寇永妹，張玉敏，李玉柱，楊雪冰，楊振鵬

（唐山市人民醫(yī)院兒科，河北唐山063000）

肺炎支原體肺炎伴喘息患兒白細(xì)胞介素13和內(nèi)皮素1水平變化及意義

寇永妹，張玉敏，李玉柱，楊雪冰，楊振鵬

（唐山市人民醫(yī)院兒科，河北唐山063000）

目的 測(cè)定肺炎支原體肺炎（MPP）急性發(fā)作期患兒血清中白細(xì)胞介素13（IL-13）和內(nèi)皮素1（ET-1）的水平變化，并探討其與喘息發(fā)作的關(guān)系。方法 收集MPP患兒50例，其中伴喘息的MPP患兒22例，非伴喘息的MPP患兒28例，以及對(duì)照組非MPP無(wú)喘息兒童20例。使用ELISA法測(cè)定三組中的血清中IL-13和ET-1的水平，比較其相關(guān)性和差異的顯著性。結(jié)果 三組資料中，伴喘息組與非伴喘息組和對(duì)照組的IL-13和ET-1水平比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），但非伴喘息組與對(duì)照組之間差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論 IL-13和ET-1參與了肺炎支原體肺炎引起喘息的發(fā)病過(guò)程，IL-13和ET-1水平升高在MPP患兒喘息的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中起重要作用。

肺炎支原體肺炎； 白介素13； 內(nèi)皮素1； 喘息

肺炎支原體肺炎（mycoplasma pneumoniae pneumonia，MPP）是由肺炎支原體（mycoplasma pneumoniae，MP）感染引起的兒科的常見(jiàn)病之一。MP感染極易引起誘發(fā)兒童哮喘的急性發(fā)作。而MP感染引發(fā)哮喘的發(fā)病機(jī)制，至今研究的并不透徹。因此，探明這一發(fā)病機(jī)制，對(duì)哮喘發(fā)作的預(yù)防與治療，具有極大的理論意義和應(yīng)用價(jià)值。本研究通過(guò)測(cè)定有喘息的MPP及無(wú)喘息的MPP患兒血清IL-13及 ET-1的水平，探討MP感染與IL-13及ET-1與 MPP喘息發(fā)作之間的關(guān)系。

資料與方法

1 病例選擇

病例為2012年9月至2013年5月在本院兒科住院確診為MPP急性期患兒50例。臨床診斷符合《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》第7版關(guān)于MPP的診斷標(biāo)準(zhǔn)［1］：①發(fā)熱，表現(xiàn)為弛張熱或不規(guī)則熱，伴咳嗽、氣促等癥狀；②雙肺呼吸音粗，或可聞及干、濕羅音，或肺部有實(shí)變體征；③胸片可表現(xiàn)為大葉性肺炎、小葉性肺炎、肺間質(zhì)X線征或肺門(mén)X線征；④通過(guò)被動(dòng)凝集法檢測(cè)血清MP-IgM，MP-IgM≥1：80。所有病例共分2組，其中MPP1組為MPP伴喘息患兒，共22例，女10例，男12例，年齡為9個(gè)月到9歲，平均年齡4.1歲。MPP2組為MPP不伴喘息患兒，共28例，其中女12例，男16例，年齡為8個(gè)月到9歲，平均年齡為4.8歲。對(duì)照組選擇同期兒科門(mén)診正常體檢兒童，共20例，其中男9例，女11例；年齡為1歲到10歲，近1個(gè)月沒(méi)有感染性疾病史。3組患兒年齡、性別比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。本研究獲得醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)以及家屬的知情同意。

2 方法

2.1肺炎支原體抗體的檢測(cè) 采集患兒靜脈血2 mL，在2小時(shí)內(nèi)，離心分離出血清。采用被動(dòng)凝集法檢測(cè)肺炎支原體抗體，所用試劑為日本富士瑞必歐株式會(huì)社生產(chǎn)的肺炎支原體抗體血凝診斷試劑盒；均在有效期內(nèi)使用，嚴(yán)格按照操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

2.2血清IL-13、ET-1水平檢測(cè) 住院患兒于入院后第二日晨，體檢兒童于體檢當(dāng)日晨空腹抽取靜脈血3mL，分離血清，-70℃凍存，采用ELISA法定量測(cè)定所有資料的血清IL-13、ET-1水平。檢測(cè)試劑盒購(gòu)自上海信裕生物科技有限公司。使用MULTISKAN FC型全自動(dòng)酶免儀，具體操作嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)分析使用SPSS 18.0軟件，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，多組間比較采用方差分析，多組間兩兩比較根據(jù)方差齊性與否采用Bonferroni（B）、Tamhane's T2（M）檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

1 IL-13與ET-1水平比較

三組血清IL-13和ET-1水平比較見(jiàn)表1。

表1　三組血清IL-13、ET-1水平比較（±s）

表1　三組血清IL-13、ET-1水平比較（±s）

組別例數(shù)IL-13（ng/L）ET-1（pg/mL）MPP12221.03±8.53105.61±52.82 MPP22814.90±5.8468.92±25.34對(duì)照組2014.40±5.3566.16±18.90

伴喘息、非喘息MPP患兒與對(duì)照組三組血清IL-13和ET-1水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。數(shù)據(jù)分析可知，伴喘息MPP患兒血清的IL-13和ET-1水平，顯著高于無(wú)喘息MPP患兒以及對(duì)照組血清的IL-13和 ET-1水平（P＜0.05），而無(wú)喘息MPP患兒和對(duì)照組血清的IL-13、ET-1水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

計(jì)算對(duì)照組IL-13、ET-1的95%置信區(qū)間分別為（3.91，24.89），（29.11，103.20），分別比較 MPP1與MPP2組IL-13、ET-1數(shù)值，數(shù)值高于95%置信區(qū)間記為升高，在區(qū)間范圍內(nèi)或低于下限記為正常。數(shù)值結(jié)果見(jiàn)表2。

表2　MPP1組與對(duì)照組IL-13、ET-1敏感度與特異的比較

IL-13與ET-1靈敏度和特異度分別為77.27%、92.86%和86.36%、89.29%。

2 IL-13與ET-1相關(guān)性分析

MPP1、MPP2和對(duì)照組這3組中的IL-13和ET-1之間均存在極顯著的正相關(guān)關(guān)系（P＜0.01），相關(guān)系數(shù)r分別為0.84、0.74、0.62。

討論

MP是兒童呼吸道感染的重要病原體之一［2］，但是其引發(fā)哮喘發(fā)作的致病機(jī)理至今尚未研究透徹，一般認(rèn)為，伴喘息的MPP是由眾多細(xì)胞因子參與的免疫反應(yīng)、炎癥及免疫損傷［3］。研究已證實(shí)，MP既是MPP的感染源，又是引發(fā)哮喘發(fā)作的過(guò)敏源。MP感染后通過(guò)一系列生理免疫反應(yīng)致使T淋巴輔助細(xì)胞Th1/Th2比例失衡是哮喘發(fā)生發(fā)展的主要機(jī)制之一，且哮喘患者體內(nèi)Th2亞群占優(yōu)勢(shì)［4-5］，而IL-13則是由Th2細(xì)胞分泌產(chǎn)生的炎性反應(yīng)因子。IL-13的增加不但能促使T淋巴輔助細(xì)胞Th0進(jìn)一步向Th2細(xì)胞分化，而且能夠促使嗜酸性粒細(xì)胞（EOS）和免疫球蛋白E（IgE）水平的增加，進(jìn)而影響哮喘病情的發(fā)作和延續(xù)［6］。因此，在眾多與哮喘有關(guān)的炎癥因子中，IL-13占首要地位［7］。

ET-1是一種血管活性多肽，肺血管內(nèi)皮細(xì)胞和氣道上皮細(xì)胞是其主要合成場(chǎng)所。有研究表明，ET-1參與了肺內(nèi)炎癥的病理生理過(guò)程［8］，能引起支氣管平滑肌強(qiáng)烈痙攣，又能刺激多種炎癥介質(zhì)釋放，引起氣道炎癥，同時(shí)可加重機(jī)體缺血、缺氧，在病情發(fā)生發(fā)展中起著重要作用［9］。有研究表明，當(dāng)氣道上皮細(xì)胞受損后，ET-1會(huì)出現(xiàn)過(guò)表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)氣道中EOS的聚集、活化［10］，而EOS的增加又會(huì)引起血清中IgE水平的升高，進(jìn)而引起喘息發(fā)作［10］。

在本研究中，伴喘息MPP組的血清IL-13、ET-1含量顯著高于無(wú)喘息MPP組以及對(duì)照組的血清IL-13、ET-1含量（P＜0.01），而無(wú)喘息MPP組的血清IL-13、ET-1含量與對(duì)照組差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），這與既往關(guān)于 IL-13、ET-1、喘息發(fā)作關(guān)系研究［1，8］的相關(guān)報(bào)道類(lèi)似。這種比較關(guān)系顯示，在MPP患兒血清中IL-13和ET-1的水平之間存在極顯著的正相關(guān)關(guān)系，并且它們與是否為MP感染關(guān)系不大，但與喘息發(fā)作存在對(duì)應(yīng)關(guān)系，說(shuō)明IL-13和ET-1水平的升高可能在MPP伴發(fā)喘息的發(fā)作及加重過(guò)程中起重要作用。本研究的結(jié)果說(shuō)明血清中IL-13和ET-1的含量水平一定程度上能夠反映出MPP患兒出現(xiàn)喘息的幾率。本研究可以為預(yù)防MPP引發(fā)哮喘及哮喘發(fā)作加重提供討論依據(jù)，臨床治療上，可以通過(guò)制備ET-1與IL-13的單克隆抗體，用來(lái)中和體內(nèi)過(guò)量的IL-13及ET-1，應(yīng)用轉(zhuǎn)換酶抑制劑，減少I(mǎi)L-13以及ET-1的生成，或者應(yīng)用拮抗劑和受體阻斷劑，阻抑IL-13和ET-1的作用，可能為MPP尤其是伴喘息MPP的治療，減輕肺部炎癥損傷，防止發(fā)展成哮喘開(kāi)辟一條新的途徑。

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（李 凌編輯）

Changes of Interleukin-13 and Endothelin-1 in Children with Mycoplasma Pneumoniae Pneumonia with Wheezing and Their Significances

KOU Yong-mei，ZHANG Yu-min，LI Yu-zhu，YANG Xue-bin，YANG Zhen-peng
（Department of pediatrics，Tangshan City People's Hospital，Tangshan 063000，China）

Objective To determine the changes in the levels of Interleukin-13（IL-13）and Endothelin-1（ET-1）in children with Mycoplasma Pneumoniae Pneumonia（MPP）with wheezing，and to explore their relationship with wheezing.Methods We enrolled 50 MPP patients，including 22 cases of MPP with wheezing，28 cases of MPP without wheezing，and 20 healthy children.IL-13 and ET-1 were measured by ELISA.The correlation and difference between groups were compared.Results IL-13 and ET-1 levels of wheezing group were significantly different from that of non-wheezing group or control group（P＜0.05）. There was no significant difference between non wheezing group and control group（P＞0.05）.Conclusion IL-13 and ET-1 might be involved in the pathogenesis of wheezing caused by MPP.The increase of IL-13 and ET-1 might play an important role in the occurrence and development of MPP in children with wheezing.

Mycoplasma； Pneumoniae； Pneumonia；Interleukin-13； Endothelin-1； Wheezing

10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.09.012

2015-12-22；

2016-02-02

寇永妹（1978—），女，學(xué)士，兒科主治醫(yī)師，從事兒科工作。Tel：18931506119；Email：18931506119@163.com

張玉敏（1977—），女，碩士，副主任檢驗(yàn)師，從事臨床實(shí)驗(yàn)及研究工作。Tel：18931506372；E-mail：1023716755@qq