宋　靜，楊發(fā)龍，陳　剛，王　杰，鐘金誠(chéng)，鄭玉才（.重慶長(zhǎng)壽區(qū)疫病預(yù)防控制中心，重慶長(zhǎng)壽400；.青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院，青海西寧8000；.西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，四川成都6004）

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青海藏系綿羊毛囊生長(zhǎng)周期性變化的研究

宋靜1，楊發(fā)龍3，陳剛2，王杰3，鐘金誠(chéng)3，鄭玉才3
（1.重慶長(zhǎng)壽區(qū)疫病預(yù)防控制中心，重慶長(zhǎng)壽401220；2.青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院，青海西寧810003；3.西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，四川成都610041）

摘要：對(duì)青海藏系綿羊皮膚切片進(jìn)行H.E.染色的組織形態(tài)學(xué)觀察顯示，青海藏系綿羊皮膚毛囊在2月份處于休止期、5月份處于興盛前期、8月份處于興盛期、11月份進(jìn)入退行期；初級(jí)毛囊密度活動(dòng)變化較次級(jí)毛囊密度活動(dòng)變化恒定，S/P值明顯低于其他品系綿羊；毛囊群以一元體和二元體毛囊群居多，三元體毛囊群較少。

關(guān)鍵詞：青海藏系綿羊；毛囊

青海藏羊是我國(guó)3大綿羊品種之一，屬粗毛羊品種[1]。所產(chǎn)羊毛以其纖維長(zhǎng)、彈性好、彈力大、富有光澤等特點(diǎn)而聞名，譽(yù)稱“西寧毛”，是制做地毯、長(zhǎng)毛絨和提花毛毯的優(yōu)質(zhì)原料。由于本省草場(chǎng)載畜量過重、草場(chǎng)退化、氣候干旱、選種選配等原因，使青海藏羊被毛品質(zhì)有所下降[2]。國(guó)內(nèi)關(guān)于細(xì)毛羊和絨山羊皮膚組織形態(tài)已經(jīng)有一些研究，但對(duì)青海藏系綿羊等粗毛羊類皮膚形態(tài)的研究比較少。通過研究不同品種、品系皮膚形態(tài)和被毛生長(zhǎng)特性，能夠在一定程度上揭示羊毛規(guī)律性生長(zhǎng)的調(diào)控機(jī)理。為進(jìn)一步選育和改良提供科學(xué)依據(jù)，同時(shí)為分子機(jī)理方面的研究提供形態(tài)學(xué)方面的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1　材料與方法

1.1樣品的采集和處理本試驗(yàn)皮膚組織均采自青海省三角城種羊場(chǎng)，選取兩周歲臨床健康，生長(zhǎng)發(fā)育良好的青海藏系綿羊公羊和母羊各兩只。連續(xù)在1年周期內(nèi)每隔3個(gè)月（即2月、5月、8月、11月），在試驗(yàn)羊體側(cè)部肩胛后緣約10 cm處，剪毛、剃毛、清洗、碘酊涂布消毒、酒精脫碘，剪取約2 cm×2 cm大小兩塊皮樣，立即放入現(xiàn)配的4%多聚甲醛溶液中固定，24 h，然后制作石蠟切片、H.E.染色、脫水、封片。

1.2統(tǒng)計(jì)分析常規(guī)H.E.染色切片采集圖像后，獲取的相應(yīng)數(shù)據(jù)用Microsoft Excel數(shù)據(jù)分析工具進(jìn)行單因素方差分析和t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析。

1.2.1皮膚收縮率的校正皮膚組織在脫離羊體后經(jīng)固定、脫水及透明等一系列切片制作過程中會(huì)出現(xiàn)收縮現(xiàn)象，所以在研究皮膚毛囊性狀時(shí)，必須對(duì)皮膚的收縮率進(jìn)行校正。按以下公式進(jìn)行校正得到青海藏系綿羊的皮膚收縮率均為65%。（本文以下涉及毛囊的數(shù)據(jù)皆為換算成活體皮膚情況下的數(shù)據(jù)）。

皮膚收縮率=（脫水透明后皮膚塊面積/活體采樣時(shí)皮膚塊面積）×l00%

1.2.2橫切切片的統(tǒng)計(jì)取每只青海藏系綿羊各月份皮膚橫切切片樣本，用圖像采集器采集10個(gè)視野中具有完整毛囊群的區(qū)域，統(tǒng)計(jì)初級(jí)毛囊和次級(jí)毛囊數(shù)，最后換算為每mm2毛囊個(gè)數(shù)（毛囊密度）。分別統(tǒng)計(jì)每只青海藏系綿羊各月份初、次級(jí)毛囊密度（個(gè)/mm2），并計(jì)算出S/P值。

2　結(jié)果與分析

2.1結(jié)果

2.1.1皮膚毛囊染色結(jié)果蘇木精染液為堿性，主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色；伊紅為酸性染料，主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。染色結(jié)果：細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色，黏液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色，胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色，彈力纖維呈亮粉紅色（見中插彩版圖1）。

2.1.2橫切切片的統(tǒng)計(jì)結(jié)果如表1、圖2。

表1　不同月份初級(jí)、次級(jí)毛囊密度及S/P值

圖2　不同月份初級(jí)、次級(jí)毛囊密度及S/P值

2.2分析對(duì)采集的各月份皮膚樣本進(jìn)行橫切，H.E.染色，用圖像采集器采集10個(gè)視野中具有完整毛囊群的區(qū)域，在皮膚水平切片上所觀察到的結(jié)果表明，青海藏系綿羊的皮膚組織學(xué)結(jié)構(gòu)與其他品系綿羊的基本一致。根據(jù)毛囊的發(fā)生早晚及形態(tài)，一般可將毛囊分為兩個(gè)類型：一種是初級(jí)毛囊；另一種為次級(jí)毛囊。毛囊在皮膚內(nèi)有規(guī)律的成群分布，周圍由較寬的致密結(jié)締組織環(huán)繞形成毛囊群。其中毛囊群多為一元體和二元體，其次為三元體，而四元體極少能觀察到。每個(gè)毛囊群基本呈橢圓形，毛囊群中初級(jí)毛囊有規(guī)律的在毛囊群的一側(cè)排列，直徑較粗，大小明顯，并且伴有零星不發(fā)達(dá)的小型皮脂腺。次級(jí)毛囊分布在初級(jí)毛囊周圍，直徑較小，但清楚可辨。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及圖表分析結(jié)果表明，青海藏系綿羊初、次級(jí)毛囊密度均在2月最低，而在8月最高。從2月到8月，初、次級(jí)毛囊密度逐漸增加，說明毛囊重建直到8月結(jié)束。從8月直到11月，初、次級(jí)毛囊密度都呈緩慢的下降趨勢(shì)。另外從密度變化曲線還可以看出，初級(jí)毛囊密度變化較次級(jí)毛囊密度變化平緩，說明一年中初級(jí)毛囊密度變化相對(duì)比較恒定。

2.3討論形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)，2月的初、次級(jí)毛囊均出現(xiàn)數(shù)量不等的空泡，且毛囊群間結(jié)締組織增多，有了退行期的特征，毛囊各性狀的統(tǒng)計(jì)值最低；5月舊次級(jí)毛囊呈空泡狀，一側(cè)有新的次級(jí)毛囊生成，毛囊數(shù)量增多，且毛囊各性狀的統(tǒng)計(jì)值逐漸增加；次級(jí)毛囊在8月重新生成時(shí)，之前2～3一群成群發(fā)生的，已互相分離形成獨(dú)立的毛囊，而此時(shí)毛囊各性狀的統(tǒng)計(jì)值為最高；11月至第2年的2月次級(jí)毛囊數(shù)逐漸減少，毛囊各性狀的統(tǒng)計(jì)值逐漸減少。結(jié)合統(tǒng)計(jì)結(jié)果，我們認(rèn)為青海藏系綿羊在2月時(shí)其毛囊處于休止期，5月處于興盛前期，8月處于毛囊發(fā)育的興盛期，而11月已慢慢進(jìn)入退行期。青海藏系綿羊毛囊的發(fā)育與其他品系綿羊一樣，在1年中明顯地經(jīng)歷了興盛、退行、休止3個(gè)時(shí)期，其周期為1年。另外1、2月為青海最冷時(shí)期，但其毛囊活性卻處于休止期，說明毛生長(zhǎng)的最快時(shí)期并非為氣溫的最冷時(shí)期，低溫并不能促進(jìn)毛的生長(zhǎng)。一般而言，皮膚內(nèi)毛囊密度大則結(jié)締組織成分少，導(dǎo)致真皮疏松；反之，毛囊密度小，則結(jié)締組織成分多，因而真皮致密結(jié)實(shí)。單位皮膚面積的毛囊數(shù)（即毛囊密度）與產(chǎn)絨量呈正相關(guān)，密度越大，產(chǎn)毛量越高。所以，產(chǎn)毛量取決于體表被毛的密度，而體表被毛的密度又是由單位面積的毛囊數(shù)來決定的，單位面積毛囊數(shù)與毛囊群的大小，即毛囊群內(nèi)次級(jí)毛囊與初級(jí)毛囊的比值S/P關(guān)系密切。隨著毛囊群內(nèi)次級(jí)毛囊數(shù)的增加，即S/P值的增大，羊毛的產(chǎn)量增加而羊毛的細(xì)度逐漸減小[3]。本試驗(yàn)所測(cè)得青海藏系綿羊的S/P值在2.21±0.36-2.99±0.44之間，均明顯低于內(nèi)蒙古絨山羊的阿拉善品系（7.085）[4]、沂蒙黑山羊（7.47）[5]、安哥拉山羊（8.28）、中衛(wèi)山羊（8.28）[6]、遼寧絨山羊（7.58）[7]，新疆細(xì)毛羊（14.73）[8]。揭示了青海藏系綿羊產(chǎn)毛量低，羊毛較粗的一個(gè)內(nèi)在原因。此外，青海藏系綿羊的三元體毛囊群明顯低于其他品系羊，其結(jié)果是相對(duì)增加了毛囊群間的間隔面積，減少了單位皮膚面積的毛囊數(shù)和毛被密度，影響其產(chǎn)毛量和細(xì)度，是青海藏系綿羊產(chǎn)毛量相對(duì)較低，毛質(zhì)較粗的另一個(gè)重要原因。這一現(xiàn)象說明毛囊密度與S/P值這兩個(gè)產(chǎn)毛性能的重要指標(biāo)具有較高的遺傳力。根據(jù)這一特性，采用雜交改良是提高羊毛產(chǎn)量、改善羊毛品質(zhì)的有效途徑之一。

3　結(jié)論

3.1本試驗(yàn)從形態(tài)學(xué)方面描述了青海藏系綿羊皮膚毛囊在一年間的變化。青海藏系綿羊在2月其毛囊處于休止期，5月處于興盛前期，8月處于毛囊發(fā)育的興盛期，而11月進(jìn)入退行期。

3.2在毛囊周期變化中，初級(jí)毛囊密度活動(dòng)變化較次級(jí)毛囊密度活動(dòng)變化恒定。

3.3試驗(yàn)所測(cè)得青海藏系綿羊的S/P值明顯低于其他品系綿羊。且毛囊群以一元體和二元體毛囊群居多，而三元體毛囊群較少。

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中圖分類號(hào)：S826

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：0529-6005（2016）05-0043-02

收稿日期：2016-03-02

作者簡(jiǎn)介：宋靜（1978-），女，獸醫(yī)師，碩士，從事畜禽疫病防控工作，E-mail：112675585@qq.com