楊一平 陳偉國(guó) 錢(qián)秋杰 戴建忠

(海寧市蠶桑技術(shù)服務(wù)站，浙江嘉興 314400)

甲氧蟲(chóng)酰肼和阿維菌素及其混合制劑對(duì)家蠶的安全性評(píng)價(jià)

楊一平 陳偉國(guó) 錢(qián)秋杰 戴建忠

(海寧市蠶桑技術(shù)服務(wù)站，浙江嘉興 314400)

為了研究類(lèi)昆蟲(chóng)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑甲氧蟲(chóng)酰肼對(duì)家蠶的毒性，測(cè)定了甲氧蟲(chóng)酰肼和阿維菌素及其混合制劑對(duì)家蠶的急性經(jīng)口食下毒性、熏蒸毒性、在桑樹(shù)上的內(nèi)吸傳導(dǎo)毒性和殘毒期。試驗(yàn)結(jié)果表明，3種農(nóng)藥對(duì)3齡起蠶的致死中濃度(LC50)分別為24%甲氧蟲(chóng)酰肼懸浮劑(SC)0.060 9 mg/L、1.8%阿維菌素水乳劑(EW)0.001 3 mg/L、10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼懸浮劑(SC)0.007 8 mg/L(根據(jù)有效含量計(jì)算為阿維菌素0.001 6 mg/L·甲氧蟲(chóng)酰肼0.006 2 mg/L)，3種藥劑對(duì)家蠶的毒性等級(jí)均為劇毒級(jí);10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼SC 1 000倍液(100 mg/L)、24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC 1 000倍液(240 mg/L)、1.8%阿維菌素EW 1 000倍液(18 mg/L)對(duì)家蠶均無(wú)熏蒸毒性;24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC 3 000倍液(80 mg/L)、1.8%阿維菌素EW 1 500倍液(12 mg/L)和10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼SC 1 000倍液(100 mg/L)在桑樹(shù)上的殘毒期均＞50 d;24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC 3 000倍液(80 mg/L)、10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼SC 1 000倍液(100 mg/L)均可通過(guò)內(nèi)吸作用并傳導(dǎo)到未噴藥的桑葉上。建議桑園附近及養(yǎng)蠶區(qū)域避免使用此類(lèi)農(nóng)藥。

甲氧蟲(chóng)酰肼;阿維菌素;家蠶;毒性;內(nèi)吸傳導(dǎo);致死中濃度;安全性

甲氧蟲(chóng)酰肼［N－叔丁基－N'－(3－甲氧基－2－甲基苯甲酰基)－3，5－二甲基苯甲酰肼，methoxyfenozide］［1］屬二芳酰肼類(lèi)昆蟲(chóng)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，對(duì)鱗翅目害蟲(chóng)具有高度選擇殺蟲(chóng)活性，以觸殺作用為主，兼有一定的內(nèi)吸傳導(dǎo)殺蟲(chóng)作用。該藥屬仿生型蛻皮激素類(lèi)殺蟲(chóng)劑，其作用機(jī)理獨(dú)特，藥劑進(jìn)入昆蟲(chóng)體內(nèi)后與蛻皮激素受體結(jié)合，誘導(dǎo)昆蟲(chóng)提早成熟進(jìn)入蛻皮過(guò)程，但又不能形成健康的新表皮，由于不能完全蛻皮，從而導(dǎo)致害蟲(chóng)脫水、饑餓，最終死亡，其藥效經(jīng)過(guò)較長(zhǎng)［1－3］。甲氧蟲(chóng)酰肼主要用于蔬菜、果樹(shù)、棉花和水稻等作物防治鱗翅目害蟲(chóng)［4－7］。240 g/L甲氧蟲(chóng)酰肼懸浮劑已列入2015年浙江省農(nóng)業(yè)廳推薦的主要農(nóng)作物(水稻)病蟲(chóng)害防治藥劑品種，用于防治二化螟、三化螟及蔬菜鱗翅目害蟲(chóng)，2016年浙江省農(nóng)業(yè)廳又將10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼懸浮劑列入二化螟防治藥劑［8］。相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道了甲氧蟲(chóng)酰肼對(duì)家蠶的急性經(jīng)口毒性為高毒至劇毒［9－11］，為進(jìn)一步明確其對(duì)養(yǎng)蠶生產(chǎn)的安全性，我們于2016年春、夏季系統(tǒng)測(cè)定了10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼、甲氧蟲(chóng)酰肼等對(duì)家蠶的毒性，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試農(nóng)藥 10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼(有效成份含2%阿維菌素和8%甲氧蟲(chóng)酰肼)懸浮劑(SC)，浙江省上虞市銀邦化工有限公司生產(chǎn)，農(nóng)藥登記證號(hào)LS20140205;24%甲氧蟲(chóng)酰肼懸浮劑(SC)，浙江省上虞市銀邦化工有限公司生產(chǎn)，農(nóng)藥登記證號(hào)PD20121858;1.8%阿維菌素水乳劑(EW)，浙江錢(qián)江生物化學(xué)股份有限公司生產(chǎn)，農(nóng)藥登記證號(hào)PD20110261;77.5%敵敵畏乳油(EC)，南通江山農(nóng)藥化工股份有限公司生產(chǎn)，農(nóng)藥登記證號(hào)PD85105－2。

1.1.2 供試家蠶品種 白玉×秋豐，浙江省海寧市新興蠶種制造有限公司生產(chǎn)。

1.1.3 供試桑園及桑樹(shù)品種 海寧市蠶桑技術(shù)服務(wù)站試驗(yàn)桑園。強(qiáng)桑1號(hào)，4年生，中干樹(shù)型養(yǎng)成，每667 m2桑園栽植600株。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 3種農(nóng)藥對(duì)3齡家蠶的急性經(jīng)口毒性測(cè)定將3種殺蟲(chóng)劑按質(zhì)量濃度稀釋成5～7個(gè)濃度梯度，10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼SC為0.013 9、0.011 6、0.009 6、0.008 0、0.006 7、0.005 6 mg/L;24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC為0.200 0、0.142 9、0.102 0、0.072 9、0.052 1、0.037 2、0.026 6 mg/L;1.8%阿維菌素EW為 0.001 8、0.001 4、0.001 2、0.000 9、0.000 7、0.000 6 mg/L。取適熟桑葉分別浸入不同濃度的藥液中1 min，取出后自然晾干，剪成4 cm×4 cm左右的方形葉片置于保鮮盒內(nèi)備用。每處理區(qū)數(shù)3齡起蠶20頭供試，每處理區(qū)給予浸漬后的方形帶毒桑葉片1片，在溫度(26.5±1.0)℃、相對(duì)濕度75%～85%的恒溫室內(nèi)飼養(yǎng)，24 h后改用新鮮無(wú)毒桑葉繼續(xù)飼養(yǎng)至4齡第1天，每天調(diào)查幼蟲(chóng)中毒死亡率，以清水處理為空白對(duì)照，每個(gè)處理重復(fù)3次。采用DPS (15.10版)統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)藥液質(zhì)量濃度對(duì)數(shù)與幼蟲(chóng)死亡率概率值進(jìn)行線(xiàn)性回歸分析［12］，求出致死中濃度(LC50)和95%置信限。

1.2.2 3種農(nóng)藥對(duì)2齡家蠶的熏蒸毒性測(cè)定 配制10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼SC 1 000倍液(阿維菌素20 mg/L·甲氧蟲(chóng)酰肼80 mg/L)、24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC 1 000倍液(甲氧蟲(chóng)酰肼240 mg/L)、1.8%阿維菌素EW 1 000倍液(阿維菌素18 mg/L)稀釋液供試，分別取配制好的各種農(nóng)藥稀釋液1 mL均勻涂于直徑10 cm的培養(yǎng)皿內(nèi)，把涂有農(nóng)藥稀釋液的直徑10 cm的培養(yǎng)皿放入容積為60 L(高60 cm、直徑36 cm)的聚乙烯塑料桶底部，在距桶底40 cm高處放入裝有30頭2齡起蠶直徑10 cm的培養(yǎng)皿(不加蓋)進(jìn)行熏蒸毒性試驗(yàn)，然后以無(wú)毒桑葉飼喂家蠶;以77.5%敵敵畏EC 10 000倍液(77.5 mg/L)為農(nóng)藥對(duì)照，以清水為空白對(duì)照，每個(gè)處理重復(fù)3次，塑料桶用雙層蓋密封后放置于(30.0±1.0)℃的恒溫室內(nèi)，熏蒸24 h后取出，然后飼喂新鮮無(wú)毒桑葉，每24 h調(diào)查中毒死亡蠶頭數(shù)并計(jì)算中毒死亡率，飼養(yǎng)至3齡第1天結(jié)束。

1.2.3 3種農(nóng)藥在桑樹(shù)上的內(nèi)吸傳導(dǎo)毒性和殘毒期測(cè)定 (1)3種農(nóng)藥不同濃度的準(zhǔn)備。配制10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼SC 1 000倍液、24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC 2 000倍液和3 000倍液、1.8%阿維菌素EW 900倍液和1 500倍液、24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC 3 000倍液+ 1.8%阿維菌素EW 900倍液。(2)桑葉噴藥處理。將上述6種藥液分別均勻噴灑于5株供試桑樹(shù)的桑葉葉面，枝條頂端最大葉位以上做好標(biāo)記，防止采摘未噴到藥液的新生桑葉，不同處理間隔2行桑樹(shù)作保護(hù)行。其中從10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼SC 1 000倍液、24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC 2 000倍液和3 000倍液3個(gè)處理的供試桑樹(shù)中各選取4株，在桑樹(shù)枝條上半部分用透明塑料袋隔離，只給桑樹(shù)枝條下半部分桑葉噴藥，待藥液略干后撕開(kāi)套在桑樹(shù)上的塑料袋頂部并做好固定，防止未噴藥處理的桑葉受污染，5 d后采取上部未噴藥的桑葉測(cè)定不同農(nóng)藥在桑樹(shù)的內(nèi)吸傳導(dǎo)毒性。(3)3種農(nóng)藥殘毒期測(cè)定試驗(yàn)。噴藥后20 d起每5 d采摘不同農(nóng)藥不同濃度噴灑的桑葉養(yǎng)蠶，每次分別采摘3個(gè)未直接噴藥處理區(qū)的桑葉、6個(gè)直接噴藥處理區(qū)的桑葉，以新鮮無(wú)毒桑葉為對(duì)照，共10個(gè)處理區(qū)，每個(gè)處理區(qū)30頭3齡起蠶，重復(fù)3次，共計(jì)30個(gè)處理區(qū)，飼養(yǎng)至4齡第1天結(jié)束，逐日調(diào)查記載各處理區(qū)中毒死亡蠶頭數(shù)，計(jì)算中毒死亡率。

1.2.4 3種農(nóng)藥家蠶中毒癥狀的觀(guān)察 在10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼SC和24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC急性毒性和殘毒期測(cè)定過(guò)程中，觀(guān)察記錄供試家蠶的中毒癥狀。

2 結(jié)果與分析

2.1 3種農(nóng)藥對(duì)3齡家蠶的急性經(jīng)口毒性

采用浸葉法測(cè)定10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼SC、24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC、1.8%阿維菌素EW對(duì)3齡起蠶的急性經(jīng)口毒性，由表1可以看出，3種供試農(nóng)藥對(duì)家蠶的毒性大小依次為1.8%阿維菌素EW(LC50值為0.001 3 mg/L)＞10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼SC［LC50值為0.007 8 mg/L(根據(jù)有效含量計(jì)算為阿維菌素0.001 6 mg/L·甲氧蟲(chóng)酰肼0.006 2 mg/L)］＞24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC(LC50值為0.060 9 mg/L)。參照2005年制定的《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》草案的農(nóng)藥毒性等級(jí)劃分新標(biāo)準(zhǔn)［13］，3種供試農(nóng)藥對(duì)家蠶的毒性等級(jí)均為劇毒級(jí)(LC50≤0.5 mg/L)。但24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC的LC50值為1.8%阿維菌素EW的46.85倍，10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼 SC的 LC50值為1.8%阿維菌素EW的6.00倍，表明10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼SC對(duì)家蠶的急性經(jīng)口毒性主要來(lái)自于阿維菌素成份。

表1 3種農(nóng)藥對(duì)3齡起蠶的急性經(jīng)口毒性測(cè)定結(jié)果

2.2 3種農(nóng)藥對(duì)2齡家蠶的熏蒸毒性

10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼SC、24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC、1.8%阿維菌素EW 3種供試農(nóng)藥1 000倍稀釋液熏蒸處理2齡起蠶24 h后，繼續(xù)飼養(yǎng)至3齡第1天均無(wú)中毒癥狀和死亡蠶，發(fā)育進(jìn)度與清水對(duì)照處理無(wú)差異;對(duì)照農(nóng)藥77.5%敵敵畏EC 10 000倍稀釋液熏蒸處理2齡起蠶，24 h內(nèi)家蠶全部中毒死亡，表明3種供試農(nóng)藥在試驗(yàn)濃度下對(duì)家蠶無(wú)熏蒸毒性。

2.3 甲氧蟲(chóng)酰肼在桑樹(shù)上的內(nèi)吸傳導(dǎo)毒性

由表2可知，24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC 2 000倍液、24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC 3 000倍液、10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼SC 1 000倍液噴于桑樹(shù)枝條下部桑葉，噴藥后5 d采摘桑樹(shù)上部未噴藥處理的桑葉飼喂3齡起蠶，死亡率均為100%，表明甲氧蟲(chóng)酰肼可通過(guò)內(nèi)吸作用并向上傳導(dǎo);噴藥后10 d開(kāi)始，3種農(nóng)藥處理桑樹(shù)的上部桑葉飼喂3齡起蠶的死亡率逐漸下降，24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC 3 000倍液于噴藥后25 d時(shí)上部桑葉對(duì)家蠶無(wú)急性中毒反應(yīng)，10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼SC 1 000倍液于噴藥后30 d時(shí)上部桑葉對(duì)家蠶無(wú)急性中毒反應(yīng)，24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC 2 000倍液于噴藥后30 d時(shí)上部桑葉對(duì)家蠶的中毒死亡率仍達(dá)22.22% (表2)。

表2 甲氧蟲(chóng)酰肼在桑樹(shù)上的內(nèi)吸毒性測(cè)定結(jié)果

2.4 3種農(nóng)藥對(duì)3齡家蠶的殘毒期

3種供試農(nóng)藥稀釋液噴于桑樹(shù)后間隔不同時(shí)間采葉飼喂3齡起蠶，統(tǒng)計(jì)中毒死亡率。由表3可知，噴藥后25 d內(nèi)6個(gè)農(nóng)藥處理區(qū)的家蠶死亡率均為100%。因桑葉葉齡及養(yǎng)蠶季節(jié)所限，試驗(yàn)在噴藥后50 d時(shí)結(jié)束，24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC 2 000倍液、24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC 3 000倍液+1.8%阿維菌素EW 900倍液、10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼SC 1 000倍液對(duì)3齡起蠶的中毒死亡率仍然達(dá)到100%;24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC 3 000倍液對(duì)家蠶的中毒死亡率則略有下降，但仍高達(dá)97.78%;1.8%阿維菌素EW 900倍液和1 500倍液噴藥后30～50 d對(duì)家蠶的中毒死亡率逐漸下降，表明甲氧蟲(chóng)酰肼在桑葉上的殘毒期明顯長(zhǎng)于阿維菌素。

表3 3種供試農(nóng)藥對(duì)3齡起蠶的殘毒期測(cè)定結(jié)果

由表2、表3還可以看出，相同藥液處理及相同間隔時(shí)間，桑樹(shù)上部未噴藥處理的桑葉對(duì)家蠶的死亡率明顯低于桑樹(shù)下部直接噴藥處理的桑葉，表明甲氧蟲(chóng)酰肼雖有內(nèi)吸傳導(dǎo)作用，但受藥液濃度及生物稀釋作用的影響，內(nèi)吸傳導(dǎo)毒性低于直接噴藥毒性。

2.5 3齡家蠶的中毒癥狀

24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC藥液處理的桑葉飼喂3齡起蠶后的中毒癥狀主要表現(xiàn):食桑少，提早出現(xiàn)眠蠶特征，食下帶毒桑葉2～3 d后，眠蠶蛻皮困難，蠶體變成黑褐色，胸部膨大，頭尾部向腹部彎曲，或扭曲翻滾，至死亡過(guò)程較長(zhǎng)。1.8%阿維菌素EW的中毒癥狀表現(xiàn):拒食，靜伏，少量吐液，側(cè)倒，體色清白。因阿維菌素對(duì)家蠶的毒性明顯高于甲氧蟲(chóng)酰肼，所以，10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼SC的中毒癥狀與阿維菌素一致。

3 小結(jié)與討論

24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC對(duì)3齡起蠶的經(jīng)口急性毒性(LC50)為0.060 9 mg/L，1.8%阿維菌素EW的LC50值為0.001 3 mg/L，10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼SC的LC50值為0.007 8 mg/L介于24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC和1.8%阿維菌素EW之間。甲氧蟲(chóng)酰肼和阿維菌素對(duì)家蠶均無(wú)熏蒸毒性。甲氧蟲(chóng)酰肼在桑樹(shù)上有一定的內(nèi)吸作用。24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC和10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼SC在桑葉上的殘毒期明顯長(zhǎng)于1.8%阿維菌素EW，表明甲氧蟲(chóng)酰肼在桑樹(shù)上的降解很慢。參照農(nóng)藥對(duì)家蠶的毒性與風(fēng)險(xiǎn)性等級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)［13］，田間施藥濃度除以L(fǎng)C50的值大于10為極高風(fēng)險(xiǎn)性。按10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼SC、24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC、1.8%阿維菌素EW 3種藥劑的推薦使用濃度與LC50的比值，分別為 10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼 SC 11 396～21 368、24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC 1 752～3 678、1.8%阿維菌素EW 6 154～18 462，因此判斷這3種農(nóng)藥對(duì)家蠶均具有極高風(fēng)險(xiǎn)性。

甲氧蟲(chóng)酰肼是蟲(chóng)酰肼的衍生物，仿昆蟲(chóng)天然蛻皮激素開(kāi)發(fā)而成，會(huì)使昆蟲(chóng)蛻皮過(guò)程無(wú)法完全進(jìn)行，家蠶攝入此類(lèi)物質(zhì)后會(huì)導(dǎo)致新表皮的結(jié)構(gòu)不完整，使蛻皮半途而廢［14］。呋喃蟲(chóng)酰肼與甲氧蟲(chóng)酰肼同為蛻皮激素類(lèi)殺蟲(chóng)劑，李云芝等［15］測(cè)定的呋喃蟲(chóng)酰肼對(duì)家蠶毒性結(jié)果與本試驗(yàn)結(jié)果相似。阿維菌素在水稻、蔬菜等作物上的應(yīng)用極為廣泛，而且與甲氧蟲(chóng)酰肼的殺蟲(chóng)機(jī)理完全不同，孫淑君等［16］研究表明甲氧蟲(chóng)酰肼與阿維菌素混配對(duì)防治稻縱卷葉螟具有明顯的增效作用。本試驗(yàn)結(jié)果中10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼SC對(duì)家蠶的急性經(jīng)口毒性主要來(lái)自于阿維菌素成份，10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼SC中含2%阿維菌素，但對(duì)家蠶的LC5010%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼SC反而大于1.8%的阿維菌素EW;分析原因，10%阿維·甲氧蟲(chóng)酰肼SC、24%甲氧蟲(chóng)酰肼SC均由浙江省上虞市銀邦化工有限公司生產(chǎn)，而1.8%阿維菌素EW由浙江錢(qián)江生物化學(xué)股份有限公司生產(chǎn)，可能由于阿維菌素生產(chǎn)企業(yè)不同和制劑類(lèi)型不同導(dǎo)致其毒力出現(xiàn)差異。本試驗(yàn)結(jié)果表明:甲氧蟲(chóng)酰肼與阿維菌素混配后，對(duì)家蠶的急性經(jīng)口毒性提高到甲氧蟲(chóng)酰肼的6倍，在微劑量下也容易導(dǎo)致家蠶中毒;而在桑葉上的殘毒期又比阿維菌素明顯延長(zhǎng)。因此，這2種藥劑混配進(jìn)一步加大了對(duì)家蠶農(nóng)藥中毒的風(fēng)險(xiǎn)性，建議桑園附近及養(yǎng)蠶區(qū)域避免使用此類(lèi)農(nóng)藥，以免因家蠶中毒死亡而造成經(jīng)濟(jì)損失。

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S884.9

B

1007－0982(2016)04－0036－05

10.16839/j.cnki.zgcy.2016.04.009

2016－07－24;接受日期:2016－09－30

現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專(zhuān)項(xiàng)(編號(hào)CARS－22)。

第1作者信息:楊一平(1979—)，女，浙江海寧，本科，農(nóng)藝師。Tel:0573－87635765，E-mail:173067929@qq.com