貴州包裝飲用水中污染情況分析

銅綠假單胞菌也稱(chēng)綠膿桿菌，是一種常見(jiàn)的條件致病菌。銅綠假單胞菌在自然界分布廣泛，存在于空氣、土壤、水體、動(dòng)物和人皮膚、呼吸道及腸道中。銅綠假單胞菌能夠產(chǎn)生溶于水的綠膿菌素、熒光色素、紅膿菌素，同時(shí)該菌還能夠產(chǎn)生內(nèi)毒素、胞外毒素、外毒素A等十余種致病因子，其中外毒素A為重要的致死因子。在食品檢測(cè)領(lǐng)域，銅綠假單胞菌是一種非常重要的水源性致病菌，其廣泛存在于水源水及各類(lèi)型包裝飲用水中。近年來(lái)，隨著包裝飲用水生產(chǎn)和消費(fèi)量的不斷上升，銅綠假單胞菌污染包裝飲用水的報(bào)道逐漸增多，甚至引起食物中毒?，F(xiàn)階段，包裝飲用水中銅綠假單胞菌污染的問(wèn)題日益受到重視，包裝飲用水中的銅綠假單胞菌已經(jīng)成為各級(jí)監(jiān)管部門(mén)和檢測(cè)機(jī)構(gòu)重點(diǎn)監(jiān)測(cè)的對(duì)象。包裝飲用水新國(guó)標(biāo) GB19298-2014于 2015年 5月 24號(hào)正式實(shí)施，新國(guó)標(biāo)修改了微生物指標(biāo)與限量，銅綠假單胞菌被列為必檢的微生物檢測(cè)項(xiàng)目之一。為了掌握新國(guó)標(biāo)實(shí)施以來(lái)貴州省內(nèi)生產(chǎn)和銷(xiāo)售的包裝飲用水中銅綠假單胞菌污染的情況，本文共檢測(cè)了291個(gè)批次的包裝飲用水，結(jié)果分析如下。

材料與方法（一）樣品來(lái)源 包裝飲用水新國(guó)標(biāo)GB19298-2014于2015 年5月24日開(kāi)始實(shí)施，所以此次檢測(cè)和統(tǒng)計(jì)的水樣為2015年5月24日至2015年12月31日抽檢的樣品。檢測(cè)樣品由專(zhuān)業(yè)抽樣人員在貴州省內(nèi)各包裝飲用水生產(chǎn)企業(yè)和供水站進(jìn)行隨機(jī)抽樣，共抽取了291個(gè)批次的包裝飲用水。各個(gè)批次的包裝飲用水均在有效期內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。（二）試劑與儀器CN瓊脂（貨號(hào)：027254）、金氏B培養(yǎng)基（貨號(hào)：027052）購(gòu)自廣東環(huán)凱微生物科技有限公司。乙酰胺肉湯（貨號(hào)：HB8653）、納氏試劑（貨號(hào)：HB8654）、氧化酶試紙（貨號(hào)：HB2100）購(gòu)自青島海博生物技術(shù)有限公司。0.45μm濾膜（貨號(hào)：HAWG047S6）和過(guò)濾儀器購(gòu)自密理博中國(guó)有限公司。三用紫外分析儀購(gòu)自上海漢諾儀器有限公司。（三）檢測(cè)方法及評(píng)價(jià)嚴(yán)格按照國(guó) 標(biāo)GB/T8538 4.54-2008進(jìn) 行 銅綠假單胞菌的檢測(cè)。采用濾膜法進(jìn)行銅綠假單胞菌的檢測(cè)，將250ml水樣用0.45μm孔徑的濾膜進(jìn)行過(guò)濾，然后將濾膜移至CN瓊脂平板上，于36℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)40-48h。在培養(yǎng)20-24h和40-48h后觀察濾膜上菌落的生長(zhǎng)情況：①濾膜上所有顯綠色或藍(lán)色的菌落，直接判定為銅綠假單胞菌并計(jì)數(shù)；②在長(zhǎng)波紫外燈（365 nm）下檢查濾膜，能夠產(chǎn)生熒光的非綠/藍(lán)菌落為疑似銅綠假單胞菌，進(jìn)行乙酰胺肉湯產(chǎn)胺試驗(yàn)，產(chǎn)胺試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性判定為銅綠假單胞菌；③濾膜上不發(fā)熒光的紅褐色菌落進(jìn)行乙酰胺肉湯產(chǎn)胺試驗(yàn)、氧化酶實(shí)驗(yàn)、金氏B產(chǎn)熒光實(shí)驗(yàn)，如上述三項(xiàng)實(shí)驗(yàn)均為陽(yáng)性，則判定為銅綠假單胞菌［7］。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中使用銅綠假單胞菌陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)菌株（CMCC：10104）作為對(duì)照。檢測(cè)結(jié)果按照GB19298、DBS52/008等相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評(píng)價(jià)。

結(jié)果（一）不同類(lèi)型包裝飲用水中銅綠假單胞菌檢出情況本次共檢測(cè)291個(gè)批次的包裝飲用水，檢出銅綠假單胞菌陽(yáng)性樣品9個(gè)批次，檢出率為3.09%，檢出范圍為2-51 CFU/250ml。天熱飲用山泉水為215個(gè)批次，檢出銅綠假單胞菌陽(yáng)性樣品7個(gè)批次，檢出率為3.24%，檢出范圍為2-51 CFU/250ml。飲用純凈水為75個(gè)批次，檢出銅綠假單胞菌陽(yáng)性樣品2個(gè)批次，檢出率為2.67%，檢出范圍為4-3 2 CFU/250ml。天然飲用山泉水與飲用純凈水銅綠假單胞菌檢出率無(wú)顯著性差異（χ2=0.02，P＞0.05）（見(jiàn)表1）。

表1　不同類(lèi)型包裝飲用水中銅綠假單胞菌檢出情況

（二）不同包裝類(lèi)型飲用水中銅綠假單胞菌檢出情況

瓶裝飲用水共26個(gè)批次，未檢出銅綠假單胞菌陽(yáng)性樣品。桶裝飲用水共265個(gè)批次，檢出銅綠假單胞菌陽(yáng)性樣品9個(gè)批次，檢出率為3.40%，檢出范圍為2-5 1 CFU/250ml。瓶裝飲用水與桶裝飲用水銅綠假單胞菌檢出率無(wú)顯著性差異（χ2=0.91，P＞0.05）（見(jiàn)表2）。

表2　不同包裝類(lèi)型飲用水中銅綠假單胞菌檢出情況

包裝飲用水是密封于符合食品安全標(biāo)準(zhǔn)和相關(guān)規(guī)定的包裝容器中，可供直接飲用的水［6］。本文共檢測(cè)了291個(gè)批次的包裝飲用水，檢出銅綠假單胞菌陽(yáng)性樣品9個(gè)批次，檢出率為3.09%，說(shuō)明目前貴州省內(nèi)生產(chǎn)和銷(xiāo)售的包裝飲用水存在銅綠假單胞菌污染問(wèn)題，應(yīng)引起市場(chǎng)監(jiān)管、食品藥品監(jiān)督管理局等相關(guān)部門(mén)的重視。

本次檢測(cè)中銅綠假單胞菌檢出率為3.09%，低于其他地區(qū)的檢出率。王燕梅等的調(diào)查報(bào)告中顯示在江蘇省7個(gè)省轄市中，銅綠假單胞菌的檢出率為10.3%（34/331）。陳松等的文章中顯示四川達(dá)州市銅綠假單胞菌的檢出率為52.17%（12/23）［。魏磊等的抽樣檢測(cè)結(jié)果顯示山泉水成品水中銅綠假單胞菌的檢出率為5.6%。

本次檢測(cè)結(jié)果顯示貴州省內(nèi)生產(chǎn)和銷(xiāo)售的包裝飲用水存在銅綠假單胞菌污染問(wèn)題。從以往的研究結(jié)果來(lái)看，銅綠假單胞菌污染包裝飲用水的主要原因有：一是生產(chǎn)用水源被銅綠假單胞菌污染，魏磊、鄧梅清等的調(diào)查顯示生產(chǎn)用水源水的銅綠假單胞菌檢出率顯著高于成品水的檢出率；二是水處理和灌裝過(guò)程中引起的銅綠假單胞菌污染，不科學(xué)的水處理方式、反沖洗操作不當(dāng)、未徹底消毒的生產(chǎn)環(huán)境和生產(chǎn)設(shè)備等都有可能引起銅綠假單胞菌對(duì)成品水的污染；三是包裝材料的選擇與清洗消毒不當(dāng)會(huì)引起銅綠假單胞菌的污染。

隨著經(jīng)濟(jì)與社會(huì)的發(fā)展，包裝飲用水的消費(fèi)量逐年增長(zhǎng)，為了保障包裝飲用水的衛(wèi)生質(zhì)量，降低包裝飲用水銅綠假單胞菌污染風(fēng)險(xiǎn)，保護(hù)消費(fèi)者的切身利益，生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)對(duì)水源進(jìn)行科學(xué)的保護(hù)和管理，選擇科學(xué)的水處理方式，科學(xué)合理地對(duì)生產(chǎn)環(huán)境、生產(chǎn)設(shè)備、包裝材料進(jìn)行清洗消毒；監(jiān)管部門(mén)應(yīng)加強(qiáng)對(duì)生產(chǎn)企業(yè)的監(jiān)督和抽查力度，督促包裝飲用水生產(chǎn)企業(yè)嚴(yán)格按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)、運(yùn)輸和貯存，切實(shí)保障包裝飲用水的質(zhì)量和衛(wèi)生安全。

姓名：羅紹楠 男，布依族，碩士研究生，貴州省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)院工作，助理工程師，研究方向：食品微生物檢測(cè)。

其他作者：戴奕杰、劉廷菊、肖莉：工作單位：貴州省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)院。

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