喻正軍,李增強(.湖南新南方養(yǎng)殖服務(wù)有限公司，湖南 長沙 4000；2.湖南中岸生物藥業(yè)有限公司，湖南 長沙 4000)

臍帶血檢測技術(shù)在產(chǎn)房仔豬腹瀉防控中的應(yīng)用

喻正軍1,2,李增強1(1.湖南新南方養(yǎng)殖服務(wù)有限公司，湖南 長沙 410100；2.湖南中岸生物藥業(yè)有限公司，湖南 長沙 410100)

從2010年以來，產(chǎn)房仔豬腹瀉問題一直困擾著廣大養(yǎng)豬人，且在疾病問題中產(chǎn)房仔豬腹瀉這幾年來一直排在第一位，不論在舉辦的大小養(yǎng)豬培訓和會議，大家談?wù)撟疃嗟脑掝}都是產(chǎn)房仔豬腹瀉問題，筆者一直在臨床一線，親眼目睹了產(chǎn)房腹瀉給豬場造成的危害，甚至是毀滅性的打擊。我們將面臨如何做到產(chǎn)房仔豬腹瀉的預(yù)警、診斷和防控呢？將是擺在養(yǎng)豬人面前巨大的課題，而本文將探討臍帶血檢測技術(shù)在產(chǎn)房仔豬腹瀉疾病的診斷、防控中如何應(yīng)用和發(fā)揮作用。

1 豬胎盤的生理結(jié)構(gòu)和功能

1．1 豬胎盤的生理結(jié)構(gòu)

豬胎盤屬于非蛻膜彌散型上皮絨毛膜胎盤，絨毛膜血管內(nèi)皮、絨毛膜間充質(zhì)、絨毛膜上皮（滋養(yǎng)層）、子宮內(nèi)膜上皮、子宮內(nèi)膜結(jié)締組織和母體血管內(nèi)皮6層組織共同形成胎盤屏障，其阻止大部分微生物和毒物等從母體進入胎兒，同時也是維系母胎間物質(zhì)轉(zhuǎn)運、氣體交換與血液循環(huán)的唯一部位。

1．2 豬胎盤的功能

1）胎盤屏障不影響母和子血的物質(zhì)和氣體交換，氨基酸、氧、二氧化碳、礦物質(zhì)、水、糖和水溶性維生素（B族和C），某些藥物可以通過胎盤。

2）在胎盤形成后，未分解的蛋白質(zhì)、脂肪和脂溶性維生素（A、D和E）不能通過胎盤。

3）細菌一般不能通過絨毛進入胎兒血中，但某些病原體（結(jié)核）在胎盤中引起病變而破壞了絨毛，則可以進入胎兒血液；大多數(shù)病毒可以通過胎盤進入胎體。

2 臍帶血檢測技術(shù)在產(chǎn)房仔豬腹瀉防控的應(yīng)用

臍帶血是指胎兒娩出、臍帶結(jié)扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液。根據(jù)豬胎盤的生理結(jié)構(gòu)和功能，通過檢測臍帶血中腹瀉相關(guān)病原（豬瘟病毒、偽狂犬病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、圓環(huán)病毒、流行性腹瀉病毒、傳染性胃腸炎病毒和輪狀病毒等）和毒素等，全面系統(tǒng)分析母豬的免疫、感染和健康狀況及母豬的排毒情況，同時通過臍帶血檢測腹瀉相關(guān)病原和毒素，可以進一步評估仔豬腹瀉相關(guān)病原的感染狀況，免疫狀況和仔豬肝臟的損傷等，進而確定產(chǎn)房仔豬腹瀉發(fā)生的主要因素，豬場目前存在的漏洞等。

產(chǎn)房仔豬腹瀉問題是很復(fù)雜的問題，疾病的診斷僅靠實驗室檢測手段還是不夠的，開展產(chǎn)房仔豬腹瀉精準的預(yù)警、診斷和防控，還需進一步了解本場的豬臨床中癥狀，硬件設(shè)施，現(xiàn)場管理和本地區(qū)疫情的流行情況等方面，才可以更加精準地做到產(chǎn)房仔豬腹瀉的預(yù)警、診斷和防控。

3 臍帶血檢測技術(shù)在臨床腹瀉檢測和防控中的應(yīng)用

3．1 具體案例的分析

從2010年，臍帶血檢測技術(shù)在產(chǎn)房仔豬腹瀉診斷、防控中應(yīng)用至今，已成功幫助全國各地300多家規(guī)?；i場做好產(chǎn)房腹瀉的防控，取得非常好的效果。如在2016年3月份，北方某1 000頭母豬場，送檢6份臍帶血，該場當時在發(fā)生產(chǎn)房仔豬腹瀉，主要檢測項目：腹瀉相關(guān)病毒、內(nèi)毒素等，檢測腹瀉相關(guān)病毒方法為PCR和RT-PCR，內(nèi)毒素采用鱟試劑方法檢測，具體操作省略，檢測結(jié)果如下表1。

從臍帶血檢測到豬藍耳病病毒（PRRSV）、偽狂犬病毒(PRV)、流行性腹瀉病毒（PEDV）、傳染性胃炎病毒（TGEV）和豬瘟病毒（HCV），未檢測到其他病毒，其中偽狂犬病毒、傳染性胃腸炎病毒陽性率高，其次流行性腹瀉病毒和豬藍耳病病毒，豬瘟病毒，存在2種以上病毒混合感染，表明母豬健康水平差，也進一步表明母豬群豬瘟、偽狂犬等基礎(chǔ)疫苗免疫效果不是很理想，不能有效阻斷感染和保護母豬，母豬部分存在豬瘟、偽狂犬等帶毒排毒現(xiàn)象，同時進一步預(yù)示著仔豬在母豬體內(nèi)即胚胎時期可能已感染以上病原，將會出現(xiàn)以下的情況：可能導(dǎo)致免疫耐受，仔豬出生1～5日齡發(fā)生腹瀉等。

表1 北方某1 000頭母豬豬場臍帶血腹瀉相關(guān)病原和內(nèi)毒素檢測結(jié)果

另外，在臍帶血中檢測到內(nèi)毒素，其陽性率為83.34%（5/6），進一步表明部分母豬可能存在代謝機能方面的障礙，進而導(dǎo)致內(nèi)毒素經(jīng)胎盤屏障進入仔豬體內(nèi)，損傷仔豬肝臟及其他器官等，協(xié)同突破胎盤屏障的病原加劇對仔豬各個器官的損傷，且內(nèi)毒素可以引起仔豬腸道通透性增加而引發(fā)腹瀉，需要高度重視。

總之，根據(jù)臍帶血檢測結(jié)果和臨床癥狀，結(jié)合疾病的流行規(guī)律，該場腹瀉發(fā)生的因素是豬瘟、偽狂犬和內(nèi)毒素，流行性腹瀉病毒和傳染性胃腸炎病毒，解決該場腹瀉問題，首先解決好母豬的豬瘟、偽狂犬和內(nèi)毒素的影響，其次做好腹瀉疫苗的接種，環(huán)境干粉消毒等管理，方案實施后7 d后，產(chǎn)房仔豬腹瀉停止。

3．2 腹瀉防控理論的總結(jié)

經(jīng)反復(fù)多次臨床實戰(zhàn)，總結(jié)形成產(chǎn)房仔豬腹瀉防控的思路重點是：母豬的的防控是根本，根據(jù)臍帶血檢測結(jié)果進一步說明了這點，母豬中重點解決豬瘟、偽狂犬等基礎(chǔ)免疫的問題，其次腹瀉的防控，建議選擇流行毒株接種，重視內(nèi)毒素的防控，加強母豬的保肝護腎等；第三仔豬防控是治標，降低和減少仔豬的損失；最后，加上定期臍帶血的檢測評估，及時發(fā)現(xiàn)豬場中存在的漏洞和不足，優(yōu)化免疫和保健等措施。

3．3 臨床檢測中的應(yīng)用

圖1 2015年9月－2016年3月份臨床腹瀉豬場524份臍帶血檢測統(tǒng)計結(jié)果

2015年9月－2016年3月份采集臨床腹瀉豬場的524份臍帶血，檢測方法為PCR和RT-PCR，具體檢測結(jié)果如下圖1。

從臨床腹瀉豬場的臍帶血檢測數(shù)據(jù)來看，主要危害的病原為豬藍耳病病毒、偽狂犬病毒、豬圓環(huán)病毒和流行性腹瀉病毒等，統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)大部分存在2種或2種以上病原混合感染現(xiàn)象，表明大部分母豬的健康水平比較的差，大量母豬表現(xiàn)為眼屎比較多、淚斑等臨床癥狀，主要疫苗防控效果不理想，故導(dǎo)致仔豬腹瀉的發(fā)生，進一步說明母豬防控是仔豬腹瀉防控的關(guān)鍵，值得引起廣大養(yǎng)豬朋友的重視和關(guān)注。

3．4 具體在臨床的應(yīng)用及其效果

臍帶血檢測技術(shù)是對傳統(tǒng)實驗室檢測方法的有效補充，該技術(shù)具有采樣簡單、無應(yīng)激、不影響生產(chǎn)等優(yōu)點。可以同時評估母豬的免疫水平，健康狀況和仔豬的感染狀況，精準確定疾病發(fā)生的因素，為產(chǎn)房仔豬腹瀉的防控提供科學可靠的依據(jù)。為克服普通PCR的污染，無法定量等不足，新南方研發(fā)和服務(wù)團隊開發(fā)定量、更精準和簡單的熒光PCR檢測技術(shù)，將精準預(yù)測病毒含量與疾病的關(guān)系，結(jié)合臍帶生理結(jié)構(gòu)和天然的優(yōu)勢，將更加精準地開展疾病預(yù)警和防控?？傊?，臍帶血檢測技術(shù)將會在規(guī)模化豬場的疾病預(yù)警、診斷和防控中發(fā)揮巨大的作用。

新南方服務(wù)團隊，在國內(nèi)國外首創(chuàng)臍帶血檢測技術(shù)，根據(jù)臍帶血檢測技術(shù)臨床實戰(zhàn)中不斷總結(jié)和研究，率先提出母仔一體化、母仔同防、母仔同治等理論，并應(yīng)用該理論指導(dǎo)實際疾病防控，并積極將其應(yīng)用在臨床實戰(zhàn)中。到目前為止，從2010年以來，新南方服務(wù)團隊已成功應(yīng)用臍帶血檢測技術(shù)，服務(wù)全國500頭以上能繁母豬的規(guī)?；i場有2 000多家，其中的300多家成功解決了產(chǎn)房仔豬腹瀉問題，為社會挽回巨大的經(jīng)濟的損失。

《豬業(yè)科學》第7期有獎閱讀

讀者在仔細閱讀當期雜志后，回答下列問題，并于2016年9月1日前將答卷郵寄回編輯部，或在本刊網(wǎng)站（http://www.csis.cn）上下載電子版問卷，回答后將您答卷發(fā)送至我們的電子郵箱：swineonline@263.net。凡有效答卷者即可獲得10元手機話費充值卡，期待您的參與！

一、選擇題

1. 根據(jù)初乳中蛋白質(zhì)、乳糖、乳脂等基本成分的變化，定義母豬在分娩和分娩后（ ）之內(nèi)分泌的奶水為初乳。

A 7 d B 14 d C 3 d

2. 蓋他病（Getah，GET）是由披膜病毒科甲病毒屬的蓋他病毒（Getah virus，GETV）引起的主要侵害（ ）的一種蟲媒傳染病。

A 牛和豬 B 豬和馬 C豬和人

3.高通量測序技術(shù)可以實現(xiàn)一次對（ ）DNA分子進行序列測定；覆蓋面廣，能檢測樣品中全部遺傳信息；準確性高，其準確率可高達99.99%。

A 幾百條到幾千條 B 幾十萬到幾百萬條C 幾千條到幾萬條

二、填空

1.從2016年第7期雜志中，請您挑選出您最喜歡的文章（填寫文章的起始頁碼即可）_____________________。

2.您對我們雜志還有哪些寶貴意見和建議？__________ ________________ ________________ 。

二維碼微信答題

2016-07-06）