宋　輝，方靈芝，陶用富，葉孝剛，李　靜

(1.四川省精神衛(wèi)生中心，四川　綿陽(yáng)　621000；2.四川大學(xué)心理衛(wèi)生中心，四川　成都　610041 通信作者：宋　輝：E-mail：182321767@qq.com)

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酒精戒斷所致震顫譫妄與非震顫譫妄患者DNA氧化損傷的比較

宋輝1，方靈芝1，陶用富1，葉孝剛1，李靜2

(1.四川省精神衛(wèi)生中心，四川綿陽(yáng)621000；2.四川大學(xué)心理衛(wèi)生中心，四川成都610041 通信作者：宋輝：E-mail：182321767@qq.com)

目的DNA氧化損傷標(biāo)記物8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)與酒精戒斷有密切聯(lián)系，本研究通過對(duì)酒精戒斷所致震顫譫妄與非震顫譫妄患者DNA氧化損傷的比較，為臨床早發(fā)現(xiàn)早治療提供理論依據(jù)。方法將176例慢性酒精中毒患者按入院后是否出現(xiàn)震顫譫妄分為震顫譫妄組及非震顫譫妄組，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清8-OHdG水平，采用酒精戒斷狀態(tài)評(píng)定量表(CIWA-Ar)評(píng)定兩組戒斷嚴(yán)重程度。結(jié)果震顫譫妄組8-OHdG水平高于非震顫譫妄組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(0.58±0.12)ng/ml vs.(0.35±0.13)ng/ml,P<0.01]；8-OHdG水平與酒精戒斷狀態(tài)評(píng)定量表CIWA-Ar評(píng)分呈正相關(guān)(r=0.84)；逐步Logistic回歸分析顯示8-OHdG(OR=6.3)是震顫譫妄的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。結(jié)論檢測(cè)外周血8-OHdG水平可能有助于酒精戒斷所致震顫譫妄的早期診斷及病情判定。

DNA氧化損傷；酒精戒斷；震顫譫妄；8羥基脫氧鳥苷

慢性酒精依賴與高氧化應(yīng)激相關(guān)[1-2]。由此產(chǎn)生的氧化應(yīng)激可以誘導(dǎo)細(xì)胞生物分子損傷，如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和DNA，其中DNA損傷尤其危險(xiǎn)，因?yàn)樗梢愿淖冞z傳信息[3]。DNA氧化損傷能夠產(chǎn)生大量嘌呤羥基化、嘧啶羥基化的堿基修飾產(chǎn)物。其中8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)被認(rèn)為是DNA氧化損傷的標(biāo)志物[4-5]。已有研究表明，8-OHdG水平與酒精戒斷癥狀的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)[6]。震顫譫妄(Delirium Tremens, DT)是慢性酒精中毒患者在戒斷過程中出現(xiàn)一種嚴(yán)重且威脅生命的合并癥，患者可因感染、高熱、脫水或衰竭而死亡，死亡率為10%～15%[7-9]。而在慢性酒精中毒住院患者中，大約有5%的患者會(huì)發(fā)生嚴(yán)重酒精戒斷反應(yīng)震顫譫妄[10]。一旦出現(xiàn)，處理起來(lái)十分棘手。因此，預(yù)測(cè)并及時(shí)的治療被認(rèn)為是避免嚴(yán)重酒精戒斷反應(yīng)震顫譫妄的基石[11]。已有研究報(bào)道，8-OHdG在慢性酒精戒斷非震顫譫妄患者中顯著升高[12]，但震顫譫妄患者中8-OHdG水平是否升高，以及和非震顫譫妄患者有無(wú)差異，國(guó)內(nèi)尚無(wú)相關(guān)研究。從20世紀(jì)80年代開始，學(xué)者們陸續(xù)提出各自的可預(yù)測(cè)震顫譫妄的危險(xiǎn)因素，這些危險(xiǎn)因素的內(nèi)容涉及酒依賴史(酒量、酒齡等)、既往的戒斷癥狀、既往的軀體疾患、目前的軀體疾患，以及目前體征和癥狀等，其條目多達(dá)20個(gè)。由于研究樣本來(lái)源和方法等的不同，研究結(jié)果有差異，目前并沒有一個(gè)相對(duì)客觀的指標(biāo)來(lái)預(yù)測(cè)震顫譫妄。而本研究目的就是探明客觀的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)以預(yù)測(cè)震顫譫妄的發(fā)生，從而可以進(jìn)行針對(duì)性治療以降低死亡風(fēng)險(xiǎn)。

1　對(duì)象與方法

1.1對(duì)象

納入2013年1月-2015年1月四川省精神衛(wèi)生中心心理綜合科住院的176例慢性酒精中毒患者。入組標(biāo)準(zhǔn)：①符合《國(guó)際疾病分類(第10版)》(International Classification of Diseases，tenth edition，ICD-10)慢性酒精中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)；②入院時(shí)處于戒酒期；③入院時(shí)無(wú)震顫譫妄和意識(shí)障礙；④排除既往有精神分裂癥、雙相情感障礙、重度抑郁障礙、毒品濫用、帕金森癥、嚴(yán)重的肝硬化、嚴(yán)重傳染性疾病者等。根據(jù)患者在住院戒酒期間是否發(fā)生震顫譫妄將所有入組患者分為震顫譫妄(DT)組和非震顫譫妄(NDT)組。兩組在性別、婚姻狀況、受教育程度、工種方面差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。而DT組年齡大于NDT組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(45.3±7.6)歲vs.(40.8±4.3)歲，P<0.05]。DT組(病例組)共42例，均為漢族；男性41例，女性1例；平均年齡(45.3±7.6)歲；婚姻狀況：未婚5例，已婚31例，離婚3例，喪偶3例；受教育程度：文盲7例，小學(xué)9例，初中13例，高中 11例，大學(xué) 2例；從事工種：腦力13例，體力29例。NDT組(對(duì)照組)共134例，均為漢族；男性131例，女性3例；平均年齡(40.8±4.3)歲；婚姻狀況：未婚12例，已婚102例，離婚13例，喪偶7例；受教育程度：文盲23例，小學(xué)31例，初中38例，高中35例，大學(xué)7例；從事工種：腦力43例，體力91例。所有入組對(duì)象均簽署知情同意書，本研究獲得四川省精神衛(wèi)生中心倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2標(biāo)本及其保存

所有入組病例采集清晨空腹靜脈血3 mL， 5 000 r/min離心5分鐘后提取血清，編號(hào)后于-80℃超低溫避光保存。

1.3主要試劑與儀器

上海酶聯(lián)生物科技生產(chǎn)的血清8-OHdG ELISA試劑盒。GQ142G高速離心機(jī)(上海浦東儀器廠)，JY系列電子天平(上海精科)，SHA-B型振蕩器(中國(guó)上海)，-86℃超低溫冰箱(DW-86L205，雪頌牌)，utrao-SM600型酶標(biāo)儀(上海永創(chuàng))。

1.4方法

采用酒精戒斷狀態(tài)評(píng)定量表(Clinic Institute Alcohol Withdrawal Syndrome Scale,CIWA-Ar)評(píng)定戒斷嚴(yán)重程度，由訓(xùn)練有素的專業(yè)醫(yī)生每8小時(shí)評(píng)定一次，以72小時(shí)之內(nèi)最高值為準(zhǔn)[13]；開始給予固定的治療計(jì)劃，給予維生素B1200 mg im qd，地西泮10 mg tid及補(bǔ)液支持治療，而后根據(jù)戒斷分?jǐn)?shù)靈活調(diào)整地西泮劑量。

1.5統(tǒng)計(jì)方法

2　結(jié)　　果

2.1兩組飲酒吸煙情況比較

DT組平均酒齡(22.3±7.6)年，平均酒量(578.6±201.3)g/d，平均吸煙量(29.1±7.6)支/日；NDT組平均酒齡(21.5±6.4)年，平均酒量(542.5±213.2)g/d，平均吸煙量(24.5±5.8)支/日。兩組之間以上三項(xiàng)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。DT組CIWA-Ar評(píng)分高于NDT組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(32.5±7.4)分vs.(14.9±7.3)分，P<0.01]。見表1。

2.2兩組臨床特征及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較

兩組平均紅細(xì)胞體積、血小板、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)；DT組血鉀(3.2±0.4)mEq/L、谷草轉(zhuǎn)氨酶(186.3±101.6)U/L，總膽紅素(1.5±0.9)mg/dL，NDT組血鉀(3.8±0.5)mEq/L、谷草轉(zhuǎn)氨酶(89.4±59.6)U/L，總膽紅素(0.8±0.5)mg/dL，以上指標(biāo)兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。DT組與NDT組8-OHdG水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(0.58±0.12)ng/mLvs.(0.35±0.13)ng/mL,P<0.01]。見表1。

表1　兩組人口學(xué)資料及臨床特征比較

2.3相關(guān)分析

將外周血8-OHdG水平分別與CIWA-Ar評(píng)分、年齡、婚姻狀況、受教育程度及工種進(jìn)行相關(guān)分析，發(fā)現(xiàn)8-OHdG與CIWA-Ar評(píng)分呈正相關(guān)(r=0.84，P<0.01)。

2.4震顫譫妄危險(xiǎn)因素的Logistic回歸分析

為觀察DT組、NDT組與性別、年齡、受教育程度、民族、工種、實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)及血清 8-OHdG水平的關(guān)系，進(jìn)行兩項(xiàng)分類Logistic回歸分析(forward stepwise)，結(jié)果顯示8-OHdG水平及性別是震顫譫妄的危險(xiǎn)因素。見表2。

3　討　　論

震顫譫妄雖然在酒精依賴者中的發(fā)生率并不高，大約為5%[10]，但因戒斷反應(yīng)住院的慢性酒中毒者中發(fā)生DT并不少見[14]，而且由于其臨床的難以預(yù)見性、危害性，歷來(lái)受到臨床醫(yī)師的關(guān)注，同行們一直致力于尋找能夠預(yù)測(cè)震顫譫妄發(fā)生的危險(xiǎn)因素[15-17]，從而能有效地早期預(yù)防和治療，減少震顫譫妄的發(fā)生，從而有效減少傷殘率。

表2　震顫譫妄相關(guān)危險(xiǎn)因素的Logistic回歸分析

有研究報(bào)道，8-OHdG在慢性酒精戒斷非震顫譫妄患者中較普通人群高[12]。而本研究的相關(guān)分析結(jié)果同樣支持該結(jié)論，震顫譫妄組8-OHdG水平高于非震顫譫妄組[(0.58±0.12)ng/mL vs.(0.35±0.13)ng/mL，P<0.01]，戒斷反應(yīng)評(píng)分與8-OHdG水平呈正相關(guān)，即隨戒斷反應(yīng)程度的加重，8-OHdG水平也隨之升高。Logistic回歸分析顯示8-OHdG是震顫譫妄發(fā)生的危險(xiǎn)因素，可望成為檢測(cè)震顫譫妄發(fā)生的指標(biāo)。8-OHdG水平每升高1 ng/mL，發(fā)生震顫譫妄的危險(xiǎn)增加約6倍(OR=6.3)。因此，8-OHdG的上升應(yīng)該是在機(jī)體氧化損傷的基礎(chǔ)上，免疫、內(nèi)分泌共同作用的結(jié)果。

本研究中外周血8-OHdG水平在酒精戒斷過程中升高，且隨著病情進(jìn)展而增加，Logistic回歸分析顯示8-OHdG是震顫譫妄發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。檢測(cè)外周血8-OHdG水平對(duì)震顫譫妄的早期發(fā)現(xiàn)和病情監(jiān)測(cè)意義重大，它可能為我們提供了較敏感的生物學(xué)標(biāo)志物，這也有助于嚴(yán)重酒精戒斷反應(yīng)的治療和患者生活質(zhì)量的改善。在以后的臨床研究中，對(duì)于8-OHdG檢測(cè)與震顫譫妄內(nèi)在機(jī)制的臨床研究有必要擴(kuò)大樣本含量、嚴(yán)格分層分組、設(shè)置正常對(duì)照組來(lái)消除混雜因素。

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(本文編輯：陳霞)

Comparison of oxidative DNA damage between alcohol-dependent patients with and without delirium tremens

SONGHui1*,FANGLing-zhi1,TAOYong-fu1,YEXiao-gang1,LIJing2

(1.MentalHealthCenterofSichuanProvince,Mianyang621000,China;2.MentalHealthCenterofSichuanUniversity,Chengdu610041,China*Correspondingauthor:SONGHui,E-mail: 182321767@qq.com)

ObjectiveTo find out the pathophysiological mechanism of alcohol withdrawal by comparing the serum levels of 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine (8-OHdG) between the alcohol-dependent patients with and without delirium tremes, a biomarker of oxidative damage.MethodsThe samples in delirium tremens group and non delirium tremens group were consisted of 176 participants with alcohol withdrawal. 8-OHdG was measured by enzyme-linked immunosorbent assay. Clinic Institute Alcohol Withdrawal Syndrome Scale(CIWA-Ar) were used to assess the severity of alcohol withdrawa.ResultsPatients in the delirium tremens group had significantly higher level of oxidative DNA damage than participants in the non delirium tremens group[(0.58±0.12)ng/mL vs.(0.35±0.13)ng/mL,P<0.01]. Correlation analysis showed that the level of 8-OHdG had a positive correlation with score of the CIWA-Ar(r=0.84). Furthermore, Logistic regression showed that serum level of 8-OHdG was an independent risk factor of the delirium tremens(OR=6.3).ConclusionDetecting serum level of 8-OHdG may contribute to the early diagnosis of the delirium tremens.

Oxidative DNA damage；Alcohol withdrawal；Delirium tremens；8-hydroxy-2'-deoxyguanosine

四川省科技廳項(xiàng)目(2013FZ0007)

R749

A

10.11886/j.issn.1007-3256.2016.03.012

2016-04-18)