李蒙蒙，路緒強(qiáng)，趙勝杰，何 楠，袁平麗，李 智，劉文革

（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院鄭州果樹研究所 鄭州 450009）

西瓜（Citrullus lanatus），屬葫蘆科，原產(chǎn)于非洲，其根系強(qiáng)大，是喜溫、喜光、耐熱、耐旱不耐澇的一年生蔓性草本植物。其果實(shí)營養(yǎng)豐富，含有許多對人體有益的物質(zhì)，如番茄紅素、瓜氨酸、維生素C，對人體具有重要的保健功能[1]。瓜氨酸是人體非必需氨基酸，對羥自由基具有較高的活性，可以清除體內(nèi)游離的羥自由基，抗氧化，能夠延緩衰老，具有美容的功效；同時也可以促進(jìn)血液循環(huán)、軟化心腦血管、增強(qiáng)免疫力[2-4]。天花粉、核桃葉，以及甜瓜、黃瓜、南瓜、瓠瓜等葫蘆科作物中均含有瓜氨酸[5-8]。其中西瓜果實(shí)瓜氨酸含量豐富，是哈密瓜和黃瓜中的10倍[2]，并且鮮食即可被人體直接吸收，故食用西瓜是人體補(bǔ)充瓜氨酸的重要途徑之一。已有不少報道指出植物體內(nèi)瓜氨酸含量受品種和地區(qū)生態(tài)環(huán)境的影響[9-12]。Davis[12]研究指出同一地區(qū)，不同西瓜果實(shí)中瓜氨酸含量差異顯著。Kawasaki[9]研究表明，野生西瓜在干旱炎熱的沙漠里葉片中累積大量的瓜氨酸來清除體內(nèi)多余的自由基，抵御逆境的傷害。Dasgan[11]研究也表明鹽脅迫可誘導(dǎo)甜瓜葉片累積較多的瓜氨酸。近年來Fish等[13]研究表明在兩個地區(qū)種植的相同西瓜果實(shí)瓜氨酸含量差異不明顯。但Davis[12]研究指出相同品種西瓜在不同生態(tài)條件下，果實(shí)瓜氨酸含量差異顯著。故不同生態(tài)條件下西瓜果實(shí)瓜氨酸含量差異有待進(jìn)一步研究。

我國是西瓜生產(chǎn)大國，種植面積很大，除了少數(shù)寒冷地區(qū)無法栽培外，其他地區(qū)均有廣泛栽培。新疆是我國優(yōu)質(zhì)西瓜產(chǎn)區(qū)，主要?dú)夂蛱攸c(diǎn)是積溫高、晝夜溫差大、空氣濕度較小、日照百分率高。海南是我國重要的西瓜南繁基地，氣候特點(diǎn)為年平均氣溫較高、無霜期長、年降水較多、空氣濕度較高[14]。兩地生態(tài)條件相差較大，分別是我國西瓜西北干燥氣候栽培區(qū)和南方多濕氣候栽培區(qū)的典型代表。筆者擬通過測定海南和新疆兩地西瓜瓜氨酸含量的差異，研究不同生態(tài)條件下瓜氨酸含量差異以及影響因素，篩選出瓜氨酸含量較高并且穩(wěn)定的西瓜材料，為選育高瓜氨酸西瓜品種提供育種依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

15份西瓜材料（包括固定品種和純合自交系）來源于中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院鄭州果樹所國家西瓜甜瓜種質(zhì)資源中期庫和多倍體西瓜育種課題組。具體名稱見表1。

1.2 田間試驗(yàn)設(shè)計

15份供試材料于2015年4月下旬播種于新疆烏魯木齊試驗(yàn)基地，育苗移栽，采用裂區(qū)設(shè)計，行距1.5 m，株距0.8 m，露地覆膜滴灌栽培，單蔓整枝，第2雌花留單瓜，統(tǒng)一澆水施肥、田間管理和防治病蟲害。6月中下旬開始人工授粉，西瓜的雌、雄花于開花前1 d下午套帽，次日自交授粉，標(biāo)注授粉日期。萬學(xué)閃等研究表明[1]，西瓜果實(shí)接近完熟時果實(shí)瓜氨酸含量最高，且中心果肉瓜氨酸含量高于近皮部，故取成熟果實(shí)中心果肉測定瓜氨酸含量，根據(jù)不同材料成熟情況于8月下旬采收。

與新疆相同的15份供試材料于2015年10月上旬播種于海南三亞試驗(yàn)基地，栽培管理方式同新疆，11月上旬開始人工授粉，根據(jù)不同材料成熟情況于12月下旬采收。

1.3 試驗(yàn)方法

待西瓜成熟后，每份西瓜材料取授粉日期相同、形狀大小一致的3個西瓜果實(shí)，每個西瓜果實(shí)由瓜柄至瓜蒂、陰面至陽面縱切2等份，取果實(shí)中心果肉，去籽榨汁勻漿，置于-80℃超低溫冰箱中備用，以測定西瓜瓜氨酸含量。

瓜氨酸含量測定采用分光光度法[15]：稱取瓜汁3 g，勻漿機(jī)破壁；加入體積比為9∶1純甲醇和6 mol·L-1鹽酸配成的提取液 4.5 mL，55 ℃水浴20 min，活性炭脫色后過濾；稀釋40倍，取5 mL稀釋液，加入體積比為3∶1的硫酸和磷酸混合液2 mL和30 g·L-1二乙酰一肟0.25 mL，搖勻；避光煮沸30 min，冷卻至室溫，在波長490 nm處測定吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計算瓜氨酸含量，3次重復(fù)并求平均值。

瓜氨酸含量（g·kg-1）=(0.0965A+0.0085)×f

式中，A為490 nm處吸光值；0.0965為標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率；0.0085為標(biāo)準(zhǔn)曲線截距；f為總稀釋倍數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

采用用軟件SPSS 20.0進(jìn)行相關(guān)數(shù)據(jù)分析

2 結(jié)果與分析

2.1 不同生態(tài)條件下西瓜果實(shí)瓜氨酸含量的總體差異分析

15份西瓜瓜氨酸含量如表1，新疆地區(qū)瓜氨酸含量范圍為 1.13～2.46 g·kg-1，平均值為 1.78 g·kg-1，海南地區(qū)瓜氨酸含量范圍為0.62～2.23 g·kg-1，平均值為1.29 g·kg-1。對兩地15份西瓜瓜氨酸含量進(jìn)行差異顯著性分析，新疆地區(qū)瓜氨酸含量顯著高于海南。

對影響西瓜瓜氨酸含量的材料和地區(qū)生態(tài)環(huán)境兩因素進(jìn)行主效應(yīng)方差分析如表2，材料間瓜氨酸含量差異極顯著，同時不同地區(qū)間瓜氨酸含量也存在極顯著差異。說明材料、地區(qū)生態(tài)環(huán)境兩因素均能夠顯著影響西瓜果實(shí)瓜氨酸含量。

表1 不同生態(tài)環(huán)境下不同西瓜材料果實(shí)瓜氨酸含量

表2 不同生態(tài)條件下不同西瓜材料瓜氨酸含量多因素方差分析

2.2 同一生態(tài)條件下不同西瓜材料果實(shí)瓜氨酸含量差異分析

由表1可知，新疆15份西瓜材料瓜氨酸含量的變異系數(shù)為21.55%；海南15份西瓜材料果實(shí)瓜氨酸含量變異系數(shù)為35.49%。新疆地區(qū)瓜氨酸含量最高的是‘white wonder’，含量為 2.46 g·kg-1，顯著高于瓜氨酸含量最低的‘彰引’的1.13 g·kg-1，且是‘彰引’的2.18倍。海南瓜氨酸含量最高的是‘9904’，含量為 2.22 g·kg-1，含量最低的是‘SBD黑’，含量0.62 g·kg-1，兩者瓜氨酸含量差異顯著，比值高達(dá)3.58。

2.3 不同生態(tài)條件下同一西瓜材料果實(shí)瓜氨酸含量差異分析

同一西瓜品種在不同生態(tài)條件下瓜氨酸含量存在顯著差異，如‘91E7’，在新疆地區(qū)瓜氨酸含量為2.20 g·kg-1，顯著高于海南地區(qū)瓜氨酸含量1.41 g·kg-1。15 份西瓜材料中，除了‘02D97’‘9904’和‘綠貝雷’3份新疆種植的瓜氨酸含量低于海南外，其余12份西瓜材料瓜氨酸含量新疆均高于海南，其中11份含量差異達(dá)到顯著水平。

以新疆與海南瓜氨酸含量比值來評價各西瓜材料在不同生態(tài)條件下瓜氨酸含量受生態(tài)環(huán)境的影響程度與穩(wěn)定性。比值越接近1，則同一材料在不同生態(tài)條件下瓜氨酸含量越穩(wěn)定。比值越大于1或越小于1說明不同生態(tài)條件下瓜氨酸含量穩(wěn)定性越差。如表1所示，15份西瓜材料瓜氨酸含量新疆/海南范圍為 0.91～2.31，其中‘FLG’‘J5F’‘C148’‘SBD黑’4份西瓜材料瓜氨酸含量新疆/海南比值較大，分別為 2.22、2.31、2.13、2.23；而‘White won?der’‘02D97’‘9904’‘綠貝雷’4 份西瓜材料兩地含量比值接近于 1，分別為 1.11、0.97、0.91、0.91。

3 討論

本試驗(yàn)15份西瓜材料在新疆地區(qū)瓜氨酸含量范圍為1.13～2.46 g·kg-1，海南地區(qū)瓜氨酸含量范圍為0.62～2.22 g·kg-1，新疆地區(qū)瓜氨酸含量顯著高于海南。材料和地區(qū)生態(tài)環(huán)境都能顯著影響西瓜瓜氨酸含量。這和Davis[12]研究的結(jié)果相一致。

同一地區(qū)不同材料之間瓜氨酸含量相差很大，新疆和海南15份西瓜材料瓜氨酸含量變異系數(shù)分別為21.55%、35.49%，表明同一地區(qū)不同西瓜材料瓜氨酸含量均有較大差異。新疆瓜氨酸含量最高材料‘white wonder’顯著高于含量最低的‘彰引’。而海南瓜氨酸含量最高‘9904’也是含量最低的‘SBD黑’的3.58倍，不同西瓜材料果實(shí)瓜氨酸含量有很大差異，這和Rimando[16]的結(jié)果相一致。

同一西瓜材料在不同生態(tài)條件下瓜氨酸含量存在顯著差異，15份西瓜材料中有12份西瓜材料瓜氨酸含量新疆高于海南，其中有11份達(dá)到了極顯著差異水平。這可能是由于相比于海南，新疆晝夜溫差大，日照時間長，降雨量較少有關(guān)，新疆的生態(tài)條件更利于西瓜果實(shí)瓜氨酸的累積，但具體原因還有待于進(jìn)一步研究。筆者采用新疆與海南瓜氨酸含量比值來評價西瓜品種瓜氨酸含量受生態(tài)環(huán)境的影響程度與穩(wěn)定性，15份材料中瓜氨酸含量新疆/海南比值范圍為0.91～2.31，說明環(huán)境對不同西瓜材料瓜氨酸含量的影響程度存在差異。其中‘FLG’‘J5F’‘C148’‘SBD 黑’4 份西瓜材料瓜氨酸含量受不同生態(tài)環(huán)境影響較大；而‘White wonder’‘02D97’‘9904’‘綠貝雷’4 份材料在不同生態(tài)條件下含量較穩(wěn)定。結(jié)合瓜氨酸含量與穩(wěn)定性，本文篩選出兩份瓜氨酸含量穩(wěn)定且較高的西瓜材料，分別是‘White wonder’‘9904’可以作為選育高瓜氨酸品種的育種材料在生產(chǎn)上應(yīng)用。