劉莉瑩 康潔 吳長輝 李曄 陳若蕓

[摘要]研究茶病靈芝Ganoderma theaecolum的三萜類成分。茶病靈芝乙醇提取物經(jīng)硅膠、ODS和PreHPLC等色譜技術(shù)分離純化，通過波譜學(xué)方法鑒定化合物的結(jié)構(gòu)。從茶病靈芝中分離得到15個(gè)三萜類化合物，分別為赤芝酮C（1），赤芝酮D（2），7羰基靈芝酸Z2（3），7羰基靈芝酸Z（4），靈芝烯酸H（5），靈芝烯酸B（6），3β，7β二羥基11，15，23三羰基羊毛甾8，16二烯26酸（7），3β，7β二羥基11，15，23三羰基羊毛甾8，16二烯26酸甲酯（8），ganolucidic acid B（9），ganolucidate F（10），靈芝酸C2甲酯（11），靈芝酸ζ（12），靈芝酸AP3（13），靈芝酸B甲酯（14），靈芝醇B（15）?；衔?～15均為首次從該真菌中分離得到。

[關(guān)鍵詞]靈芝屬；茶病靈芝；三萜類

我國靈芝屬真菌有98種，《中國藥典》2015年版記載靈芝基原種為赤芝Ganoderma lucidum （Leyssex Fr.）Karst.或紫芝Granoderma sinense Zhao Xu et Zhang的干燥子實(shí)體。茶病靈芝G theaecolum為靈芝科靈芝屬真菌，主要產(chǎn)于海南，民間作為靈芝使用，經(jīng)查閱文獻(xiàn)，除本課題組2014年發(fā)表了一篇有關(guān)茶病靈芝化學(xué)成分的文章外，茶病靈芝的化學(xué)成分和藥理作用均未有過報(bào)道?，F(xiàn)代科學(xué)研究證明，靈芝屬主要化學(xué)成分為多糖類、三萜及甾體類、生物堿類、腺苷類、蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸類化合物，具有抗腫瘤、保肝護(hù)肝、抗氧化、抗衰老作用；心臟保護(hù)作用；改善記憶作用；抗病毒、抑制細(xì)菌作用等。靈芝三萜類化合物有抑制組胺釋放[12]、抗HIV1病毒及抗HIV1蛋白酶活性[34]、抑制腫瘤細(xì)胞生長[5]等作用。

本實(shí)驗(yàn)前期對茶病靈芝乙醇提取物進(jìn)行了生物活性篩選，其中正丁醇部位具有較強(qiáng)的蛋白酪氨酸激酶抑制活性，在100 mg·L-1時(shí)，抑制率達(dá)到88%，對乙醇提取物進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究，得到了5個(gè)新的三萜類化合物，5個(gè)已知化合物，藥理活性篩選結(jié)果顯示其中6個(gè)化合物對DL半乳糖胺誘導(dǎo)的HL7702肝細(xì)胞損傷具有一定的保護(hù)作用[6]。本文繼續(xù)報(bào)道從茶病靈芝乙醇提取物上大孔樹脂的50%乙醇洗脫部位和70%乙醇洗脫部位分離得到的15個(gè)三萜類化合物，分別鑒定為赤芝酮C（1），赤芝酮D（2），7羰基靈芝酸Z2（3），7羰基靈芝酸Z（4），靈芝烯酸H（5），靈芝烯酸B（6），3β，7β二羥基11，15，23三羰基羊毛甾8，16二烯26酸（7），3β，7β二羥基11，15，23三羰基羊毛甾8，16二烯26酸甲酯（8），ganolucidic acid B（9），ganolucidate F（10），靈芝酸C2甲酯（11），靈芝酸ζ（12），靈芝酸AP3（13），靈芝酸B甲酯（14），靈芝醇B（15）。化合物1～15均為首次從該真菌中分離得到。

1材料

VNS600，Bruker400，BrukerAV500核磁共振儀測定NMR譜；Agilent 1100 系列 LC/MSD TrapSL型液質(zhì)聯(lián)用儀測定ESIMS；Agilent高效液相色譜儀，YMC C18（20 mm×250 mm，5 μm）色譜柱；LC 3000型中壓色譜儀；反相柱色譜硅膠RP18（50 μm）為YMC公司生產(chǎn)；薄層色譜硅膠GF254及柱色譜硅膠（200～300目）為青島海洋化工廠生產(chǎn)；葡聚糖凝膠 SephadexLH 20 為GE Pharmacia 公司生產(chǎn)；所用試劑均為分析純或色譜純。

茶病靈芝于2012年7月采于海南五指山市，由中國科學(xué)院微生物研究所張小青研究員鑒定為茶病靈芝G theaecolum，憑證標(biāo)本（NoS2421 ）保存于中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所標(biāo)本室。

2提取與分離

20 kg茶病靈芝子實(shí)體粉碎后，用95%乙醇加熱回流提取，減壓濃縮至干，得到浸膏1 kg。浸膏經(jīng)D101大孔樹脂，乙醇水梯度洗脫后得到50%乙醇部分360 g，70%乙醇部分110 g。50%乙醇部分通過硅膠柱色譜分離，采用氯仿甲醇梯度（100∶1～1∶1）洗脫，得到FrsA～J共10個(gè)部分。其中FrB部分（10 g）經(jīng)硅膠柱色譜，用石油醚丙酮梯度（9∶1～1∶1）洗脫，F(xiàn)rs1～25共25個(gè)流分。FrB8經(jīng)硅膠柱色譜，用石油醚丙酮等度（4∶1）洗脫，得到化合物2（45 mg）。FrB9經(jīng)硅膠柱色譜，用石油醚丙酮等度（7∶3）洗脫，得到化合物7（25 mg），F(xiàn)rB25經(jīng)硅膠柱色譜，用石油醚丙酮等度（6∶4）洗脫，得到化合物8（10 mg）。FrC部分（35 g）經(jīng)硅膠柱色譜，用石油醚丙酮梯度（9∶1～1∶1）洗脫，F(xiàn)rs1～36共36個(gè)流分。FrC5經(jīng)硅膠柱色譜，用石油醚丙酮等度（9∶1）洗脫，得到化合物1（4 mg），5（56 mg），F(xiàn)rC9經(jīng)硅膠柱色譜，用石油醚丙酮等度（4∶1）洗脫，得到化合物11（3 mg），9（2 mg），10（5 mg），F(xiàn)rC21經(jīng)硅膠柱色譜，用石油醚丙酮等度（6∶4）洗脫，得到化合物6（2 mg），13（15 mg）。FrD部分（84 g）經(jīng)硅膠柱色譜，用氯仿甲醇梯度（30∶1～1∶1）洗脫，F(xiàn)rs1～55共55個(gè)流分。FrD11經(jīng)硅膠柱色譜，用石油醚丙酮等度（2∶1）洗脫，得到化合物14 （1 mg），F(xiàn)rD32經(jīng)硅膠柱色譜，用氯仿甲醇等度（9∶1）洗脫，得到化合物12（2 mg）。70%乙醇部分通過硅膠柱色譜分離，用氯仿甲醇梯度（20∶1～1∶1）洗脫，得到FrsA～G共10個(gè)部分。其中FrA部分（21 g）經(jīng)硅膠柱色譜，用氯仿甲醇梯度（10∶1～1∶1）洗脫，F(xiàn)rs1～10共10個(gè)流分。FrA2經(jīng)硅膠柱色譜，用氯仿甲醇等度（10∶1）洗脫，得到化合物3（135 mg），F(xiàn)rA8經(jīng)硅膠柱色譜，用氯仿甲醇等度（7∶3）洗脫，得到化合物4（210 mg），F(xiàn)rE部分（15 g）經(jīng)硅膠柱色譜，用氯仿甲醇梯度（7∶3～1∶1）洗脫，F(xiàn)rs1～8共8個(gè)流分。FrE7經(jīng)硅膠柱色譜，用氯仿甲醇等度（6∶4）洗脫，得到化合物15（5 mg）。

3結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1白色無定型粉末。ESIMS m/z 4052 [M+H] +。1HNMR（pyridined5，600 MHz）δ：105（3H，s，H18），109（3H，s，H19），127（3H，s，H29），149（3H，s，H30），157（3H，s，H28），208（3H，s，H21），350（1H，dd，J=48，66 Hz，H3），496（1H，m，H7），532（1H，dd，J=12，78 Hz，H15）； 13CNMR（pyridined5，150 MHz）見表1。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]報(bào)道的3β，7β，15αtrihydroxy4，4，14αtrimethyl11，20dioxo5αpregn8ene一致，故鑒定化合物1為赤芝酮C（lucidone C）。

化合物2黃綠色無定型粉末。ESIMS m/z 4012 [M+H] +。1HNMR（CDCl3，500 MHz） δ：073（3H，s，H18），088（3H，s，H19），102（3H，s，H29），126（3H，s，H30），158（3H，s，H28），219（3H，s，H21），305（1H，d，J=160 Hz，H12α），277（1H，d，J=160 Hz，H12β），334（1H，t，J=175，175 Hz，H17），325（1H，dd，J=50，200 Hz，H3）； 13CNMR（CDCl3，125 MHz）見表1。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]報(bào)道的3βhydroxy4，4，14αtrimethyl7，11，15，20tetraoxo5αpregn8ene致，故鑒定化合物2為赤芝酮D（lucidone D）。

化合物3白色粉末（甲醇）。ESIMS m/z 5292[M-H]-。1HNMR（CDCl3，400 MHz） δ：080（3H，s，H18），087（3H，s，H29），092（3H，d，J=64 Hz，H21），100（3H，s，H28），116（3H，s，H30），129（3H，s，H19），182（3H，s，H27），327（1H，dd，J=52，112 Hz，H3 ）；13CNMR（CDCl3，100 MHz）見表1。通過波譜數(shù)據(jù)分析并與文獻(xiàn)[8]數(shù)據(jù)對照，故鑒定該化合物為7oxoganoderic acid Z2。

化合物4白色粉末（甲醇）。ESIMS m/z 5292[M-H]-。1HNMR（CDCl3，400 MHz） δ：065（3H，s，H18），088（3H，s，H29），091（3H，s，H28），094（3H，d，J=56 Hz，H21），099（3H，s，H30），117（3H，s，H19），183（3H，s，H27），328（1H，dd，J=44，116 Hz，H3 ）；13CNMR（CDCl3，100 MHz）見表1。通過波譜數(shù)據(jù)分析并與文獻(xiàn)[9]數(shù)據(jù)對照，鑒定該化合物為7oxoganoderic acid Z。

化合物5白色無定型粉末。ESIMS m/z 5113[M-H]-。1HNMR（CDCl3，500 MHz）δ：328（1H，dd，J=50，105 Hz，H3），315（1H，dd，J=70 Hz，H25），214（3H，s，H21），155（3H，s，H30），125（3H，s，H19），120（3H，d，J=70 Hz，H27），104（3H，s，H28），089（3H，s，H29），071（3H，s，H18）；13CNMR（CDCl3，125 MHz）見表1。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]報(bào)道的ganoderenic acid H一致，故鑒定化合物5為靈芝烯酸H。

化合物6白色晶體。ESIMS m/z 5153 [M+H]+。1HNMR（CDC13，600 MHz）δ：106（3H，s，H18），109（3H，s，H29），125（3H，s，H30），138（3H，d，J=72 Hz，H27），141（3H，s，H19），146（3H，s，H28），226（3H，s，H21），349（1H，dd，J=59，102Hz，H3），484（1H，dd，J=87，87 Hz，H7），632（1H，s，H22）；13CNMR（CDC13，150 MHz）見表1。與文獻(xiàn)[11]報(bào)道的數(shù)據(jù)一致，故鑒定化合物6為ganoderenic acid B數(shù)據(jù)相符。

化合物7淡黃色晶體（甲醇）。ESIMS m/z 5153 [M+H]+。1HNMR（CDCl3，400 MHz） δ：084（3H，s，H29），101（3H，s，H28），110（3H，d，J=68 Hz，H21），118（3H，s，H19），120（3H，d，J=64 Hz，H27），121（3H，s，H18），152（3H，s，H30），322（1H，dd，J=56，108 Hz，H3），478（1H，dd，J=99，77 Hz，H7），573（1H，s，H16）；13CNMR（CDCl3，100 MHz）見表1。通過波譜數(shù)據(jù)分析并與文獻(xiàn)[12]數(shù)據(jù)對照，鑒定該化合物為3β，7βdihydroxy11，15，23trioxolanost8，16dien26oic acid。

化合物8白色粉末（甲醇）。ESIMS m/z 5273 [M-H]-。1HNMR（CDCl3，500 MHz）δ：084 （3H，s），102 （3H，s），110 （3H，d，J=72 Hz），119 （3H，s），118 （3H，d，J=64 Hz），121 （3H，s），150 （3H，s），320 （1H，dd，J=56，110 Hz ），364（3H，s），478 （1H，dd，J=96，80 Hz），573 （1H，s）。13CNMR（CDCl3，125 MHz）數(shù)據(jù)見表1。在1HNMR出現(xiàn)了酯甲基信號δ 364（3H，s）；13CNMR也出現(xiàn)δ 520的氧甲基信號。通過波譜數(shù)據(jù)分析并與文獻(xiàn)[12]數(shù)據(jù)對照，鑒定該化合物為3β，7βdihydroxy11，15，23trioxolanost8，16dien26oic acid methyl ester。

化合物9白色粉末（甲醇）。ESIMS m/z 5013[M-H]-。1HNMR（pyridined5，600 MHz） δ：095（3H，d，J=60 Hz，H21），097（3H，s，H29），109（3H，s，H18），134（3H，d，J=72 Hz，H27），136（3H，s，H30），147（3H，s，H19），184（3H，s，H28），351（1H，dd，J=48，66 Hz，H3），464（1H，dd，J=60，36 Hz，H15）；13CNMR（pyridined5，150 MHz） δ：2083（C23），1973（C11），1761（C26），1636（C8），1388（C9），769（C3），710（C15），531（C14），517（C12），513（C5），489（C22），481（C17），464（C13），460（C24），387（C4），382（C16），373（C10），348（C25），342（C1），320（C20），298（C7），279（C2），279（C30），187（C21），185（C28），184（C19），169（C6），167（C27），161（C18），157（C29）。通過波譜數(shù)據(jù)分析并與文獻(xiàn)[13]數(shù)據(jù)對照，鑒定該化合物為ganolucidic acid B。

化合物10白色粉末（甲醇）。ESIMS m/z 5013[M-H]-。1HNMR（pyridined5，500 MHz）δ：093（3H，s，H18），109（3H，s，H29），110（3H，d，J=62 Hz，H21），124（3H，s，H28），136（3H，s，H19），147（3H，s，H30），215（3H，s，H27），351（1H，m，H3），460（1H，dd，J=92，59 Hz，H15），499（1H，dt，J=81，60 Hz，H23）；13CNMR（pyridined5，125 MHz） δ：1983（C11），1706（C26），1645（C8），1452（C24），1396（C9），1285（C25），777（C3），719（C15），667（C23），539（C14），527（C12），522（C5），497（C17），472（C13），442（C22），395（C4），394（C16），381（C10），351（C1），342（C20），307（C6），288（C2），287（C28），197（C21），195（C30），192（C19），177（C7），168（C18），165（C29），133（C27）。通過波譜數(shù)據(jù)分析并與文獻(xiàn)[14]數(shù)據(jù)對照，鑒定該化合物為3β，15α，23trihydroxy11oxo5αlanosta8，24dien26oic acid（ganolucidate F）。

化合物11白色晶體（甲醇）。ESIMS m/z 5333 [M+H]+。1HNMR（CDCl3，400 MHz） δ：088（3H，s，H18），102（3H，s，H30），085（3H，d，J=60 Hz，H21），118（3H，d，J=70 Hz，H27），102（3H，s，H28），085（3H，s，H29），127（3H，s，H19），332（1H，m，H3），455（1H，dd，J=102，72 Hz，H7），469（1H，m，H15），239（1H，m，H22α），224（1H，m，H22β）；13CNMR（CDCl3，100 MHz）δ：2098（C23），1995（C11），1740（C26），1575（C8），1421（C9），782（C3），725（C15），696（C7），539（C14），524（C12），519（C31），491（C5），481（C17），471（C13），454（C24），420（C22），386（C4），386（C10），364（C16），346（C1），346（C25），323（C20），284（C6），282（C28），278（C2），198（C19），195（C21），194（C30），171（C27），157（C18），97（C29）。在1HNMR出現(xiàn)了酯甲基信號δ 376（3H，s）；13CNMR也出現(xiàn)δ 519的氧甲基信號。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]報(bào)道的methyl ganoderate C2一致，故鑒定化合物11為靈芝酸C2甲酯。

化合物12白色晶體。ESIMS m/z 5153[M+H]+。1HNMR（pyridined5，600 MHz）δ：091（3H，s，H18），104（3H，s，H29），113（3H，s，H28），115（3H，d，J=54 Hz，H21），136（3H，s，H19），174（3H，s，H30），215（3H，s，H27），343（1H，dd，J=48，66 Hz，H3），484（1H，dd，J=87，87 Hz，H23），737（1H，d，J=84 Hz，H24）；13CNMR（pyridined5，150 MHz） δ：2081（C15），2004（C11），1999（C7），1708（C26），1518（C9），1472（C8），1428（C24），1288（C25），768（C3），667（C23），577（C14），517（C5），499（C12），461（C16），447（C13），438（C17），410（C10），410（C22），398（C4），370（C6），342（C1），340（C20），284（C28），282（C2），215（C30），201（C21），181（C19），163（C18），162（C29），135（C27）。與文獻(xiàn)[16]報(bào)道的ganoderic acidζ數(shù)據(jù)相符。

化合物13白色粉末（甲醇）。ESIMS m/z 5292[M-H]-。1HNMR（pyridined5，600 MHz） δ：101（3H，s，H18），112（3H，s，H29），131（3H，d，J=72 Hz，H27），135（3H，s，H28），139（3H，s，H30），178（3H，s，H19），184（3H，s，H21），435（1H，dd，J=96，66 Hz，H15 ）；13CNMR（pyridined5，150 MHz） δ：2154（C3），2112（C23），2046（C7），2012（C11），1778（C26），1523（C9），1504（C8），733（C20），720（C15），528（C14），525（C22），521（C12），509（C17），490（C5），478（C13），477（C24），464（C4），391（C10），368（C6），350（C1），345（C25），339（C2），302（C16），272（C28），266（C21），206（C30），202（C29），189（C18），175（C19），170（C27）。通過波譜數(shù)據(jù)分析并與文獻(xiàn)[17]數(shù)據(jù)對照，鑒定該化合物為ganoderic acid AP3。

化合物14白色針晶。EIMS m/z 530 [M]+·，512 [M-H2O]+。1HNMR（CDCl3，600 MHz）δ：086（3H，s，H18），102（3H，d，J=60 Hz，H21），109（3H，d，J=72 Hz，H27），122（3H，s，H29），125（3H，s，H19），135（3H，s，H21），217（3H，s，H28），321（1H，dd，J= 48，66 Hz，H3），481（1H，dd，J=60，84 Hz，H7）； 13CNMR（CDCl3，150 MHz） δ：2172（C23），2094（C15），1977（C11），1743（C27），1568（C8），1427（C9），783（C3），668（C7），585（C14），519（C31），503（C12），491（C22），490（C17），467（C24），456（C5），450（C10），409（C16），388（C13），386（C4），348（C1），347（C25），315（C20），281（C2），277（C6），266（C26），244（C29），198（C21），184（C28），174（C19），170（C18），154（C30）。在1HNMR圖譜中出現(xiàn)了酯甲基信號δ 376（3H，s）；13CNMR也出現(xiàn)δ 519的氧甲基信號，與文獻(xiàn)報(bào)[18]道的methyl ganoderate B數(shù)據(jù)相符，故鑒定化合物14為靈芝酸B甲酯。

化合物15白色粉末（甲醇）。ESIMS m/z 5292[M-H]-。1HNMR（CDCl3，400 MHz）δ：057（3H，s，H18），088（6H，s，H28和H30），092（3H，d，J=64 Hz，H21），098（3H，s，H29），101（3H，s，H19），167（3H，s，H27），324（1H，dd，J=44，108 Hz ，H3），399（2H，s，H26），532（1H，d，J=60 Hz，H7），540（1H，d，J=64 Hz，H24），547（1H，d，J=60 Hz，H11）。13CNMR（CDCl3，150 MHz）δ：1459（C9），1427（C8），1343（C25），1270（C24），1202（C7），1163（C11），789（C3），691（C26），509（C17），503（C5），491（C14），438（C13），387（C4），378（C12），374（C10），361（C20），359（C22），357（C1），315（C16），281（C2），279（C15），278（C29），256（C28），245（C23），230（C6），227（C19），184（C21），158（C30），157（C18），136（C27）。通過波譜數(shù)據(jù)分析并與文獻(xiàn)[19]數(shù)據(jù)對照，鑒定該化合物為靈芝醇B。

4蛋白酪氨酸激酶抑制活性

將化合物和PTK粗提物加入酶標(biāo)板，37 ℃孵育；加入激酶緩沖液稀釋的ATP，37 ℃孵育；移除板中反應(yīng)液，洗滌；加入抗體復(fù)合物，37 ℃孵育；移除板中抗體復(fù)合物，洗滌；加入TMB顯色液室溫避光反應(yīng)；加入終止液，于450 nm測A。抑制率=（A正常-A樣品）/（A正常-A空白）×100%[20]。

測試結(jié)果顯示茶病靈芝乙醇提取物50%乙醇部位具有一定的蛋白酪氨酸激酶抑制活性，IC50為787 μmol·L-1，化合物1～15對蛋白酪氨酸激酶均沒有抑制作用（IC50>10 μmol·L-1）。

5結(jié)果與討論

本研究從茶病靈芝乙醇提取物上大孔樹脂的50%乙醇部位和70%乙醇部位分離得到15個(gè)三萜類化合物，均未表現(xiàn)出蛋白酪氨酸激酶抑制活性，化學(xué)研究需繼續(xù)進(jìn)行。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，在HepG2細(xì)胞中，靈芝醇B能夠明顯降低H2O2誘導(dǎo)的ALT和AST水平，能夠活化PXR誘導(dǎo)的CYP3A4酶的表達(dá)，具有保肝的作用[8]。ganolucidic acid B具有誘導(dǎo)hPXR介導(dǎo)的CYP3A4酶的表達(dá)的能力[14]。7羰基靈芝酸Z對HMGCoA還原酶和酰基輔酶A?；D(zhuǎn)移酶有抑制作用[18]。本文分離得到的化合物包括了ganolucidic acid B（9），7羰基靈芝酸Z（14），靈芝醇B（15） 這些活性成分。

[參考文獻(xiàn)]

[1]陳若蕓，于德泉. 靈芝三萜化學(xué)成分研究進(jìn)展[J]. 藥學(xué)學(xué)報(bào)，1990，25（12）：940.

[2]Kohda H， Wada T， Samoto K， et al. The biologically active consitiuents of Ganoderma lucidum（Fr） Karst histamine releaseinhibitory trierpenes[J]. Chem Pharm Bull， 1985， 33（4）：1367.

[3]Min B， Nakamura N， Miyashiro H， et al. Triterpenes from the spores of Ganoderma lucidum and their inhibitory activity against HIV1 protease [J]. Chem Pharm Bull， 1998， 46（10）：1607.

[4]Sone Y， Okuda R， Wada N， et al. Structures and antitumor activities of the polysaccharides isolated from fruiting body and the growing culture of mycelium of Ganoderma lucidum [J]. Agric Biol Chem， 1985， 49（9）：2641.

[5]Chairu L， Tokuyama T， Aayashi Y， et al. Applanoxidic acids A， B， C and D， biologically active tetracyclic triterpenes from Ganoderma applanatum [J]. Phytochemistry， 1991， 30（12）：4105.

[6]Liu LY， Chen H， Liu C， et al. Triterpenoids of Ganoderma theaecolum and their hepatoprotective activities[J]. Fitoterapia， 2014， 98：254.

[7]Nishitoba T， Sato H， Sakamura S. New terpenoids， ganolucidic acid D， ganoderic acid L， lucidone C and lucidenic acid G， from the fungus Ganoderma lucidum [J]. Agric Biol Chem， 1986， 50（3）：809.

[8]Peng X R， Liu J Q， Han Z H， et al. Protective effects of triterpenoids from Ganoderma resinaceum on H2O2induced toxicity in HepG2 cells [J]. Food Chem， 2013， 141（2）：920.

[9]Li C J， Li Y M， Sun H H. New ganoderic acids， bioactive triterpenoid metabolites from the mushroom Ganoderma lucidum [J]. Nat Prod Res， 2006， 20（11）：985.

[10]Nishitoba T， Goto S， Sato H， et al. Bitter triterpenoids from the fungus Ganoderma applanatum[J]. Phytochemistry， 1989， 28（1）：193.

[11]Komoda Y， Nakamura H， Ishihara S， et al. Structures of new terpenoid constituents of Ganoderma lucidum（Fr. ） KARST（Polyporaceae）[J]. Chem Pharm Bull， 1985， 33（11）：4829.

[12]Guan S H， Yang M， Wang X M， et al. Structure elucidation and complete NMR spectral assignments of three new lanostanoid triterpenes with unprecedented Δ16，17 double bond from Ganoderma lucidum [J]. Magn Reson Chem， 2007， 45：789.

[13]Kikuchi T， Matsuda S， Murai Y， et al. Ganoderic acid G and I and ganolucidic acid A and B， new triterpenoids from Ganoderma lucidum [J]. Chem Pharm Bull， 1985， 33（6）：2628.

[14]Liu J Q， Wang C F， Li Y， et al. Isolation and bioactivity evaluation of terpenoids from the medicinal fungus Ganoderma sinense [J]. Planta Med， 2012， 78：368.

[15]Kikuchi T， Kanomi S， Kadota S， et al. Constituents of the fungus Ganoderma lucidum（Fr.） Karst. I. Structures of ganoderic acids C2， E， I， and K， lucidenic acid F and related compounds[J]. Chem Pharm Bull， 1986， 34（9）：3695.

[16]Min B S， Gao J J， Nakamura N， et al. Triterpenes from the spores of Ganoderma lucidum and their cytotoxicity against MethA and LLC tumor cells[J]. Chem Pharm Bull， 2000， 48（7）：1026.

[17]Wang F， Liu J K. Highly oxygenated lanostane triterpenoids from the fungus Ganoderma applanatum[J]. Chem Pharm Bull， 2008， 56（7）：1035.

[18]Kubota T， Asaka Y， Miura I， et al. Structures of ganoderic acid A and B， two new lanostane type bitter triterpenes from Ganoderma lucidum（FR. ） KARST. [J]. Helv Chim Acta， 1982， 65：611.

[19]Arisawa M， Fujita A， Saga M， et al. Three new lanostanoids from Ganoderma lucidum[J]. J Nat Prod， 1986， 49（4）：621.

[20]郭晶，方蓮花，陳若蕓，等. 常用清熱解毒類中藥提取物的蛋白酪氨酸激酶抑制活性篩選 [J]. 中國新藥雜志，2011，20（12）：1070.

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