□ 劉娟娟　安　瑜　陜西省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院

氣相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定蔬菜中狄氏劑結(jié)果的不確定度評(píng)定

□ 劉娟娟安瑜陜西省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院

本文分析了氣相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定蔬菜中狄氏劑的影響因素，根據(jù)不確定度的評(píng)定方法，建立數(shù)學(xué)模型。對(duì)模型中的各個(gè)參數(shù)進(jìn)行不確定度來(lái)源分析，并對(duì)其測(cè)量不確定度進(jìn)行合理評(píng)定。通過(guò)檢測(cè)實(shí)例，依據(jù)檢驗(yàn)方法，提出了氣相色譜儀-質(zhì)譜聯(lián)用儀測(cè)定蔬菜中狄氏劑的不確定度，為廣大食品檢測(cè)檢測(cè)工作者提供了一定的參考依據(jù)。

氣相色譜-質(zhì)譜；狄氏劑；不確定度

1　實(shí)驗(yàn)部分

1.1儀器與主要試劑

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（Trace D&QMS-美國(guó)賽默飛世爾公司），狄氏劑標(biāo)準(zhǔn)溶液（國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心）；正己烷；無(wú)水硫酸鈉、氯化鈉均為優(yōu)級(jí)純，550 ℃馬弗爐中灼燒4 h候后備用。

1.2分析流程

按照GB/T 19648-2006要求，稱(chēng)取20 g蔬菜樣品，加入40 mL乙腈，浸泡，勻漿，加入5 g NaCl，再勻漿1 min，離心，取上清液，待凈化。將二氯甲烷與正己烷按照1∶4的比例進(jìn)行調(diào)配，之后取100 mL的混合液來(lái)進(jìn)行試驗(yàn)。將混合液進(jìn)行振蕩，持續(xù)5 s的時(shí)間。振蕩之后進(jìn)行混合液的靜置分層，然后利用碳酸鈉-硅膠柱對(duì)有機(jī)層進(jìn)行凈化，之后凈化柱的清洗是利用調(diào)配好的二氯甲烷以及正己烷的100 mL混合液來(lái)進(jìn)行。同時(shí)，還需要利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器來(lái)對(duì)濾液進(jìn)行濃縮，以正己烷定容至5 mL，在對(duì)此進(jìn)行測(cè)定的時(shí)候，需要利用氣象色譜儀質(zhì)譜聯(lián)用儀來(lái)進(jìn)行，同時(shí)要對(duì)時(shí)間定性進(jìn)行保留，峰面積定量是運(yùn)用外標(biāo)法來(lái)進(jìn)行測(cè)量的。

本法中的5種濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液是對(duì)（100.0±0.2）μg/mL的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液進(jìn)行稀釋之后得到的，平均對(duì)5種溶液進(jìn)行3次的測(cè)定，結(jié)果采用平均值，之后利用最小二乘法擬合濃度-峰面積曲線為標(biāo)準(zhǔn)工作曲線進(jìn)行校準(zhǔn)。

2　評(píng)定不確定度的過(guò)程

2.1建立數(shù)學(xué)模型

GC-MS的測(cè)定需要通過(guò)狄氏劑標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置來(lái)進(jìn)行，線性方程通過(guò)線性回歸得到。而待測(cè)組分的定性分析則是通過(guò)采用與標(biāo)準(zhǔn)樣品保留時(shí)間相比較的方式來(lái)進(jìn)行，而待測(cè)組分的定量分析則是通過(guò)外標(biāo)法來(lái)進(jìn)行。而狄氏劑在樣品中的含量計(jì)算公式見(jiàn)式（1）。

式（1）中，W——樣品中狄氏劑的殘留量（μg/g）；C——提取液定容溶液中狄氏劑濃度（μg/g）；V——定容體積（mL）；frec——回收率校正因子；m——樣品取樣量（g）。

2.2分析不確定度的主要來(lái)源

2.2.1標(biāo)準(zhǔn)溶液在校準(zhǔn)過(guò)程引入的不確定度

采用最小二乘法擬合標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，對(duì)試樣的濃度進(jìn)行計(jì)算，繼而對(duì)擬合過(guò)程中所引入的不確定度進(jìn)行分析研究。

2.2.2在稱(chēng)樣過(guò)程中引入的不確定度

由天平的最大允許誤差（MPE）構(gòu)成。

2.2.3實(shí)驗(yàn)中過(guò)程中引入的不確定度

在制備測(cè)試樣品的過(guò)程中，涉及到的操作步驟繁雜，其中包括了萃取、凈化、過(guò)濾和濃縮等一系列操作。而不確定度會(huì)被利用在所有操作中，因此，很難確定測(cè)量結(jié)果不確定度受到哪個(gè)步驟的影響，故而需要將檢測(cè)方法確認(rèn)中的有關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行運(yùn)用，包括回收率等，從而來(lái)對(duì)制備試樣過(guò)程中引入的不確定度進(jìn)行評(píng)定。

2.3評(píng)定各個(gè)分量的不確定度

2.3.1最小二乘法擬合標(biāo)準(zhǔn)工作曲線求得試樣濃度過(guò)程中所引入的不確定度

在進(jìn)行測(cè)定的時(shí)候，需要配置5種濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，這里所用到的是（100.0±0.2）μg/mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，其濃度值從小到大依次為0.01、0.05、0.1、0.5 μg/mL和1.0 μg/mL，在進(jìn)行3次測(cè)定之后，可以得到相對(duì)應(yīng)的面積A，之后利用最小二乘法進(jìn)行擬合，從而將標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的線性回歸方程A=a+bC（a為截距，b為斜率）計(jì)算出來(lái)，結(jié)果是：A=5405113C-289697，其中a=截距，b=斜率，除此之外，還可以將方程的線性相關(guān)系數(shù)r計(jì)算出來(lái)，結(jié)果是：r=0.999 81。

平均進(jìn)行3次試樣的測(cè)定，其平均濃度通過(guò)試樣峰面積在標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的線性回歸方程計(jì)算出來(lái)，平均濃度用C表示，計(jì)算結(jié)果為0.042 9 μg/ mL，其標(biāo)準(zhǔn)不確定度見(jiàn)式（2）、式（3）。

n—標(biāo)準(zhǔn)溶液的測(cè)定次數(shù)，為15；p-試樣的測(cè)定次數(shù)，為3。

由最小二乘法擬合標(biāo)準(zhǔn)工作曲線引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

urel(C)=u(C)/C=0.00884/0.0429=0.206

2.3.2稱(chēng)樣過(guò)程中樣品質(zhì)量的不確定度

根據(jù)檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，0.01 g是作為樣品稱(chēng)量的準(zhǔn)確值，而天平所允許的最大誤差為±0.01 g，在處理過(guò)程中根據(jù)矩形分布來(lái)進(jìn)行，從而可以計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)不確定度以及相對(duì)不確定度分別是：

2.3.3樣品在制備過(guò)程中引入的不確定度

回收率作為評(píng)定樣品在制備過(guò)程產(chǎn)生的不確定度標(biāo)準(zhǔn)，將標(biāo)準(zhǔn)溶液0.05 μg/mL加入進(jìn)去，之后將較為接近的五次樣品濃度水平的樣品添加回收率進(jìn)行計(jì)算與測(cè)定，測(cè)定出來(lái)的5次回收率結(jié)果分別是：92.1%、94.8%、90.5%、93.9%和92.2%，據(jù)此計(jì)算出的平均回收率為=92.7%，將SR=2.09%作為標(biāo)準(zhǔn)不確定度，這是采取的平均值標(biāo)準(zhǔn)偏差，從而計(jì)算出相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度、標(biāo)準(zhǔn)不確定度分別是：

2.3.4測(cè)試過(guò)程隨機(jī)效應(yīng)引起的不確定度

不確定度的合成

由于在建立的數(shù)學(xué)模型中，各個(gè)計(jì)算因子為乘除關(guān)系，某些影響因素產(chǎn)生的不確定度極其微小，可以忽略不計(jì)，因此試樣中狄氏劑殘留量測(cè)定結(jié)果的相對(duì)合成不確定度計(jì)算可簡(jiǎn)化為：

2.5擴(kuò)展不確定度

如果沒(méi)有特殊的要求，其擴(kuò)展因子的選取應(yīng)當(dāng)以國(guó)際慣例為依據(jù)，其取值為k=2。因此，擴(kuò)展不確定度則是：

2.6本方法測(cè)試結(jié)果

按照GB/T 19648-2006實(shí)驗(yàn)室方法測(cè)定蔬菜中狄氏劑農(nóng)藥殘留量結(jié)果為：

因此本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為：

（0.043±0.020）μg/g，k=2

［1］陳世山，劉心同，高紅偉.氣相色譜法測(cè)定糧食中六六六農(nóng)藥殘留量的不確定度評(píng)定［J］.中國(guó)計(jì)量，2005（9）：76-79.

［2］劉立譯.量化分析測(cè)量不確定度指南［M］.北京：中國(guó)計(jì)量出版社，2003.

［3］倪育才.實(shí)用測(cè)量不確定度評(píng)定［M］.北京：中國(guó)計(jì)量出版社，2004.

［4］古成昕.不確定度的分析與計(jì)算［J］.計(jì)量與測(cè)試技術(shù)，2008，35（1）：15-16.