柏永華,劉 圣(遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院病理科,貴州遵義563003)
高危型HPV-DNA檢測在宮頸病變篩查和隨訪中的應(yīng)用
柏永華,劉圣(遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院病理科,貴州遵義563003)
目的分析高危型人乳頭瘤病毒DNA(HPV-DNA)檢測在宮頸病變和宮頸癌篩查中的應(yīng)用效果。方法選取2014年7月至2015年7月在該院接受宮頸癌前病變篩查患者150例,采用液基薄層細(xì)胞學(xué)試驗(TCT)和高危型HPV-DNA第2代雜交捕獲技術(shù)進(jìn)行病變檢查,再行陰道鏡下病理活檢確診,分析TCT與HPV-DNA檢測結(jié)果與病理活檢結(jié)果的符合率。結(jié)果高危型HPV-DNA的檢出率[92.7%(139/150)]與病理活檢結(jié)果[98.0%(147/150)]的符合率較高,且均明顯高于TCT[82.7%(124/150)]檢測結(jié)果,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論高危型HPV-DNA檢測在宮頸癌前病變篩查中可作為細(xì)胞學(xué)檢查的輔助手段,提高診斷準(zhǔn)確性,并可指導(dǎo)HPV感染者的治療及用于患者的追蹤隨訪。
DNA,病毒;宮頸疾病;宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變;宮頸腫瘤;普查;乳頭狀瘤病毒科
宮頸癌是臨床上最常見的一種惡性腫瘤,在女性惡性腫瘤中排名第二,僅次于乳腺癌[1]。近幾年來,隨著人們生活水平的不斷提高,女性的生活方式也發(fā)生了巨大的變化,宮頸癌的發(fā)病年齡日趨年輕化,且發(fā)病率正以每年2%~3%的速度持續(xù)上升,對廣大女性的身體健康和生活質(zhì)量造成嚴(yán)重影響[2-3]。大量臨床研究顯示,引發(fā)宮頸病變的因素比較復(fù)雜,其中宮頸人乳頭瘤病毒(HPV)感染是引發(fā)宮頸癌的一個重要原因,也是當(dāng)前臨床公認(rèn)的因素[4-5]。1977年Zur Hausen[4]首次提出HPV可能是引發(fā)宮頸癌的高危因素,之后國內(nèi)學(xué)者對此進(jìn)行了深入研究,相關(guān)研究均證實HPV感染與宮頸癌關(guān)系密切,尤其是13種高危型HPV(HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68)感染與宮頸癌的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)[6-7]。
相關(guān)研究顯示,宮頸癌患者越早接受治療,預(yù)后效果越顯著[5,8],早期篩查并確認(rèn)病情后,針對病情采取科學(xué)、有效的治療措施,可有效提高患者的生存率,臨床效果十分顯著。因此,找到一種快速、有效的宮頸癌前病變篩查方法成為臨床工作者高度關(guān)注的問題。液基薄層細(xì)胞學(xué)試驗(TCT)是宮頸癌前病變篩查方法發(fā)展過程中的里程碑,其診斷敏感度較高,不易出現(xiàn)假陰性,但是對于一些典型的鱗狀上皮細(xì)胞的分辨效果并不顯著。近年來,高危型HPV-DNA檢測逐步應(yīng)用于宮頸癌前病變的檢測,而且取得良好效果,已成為當(dāng)前臨床研究的熱點[8-9]。本文主要就高危型HPV-DNA檢測在宮頸癌前病變篩查和隨訪中的應(yīng)用進(jìn)行分析。
1.1一般資料選取2014年7月至2015年7月在本院接受宮頸病變篩查的患者150例,年齡25~59歲,平均(28.5±5.8)歲?;颊呔驮\原因為白帶異常、陰道不規(guī)則出血及性交出血等。所有患者已排除無性生活史,有宮頸病變史及已進(jìn)行宮頸癌前病變篩查。所有患者對本研究均知情同意,均采用TCT和高危型HPV-DNA檢查后,再行陰道鏡下病理活檢確診。
1.2方法
1.2.1高危型HPV-DNA檢測(1)應(yīng)用高危型HPVDNA第2代雜交捕獲技術(shù)(HC2),儀器由深圳凱杰生物有限公司提供,標(biāo)本采集使用HC2檢測專用采樣刷,放置于患者宮頸口內(nèi),順時針或逆時針旋轉(zhuǎn)3圈后,停留10 s再取出,將采樣刷放入事先準(zhǔn)備的標(biāo)本儲存瓶中,標(biāo)記送檢。(2)使用酶切信號放大法檢測13種高危型HPV,包括HPV 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68,使用試劑含有三組寡核苷酸混合物:①A5/A6,對HPV 51、56、68型進(jìn)行檢測;②A7,對HPV 18、39、45、59、58型進(jìn)行檢測;③A9,對HPV 16、31、33、35、52、58型進(jìn)行檢測。同時將與人2型組蛋白基因結(jié)合的寡核苷酸作為內(nèi)部質(zhì)控。高危型HPV-DNA檢測試劑與耗材由北京英碩力公司提供,DNA提取與Cervista檢測嚴(yán)格參照試劑說明書進(jìn)行。
1.2.2TCT檢測所有患者均使用一次性取樣器,將取樣器尖端放入患者宮頸管內(nèi)部,兩邊緊貼頸管外口,以順時針方向轉(zhuǎn)動5周,之后將采樣器直接吸入到裝有新柏氏(Thinprep)細(xì)胞保存液的小瓶中送檢,經(jīng)Thinprep系統(tǒng)程序化處理,制作成直徑為2 cm的超薄玻片,加入95%乙醇進(jìn)行固定,以巴氏染色,細(xì)胞學(xué)診斷采用TBS分類法。
1.2.3陰道鏡下病理活檢對所有患者行陰道鏡下病理活檢,主要觀察患者宮頸鱗狀上皮、柱狀上皮及轉(zhuǎn)化區(qū)的顏色、形狀及血管變化,對醋酸實驗顯示可疑病變區(qū)與碘陰性區(qū)實施多點活檢,如果陰道鏡下未發(fā)現(xiàn)可疑病變者,于轉(zhuǎn)化區(qū)的3、6、9、12點實施多點活檢,之后進(jìn)行病理學(xué)檢查,以病理檢查結(jié)果為最終標(biāo)準(zhǔn)。
1.2.4判定標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞學(xué)與所有活檢標(biāo)本均交由專業(yè)病理科醫(yī)生通過TBS分類法進(jìn)行診斷,高危型HPVDNA檢測以高于50 copy/mL為陽性。
1.3統(tǒng)計學(xué)處理應(yīng)用SPSS18.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計量資料以±s表示,采用t檢驗;計數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示,采用χ2檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
高危型HPV-DNA檢測結(jié)果與陰道鏡下病理活檢結(jié)果的符合率較高,且明顯高于TCT檢測結(jié)果,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。
表1 3種檢測方法的HPV感染情況比較[n(%)]
近年來,我國宮頸癌的發(fā)生率逐年上升,而且呈顯著年輕化趨勢,對我國婦女的健康造成了嚴(yán)重的威脅。國內(nèi)外對宮頸癌的病因進(jìn)行了深入研究,結(jié)果顯示,宮頸上皮內(nèi)瘤變是發(fā)生在癌癥前期的病變,因此,在宮頸癌患者的臨床治療中應(yīng)引起高度重視,對癥處理具有重要意義。TCT是一種比較先進(jìn)的宮頸癌細(xì)胞學(xué)檢查技術(shù),與常規(guī)制片方法比較,其對樣本的收集率進(jìn)行了有效的改進(jìn),并將細(xì)胞均勻地分布于載玻片上,大幅度提高了發(fā)現(xiàn)鱗狀上皮低度和高度病變的敏感度,在臨床宮頸癌前病變的篩查中已得到廣泛運(yùn)用[6-7]。
HPV是一種嗜上皮性病毒,目前已確定HPV的類別共有110種,而且國內(nèi)外已將HPV感染公認(rèn)為是引發(fā)宮頸癌的重要原因,患者感染高危型HPV后很容易引發(fā)宮頸癌。在目前發(fā)現(xiàn)的110種HPV類型中,大多數(shù)的亞型不會對人類的身體健康造成傷害,大部分機(jī)體感染這些無害的HPV亞型病毒后,可以通過自身免疫系統(tǒng)進(jìn)行自動清除。但是其中有13種HPV亞型病毒可能會導(dǎo)致癌癥,分別是HPV 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68,這些亞型病毒被臨床統(tǒng)稱為高危險HPV,因此,高危型HPV-DNA檢測可作為宮頸癌及癌前病變的重要篩查指標(biāo)。以往研究表明,高危型HPV感染與宮頸病變有著密切關(guān)系,高危型HPV感染患者發(fā)生宮頸癌與癌前病變的比例明顯高于未受到感染者,有75%的女性一生中一定會受到一次HPV感染,其中性活躍期的女性受到HPV感染的概率最高[5]。正常情況下,機(jī)體可以自動識別并將感染到的HPV自動清除,但隨著HPV感染次數(shù)的增加,機(jī)體發(fā)生宮頸癌的風(fēng)險也會隨之增加。呂向華[10]收集22個國家的宮頸癌活檢標(biāo)本進(jìn)行檢測后發(fā)現(xiàn),其中99.7%的宮頸病變患者的病變組織中都能檢測到HPV-DNA的存在,提示高危型HPV-DNA檢測在篩查宮頸癌及癌前病變中的靈敏度較高,而且陰性預(yù)測值也非常高。大量研究報道也證實,高危型HPV-DNA的陰性預(yù)測值可達(dá)99.0%[11]。
本研究結(jié)果顯示,TCT與高危型HPV-DNA檢測在宮頸癌前病變檢測中均能取得較好效果,但是高危型HPV-DNA檢測的陽性檢出率更高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),而且其檢測結(jié)果與病理活檢結(jié)果的符合率明顯高于TCT。由此可見,高危型HPV-DNA檢測可有效提高宮頸癌前病變篩查的敏感性及陽性檢出率,且不易出現(xiàn)漏診情況,值得在臨床推廣應(yīng)用。
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10.3969/j.issn.1009-5519.2016.13.043
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1009-5519(2016)13-2069-02
(2016-03-10)