥的藥害，提高農(nóng)作物的安全性。66.5%二甲四氯鈉·4%唑草酮可濕性粉劑主要用于防治水稻田的闊葉雜草和莎草。參考大量的文獻，發(fā)現(xiàn)對于二甲四氯鈉鹽和唑草酮的單一原藥的定量分析已有報道[1-3]，但是對于二甲四氯鈉、唑草酮復配的可濕性粉劑進行同柱分離并定量分析含量的方法則未見報道。本文考慮采用高效液相色譜法測定其含量。首先配制流動相的水為酸性（pH=4乙酸水溶液），這樣可以將可濕性粉劑樣品中的二甲四氯鈉完全轉(zhuǎn)化為二甲四氯酸，然后對二甲四氯酸和唑草酮這兩種成分進行定性分離，并進一步建立起對66.5%二甲四氯鈉·4%唑草酮可濕性粉劑的定量分析方法。本文中的操作方法快速、簡單、準確、分離效果好。經(jīng)驗證，這種分析方法的線性關(guān)系、準確度和精密度均能達到定量分析的要求，可以作為66.5%二甲四氯鈉·4%唑草酮可濕性粉劑產(chǎn)品的檢測分析方法。

1　實驗部分

1.1試劑和儀器

甲醇：色譜純；水：新蒸二次蒸餾水；乙酸：分析純；二甲四氯酸標樣：已知質(zhì)量分數(shù)≥98.0%；唑草酮標樣：已知質(zhì)量分數(shù)≥98.0%，標樣全部由農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所提供。

日本島津LC-10AT高效液相色譜儀，具有紫外可變波長檢測器；色譜數(shù)據(jù)處理機；微量進樣器：25μL；微孔過濾器：濾膜孔徑約為0.45μm；超聲波清洗器等。

1.2液相色譜操作條件

流動相：甲醇∶水（水為pH=4乙酸水溶液）=85∶15（V/V）；流速：0.7mL/min；紫外檢測波長：280nm；進樣量：5μL；出峰時間：唑草酮約8.8min，二甲四氯酸約3.8min。

上述的液相色譜分析操作條件，可以根據(jù)不同的液相色譜儀、高效液相色譜柱，對分析操作參數(shù)和操作條件作出合理、適當?shù)恼{(diào)整，從而獲得最佳的分離效果。二甲四氯酸、唑草酮標樣和樣品的高效液相色譜圖見圖1、圖2。

1.3測定步驟

1.3.1標準溶液的配制

準確稱取二甲四氯酸標樣0.4760g（精確至0.0002g），唑草酮標樣0.0280g（精確至0.0002g）置于50mL容量瓶中，加入20mL的甲醇溶解，用超聲波振蕩15min后，取出冷卻至室溫，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，備用。

1.3.2試樣溶液的配制

準確稱取66.5%二甲四氯鈉·4%唑草酮可濕性粉劑的試樣約0.7000g（精確至0.0002g），置于50mL容量瓶中，加蒸餾水5mL，再加入乙酸調(diào)整至溶液pH=4，用超聲波振蕩溶解，取出冷卻后加入甲醇約20mL，再用超聲波振蕩15min，取出冷卻至室溫，用色譜稀釋至刻度，搖勻，備用。

圖1　二甲四氯酸、唑草酮標樣的高效液相色譜圖

圖2　二甲四氯酸、唑草酮樣品的高效液相色譜圖

1.3.3測定

根據(jù)上述的液相色譜分析操作條件，確定液相色譜儀的基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標樣溶液，得出各針的的二甲四氯酸、唑草酮的峰面積。當連續(xù)進樣并確定相鄰兩針的峰面積相對變化值小于1.0%時，再按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序陸續(xù)進樣，用外標法來確定二甲四氯酸和唑草酮的含量。

1.3.4計算

將測得的試樣溶液、標樣溶液中二甲四氯酸、唑草酮的峰面積分別進行平均。根據(jù)二甲四氯酸、唑草酮的平均峰面積來計算各自的含量。

試樣中二甲四氯酸質(zhì)量分數(shù)X1（%）：

式中：A1-標樣溶液中二甲四氯酸峰面積的平均值；A2-試樣溶液中二甲四氯酸峰面積的平均值；m1-二甲四氯酸標樣的質(zhì)量，g；m2-試樣的質(zhì)量，g；Pi-標樣中二甲四氯酸的質(zhì)量分數(shù)，%。

試樣中唑草酮質(zhì)量分數(shù)X1（%）：

式中：A1-標樣溶液中唑草酮峰面積的平均值；A2-試樣溶液中唑草酮峰面積的平均值；m1-唑草酮標樣的質(zhì)量，g；m2-試樣的質(zhì)量，g；Pi-標樣中唑草酮的質(zhì)量分數(shù)，%。

2　結(jié)果與討論

2.1色譜條件的選擇

參照文獻中的各種分析操作方法，并同時考慮原藥二甲四氯酸、唑草酮的理化性質(zhì)，綜合考慮后，選擇混合的甲醇、水作為流動相。甲醇和水按照不同的配比，配制不同的流動相，在色譜柱上進樣分析后，進而優(yōu)化甲醇和水的配比。為了得到更好的分離效果，并保證分析結(jié)果的準確，首先選用乙酸將水的pH調(diào)到4.0，然后確定選擇甲醇∶水（水為pH=4乙酸水溶液）=85∶15（V/V）的流動相；流速調(diào)整為0.7mL/min；紫外檢測波長為280nm，可以很好地分離二甲四氯酸、唑草酮和其它雜質(zhì)；同時色譜基線平穩(wěn)，出峰的峰形漂亮，并且分析時間為12min，大大提高了分析檢測的效率。

2.2分析方法的線性相關(guān)性試驗

稱取二甲四氯酸標樣1.9040g（精確至0.0002g）和唑草酮標樣0.1120g（精確至0.0002g），置于100mL容量瓶中，用甲醇溶解，再用超聲波振蕩15min，稀釋至刻度，搖勻。分別準確移取上述定容后的溶液5、10、15、20、25mL，置于50mL容量瓶中，再用甲醇稀釋至刻度，搖勻，定容。在上述色譜操作條件下進行分析，分別以二甲四氯酸、唑草酮標樣濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標繪制標準曲線，結(jié)果見表1、圖3、圖4。二甲四氯酸線性方程y=634626x+31995，其線性相關(guān)系數(shù)為0.9985；唑草酮線性方程y=4E+06x+15235，其線性相關(guān)系數(shù)為0.9996。

表1　二甲四氯酸、唑草酮標樣的線性相關(guān)性試驗結(jié)果

圖3　二甲四氯酸濃度和峰面積的線性關(guān)系

圖4　唑草酮濃度和峰面積的線性關(guān)系

2.3分析方法的精密度試驗

對同一產(chǎn)品準確稱取5個試樣，在上述色譜操作條件下進行分析，測得二甲四氯鈉、唑草酮的標準偏差分別為0.14、0.05，變異系數(shù)分別為0.21%、1.20%（表2）。

表2　二甲四氯酸、唑草酮的精密度試驗結(jié)果

2.4分析方法的準確度試驗

在已知含量的試樣中分別準確加入不同量的二甲四氯酸、唑草酮標樣，在上述色譜操作條件下進行分析，測得二甲四氯酸、唑草酮的平均回收率分別為99.34%、99.146%（表3）。

表3　二甲四氯酸、唑草酮的準確度試驗結(jié)果

3　結(jié)論

本文采用高效液相色譜法測定66.5%二甲四氯鈉· 4%唑草酮可濕性粉劑的有效成分。試驗結(jié)果表明，本方法的分離效果及線性關(guān)系良好，準確度和精密度高，同時該方法具有快速、準確和分離效果好的優(yōu)點，是一種非常可行的分析操作方法。

[1]GB20698-2006，56%2甲4氯鈉鹽可溶粉劑[S].

[2]徐巧明，高清，董紅春，等.農(nóng)藥2甲4氯鈉鹽的高效液相色譜分析[J].現(xiàn)代農(nóng)藥，2004，3（4）：21-22.

[3]吳進龍，張志一，單煒力，等.唑草酮原藥高效液相色譜分析方法研究[J].農(nóng)藥科學與管理，2008，29（2）：15-18.

Analytical Method for 66.5%MCPA-Na·4%Carfen Trazone-ethyl WP by RP-HPLC

LIN Xiang，LIU Gai-ling，YANG Hong-mei，CAI Chong
（Anhui Kelihua Chemical Co.，Ltd.，Suzhou 234000，China）

The analytical method for determination of 66.5%MCPA-Na·4%Carfen trazone-ethyl WP was established.The method was developed with external standard method，5μm C18 stainless steel column and UV detector by UV at wavelength of 280nm，methanol and water（85∶15，by Vol）as the mobile phase.The analysis showed that the linear correlation coefficient of MCPA，Carfen trazone-ethyl were 0.9985，0.9996；standard deviations were 0.14，0.05；variable coefficients were 0.21%，1.20%；and average recovery rates were 99.34%，99.146%.The method has the advantages of convenience，fast speed，good separation，high precision and accuracy，and fine linear correlations.

MCPA-Na；Carfen trazone-ethyl；HPLC；analysis

10.3969/j.issn.1008-553X.2016.04.042

O657.7+2；S482.4+7

A

1008-553X（2016）04-0113-03

2016-03-28

林想（1987-），男，畢業(yè)于淮北師范大學（原淮北煤炭師范學院），從事農(nóng)藥原藥、制劑的分析檢測工作，15222977136，linxiangqwe@163.com。