黃韻璇，李海峰，黃澤波（廣東藥科大學生命科學與生物制藥學院，廣東廣州510006）

天然藥物抗氧化活性物質(zhì)研究進展

黃韻璇，李海峰，黃澤波
（廣東藥科大學生命科學與生物制藥學院，廣東廣州510006）

氧化脅迫與衰老和多種疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關，許多抗氧化劑具有延緩衰老和防治氧化脅迫相關疾病的活性。其中，植物來源的天然抗氧化劑還具有來源可靠、安全性高、副作用低等諸多優(yōu)點，是目前藥品、保健品、化妝品等行業(yè)的重要開發(fā)對象。本文重點介紹了天然藥物抗氧化活性物質(zhì)的國內(nèi)外研究進展，同時簡單介紹了目前開發(fā)抗氧化劑常用的體內(nèi)外活性評價方法，并對這些天然抗氧化物質(zhì)在生物醫(yī)藥領域的應用前景進行了展望。

抗氧化；多酚；多糖；多肽

體內(nèi)外多種因素誘導產(chǎn)生的過量自由基可引發(fā)氧化脅迫反應，導致細胞結構損傷和功能缺失，促使機體衰老并加劇阿爾茨海默病、心血管疾病、惡性腫瘤等相關疾病的發(fā)展。氧化反應還可能引起藥品、保健品、化妝品等產(chǎn)品中有效成分的破壞，甚至產(chǎn)生有害物質(zhì)。采用抗氧化劑清除體內(nèi)外過量的自由基，一方面可以減輕機體的氧化脅迫損傷從而有助于延緩衰老和防治衰老相關疾病，另一方面能夠有效保護藥品等產(chǎn)品品質(zhì)并延長其保存期限，因此抗氧化產(chǎn)物在醫(yī)藥健康產(chǎn)業(yè)中有著廣泛的需求和應用［1］。其中，中草藥等植物來源的天然抗氧化劑不僅具有良好的抗氧化活性，還符合人們對綠色健康的要求，具有巨大的市場潛力［2］。本文簡要綜述天然藥物抗氧化活性物質(zhì)以及常用的抗氧化活性評價方法。

1　天然藥物中的抗氧化活性物質(zhì)

近年來，大量研究表明天然藥物中存在多種具有抗氧化活性的物質(zhì)，包括多酚類、維生素類、皂苷類、生物堿類等小分子化合物以及多糖、多肽等大分子產(chǎn)物。這些天然產(chǎn)物的抗氧化作用與其抑制過氧化反應、清除自由基、增強機體抗氧化功能等有關。

1.1多酚類

多酚是一類含有多個酚羥基結構的化合物，可分為類黃酮、酚酸、芪類等多個種類，在植物根、葉、皮中含量較為豐富。多酚結構中的酚羥基可作為氫供體清除自由基，而且其反應活性與酚羥基的數(shù)量和位置密切相關，如鄰位酚羥基結構易與自由基反應形成醌，因此大多數(shù)多酚類化合物都具有良好的體內(nèi)外抗氧化作用。我們曾從紫菜苔、白菜苔和廣東菜心中制備了乙醇提取物，發(fā)現(xiàn)這些提取物含有大量的多酚類化合物并具有一定的體外還原性和DPPH清除能力。利用秀麗線蟲（Caenorhabditis elegans）模型進一步研究表明，這些醇提物均能降低秀麗線蟲體內(nèi)的活性氧自由基（reactive oxygen species，ROS）水平，增強超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）的酶活力，并延長秀麗線蟲在百草枯氧化脅迫下的存活時間，其中總多酚含量最高的紫菜苔提取物還能夠延長秀麗線蟲的平均壽命［3］。這些結果說明多酚類化合物的抗氧化作用有助于延緩生物體衰老。

1.1.1類黃酮 類黃酮是多酚中種類最多的一類化合物，又可分為黃酮、異黃酮、黃烷醇、黃酮醇等種類。大多數(shù)植物的組織中都含有類黃酮，如槲皮素、兒茶素、表沒食子兒茶素沒食子酸酯（epigallocatechin-3-gallate，EGCG）等，而大部分類黃酮都有一定的抗氧化活性。例如，槲皮素是一種常見的黃酮醇類化合物，能夠降低H2O2處理的胃黏膜上皮細胞GES-1內(nèi)的ROS水平，恢復線粒體內(nèi)膜電位，提高細胞活力并減少細胞凋亡，還能抑制乙醇誘導胃黏膜急性損傷模型小鼠體內(nèi)的ROS積累和炎癥反應，有助于緩解胃功能失常［4］。茶多酚中的主要成分EGCG可以清除β-淀粉樣蛋白（amyloidβ protein，Aβ）誘導小鼠小神經(jīng)膠質(zhì)細胞CRL-2468產(chǎn)生的過量ROS，并可提高核因子Nrf2和血紅素氧合酶HO-1的表達，抑制核因子NF-κB通路，從而抵抗Aβ誘導的氧化和炎癥脅迫［5］。

1.1.2酚酸 酚酸類化合物主要包括以沒食子酸為代表的羥基苯甲酸類、以3-羥基苯乙酸為代表的鞣花酸類和以綠原酸為代表的羥基肉桂酸類，它們廣泛存在于金銀花、杜仲、茼蒿等植物中。研究表明，沒食子酸不僅能降低H2O2誘導人晶狀體上皮細胞產(chǎn)生的過量ROS，還能增強由毛果蕓香堿誘導的青光眼模型家兔中眼房水的總抗氧化能力，從而緩解眼內(nèi)高壓［6］。在CCl4誘導的肝損傷模型小鼠中，綠原酸能夠增強肝臟組織的 SOD和谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）酶活力，減少脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛的含量，表現(xiàn)出良好的護肝作用［7］。與其他多酚類化合物相似，酚酸的抗氧化能力與酚羥基的結構密切相關，如具有鄰苯三酚結構的沒食子酸的體外抗氧化能力較鄰苯二酚結構的綠原酸和迷迭香酸的更強。

1.1.3其他多酚類 從虎杖等植物中分離出來的芪類化合物白藜蘆醇不僅能夠清除自由基，還可以上調(diào)氧化脅迫條件下多種抗氧化酶的表達，調(diào)控與線粒體呼吸、脂肪酸氧化、糖異生等功能相關的信號通路，從而緩解體內(nèi)氧化脅迫損傷［8］，對阿爾茨海默病、動脈粥樣硬化等衰老相關疾病有一定的防治潛力［9］。另外，從姜黃中分離得到的二酮類化合物姜黃素能夠增強神經(jīng)細胞SH-SY5Y在PINK1基因敲除后的線粒體功能，抑制細胞凋亡，對帕金森樣神經(jīng)細胞具有良好的保護作用［10］。

1.2多糖類

許多中藥多糖具有抗氧化活性，可以增強免疫功能和延緩機體衰老，對心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病、癌癥等也有一定的治療作用。我們利用細胞、秀麗線蟲和小鼠模型研究發(fā)現(xiàn)，當歸、黃芪、茜草、地木耳、淫羊藿、竹蓀等中草藥來源的多糖具有清除體外自由基和調(diào)節(jié)體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)功能的作用。其中，當歸是一種傳統(tǒng)的補血類中藥，其多糖不僅能緩解H2O2對神經(jīng)細胞PC12的氧化損傷，包括提高細胞活力、減少凋亡細胞數(shù)量和ROS水平以及改善線粒體功能，還能增強大腦中動脈閉塞小鼠皮層組織中的SOD和GSH-Px酶活力，抑制脂質(zhì)過氧化，增加大腦微脈管數(shù)量和血流量，從而有助于提高小鼠的學習和記憶能力［11］。黃芪是我國傳統(tǒng)的補益類中藥，具有增強免疫的功效，其多糖已作為抗腫瘤藥等使用。近年來的研究表明，黃芪多糖可以提高D-半乳糖致衰小鼠血清中SOD、過氧化氫酶（catalase，CAT）和GSH-Px的酶活力［12］，表明黃芪多糖具有通過抗氧化作用延緩衰老的潛力。亨廷頓舞蹈癥的主要致病蛋白是多聚谷氨酰胺（polyglutamine，polyQ），我們利用轉(zhuǎn)基因polyQ秀麗線蟲模型對黃芪多糖的活性進行研究，結果發(fā)現(xiàn)黃芪多糖不僅能延長野生型和polyQ秀麗線蟲的壽命，而且還能抑制polyQ聚集及其誘導的神經(jīng)元死亡，這種神經(jīng)保護活性與調(diào)節(jié)氧化脅迫抗性相關的轉(zhuǎn)錄因子 DAF-16/FOXO有關［13］。此外，我們還發(fā)現(xiàn)來源于止血中藥茜草的多糖在人細胞和秀麗線蟲模型中都表現(xiàn)出一定的抗氧化活性，并且可以通過調(diào)節(jié)蛋白酶體降解途徑抑制Aβ在人胚胎腎細胞T-REx293內(nèi)的聚集和聚集毒性［14］。這些研究表明抗氧化活性多糖具有延緩衰老和防治衰老相關神經(jīng)退行性疾病的潛在功能。

1.3多肽類

一般而言，多肽具有生物活性較好、免疫原性較低、不易在體內(nèi)蓄積等優(yōu)點。從多種植物中制備的多肽類物質(zhì)，如大豆肽、當歸肽、銀杏肽等，被證實具有不同程度的抗氧化作用。例如，一些大豆多肽已廣泛應用于抗疲勞、增強免疫力等保健食品中。研究表明，大豆多肽對自由基的清除作用較未降解的大豆蛋白更強，能有效抑制脂質(zhì)過氧化反應，并螯合過量金屬離子［15］。同時，大豆多肽還能增強負重游泳小鼠體內(nèi)SOD酶活力并延長小鼠力竭游泳時間，說明大豆肽的抗氧化活性與抗疲勞功能有相關性［16］。我們利用胰酶和木瓜酶從多種中藥材制備了多肽，發(fā)現(xiàn)當歸多肽能夠有效延長秀麗線蟲在百草枯氧化脅迫下的存活時間。其中，相對分子質(zhì)量小于3 000的當歸多肽組分AsiPeps可以提高SOD和CAT的酶活力，降低秀麗線蟲體內(nèi)由氧化脅迫和衰老誘導的過量ROS水平，減少衰老早期的脂褐素積累，并能延長秀麗線蟲的壽命［17］。這些結果說明當歸多肽可以通過增強體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)的功能來發(fā)揮抗衰老作用。

1.4維生素類

1.4.1維生素C與維生素E 維生素是人體必需的營養(yǎng)物質(zhì)，其中維生素C是一種水溶性抗氧化劑，維生素E則是一類脂溶性的抗氧化劑，均具有很強的還原性。研究表明，將維生素C飼喂17β-雌二醇誘導的乳腺癌模型大鼠，動物乳腺和肝臟組織中的氧化脅迫程度得到改善，如脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物8-異前列腺素F2α的含量減少，而且腫瘤組織的生長會受到抑制［18］。維生素E可以提高大氣顆粒物PM2.5處理人臍靜脈內(nèi)皮細胞中的SOD酶活力，并能降低ROS、丙二醛以及白介素-6和腫瘤壞死因子-α等炎癥因子的水平，從而緩解PM 2.5的細胞毒性［19］。長期服用維生素E也能降低吸煙男性尿液中8-異前列腺素F2α的含量，減輕吸煙對人體的損傷［20］，說明維生素E具有治療慢性呼吸系統(tǒng)疾病的潛力。

1.4.2類胡蘿卜素 類胡蘿卜素是以維生素A前體β-胡蘿卜素為代表的具有類異戊二烯結構的一類化合物。從植物中獲得的葉黃素、番茄紅素等類胡蘿卜素具有較好的抗氧化活性。其中，葉黃素可以淬滅單線態(tài)氧，捕獲ABTS和DPPH自由基，還能減少腹腔注射順鉑的小鼠總血中還原型谷胱甘肽（glutathione，GSH）消耗，抑制DNA交聯(lián)，穩(wěn)定染色體結構。由于GSH水平與微核率成負相關，這些結果表明葉黃素的抗氧化作用可以緩解順鉑對DNA的損傷［21］。番茄紅素是一種脂溶性的深紅色色素，有研究顯示番茄紅素能降低缺血再灌注損傷小鼠模型心肌細胞中的線粒體ROS水平，從而緩解線粒體的DNA損傷和功能障礙［22］。

1.5其他產(chǎn)物

皂苷和生物堿類化合物作為中草藥的重要有效成分，也具有良好的體內(nèi)外抗氧化活性。例如，從景天科植物紅景天中制備的紅景天苷能夠延長轉(zhuǎn)基因polyQ秀麗線蟲在百草枯氧化脅迫下的存活時間，增強秀麗線蟲體內(nèi)SOD和CAT的酶活力，減少脂質(zhì)氧化產(chǎn)物丙二醛的含量，從而緩解polyQ引起的神經(jīng)毒性［23］。從黃連中提取的小檗堿可以調(diào)節(jié)高糖脅迫下腎小管上皮細胞NRK-52E和HK-2中的磷脂酰肌醇三激酶信號通路，從而促進Nrf2轉(zhuǎn)錄因子的核定位，提高抗氧化酶HO-1和SOD的酶活力，減少GSH消耗、ROS水平和caspase-3等凋亡蛋白含量，進而緩解高糖引起的氧化損傷，表明小檗堿具有防治糖尿病腎病的作用潛力［24］。

2　抗氧化活性的評價方法

抗氧化活性的評價主要在體外、細胞和整體動物3個層次進行。其中，體外評價方法是利用氧化還原反應來檢測對自由基的清除作用，基于細胞水平的評價方法主要是檢測抗氧化酶活力、過氧化產(chǎn)物含量以及ROS水平等指標。在整體動物水平上的抗氧化活性評價除了上述指標外，還可以通過觀察造模動物的存活和表型來判斷化合物的抗氧化功效。

2.1體外抗氧化活性評價

通常采用Fe3+還原能力法和普魯士藍法檢測活性產(chǎn)物的總還原性，采用氧自由基吸收能力法檢測活性產(chǎn)物對自由基鏈式反應的抑制作用［25］。此外，分光光度法可檢測活性產(chǎn)物對DPPH和ABTS自由基的清除率，水楊酸比色法和鄰二氮菲-Fe2+氧化法可檢測對·OH的清除率，鄰苯三酚自氧化法和核黃素-NBT法可檢測對·O2-的清除率，硫氰酸鐵法可檢測對脂質(zhì)過氧化反應的抑制作用［26-28］。其中，氧自由基吸收能力法是被美國官方分析化學師協(xié)會（AOAC）認可的評價方法，可用于檢測通過氫轉(zhuǎn)移機制阻止自由基鏈式反應的抗氧化活性，具有準確性好、靈敏度高和應用范圍廣等特點。DPPH清除率檢測法是一種用于評價單電子自由基清除活性的方法，操作簡單快速且成本低廉，廣泛用于各類物質(zhì)的體外抗氧化能力評價。

2.2細胞模型抗氧化活性評價

細胞中的ROS是參與代謝反應的重要物質(zhì)，也是產(chǎn)生氧化損傷的主要誘因。通?？衫梅肿犹结槪ㄈ鏒CFH-DA熒光探針）來檢測細胞內(nèi)ROS水平，從而評價活性產(chǎn)物在細胞水平上的抗氧化活性［29］。此外，細胞含有一套主要由抗氧化酶等組成的氧化防御系統(tǒng)，可以清除過量積累的ROS。例如，SOD可催化·O2-發(fā)生歧化反應而生成H2O2和O2，SOD酶活力檢測可采用細胞色素C法、NBT顯色法和WST-1法等方法進行。CAT可催化H2O2分解生成H2O和O2，因此通過高錳酸鉀滴定法、碘量法和紫外分光光度法檢測H2O2，或者通過電流測定法和簡易氣量測定法檢測O2，從而測定CAT的酶活力。谷胱甘肽還原酶可將氧化型谷胱甘肽還原成GSH，而GSH-Px可利用GSH清除細胞內(nèi)的過氧化物，GSH-Px酶活力可采用DTNB法來檢測。細胞內(nèi)ROS水平的急劇升高可能誘發(fā)凋亡，采用噻唑藍法和熒光素雙醋酸酯染色法可以檢測活性產(chǎn)物對細胞活力的影響［30-31］，也可以采用流式細胞術和TUNEL法等直接分析細胞的凋亡程度［32］。

2.3動物模型抗氧化活性評價

在整體動物水平進行氧化脅迫造模，常用的誘導劑有H2O2、百草枯、1-甲基-4-苯基吡啶離子、魚藤酮、次氯酸、多巴胺、脂多糖、偶氮二異丁基二鹽酸鹽和環(huán)磷酰胺等，這些誘導劑在動物體內(nèi)可誘導產(chǎn)生過量的ROS并加速個體衰亡。因此，通過檢測動物模型的生存時間可以評價活性產(chǎn)物對氧化脅迫的緩解作用，在這方面應用較多的主要有秀麗線蟲、果蠅等低等模式動物［33］。對小鼠、大鼠、家兔等壽命較長的哺乳動物，大多數(shù)采用D-半乳糖致衰、急性缺氧、擠壓傷、局部組織缺血再灌注損傷等方式進行氧化損傷造模，然后可通過檢測血液和組織勻漿中的ROS水平、抗氧化酶活性和脂質(zhì)過氧化物含量來評價活性產(chǎn)物的體內(nèi)抗氧化活性［26］。

3　小結和展望

綜上所述，植物含有多種抗氧化活性產(chǎn)物，而且這些產(chǎn)物表現(xiàn)出不同的抗氧化活性，不僅能夠保護機體組織免受氧化損傷，還可以延緩衰老和防治衰老相關疾病，這些研究結果為植物天然抗氧化劑的開發(fā)提供了實驗基礎。然而，植物抗氧化產(chǎn)物的活性評價迄今大多集中在體外和細胞模型層面，在動物體水平上的活性和機制研究并不深入。同時，天然抗氧化劑目前在醫(yī)藥健康產(chǎn)業(yè)中的應用主要集中在維生素C、茶多酚等小分子物質(zhì)，其他抗氧化產(chǎn)物的應用相對較少。因此，加強多糖、多肽等天然抗氧化產(chǎn)物的研究，在分子、細胞和整體動物水平探索其作用機制，完善高效分離與規(guī)?；苽浼夹g，將有利于推動這類抗氧化活性產(chǎn)物在藥品、保健品等行業(yè)的應用。

［1］NASH K M，AHMED S.Nanomedicine in the ROS-mediated pathophysiology:Applications and clinical advances［J］.Nanomedicine，2015，11（8）:2033-2040.

［2］SRINIVASAN K.Antioxidant potential of spices and their active constituents［J］.Crit Rev Food Sci Nutr，2014，54（3）:352-372.

［3］CHEN Jing，ZHANG Ju，XIANG Yanxia，et al.Extracts of Tsai Tai （Brassica chinensis）:enhanced antioxidant activity and anti-aging effects both in vitro and in Caenorhabditis elegans［J］.Food Funct，2016，7（2）:943-952.

［4］HU Xinting，DING Chen，ZHOU Nan，et al.Quercetin protects gastric epithelial cell from oxidative damage in vitro and in vivo［J］. Eur J Pharmacol，2015，754:115-124.

［5］CHENG-CHUNG WEI J，HUANG Hsiuchen，CHEN Weijen，et al. Epigallocatechin gallate attenuates amyloid β-induced inflammation and neurotoxicity in EOC 13.31 microglia［J］.Eur J Pharmacol，2016，770:16-24.

［6］LAI Juiyang，LUO Lijyuan.Antioxidant gallic acid-functionalized biodegradableinSitugellingcopolymersforcytoprotective antiglaucoma drug delivery systems［J］.Biomacromolecules，2015，16（9）:2950-2963.

［7］FENG Yingshu，SUN Congyong，YUAN Yangyang，et al.Enhanced oral bioavailability and in vivo antioxidant activity of chlorogenic acid via liposomal formulation［J］.Int J Pharm，2016，501（1/2）: 342-349.

［8］DIAZ-GEREVINI G T，REPOSSI G，DAIN A，et al.Beneficial action of resveratrol:How and why？［J］.Nutrition，2016，32（2）:174-178.

［9］NOVELLE M G，WAHL D，DIéQUEZ C，et al.Resveratrol supplementation:Where are we now and where should we go？［J］. Ageing Res Rev，2015，21:1-15.

［10］VAN DER MERWE C，VAN DYK H C，ENGELBRECHT L，et al. Curcumin rescues a PINK1 knock down SH-SY5Y cellular model of parkinson's disease from mitochondrial dysfunction and cell death ［J］.Mol Neurobiol，2016，doi:10.1007/s12035-016-9843-0.

［11］LIE Tao，LI Haifeng，F(xiàn)ANG Zhen，et al.Polysaccharides from Angelica sinensis alleviate neuronal cell injury caused by oxidative stress［J］.Neural Regen Res，2014，9（3）:260-267.

［12］李紅法，郭松波，滿淑麗等.乙醇分級沉淀提取黃芪多糖及其理化性質(zhì)和抗氧化活性研究［J］.中國中藥雜志，2015，40（11）: 2112-2116.

［13］ZHANG Hanrui，PAN Ni，XIONG Siqin，et al.Inhibition of polyglutamine-mediated proteotoxicity by Astragalus membranaceus polysaccharide through the DAF-16/FOXO transcription factor in Caenorhabditis elegans［J］.Biochem J，2012，441（1）:417-424.

［14］CHAKRABORTEE S，LIU Yun，ZHANG Liao，et al.Macromolecular and small-molecule modulation of intracellular Aβ42 aggregation and associated toxicity［J］.Biochem J，2012，442（3）:507-515.

［15］SARMADI B H，ISMAIL A.Antioxidative peptides from food proteins:A review［J］.Peptides，2010，31（10）:1949-1956.

［16］陳園園，施用暉，樂國偉.不同分子量大豆低聚肽抗氧化活性與抗疲勞關系研究［J］.氨基酸和生物資源，2008，30（2）:59-62.

［17］WANG Qiangqiang，HUANG Yunxuan，QIN Chuixin，et al.Bioactive peptides from Angelica sinensis protein hydrolyzate delay senescence in Caenorhabditis elegans through antioxidant activities［J］.Oxid Med Cell Longev，2016.Article ID 8956981，10 pages.doi:10. 1155/2016/8956981.

［18］MENSE S M，SINGH B F，REMOTTI F，et al.Vitamin C and alphanaphthoflavone prevent estrogen-induced mammary tumors and decrease oxidative stress in female ACI rats［J］.Carcinogenesis，2009，30（7）:1202-1208.

［19］BO Liang，JIANG Shou，XIE Yuquan，et al.Effect of vitamin E and omega-3 fatty acids on protecting ambient PM2.5-induced inflammatory response and oxidative stress in vascular endothelial cells［J］.PLoS One，2016，11（3）:e0152216.

［20］GUERTIN K A，GRANT R K，ARNOLD K B，et al.Effect of longterm vitamin E and selenium supplementation on urine F2-isoprostanes，a biomarker of oxidative stress［J］.Free Radic Biol Med，2016，doi:10.1016/j.freeradbiomed.

［21］SERPELONI J M，GROTTO D，MERCADANTE A Z，et al.Lutein improves antioxidant defense in vivo and protects against DNA damage and chromosome instability induced by cisplatin［J］.Arch Toxicol，2010，84（10）:811-822.

［22］YUE Rongchuan，XIA Xuewei，JIANG Jiahui，et al.Mitochondrial DNA oxidative damage contributes to cardiomyocyte ischemia/ reperfusion-injury in rats:cardioprotective role of lycopene［J］.J Cell Physiol，2015，230（9）:2128-2141.

［23］XIAO Lingyun，LI Haifeng，ZHANG Ju，et al.Salidroside protects Caenorhabditiselegansneuronsfrompolyglutamine-mediated toxicity by reducing oxidative stress［J］.Molecules，2014，19（6）: 7757-7769.

［24］ZHANG Xiuli，LIANG Dan，LIAN Xu，et al.Berberine activates Nrf2 nuclear translocation and inhibits apoptosis induced by high glucose in renal tubular epithelial cells through a phosphatidylinositol 3-kinase/Akt-dependent mechanism［J］.Apoptosis，2016，doi:10.1007/s10495-016-1234-5.

［25］AMORATI R，VALGIMIGLI L.Advantages and limitations of common testing methods for antioxidants［J］.Free Radic Res，2014，49（5）:1-38.

［26］NIKI E.Assessment of antioxidant capacity in vitro and in vivo［J］. Free Radic Biol Med，2010，49（4）:503-515.

［27］BECKER K，SCHROECKSNADEL S，GOSTNER J，et al.Comparison of in vitro tests for antioxidant and immunomodulatory capacities of compounds［J］.Phytomedicine，2014，21（2）:164-171.

［28］ALAM M N，BRISTI N J，RAFIQUZZAMAN M.Review on in vivo and in vitro methods evaluation of antioxidant activity［J］.Saudi Pharm J，2013，21（2）:143-152.

［29］LóPEZ-ALARCóN C，DENICOLA A.Evaluating the antioxidant capacity of natural products:A review on chemical and cellularbased assays［J］.Anal Chim Acta，2013，763:1-10.

［30］ANGIUS F，F(xiàn)LORIS A.Liposomes and MTT cell viability assay:An incompatible affair［J］.Toxicol In Vitro，2015，29（2）:314-319.

［31］LINDHAGEN E，NYGREN P，LARSSON R.The fluorometric microculture cytotoxicity assay［J］.Nat Protoc，2008，3（8）:1364-1369.

［32］DARZYNKIEWICZ Z，GALKOWSKI D，ZHAO Hong.Analysis of apoptosis by cytometry using TUNEL assay［J］.Methods，2008，44 （3）:250-254.

［33］WANG Qiangqiang，YANG Fan，GUO Wei，et al.Caenorhabditis elegans in Chinese medicinal studies:making the case for aging and neurodegeneration［J］.Rejuvenation Res，2013，17（2）:205-208.

（責任編輯：王昌棟）

Recent progress on antioxidant products from natural sources

HUANG Yunxuan，LI Haifeng，HUANG Zebo
（School of Biosciences and Biopharmaceutics，Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006，China）

Oxidative stress is closely associated with ageing and ageing-related diseases.Recent studies suggest that antioxidants can delay ageing process and prevent oxidative stress-related diseases.Natural antioxidants from plants and other sources have a variety of advantages such as source authenticity，high safety and low side effect，and thus have great potentials in pharmaceutical，health and cosmetic products. This paper provides an overview of recent progress on natural antioxidant products.Commonly used evaluation methods on antioxidant activities，including both in vitro and in vivo assays，as well as application prospects of natural antioxidant products in biomedical field，are also briefly introduced.

antioxidant；polyphenol；polysaccharide；peptide

R284

A

1006-8783（2016）04-0532-05

10.16809/j.cnki.1006-8783.2016041803

2016-04-18

國家自然科學基金面上項目（81274048）；國家自然科學基金青年基金項目（81403081）

黃韻璇（1992—），女，2013級碩士研究生，Email:hyx612@163.com；通信作者:黃澤波（1965—），男，教授，主要從事衰老及相關疾病研究，Email:zebohuang@gdpu.edu.cn。

網(wǎng)絡出版時間:2016-05-06 10:51 網(wǎng)絡出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/44.1413.R.20160506.1051.001.html