林偉財，王欽貴，謝紹河，，鄧岳文，梁飛龍

（1.廣東紹河珍珠有限公司，廣東 汕頭 515822；2.廣東海洋大學(xué)珍珠研究所，廣東 湛江 524025）

三角帆蚌內(nèi)臟團(tuán)二次植核育珠

林偉財1，王欽貴1，謝紹河1，2，鄧岳文2，梁飛龍2

（1.廣東紹河珍珠有限公司，廣東 汕頭 515822；2.廣東海洋大學(xué)珍珠研究所，廣東 湛江 524025）

以10.7、11.2、11.7、12.2和12.7mm等5組直徑珠核，3個藥物配方珠核處理，以及3.5、4.0、4.5、5.0和5.5齡等5組植核蚌齡，分別比較珠核規(guī)格、珠核藥物處理和蚌齡對三角帆蚌內(nèi)臟團(tuán)二次植核育珠效果的影響。結(jié)果表明，珠核規(guī)格、珠核藥物處理和蚌齡對三角帆蚌內(nèi)臟團(tuán)二次植核育珠效果存在影響，珠核直徑11.7mm、藥物處理2組和育珠蚌齡3.5 a的育珠蚌具有最高的優(yōu)質(zhì)珠率。

三角帆蚌；內(nèi)臟團(tuán)；育珠；二次植核

三角帆蚌（Hyriopsis cumingii）分布在我國河北、山東、安徽、江蘇、浙江、江西、湖北、湖南和廣西等地湖泊和河流中，是我國培育淡水珍珠的主要育珠蚌，所產(chǎn)珍珠表面光滑、珠質(zhì)細(xì)膩、色澤艷麗、形狀較圓［1］。我國淡水珍珠生產(chǎn)存在的主要問題是高產(chǎn)低值，年產(chǎn)淡水珍珠達(dá)2 000 t，占世界珍珠總產(chǎn)量的90%以上，但銷售份額不足10%［2-6］。我國生產(chǎn)的淡水珍珠基本為無核珍珠，光澤好、形狀圓的優(yōu)質(zhì)大型珍珠比率低，價格偏低，而淡水河蚌內(nèi)臟團(tuán)植核培育有核珍珠育珠時間短、珍珠形狀可控、顆粒大、光澤好、價值高［6-7］。目前，培育優(yōu)質(zhì)大型“南洋珠”的大珠母貝Pinctada maxima和珠母貝Pinctada margaritifera植核育珠均采用多次植核育珠技術(shù)以培育大顆粒優(yōu)質(zhì)珍珠［8-9］，而三角帆蚌內(nèi)臟團(tuán)多次植核育珠的報道比較少見。為縮短育珠時間，實現(xiàn)育珠三角帆蚌體的重復(fù)利用，減少河蚌養(yǎng)殖的環(huán)境污染，本實驗進(jìn)行三角帆蚌內(nèi)臟團(tuán)二次植核育珠初步研究，以期為三角帆蚌育珠養(yǎng)殖高效利用提供參考。

1 材料和方法

1.1 材料

實驗蚌：來源于廣東紹河珍珠有限公司湛江雷州試驗基地，已在內(nèi)臟團(tuán)斧足部位植入直徑8.0mm珠核，培育有核珍珠 2.0 a ，珍珠平均直徑達(dá)11.2mm。

二次植核珠核：正圓形，用濃鹽酸配制成體積分?jǐn)?shù)10%的鹽酸溶液反復(fù)洗滌約30 min，去除珠核加工過程中殘留的雜質(zhì)，經(jīng)清水清洗干凈后，用現(xiàn)配的石灰水反復(fù)洗滌至中性。

1.2 植核方法

將蚌洗凈、栓口，固定于植核臺上，采用微創(chuàng)手術(shù)取出珍珠，保全珍珠囊，只留下一個創(chuàng)口；從珍珠囊上的創(chuàng)口再次植入珠核，不需要植入細(xì)胞小片，每蚌植入珠核1粒。手術(shù)后滴加消毒液處理植核創(chuàng)口，將育珠蚌水平放置于微流水的水槽中休養(yǎng)，30～60 min后移到育珠池塘中吊養(yǎng)。

1.3 實驗設(shè)計

1.3.1 珠核規(guī)格分組 二次植核植入的珠核設(shè)置10.7、11.2（CK）、11.7、12.2、12.7等5種直徑組，分別比第一次植核珍珠直徑小0.5mm，以及大0.0、0.5、1.0和1.5mm，每組設(shè)3個重復(fù)，每重復(fù)組用蚌600只，蚌齡3.5 a。

1.3.2 藥物處理分組 使用細(xì)胞激活劑和抗菌素配制3個配方進(jìn)行珠核處理和植核工具消毒，比較藥物處理珠核對三角帆蚌二次植核育珠蚌留核、成珠率的影響。珠核直徑為11.7mm，植核蚌的蚌齡為 3.5 a，每處理組設(shè) 3個重復(fù)組，每重復(fù)組用蚌600只。

1.3.3 蚌齡分組 設(shè)立5個實驗組比較育珠蚌年齡對二次植核育珠效果的影響。植核蚌的蚌齡分別為3.5、4.0、4.5、5.0和5.5 a，珠核直徑為11.7mm。每年齡組設(shè)3個重復(fù)組，每重復(fù)組用蚌600只。

1.4 數(shù)據(jù)收集與處理

育珠蚌休養(yǎng)期為30 d、育珠期為18個月，休養(yǎng)期和育珠期結(jié)束后統(tǒng)計育珠蚌成活率、成珠率和優(yōu)質(zhì)珠率。

育珠蚌成活率 = 育珠結(jié)束成活蚌總數(shù)/植核蚌總數(shù)；

成珠率 = 收獲珍珠數(shù)/成活蚌留核數(shù)；

留核率 = 留核數(shù)/成活蚌數(shù)；

優(yōu)質(zhì)珠率 = 優(yōu)質(zhì)珍珠數(shù)/收獲珍珠數(shù)。

優(yōu)質(zhì)珍珠判斷標(biāo)準(zhǔn)為：具有珍珠光澤、正圓形、表面光滑細(xì)膩、無肉眼可見的褶紋和斑點，珍珠層厚度大于0.80mm。

利用單因素方差分析（ANOVA）比較實驗組間的成活率、成珠率和優(yōu)質(zhì)珠率，若差異顯著再利用LSD方法比較各組間的差異。檢驗的顯著性水平α設(shè)為0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 珠核規(guī)格對二次植核育珠效果的影響

從表1可見，不同規(guī)格的珠核進(jìn)行三角帆蚌內(nèi)臟團(tuán)二次植核的育珠蚌成活率、留核率、成珠率差異不顯著（P＞0.05），但優(yōu)質(zhì)珠率差異顯著（P＜0.05）。二次植核珠核直徑11.7mm的手術(shù)母蚌優(yōu)質(zhì)珠率最高（25.0%），12.7mm的次之（23.0%），10.7mm最低（16.0%）?？梢?，合適的珠核規(guī)格可以提高育珠蚌的優(yōu)質(zhì)珠率。

表1 不同珠核規(guī)格的二次植核育珠效果Table 1 The effects of nucleus size on pearl production of second graft of Hyriopsis cumingii %

2.2 珠核藥物處理對二次植核育珠的影響

從表2可見，藥物處理珠核和手術(shù)工具對育珠蚌內(nèi)臟團(tuán)二次植核的手術(shù)蚌成活率和優(yōu)質(zhì)珠率存在顯著差異（P＜0.05）。其中，配方2的育珠蚌成活率和優(yōu)質(zhì)珠率最高，分別為90.0%和24.5%。配方3次之，分別為88.0%和23.0%；對照組育珠蚌成活率和優(yōu)質(zhì)珠率（80.0%和15.0%）最低。因此，合適的藥物處理可以提高育珠蚌的成活率和優(yōu)質(zhì)珠率。

表2 不同珠核處理配方的植核育珠結(jié)果Table 2 Effects of nucleus medicinal treatment on pearl production of second graft of Hyriopsis cumingii %

2.3 蚌齡對二次植核育珠的影響

從表3可見，蚌齡對三角帆蚌育珠蚌二次植核的成活率、留核率影響不顯著，但是成珠率和優(yōu)質(zhì)珠率存在顯著影響（P＜0.05）。其中，蚌齡3.5a的育珠蚌成珠率和優(yōu)質(zhì)珠率最高（85.0%和25.0%），5.5a最低（73.0%和15.3%）。隨著蚌齡的增加，育珠蚌的成珠率和優(yōu)質(zhì)珍珠率逐漸降低，其中，3.5a、4.0a和4.5a組之間育珠蚌成珠率和優(yōu)質(zhì)珠率差異不顯著，5.0a和5.5a之間成珠率和優(yōu)質(zhì)珠率差異也不顯著。

表3 不同蚌齡對三角帆蚌二次植核育珠效果的影響Table 3 The effects of host oyster ages on pearl production of second graft of Hyriopsis cumingii %

3 討 論

大型珍珠貝人工育珠過程中，通過二次植核可以生產(chǎn)比第一次植核培育的珍珠規(guī)格更大的珍珠。對生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)珍珠的育珠貝，根據(jù)其健康狀況和培育優(yōu)質(zhì)珍珠的能力，通常進(jìn)行二次、三次甚至四次植核育珠，以提高育珠貝的利用率［8-9］。三角帆蚌內(nèi)臟團(tuán)二次植核育珠中，植入的珠核規(guī)格、珠核的藥物處理和育珠蚌的年齡對育珠蚌的成活率和成珠率存在顯著影響。珠核規(guī)格過大，育珠蚌成活率、留核率低，但珠核過小，珍珠產(chǎn)量低，育珠蚌產(chǎn)能得不到充分發(fā)揮，只有合適規(guī)格的珠核，才可以充分發(fā)揮育珠蚌的產(chǎn)能［10］。使用合適的藥物對珠核進(jìn)行處理，能夠降低母蚌對珠核的排異反應(yīng)，提高留核率，促進(jìn)珍珠囊快速恢復(fù)功能分泌珍珠質(zhì)，加快珍珠的形成［11］。使用合適貝齡的母貝進(jìn)行植核育珠，可以縮短育珠時間，培育大規(guī)格優(yōu)質(zhì)珍珠［10］。

3.1 珠核規(guī)格對三角帆蚌內(nèi)臟團(tuán)二次植核育珠效果的影響

培育珍珠使用的珠核規(guī)格關(guān)系到所培養(yǎng)的珍珠產(chǎn)量和質(zhì)量，是影響珍珠貝類植核育珠效果的主要因素之一。黃惟灝等［12］指出體長120～122mm的三角帆蚌（Hyriopsis cumingii）內(nèi)臟團(tuán)植核培育有核珍珠的合適珠核直徑為8.00～8.25mm。符韶等［13］認(rèn)為珠母貝（Pinctada margaritifera）首次植核的適宜珠核直徑為6.0mm，珠核規(guī)格越大，植核手術(shù)對貝體的生理機(jī)能破壞越大，手術(shù)貝死亡率越高。Kripa V等［14］認(rèn)為，使用大規(guī)格珠核可使日本珠母貝珍珠收獲量減少70%～40%。

本實驗表明，二次植核植入的珠核直徑與第一次植核培育的珍珠相比較，育珠蚌成活率、成珠率差異不顯著，但優(yōu)質(zhì)珠率差異顯著。本實驗第一次植入直徑8.0mm的珠核，2 a后收獲珍珠時，平均直徑為 11.2mm，二次植核平均直徑等于或大于11.2mm的實驗組優(yōu)質(zhì)珠率顯著高于小于11.2mm的實驗組?？梢姡踩胫楹酥睆奖鹊谝淮沃埠伺嘤恼渲榇蟮挠榘鰞?yōu)質(zhì)珠率高，植入珠核直徑比珍珠小的育珠蚌優(yōu)質(zhì)珠率低。筆者認(rèn)為，第一次植核培育的珍珠被取出后，植入直徑等于或略大于珍珠的珠核時，已經(jīng)培育的珍珠囊能夠平滑伸展緊貼在珠核表面，因此形成的珍珠表面光滑，皺紋少，而植入比珍珠略小的珠核時，珍珠囊不能平滑伸展覆蓋在珠核表面，形成皺褶，因而形成的珍珠表面具有皺紋，光澤度差。二次植核植入的最佳珠核規(guī)格還有待進(jìn)一步研究。

3.2 珠核處理對三角帆蚌二次植核育珠效果的影響

研究表明，使用合適的藥物對細(xì)胞小片和珠核進(jìn)行處理，可以提高細(xì)胞小片和珠核、細(xì)胞小片和手術(shù)貝以及珠核和手術(shù)貝的親和力，促進(jìn)細(xì)胞小片快速形成珍珠囊分泌珍珠質(zhì)，提高育珠貝的成活率和珍珠質(zhì)量［15-19］。鄧陳茂等［17］指出，用含20 mg/L的金霉素海水溶液配制體積分?jǐn)?shù)為 2%的紅汞處理細(xì)胞小片，顯著提高馬氏珠母貝育珠貝的成活率和珍珠質(zhì)量，縮短育珠時間。王梅芳等［18］認(rèn)為，對細(xì)胞小片和珠核進(jìn)行藥物處理，可以明顯提高馬氏珠母貝的成活率和珍珠質(zhì)量。Norton J H等［19］認(rèn)為使用抗菌素處理細(xì)胞小片、珠核和植核工具，可以提高育珠貝成活率和珍珠質(zhì)量。本研究結(jié)果顯示，經(jīng)過合適的藥品對細(xì)胞小片和珠核進(jìn)行處理，育珠蚌的成活率和成珠率顯著提高。筆者認(rèn)為，本實驗藥物主要成分為細(xì)胞激活劑和消毒殺菌劑，同時配合同種組織提取液，具有對創(chuàng)口進(jìn)行消毒和促進(jìn)細(xì)胞生長的功能，而同種組織提取液起到降低蚌體對珠核的排斥作用，因此，育珠蚌成活率高、留核率高，珍珠質(zhì)量好。

3.3 育珠蚌年齡對三角帆蚌育珠效果的影響

珍珠貝類的代謝水平與生長年齡密切相關(guān)，而珍珠貝類的代謝水平又影響到珍珠囊分泌珍珠質(zhì)的能力。因此，培育珍珠的手術(shù)貝的貝齡對珍珠貝植核育珠效果存在顯著影響。符韶等［13］認(rèn)為年幼的珠母貝對植核手術(shù)適應(yīng)性強(qiáng)、傷口愈合快，具有較高的植核育珠成活率、成珠率。尹立鵬等［20］指出馬氏珠母貝（Pinctada martensii）低齡貝（1.5齡）植核育珠的留核率、成活率和珍珠質(zhì)量明顯高于高齡貝（2齡）。梁飛龍等［21］在企鵝珍珠貝Pteria penguin育珠研究中觀察到低齡貝的成活率顯著高于高齡貝。許巧情等［22］指出三角帆蚌珍珠快速生長的年齡為2～4 a，5 a后珍珠生長較慢。Xu等［23］認(rèn)為3～4 a三角帆蚌分泌珍珠質(zhì)能力最強(qiáng)，2～3 a次之，5 a后珍珠分泌能力明顯下降。本研究表明，三角帆蚌二次植核育珠時間長達(dá)1.5 a，植核時貝齡超過4.5 a，6 a貝珍珠質(zhì)的分泌機(jī)能開始下降，珍珠層形成速度慢，珍珠育成時間延長，養(yǎng)殖成本和風(fēng)險增加。建議生產(chǎn)上選擇3.5～4.5 a母蚌進(jìn)行二次植核育珠，以縮短育珠時間，提高育珠效益。

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（責(zé)任編輯：陳莊）

Experiments on Pearl Production of Second Graft in the Visceral Mass of Hyriopsis cumingii

LIN Wei-cai1，WANG Qing-ui1，XIE Shao-he1，2，DENG Yue-wen2，LIANG Fei-long2
（1.Guangdong Shaohe Pearl Co.Ltd，Shantou 515822，China；2.Pearl Research Institute，Guangdong Ocean University，Zhanjiang 524025，China）

Three experiments were carried out to investigate the effects of nucleus size，nucleus medicinal treatment and host oyster age on second graft of Hyriopsis cumingii.ExperimentⅠ：The mean diameter of the first graft pearls was 11.2mm，the nucleus diameter of second graft in the visceral of Hyriopsis cumingii was 10.7mm，11.7mm，12.2mm，12.7mm and 11.2mm，respectively ExperimentⅡ：The effect of three solutions of nucleus medicinal treatment on pearl production traits was evaluated.Experiment Ⅲ：The age of host pearl oyster was 3.5，4.0，4.5，5.0 and 5.5 years old，respectively.Results showed that there were significant differences in perfect quality pearl rates among the groups.The highest perfect quality pearl rates obtained in the host pearl oyster with 11.7mm nucleus implanted，and 3.5 years old and nucleus medicinal treatment group2 in experimentⅠ，Ⅱ andⅢ.

Hyriopsis cumingii；visceral mass；pearl production；second graft

S966.23

A

1673-9159（2016）03-0035-04

10.3969/j.issn.1673-9159.2016.03.006

2016-02-29

廣東省海洋漁業(yè)科技推廣專項（A201308A04； A201208A04）

林偉財（1986—），男，本科，主要研究方向為珍珠養(yǎng)殖與加工。E-mail：xsh5760288@126.com

梁飛龍（1963—），男，教授級高級工程師，主要研究方向為珍珠養(yǎng)殖。Email： lflzjou@126.com