許鴻昌

[摘要] 目的 評(píng)價(jià)分析聯(lián)合檢測(cè)抗核抗體（ANA）、抗雙鏈DNA抗體（抗-ds-DNA）及抗-sm、抗核小體對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）的診斷價(jià)值。 方法 選取2011年2月～2013年12月在我院門診和住院的119例自身免疫疾病患者作為研究對(duì)象，其中67例患者為系統(tǒng)性紅斑狼瘡，作為SLE組，另52例患者為非系統(tǒng)性紅斑狼瘡，作為非SLE組；同時(shí)另選取50例健康體檢者作為對(duì)照組。三組研究對(duì)象均分別進(jìn)行ANA、抗ds-DNA、抗-sm、抗核小體檢測(cè)，對(duì)其檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析。 結(jié)果 ANA、抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小體抗體在SLE組中的敏感性分別為83.5%、43.2%、52.2%、47.7%，明顯高于非SLE組；敏感性由83.5% 提高到94.0%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 ANA、抗-ds-DNA及抗-sm、抗核小體抗體的聯(lián)合檢測(cè)在SLE診斷中有良好的互補(bǔ)作用，可明顯提高敏感性，避免漏檢；對(duì)SLE的早期診斷、療效檢測(cè)有顯著的臨床應(yīng)用價(jià)值。

[關(guān)鍵詞] 抗核抗體（ANA）；抗雙鏈DNA抗體（抗ds-DNA）；抗-sm；抗核小體抗體；系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）

[中圖分類號(hào)] R593.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2016）07-0091-03

[Abstract] Objective To evaluate and analyze the diagnostic value of antinuclear antibody（ANA）， anti-ds DNA， anti-sm， and anti-nucleosome combined detection in SLE. Methods 119 patients with autoimmune disease treated in our hospital from February 2011 to December 2013 were selected， of which 67 patients with SLE were divided into the SLE group， another 52 non-SLE patients were divided into the non-SLE group. 50 healthy volunteers were also enrolled as the control group. ANA， anti-ds DNA， anto-sm and anti-nucleosome detection were conducted on patients of three groups and the results were analyzed. Results The sensibility of ANA， anti-ds-DNA， anto-sm and anti-nucleosome antibody in the SLE group were 83.5%， 43.2%， 52.2%， and 47.7%， significantly higher than those in the non-SLE group（P<0.05）. The detection sensitivity was enhanced from 83.5% to 94.0% with significant difference （P<0.05）. Conclusion Combined detection of ANA， anti-ds-DNA， anto-sm and anti-nucleosome antibody shows favorable supplementary effect in diagnosis of SLE， which can significantly enhance the sensitivity of detection and avoid probability of missed detection， indicating remarkable clinical application value in early diagnosis and efficacy assessment of SLE.

[Key words] Antinuclear antibodies； Anti-ds-DNA； Anti-sm； Anti-nucleosome antibody； Systemic lupus erythematosus

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）是風(fēng)濕免疫科較為常見的一種疾病，也叫全身性紅斑狼瘡或紅斑性狼瘡，是一種慢性自身免疫性炎癥結(jié)締組織疾病，以多系統(tǒng)器官病變累及多臟器，且血清中常伴有多種自身抗體，由于抗體作用靶抗原的不同，患者血清中出現(xiàn)自身抗體如抗核抗體（ANA）、抗雙鏈DNA抗體（抗-ds-DNA）、抗-sm、抗核小體抗體（AnuA）等，在SLE患者血清中可單獨(dú)、或多個(gè)同時(shí)出現(xiàn)。這些抗體對(duì)SLE的診斷有很好的特異性，但敏感性各不相同，若單一檢測(cè)會(huì)對(duì)SLE有漏檢。有文獻(xiàn)[1，2]報(bào)道用幾種特異性抗體聯(lián)合檢測(cè)可提高SLE患者自身抗體的陽性率，但選擇的抗體各有不同。本研究分析了67例SLE患者抗核抗體（ANA）、抗雙鏈DNA抗體（抗-ds-DNA）、抗-sm、抗核小體抗體的檢測(cè)結(jié)果，旨在探討聯(lián)合檢測(cè)對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡SLE的診斷價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2011年2月～2013年12月我院住院和門診患者及健康體檢者。SLE組包括67例系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）患者，男12例，女55例，年齡19～76歲，平均（50.5±15.8）歲。SLE診斷均符合2009 SLICC修改的ACR系統(tǒng)性紅斑狼瘡分類標(biāo)準(zhǔn)[3]。非SLE組：確診的52例自身免疫性疾病，包括9例干燥綜合征、6例多發(fā)性硬化癥、15例類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、2例強(qiáng)直性脊柱炎、5例系統(tǒng)性血管炎、12例混合性結(jié)締組織病和3例皮肌炎，年齡17～75歲，平均（50.9±14.9）歲。診斷均符合各自相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]。正常健康對(duì)照組50例，男12例，女38例；年齡19～78歲，平均（51.3±15.4）歲。

1.2 試劑

抗核抗體（間接免疫熒光）、抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小體（免疫印跡法）檢測(cè)試劑，均由歐盟（杭州）醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室有限公司提供。

1.3 儀器

Lak-601型熒光顯微鏡，EUROBLotMasterII全自動(dòng)免疫分析儀，Canosan掃描儀。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 標(biāo)本采集 清晨空腹采集靜脈血3 mL，靜置30 min后，3000 r/min速率離心10 min分離血清，對(duì)血清標(biāo)本分別標(biāo)號(hào)，保存于-20℃待檢。

1.4.2 測(cè)試 對(duì)血清標(biāo)號(hào)，抗核抗體采用間接免疫熒光法檢測(cè)（抗核抗體ANA熒光強(qiáng)度≥1∶100為陽性，熒光強(qiáng)度≤1∶100為陰性）。抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小體采用免疫印跡法檢測(cè)，操作采用歐盟提供的EUROBLotMasterII全自動(dòng)免疫分析儀，為避免人眼判讀誤差，采用Canosan掃描儀判讀結(jié)果，以顯色大于一個(gè)+為陽性。

1.4.3 敏感性及特異性 敏感性=真陽性/病例組=真陽性/（真陽性+假陰性）=SLE組試驗(yàn)陽性/（SLE試驗(yàn)陽性+試驗(yàn)陰性）；特異性=真陰性/健康對(duì)照組=真陰性/（真陰性+假陽性）=（非SLE組+健康對(duì)照組）試驗(yàn)陰性/（試驗(yàn)陰性+試驗(yàn)假陽性）。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，根據(jù)計(jì)算所得χ2值查χ2界值表，各組敏感率χ2檢驗(yàn)中P<0.01，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而各組特異性χ2檢驗(yàn)中P>0.05則差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 抗核抗體、抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小體對(duì)疾病的檢測(cè)意義

67例SLE患者抗核抗體、抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小體抗體的敏感性分別為83.5%、43.2%、52.2%、47.7%，按照行列表χ2檢驗(yàn)，將SLE患者組與非SLE組和健康對(duì)照組做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，χ2=10.60，P<0.01，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，特異性分別為90.2%、98.0%、97.1%、98.0%，按照行列表χ2檢驗(yàn)，將SLE患者組與非SLE組和健康對(duì)照組的特異性做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，χ2=2.77，P>0.05。見表1。

2.2 抗核抗體聯(lián)合抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小體檢測(cè)敏感性比較

抗核抗體檢測(cè)SLE的敏感性為83.5%，聯(lián)合抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小體檢測(cè)，特異性無明顯改變，敏感性明顯高于單一檢測(cè)，達(dá)94%，按照行列表χ2檢驗(yàn)，將單獨(dú)檢測(cè)抗核抗體與各聯(lián)合檢測(cè)的敏感性做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，χ2=13.10，P<0.01，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，后者的敏感性更高，見表2。

3 討論

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus （SLE）是風(fēng)濕免疫科較為常見的一種疾病，也稱全身性紅斑狼瘡或紅斑性狼瘡；發(fā)病原因至今尚未明確，為臨床上有較高發(fā)病率的風(fēng)濕免疫科疾病，是一種慢性自身免疫性炎癥結(jié)締組織疾病，以多系統(tǒng)器官病變累及多臟器，并且血清中常伴有多種自身抗體出現(xiàn)的自身免疫性炎癥性疾病，該病患者多為年輕女性，年齡在20～40歲之間，老年人群及兒童也可發(fā)病?；颊叨喟橛衅ふ?、紅斑、關(guān)節(jié)痛、關(guān)節(jié)炎等癥狀，不僅會(huì)給患者的健康造成影響，而且會(huì)對(duì)患者的心理健康造成一定程度上影響。由于臨床癥狀多不典型，多通過實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)自身抗體來幫助診斷。目前診斷系統(tǒng)性紅斑狼瘡實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)主要有抗核抗體、抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小體等。

抗核抗體靶抗原分布于整個(gè)細(xì)胞，包括細(xì)胞核、細(xì)胞骨架、細(xì)胞漿、細(xì)胞分裂期，是指細(xì)胞內(nèi)所有的抗原成分抗體的總稱。抗核抗體檢測(cè)在診斷SLE有較高的敏感性（90.2%）。在干燥綜合征、多發(fā)性硬化癥、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、混合性結(jié)締組織病等多種自身免疫病中均可出現(xiàn)陽性反應(yīng)，少數(shù)正常人也有弱陽性反應(yīng)。表1顯示特異性較差，本研究中混合性結(jié)締組織病4例、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎3例、干燥綜合征2例、健康對(duì)照組1例、均有陽性反應(yīng)，不能作為單獨(dú)診斷SLE的標(biāo)準(zhǔn)，抗核抗體只能作為自身免疫性疾病的過篩實(shí)驗(yàn)[5，6]?？购诵◇w抗體（anti-nucleosome antibody，AnuA），是真核細(xì)胞的亞單位，在SLE中輔助T淋巴細(xì)胞識(shí)別自身抗原，產(chǎn)生特異性自身抗體，是多種自身抗體產(chǎn)生的根源。有報(bào)道，AnuA和抗-ds-DNA與SLE的疾病活動(dòng)性相關(guān)，特別是與狼瘡腎損傷有密切相關(guān)，可以作為病情觀察的指標(biāo)[7]，本研究AnuA抗體在67例SLE中敏感性為47.7%，特異性為98.0%，與文獻(xiàn)[7，8]報(bào)道結(jié)果基本一致。

抗-sm抗體對(duì)SLE有輔助診斷意義，但與疾病的活動(dòng)無關(guān)，有報(bào)道抗-sm抗體是SLE的標(biāo)志性抗體之一[9]。對(duì)SLE較高的特異性，活動(dòng)期或非活動(dòng)期抗-sm均可呈現(xiàn)陽性反應(yīng)，有報(bào)道抗-sm抗體陽性是發(fā)生狼瘡性腎炎的特異性指標(biāo)之一[10]。本研究抗-sm陽性率為52.2%，但在健康組沒有一例陽性反應(yīng)特異性為100%，與疾病對(duì)照組特異性97.1%，是診斷SLE的理想指標(biāo)。

抗-ds-DNA對(duì)靶抗原的識(shí)別位點(diǎn)是雙螺旋脫氧核糖核酸骨架上，對(duì)SLE具有高度的特異性[11]，并與臨床表現(xiàn)密切相關(guān)。是目前公認(rèn)診斷SLE的標(biāo)志性抗體之一[12]。且有報(bào)道：抗-ds-DNA抗體滴度與SLE的活動(dòng)性呈正相關(guān)[13]，定期監(jiān)測(cè)抗-ds-DNA抗體，有助于觀察SLE患者腎損傷的程度，可作為狼瘡腎病情的觀察指標(biāo)[14]。

抗核抗體、抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小體檢測(cè)在自身免疫性疾病中有重要的價(jià)值，本文試驗(yàn)顯示抗核抗體（ANA）可見于多種自身免疫病，在SLE患者血清中，ANA在SLE中的敏感性為83.5%，抗-ds-DNA中的敏感性為43.2%，抗-sm抗體在SLE中的敏感性為52.2%、抗核小體在SLE中的敏感性為47.7%。在SLE診斷中敏感性ANA≥抗-sm≥抗核小體≥抗-ds-DNA抗體，特異性抗-ds-DNA≥抗核小體抗體≥抗-sm≥ANA。有時(shí)ANA陰性而抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小體則會(huì)有陽性出現(xiàn)，而與抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小體聯(lián)合檢測(cè)，單獨(dú)檢測(cè)則會(huì)出現(xiàn)漏檢和誤檢，同時(shí)還可對(duì)SLE患者進(jìn)行有效的病情監(jiān)測(cè)，以減少并發(fā)癥[15]。若ANA、抗-ds-DNA及抗-sm、抗核小體抗體聯(lián)合檢測(cè)，敏感性可達(dá)94.0%。聯(lián)合檢測(cè)特異性比較，無明顯差異（P>0.05），而單一抗體檢測(cè)敏感性比較，有顯著差異（P<0.01）。

綜上所述，SLE患者血清中可同時(shí)出現(xiàn)多種自身抗體，在患者血清中可單獨(dú)或同時(shí)出現(xiàn)，若只檢測(cè)一種則會(huì)出現(xiàn)漏診或誤診，若聯(lián)合檢測(cè)ANA、抗-ds-DNA及抗-sm、抗核小體抗體，可明顯提高SLE診斷的敏感性，降低漏檢率，且上述檢測(cè)方法聯(lián)合檢測(cè)可發(fā)揮良好的互補(bǔ)作用，對(duì)提高SLE的早期診斷、療效監(jiān)測(cè)有良好的應(yīng)用價(jià)值。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 張忠源，葉桂去，胡望平，等. 四種抗體在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中應(yīng)用探討[J]. 國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33（11）：1394-1395.

[2] 蘇茵，賈汝琳，栗占國，等. 自身抗體聯(lián)合測(cè)定在系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷中的意義[J]. 中華風(fēng)濕病學(xué)雜志，2005，9（1）：16-19.

[3] 石連杰，李春，朱佳鑫，等. 系統(tǒng)性紅斑狼瘡最新分類標(biāo)準(zhǔn)分類標(biāo)準(zhǔn)誕生[J]. 中華風(fēng)濕病學(xué)雜志，2012，16（16）：713-714.

[4] 葉任高，陸再英，謝毅，等. 內(nèi)科學(xué)[M]. 第6版. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2004：877-944.

[5] 諶曉燕，陳艷，張銀輝，等. ANA、抗dsDNA抗體和抗ENA抗體譜對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡的診斷價(jià)值[J]. 國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2014，35（9）：1131-1133.

[6] 孟博，張志斌. 抗核抗體在自身免疫性疾病的檢測(cè)及應(yīng)用[J]. 放射免疫學(xué)雜志，2006，19（1）：78-79.

[7] 劉艷慧，王愛雪，孟新艷，等. 抗核抗體、抗雙鏈DNA抗體和抗超敏雙鏈DNA抗體與系統(tǒng)性紅斑狼瘡的相關(guān)性研究[J]. 臨床內(nèi)科雜志，2013，30（7）：453-455.

[8] 張璇，李薇，張衛(wèi)云，等. 抗核小體抗體測(cè)定在系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷中的應(yīng)用價(jià)值[J]. 現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010， 25（2）：118-120.

[9] 楊衛(wèi)平，付敏. ENA多肽抗體檢測(cè)及臨床意義[J]. 中原醫(yī)刊，2005，12：23-32.

[10] Llic T，Curec S. Antii RNP antibodies and lupus nephritis[J].Med PregL，2000，53：589-594.

[11] 周厚清，梁靜文，董敏，等. ANA譜和ds-DNA檢測(cè)在系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷中的臨床意義[J]. 中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2013，（5）：1228-1230.

[12] 楊國亮，王俠生. 現(xiàn)代皮膚病學(xué)[M]. 上海：上海醫(yī)科大學(xué)出版社，1996：540-550.

[13] 楊軍鋒，杜娟麗，王漢民，等. ANA、抗SSA、抗SSB、抗ds-DNA、抗Sm與狼瘡性腎炎病理的關(guān)系探討[J]. 延安大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)科學(xué)版，2011，9（3）：6-7.

[14] Benucci M，Gobbi FL. Del Rosso A，et al. Disease activity and antinucleosome antibodise in systemic lupus erythemalosus[J]. Scand J Rheumatol，2003，32：42-45.

[15] 蘇利沙，張根豪，鄧少麗，等. 常用免疫抑制劑治療對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者淋巴細(xì)胞亞群的影響[J]. 鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2014，49（2）：236-239.

（收稿日期：2015-12-17）