孟海洋

(太康縣人民醫(yī)院，河南 周口 461400)

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視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中Ki-67、PTEN表達(dá)的變化

孟海洋

(太康縣人民醫(yī)院，河南 周口 461400)

[摘要]目的探討視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中Ki-67、PTEN表達(dá)的變化及其臨床意義。方法采用免疫組化S-P法檢測(cè)97例視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤和28例正常視網(wǎng)膜組織中Ki-67、PTEN的表達(dá)水平，并分析兩者與視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤臨床病理參數(shù)的關(guān)系。結(jié)果視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中Ki-67的陽(yáng)性率為66.0%(64/97)，高于正常視網(wǎng)膜組織的14.3%(4/28)(χ2=23.406，P<0.05)；視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中PTEN的陽(yáng)性率為53.6%(52/97)，低于正常視網(wǎng)膜組織的92.9%(26/28)(χ2=14.266，P<0.05)。視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中Ki-67、PTEN的表達(dá)均與患者的分化程度、臨床分期有關(guān)(P<0.05)。視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中Ki-67、PTEN的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.493，P<0.05)。結(jié)論Ki-67、PTEN的異常表達(dá)參與了視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的侵襲和病程進(jìn)展。

[關(guān)鍵詞]視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤；Ki-67；PTEN

視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤是一種多見(jiàn)于嬰幼兒的眼部惡性腫瘤，發(fā)病率在嬰幼兒期僅次于白血病，該病對(duì)患者的視力造成嚴(yán)重危害，嚴(yán)重者甚至危及患者的生命。視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的發(fā)生、發(fā)展由多種基因的參與，過(guò)程非常復(fù)雜。Ki-67是一種反映細(xì)胞增殖活性的標(biāo)志物，在惡性腫瘤患者體內(nèi)主要用于惡性腫瘤的發(fā)展、惡化、轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為的評(píng)估[1]。PTEN屬于抑癌基因，具有雙重磷酸酶活性，正常情況下能夠維持機(jī)體正常組織的生理行為，一旦表達(dá)缺失則可能促進(jìn)細(xì)胞的癌變[2]。本研究采用免疫組化S-P法檢測(cè)視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中Ki-67、PTEN蛋白的表達(dá)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料入組河南省人民醫(yī)院和太康縣人民醫(yī)院2010年1月至2015年9月收治的經(jīng)病理學(xué)確診的視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤患者97例，男56例，女41例；年齡6個(gè)月～12歲，中位年齡3.5歲；組織分化程度：分化型53例，未分化型44例；臨床分期：眼內(nèi)期37例，青光眼期35例，眼外擴(kuò)展期25例。并選取同期收治的因外傷摘除眼球的正常視網(wǎng)膜患者28例作為對(duì)照，其中男20例，女8例，年齡6個(gè)月～13歲，中位年齡3.2歲。2組患者的性別、年齡等基線資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2主要試劑Ki-67鼠抗人單克隆抗體、PTEN鼠抗人單克隆抗體、S-P免疫組化試劑盒及DAB顯色劑等均購(gòu)自北京中山金橋生物技術(shù)有限公司。

1.3免疫組化法檢測(cè)Ki-67、PTEN的表達(dá)情況采用免疫組化S-P法檢測(cè)97例視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤和28例正常視網(wǎng)膜組織中Ki-67、PTEN蛋白的表達(dá)，以PBS代替一抗作為陰性對(duì)照，以已知Ki-67、PTEN陽(yáng)性切片作為陽(yáng)性對(duì)照。

1.4免疫組化結(jié)果判定Ki-67、PTEN均定位于細(xì)胞漿或細(xì)胞核中，以細(xì)胞漿或細(xì)胞核染成棕黃色為陽(yáng)性信號(hào)，選取至少5個(gè)高倍鏡(×400)視野，計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù),并觀察染色強(qiáng)度，進(jìn)行綜合評(píng)估，判斷陽(yáng)性率[3]。參考文獻(xiàn)進(jìn)行免疫組化染色結(jié)果的判斷。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，Ki-67、PTEN的陽(yáng)性率等計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Spearmen相關(guān)性分析法，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2結(jié)果

2.1視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中Ki-67、PTEN的表達(dá)視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中Ki-67的陽(yáng)性率為66.0%(64/97)，高于正常視網(wǎng)膜組織的14.3%(4/28)(χ2=23.406，P<0.05)；視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中PTEN的陽(yáng)性率為53.6%(52/97)，低于正常視網(wǎng)膜組織的92.9%(26/28)(χ2=14.266，P<0.05)。

2.2視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中Ki-67、PTEN的表達(dá)與其臨床病理參數(shù)的關(guān)系視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中E-cadherin、VEGF的表達(dá)均與患者的分化程度、臨床分期有關(guān)(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中Ki-67、

PTEN的表達(dá)與其臨床病理參數(shù)的關(guān)系

項(xiàng)目nKi-67陽(yáng)性χ2PPTEN陽(yáng)性χ2P組織分化程度 分化型53304.576<0.05369.629<0.05 未分化型443416臨床分期 眼內(nèi)期371925 青光眼期35238.929<0.05197.599<0.05 眼外擴(kuò)展期25228

2.3視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中Ki-67、PTEN表達(dá)的相關(guān)性視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中Ki-67、PTEN的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.493，P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中Ki-67、PTEN表達(dá)的相關(guān)性

Ki-67PTEN陽(yáng)性陰性合計(jì)陽(yáng)性234164陰性29433合計(jì)524597

注：r=-0.493，P<0.05

3討論

視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤是嬰幼兒常見(jiàn)的原發(fā)于視網(wǎng)膜的惡性腫瘤，具有較高的致盲率和致死率，嚴(yán)重危害了嬰幼兒的生命健康安全。目前視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的主要治療手段是局部治療聯(lián)合全身化療，但是由于目前的化療方案療效有限且毒副反應(yīng)重，嚴(yán)重影響了其化療療效的進(jìn)一步提高。臨床上為進(jìn)一步探討視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的發(fā)病機(jī)制，尋找其有效的治療方案或治療靶點(diǎn)，進(jìn)行了大量研究。本研究在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的機(jī)制探討中選擇了Ki-67、PTEN這2種腫瘤相關(guān)因子。Ki-67與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移關(guān)系密切[4-5]。PTEN是一種多功能蛋白，具有蛋白磷酸酶和脂質(zhì)磷酸酶雙重活性，能夠維持正常細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖、分裂等[6-7]。本文結(jié)果顯示：視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中Ki-67的陽(yáng)性率為66.0%(64/97)，高于正常視網(wǎng)膜組織的14.3%(4/28)(χ2=23.406，P<0.05)；視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中PTEN的陽(yáng)性率為53.6%(52/97)，低于正常視網(wǎng)膜組織的92.9%(26/28)(χ2=14.266，P<0.05)。視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中Ki-67、PTEN的表達(dá)均與患者的分化程度、臨床分期有關(guān)(P<0.05)。視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中Ki-67、PTEN的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.493，P<0.05)。這與有關(guān)文獻(xiàn)[8-9]研究結(jié)果一致?？傊?，視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中Ki-67、PTEN存在異常表達(dá)，且可能參與了視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的疾病進(jìn)展、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為過(guò)程。

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Expressions of Ki-67 and PTEN in the Retinoblastoma

Meng Haiyang

(ThePeople’sHospitalofTaikang,Zhoukou461400,China)

[Abstract]ObjectiveTo investigate the expressions of Ki-67 and PTEN in the retinoblastoma and the significance.MethodsImmunohistochemical S-P method was used to detect the expressions of Ki-67 and PTEN in the 97 patients with retinoblastoma and 28 patients with normal retina tissues,their relationship with clinicopathological parameters were analyzed.ResultsThe positive rate of Ki-67 was 66.0%(64/97) in the retinoblastoma,and was 14.3%(4/28) in the normal retina tissues (χ2=23.406，P<0.05).The positive rate of Ki-67 was 53.6%(52/97) in the retinoblastoma,and was 92.9%(26/28) in the normal retina tissues (χ2=14.266，P<0.05).The expressions of Ki-67 and PTEN in the retinoblastoma were related with cell differentiation degree and clinical stage (P<0.05).In the retinoblastoma,the expression of Ki-67 was negatively related with PTEN (r=-0.493,P<0.05).ConclusionAbnormal expressions of Ki-67 and PTEN may be related to the infiltration and development of retinoblastoma.

[Key words]retinoblastoma; Ki-67; PTEN

(收稿日期：2015-10-20)

[中圖分類號(hào)]R739.7；R730.23

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]1673-5412(2016)02-0124-03

DOI:10.3969/j.issn.1673-5412.2016.02.010

作者簡(jiǎn)介：孟海洋(1979-),男,主治醫(yī)師,主要從事眼科疾病的臨床診治工作。E-mail：90475046848@qq.com