張秀蓮，趙卉，許世泉※，張志東，張影

(1．中國農業(yè)科學院特產研究所，長春130112；2．康美新開河(吉林)藥業(yè)有限公司，吉林集安134000)

自古人參就有“百草之王”的美譽，人參根中含有大量具有生物活性的多肽和人參蛋白[1]。二維電泳技術已證明人參根含有300余種人參蛋白[2]，其中，部分水溶性蛋白已被證明具有抗輻射、抗病毒、抗腫瘤、抗休克等多方面的作用[3]。但人參的蘆、體、須各部位的蛋白質含量是否有區(qū)別，尚未見報道。本試驗測定了人參蘆、體、須各部位中的蛋白質含量，并進行詳細分析，以期為它們的實際應用提供理論參考。

1　樣品來源、儀器及試劑

1.1　樣品來源

樣品均采集于吉林省撫松縣榆樹鄉(xiāng)參場，按Z字型分別選取7個樣品采摘點，每個點隨機抽取15支6年生人參，為保證測試所需的樣品量，實驗將每3支人參分解后所得的蘆、體、須部位分別混合均勻后作為1個實驗樣品，即每個采樣點隨機分成5個蘆、體、須樣品，共計7個采樣點，35個人參樣品。將上述35個人參樣品經洗刷、烘干、粉碎后作為實驗材料，待測。

1.2　試劑

EDTA標準物(意大利VELP公司)。

1.3　儀器

NDA701杜馬斯定氮儀(意大利VELP公司)；Milli-Q Advantage A10型超純水器(美國密理博公司)；MS204S型電子分析天平、S205DU電子天平(瑞士梅特勒-托利多公司)；GZX-9240 MBE電熱鼓風干燥箱(上海博訊事業(yè)有限公司醫(yī)療設備廠)。

2　方法

2.1　樣品制備

鮮參樣品經洗刷瀝水后置于50℃烘箱內干燥，粉碎后過60目篩，密封留存。實驗選取EDTA作為檢測時的標準物質。在測定前，所有樣品均需在50℃烘箱內再次干燥72h，置于干燥器內，待測。

2.2　儀器工作條件[4]

用天平準確稱取干粉樣品，用錫箔紙包好，壓縮空氣；樣品制備完成后，置于自動進樣盤里，待儀器進入工作狀態(tài)時自動進樣檢測。每個樣品平行測定3次，結果取平均值。

2.3　標準曲線線性關系和標準曲線方程

分別稱取EDTA標品0mg、12.2mg、22.3mg、32.1mg、43.2mg、51.7mg、62.4mg、74.6mg、84.4mg、91.3mg、101.2mg、113.6mg、122.6mg，用錫箔紙包好，經制樣器制樣后檢測，繪制標準曲線。

以總氮質量為橫坐標、峰面積為縱坐標做標準曲線。曲線方程：Y=4.363 885E-3+X*2.838 244E-4，相關系數R2=0.999 98。

2.4　儀器精密度測定

以標準品EDTA作為樣品，在“2.2”項測定條件下連續(xù)測定6次，統(tǒng)計分析結果。

2.5　重復性實驗

隨機選取1個樣品，在“2.2”項條件下重復測定6次，統(tǒng)計分析結果。

2.6　加樣回收率試驗

取已知含量的人參樣品，稱取5次，分別加入不同質量的EDTA制樣后在“2.2”項條件下進樣測定，統(tǒng)計結果。

3　結果與討論

3.1　結果

3.1.1精密度實驗(表1)

表1精密度實驗結果

Table1Resultsoftheprecisiontesting(%)

由表1可知，以EDTA作為樣品，進行6次平行測定，所得結果的相對標準偏差(RSD)值為0.054%(n=6)，表明儀器精密度良好。

3.1.2重復性實驗(表2)

表2重復性實驗結果

Table2Resultsoftherepetitiveexperiments(%)

3.1.3加標回收率實驗(表3)

表3回收率實驗

Table3Theexperimentationofrecoveryrate(%)

由表3可知，各組樣品加標回收率均在98%～101%之間，5組樣品加標回收率的平均值為99.54%，RSD值為0.859%，說明此方法可以用作人參蛋白質含量測定。

3.1.4蘆、體、須中蛋白質含量測定杜馬斯燃燒法[5]分別測定7組35個人參樣品的蘆、體、須中蛋白質含量(表4)。

表4人參蘆、體、須的蛋白質含量比較

Table4Comparisonofproteincontentinrhizome、middlerootandfibrousrootofGinseng

組　別GroupⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦ平均值Average蘆Rhizome15016±017713873±026714287±035617740±050513773±040612446±024814080±0342914460體Middleroot13646±037011861±028212001±026016302±043012031±012311126±011313641±018712924須Fibrousroot14294±035913573±022013456±098517700±134113033±052712562±055314534±0363014165

由表4可知，人參蘆的平均蛋白質含量最高，須的蛋白質含量略低，平均含量均超過14%，人參主體的蛋白質含量最低，僅為12.924%。蘆∶體∶須平均蛋白質含量的比值為1.12∶1∶1.01。對比7組人參蘆、體、須平均蛋白質含量可知，第4組人參蘆的平均蛋白含量為17.740，須的平均含量為17.70%，體的平均含量為16.302%，平均蛋白含量明顯高出其他組蘆、體、須對應的數值，剩余其他各組間蘆、體、須對應蛋白含量無明顯差異。

3.2　結論

本實驗采用杜馬斯燃燒法測定了樣品中的全氮含量，人參蘆的蛋白質含量最高，人參須次之，人參體中蛋白質含量最低。就蛋白質含量而言，人參的蘆、須、體部分都含有超過12%的蛋白質營養(yǎng)成分，在開發(fā)其深加工產品方面具有廣闊的應用前景。對比7組人參蘆、體、須平均蛋白含量后發(fā)現，第4組人參蘆、須、體的平均蛋白含量明顯高出其他組蘆、體、須對應的含量，其余各組間蘆、體、須對應蛋白含量差異不明顯。綜上所述，人參的蛋白質含量跟地塊具有一定相關性，例如土壤成分、微生物組成、代謝機制等，有關人參蘆、體、須各部位蛋白含量的變化機制研究，蛋白氮和非蛋白氮的深入分析檢測以及蛋白質種類和藥理作用還有待進一步研究。

[1]中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會.衛(wèi)生部《關于進一步規(guī)范保健品原料管理的通知》[Z].北京:中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會，2002.

[2]中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會.關于批準人參(人工種植)為新資源食品的公告[Z].北京:中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會，2012.

[3]李霞,孫立偉,申野.水溶性蛋白活性研究進展[J].中國實用醫(yī)學,2010,27(5):243.

[4]張秀蓮,趙卉,張志東，等.杜馬斯燃燒法和凱氏定氮法在人參蛋白質含量檢測中的對比研究[J].特產研究,2015,(4):38-40.

[5]王欽權,翁佳妍,黃城,等.凱氏定氮法和杜馬斯燃燒法測定食品中蛋白質含量的比較研究[J].輕工科技,2014,1(3):13-14.