龐國勛

(河北省人民醫(yī)院,河北 石家莊 050051)

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中藥原位凝膠制劑工藝及藥理研究概況

龐國勛

(河北省人民醫(yī)院,河北 石家莊 050051)

[關(guān)鍵詞]原位凝膠；中藥制劑

中醫(yī)藥作為中華中華民族的瑰寶，對于中藥劑型的研究及應(yīng)用有著悠久的歷史，早在商朝時(shí)期就有了湯劑，此后出現(xiàn)丸、散、膏、丹、飲、膠、酒、露、茶、糕、錠、線、條、棒、釘、灸、熨、糊等劑型，這些劑型在臨床方面依然發(fā)揮著獨(dú)特的優(yōu)勢，但是這些傳統(tǒng)的中藥制劑多制作工藝粗糙，穩(wěn)定性及安全性差，質(zhì)量可控性差，不能大批量生產(chǎn)，不利于攜帶、儲存及服用。隨著中醫(yī)藥技術(shù)的發(fā)展，目前臨床常用中藥劑型有片劑、顆粒劑、膠囊劑、鼻滴劑、氣霧劑、注射劑、滴丸、栓劑等[1]，這些制劑經(jīng)過高度提煉精制而成，并且在色、香、味方面也有了很大改進(jìn)，具有服用劑量少，體積小，攜帶方便，患者服藥依從性高的優(yōu)點(diǎn)，但存在溶解度、不易吸收、生物利用度差等缺點(diǎn)。常規(guī)制劑、長效和腸溶制劑、控緩釋制劑或藥物輸送系統(tǒng)或透皮治療系統(tǒng)、靶向制劑是現(xiàn)代制藥的發(fā)展趨勢。目前隨著藥物制劑的發(fā)展，特別是近年來材料及分子生物技術(shù)的發(fā)展，更加拓寬推動(dòng)了中藥新劑型的發(fā)展，使之更符合臨床治療的需求。

中醫(yī)藥素有“內(nèi)病外治”的理論，基于此理論，近年來國內(nèi)對中藥透皮吸收給藥發(fā)揮全身作用產(chǎn)生了濃厚的興趣，并取得了長足進(jìn)展。在中藥經(jīng)皮給藥制劑中加入其毒副作用小，或有一定藥理活性，兼治病和促透雙重作用的促透劑，增加中藥有效成分經(jīng)皮透過，達(dá)到治療全身作用的透皮劑在臨床上有了一定應(yīng)用，目前應(yīng)用于中藥的促透劑有脂質(zhì)體、傳遞體和囊泡、包合物、微乳、微球、固體脂質(zhì)納米粒和納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體，巴布劑及凝膠劑等[2]，其中凝膠劑是近年新興的一種外用藥物劑型，具有水溶性特點(diǎn)，生物相容性良好，可皮膚、黏膜及腔道等多途徑給藥，透皮吸收好，制備工藝簡單，易涂抹，無油膩感，易于清洗，不污染衣物，作用持久，可緩釋、控釋，并避免了肝臟首過效應(yīng)及胃腸道破壞，藥物毒性低及不良反應(yīng)少等優(yōu)點(diǎn)，使用方便、感受舒適、易洗、不污染衣物等[3]。原位凝膠(In Situ Ge1)是一類高分子材料以溶液或半固體狀態(tài)給藥后，立即在用藥部位(如注射部位、鼻黏膜、眼黏膜、口腔黏膜、直腸黏膜及陰道黏膜等)發(fā)生相轉(zhuǎn)變，由液態(tài)轉(zhuǎn)化成非化學(xué)交聯(lián)半固體狀態(tài)的一類制劑[4]。作為一種新型緩控釋給藥載體，不同于傳統(tǒng)的親水凝膠，它能夠以液體狀態(tài)自由加載各種不同性質(zhì)的藥物作用于用藥部位發(fā)生轉(zhuǎn)變，能有效延長藥物的作用時(shí)間，近年來成為中藥制劑領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。在此就中藥原位凝膠制劑研究現(xiàn)狀及臨床應(yīng)用概況作一簡要介紹。

1中藥原位凝膠制劑工藝研究

原位凝膠的形成機(jī)制是利用高分子材料基質(zhì)對外界的刺激發(fā)生響應(yīng)，使聚合物在生理?xiàng)l件下發(fā)生可逆的分散狀態(tài)或構(gòu)象變化，完成溶液狀態(tài)與半固體凝膠狀態(tài)間相變。因此，目前制備原位凝膠所用的聚合物按照膠凝機(jī)制分為溫度敏感型、離子敏感型及pH敏感型3種[5]。

1.1溫度敏感型又稱稱溫敏凝膠，是指對溫度變化敏感的高分子聚合物凝膠。這種原位凝膠在低溫下程液體狀態(tài)自由流動(dòng)，升溫后成為半固體的膠凝狀態(tài)。其作用機(jī)制低臨界溶解溫度系統(tǒng)，這種原位凝膠在低于低臨界溶解溫度時(shí)，聚合物成溶液狀態(tài)保持穩(wěn)定，而當(dāng)溫度升高，高于其低臨界溶解溫度時(shí)，聚合物從溶液中膠凝析出而成膠凝[6]。由于這種水凝膠能在20～25℃室溫下呈液態(tài)，接觸體液時(shí)(35～37℃)即發(fā)生轉(zhuǎn)變，并且溫度的改變相對容易控制，且體內(nèi)外均適用，口服、注射、滴眼、鼻腔黏膜、直腸黏膜等均可給藥，生物利用度高，因此是目前研究應(yīng)用較為廣泛的新型給藥載體。目前，在中藥凝膠制劑中常用的高分子材料有泊洛沙姆、殼聚糖等。

1.1.1泊洛沙姆泊洛沙姆(poloxamer)是一種由單純的高分子聚合物形成的溫度敏感原位凝膠，具有低毒、刺激性小、安全性高、與其他化學(xué)試劑配伍性好、生物相容性高，由聚氧乙烯/聚氧丙烯共聚的非離子表面活性劑，還是目前唯一應(yīng)用于靜脈乳劑的合成乳化劑，是應(yīng)用較多的載體材料。

宋成君等[7]研究對黃芩溫度敏感凝膠劑的處方進(jìn)行研究，確定20%泊洛沙姆407及10%泊洛沙姆188為黃芩溫度敏感原位凝膠的理想基質(zhì)，并且泊洛沙姆407的黃芩溶液其膠凝溫度呈現(xiàn)濃度依賴性，濃度越高，發(fā)生膠凝溫度越低，當(dāng)濃度低于15%時(shí)則喪失膠凝能力。黃芩溫度敏感原位凝膠對兔眼無刺激，滴入結(jié)膜囊內(nèi)后，形成塊狀透明凝膠，分布于結(jié)膜和角膜上，在眼部滯留時(shí)間明顯較黃芩滴眼液長，提高了療效[8]。陳鋼等以復(fù)凝聚法制備鴉膽子油微囊，并將微囊載于泊洛沙姆407形成的原位凝膠中，采用無膜溶出模型考察其體外溶蝕及釋放情況，研究顯示，制得鴉膽子油微囊原位凝膠的相變溫度為32 ℃，在體溫37 ℃下能發(fā)生相變形成半固體凝膠，能達(dá)到體內(nèi)應(yīng)用要求，體外釋藥符合Higuchi方程，持續(xù)釋放可達(dá)96 h以上。姜黃素是從姜科姜黃屬植物莪術(shù)、姜黃等植物中提取的一種天然化學(xué)成分，具有降脂、消炎、抗腫瘤等多種藥理作用，可用于糖尿病、動(dòng)脈硬化、卒中、癌癥、腦外傷等多種疾病的治療。但其難溶于水，結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，口服吸收差，生物利用度低，且在體內(nèi)易被代謝。李曉云等[9]以微乳增加姜黃素水中溶解度，并加入泊洛沙姆407制成溫度敏感的原位凝膠劑，并對姜黃素微乳原位凝膠的形態(tài)、粒徑、表面電位、載藥量、體外釋藥等進(jìn)行其考察。結(jié)果表明，姜黃素微乳原位凝膠劑為澄清透明的液體，透射電鏡下觀察為類球形液滴，粒徑分布均勻，平均粒徑為21.2 nm，Zeta電位為26.13 mV，藥物含量為19.54 mg/g，在37 ℃、1 min左右形成凝膠，膠凝后24 h內(nèi)體外累積釋藥93.76%，明顯提高了姜黃素的溶解度，具有良好的溫度敏感性。

單純使用泊洛沙姆407(F127)為基質(zhì)時(shí)，膠凝存在一些缺點(diǎn)，如無法得到膠凝溫度高、膠凝黏度差、作用時(shí)間短、體內(nèi)不能生物降解等。而泊洛沙姆188(F68)單獨(dú)使用時(shí)，在一定溫度下能夠形成凝膠，但所需濃度及溫度較高。二者膠凝機(jī)制與相同，僅聚氧丙烯/聚氧乙烯比例不同而已。一些研究者將二者聯(lián)合應(yīng)用，或加入其他聚合物，對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾，調(diào)節(jié)PPPO/PEO的比例，獲得理想的相變溫度，提高生物利用度及凝膠強(qiáng)度，延長藥物在體內(nèi)的停留時(shí)間[10-11]。陳溪等[12]以黏度實(shí)驗(yàn)對姜黃素鼻用原位凝膠處方進(jìn)行篩選、優(yōu)化，確定最終處方為20%泊洛沙姆407、2%泊洛沙姆188、0.02%苯扎溴銨、0.9%氯化鈉、0.5%姜黃素，該處方凝膠溫度為(32±0.5)℃，接近鼻腔生理溫度；凝膠時(shí)間為(0.2±0.2)min，鼻黏膜纖毛清除時(shí)間，凝膠時(shí)間短，可長時(shí)間黏附在鼻腔黏膜上；體外釋放測定顯示，姜黃素原位凝膠8 h內(nèi)僅釋放了80%，具有緩釋作用；以大鼠為模型考察姜黃素原位凝膠的腦靶向性及腦內(nèi)分布，結(jié)果顯示，姜黃素原位凝膠在大腦、小腦、海馬、嗅球中的藥物靶向效率分為為靜脈給藥的1.82，2.05，2.07，1.51倍，說明姜黃素鼻腔原位凝膠給藥增強(qiáng)了姜黃素的腦靶向性。李洪斌等[13]以黏度為指標(biāo)，用正交實(shí)驗(yàn)來確定銀杏葉提取物溫度敏感型鼻用原位凝膠的最佳工藝制備；通過透析試驗(yàn)，研究凝膠釋放機(jī)制；采用小鼠記憶獲得、記憶鞏固和記憶再現(xiàn)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行藥效研究。通過正交實(shí)驗(yàn)，確定泊洛沙姆188-泊洛沙姆407為15∶20，殼聚糖0.4%，HP-β-環(huán)糊精30%為最佳制備工藝；通過體外釋放研究，表明銀杏葉提取物鼻用原位凝膠中的藥物透生物膜擴(kuò)散是依賴于鼻黏膜兩側(cè)濃度梯度的被動(dòng)擴(kuò)散，而不是通過凝膠溶蝕使藥物釋放，6 h釋藥量達(dá)80%，符合一級釋藥方程。

藤黃主要成分藤黃酸是一種具有抗腫瘤活性的化合物，具有抗癌譜廣、毒性低的特點(diǎn)。朱邦勝等[14]運(yùn)用星點(diǎn)設(shè)計(jì)—效應(yīng)面優(yōu)化法確定注射用新藤黃酸溫敏原位凝膠劑的最佳處方，并采用高效液相法對其體外釋放進(jìn)行含量測定。最佳處方為0.2%新藤黃酸+18.26%泊洛沙姆407(F127)+7.4%泊洛沙姆188(F68)+0.5%苯甲醇，膠凝溫度為35.4 ℃ ，體外釋放顯示新藤黃酸在2 h釋放了5.99%，96 h釋放了98.44%，符合零級釋藥分布。張春盛等[15]以20%泊洛沙姆407、1%泊洛沙姆188和羥丙甲基纖維素為混合基質(zhì)，采用冷溶法制備新魚腥草素鈉眼用溫敏原位凝膠，并用高效液相色譜法測定新魚腥草素鈉含量，采用無膜溶出法進(jìn)行凝膠溶蝕試驗(yàn)考察藥物釋放特性。結(jié)果顯示；所制凝膠室溫下為液體，體溫下轉(zhuǎn)變?yōu)榘牍虘B(tài)凝膠，其膠凝溫度為30．5 ℃，；新魚腥草素鈉體外釋放符合Hixon-Crowell模型，釋藥機(jī)制為藥物擴(kuò)散與凝膠溶蝕的雙重機(jī)制，符合眼部用藥要求，制備方法簡單、質(zhì)量可控。

孫平飛等[16]采用攪拌子法測定相變溫度并測定其動(dòng)態(tài)黏度，研制蛇床子素溫敏型凝膠劑，確定其處方，用轉(zhuǎn)籃法進(jìn)行處方的體外釋放實(shí)驗(yàn)。結(jié)果：確定蛇床子素溫敏型凝膠的最佳基質(zhì)配比是質(zhì)量分?jǐn)?shù)為25%的泊洛沙姆407和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的泊洛沙姆188的組合，進(jìn)入人體內(nèi)形成凝膠并且24 h累計(jì)釋放藥物83%，結(jié)論制劑制備工藝簡單，有顯著的緩釋效果，延長藥效。宋婧等[17]研究穿琥寧直腸用原位凝膠的處方和制備工藝。以外觀、黏度突變溫度、膠凝溫度、穩(wěn)定性等為指標(biāo)，以穿琥寧含量降低百分率為指標(biāo)，以乙二胺四乙酸二鈉質(zhì)量分?jǐn)?shù)、苯甲醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)、羥丙基-β-環(huán)糊精(HP-β-CD)質(zhì)量分?jǐn)?shù)為考察因素，采用正交試驗(yàn)結(jié)合單因素試驗(yàn)優(yōu)選抗菌劑的用量和抗氧化劑的種類和用量；并對有效期進(jìn)行預(yù)測。穿琥寧直腸用原位凝膠優(yōu)選的處方為穿琥寧10 g，泊洛沙姆407 18 g，泊洛沙姆188 6.0 g，苯甲醇0.5 g、HP-β-CD 6 g，加水至100 g；膠凝溫度為(36.5±0.5)℃；制劑有效期為1.57年，優(yōu)選的處方合理、可行，可用于制備穿琥寧直腸用原位凝膠。歐陽榮等[18]以溫度敏感型原位凝膠的膠凝溫度、膠凝強(qiáng)度、生物黏附力為考察指標(biāo)，優(yōu)選出瘀腫消溫度敏感型原位凝膠基質(zhì)配比。該方由梔子、大黃、金銀花、當(dāng)歸等11味中藥組成。結(jié)果為原位凝膠基質(zhì)配方Poloxamer407、Poloxamerl88、卡波姆分別為22%、3%、0.7%。陳燕軍等[19]采用冷溶法、以泊洛沙姆為基質(zhì)材料制備注射用腫節(jié)風(fēng)提取物溫敏型原位凝膠制劑，并對處方進(jìn)行優(yōu)化、體外釋放進(jìn)行考察。優(yōu)化處方為16%泊洛沙姆407+6%泊洛沙姆188+0.2%羥丙基甲基纖維素+0.5%苯甲醇+4%(g/mL)腫節(jié)風(fēng)提取物，膠凝溫度為33 ℃，體外釋放行為符合Higuchi方程。

1.1.2殼聚糖殼聚糖為天然的堿性陽離子多糖，由甲殼素脫乙?；茫^人工合成的高分子聚合物比較，其生物相容性和可降解性較好。潘旭東等[20]采用高效液相色譜法，以黃芩苷的含量為評價(jià)指標(biāo)，以正交試驗(yàn)法L9(34) 優(yōu)選復(fù)方黃芩溫敏凝膠的殼聚糖絮凝法澄清工藝參數(shù)。結(jié)果最佳澄清工藝為殼聚糖加入量0.4 mL/g，藥液靜置時(shí)間24 h，藥液稀釋比為1∶6。張嚴(yán)琦等[21]制備含1%殼聚糖中藥復(fù)方黃聚凝膠劑，在RYJ-6B型藥物透皮擴(kuò)散試驗(yàn)裝置中進(jìn)行體外透皮實(shí)驗(yàn)，通過對小白鼠(BALB/C)活體被表透皮擴(kuò)散含量進(jìn)行測定。在1%殼聚糖基質(zhì)、中藥復(fù)方黃聚凝膠(含1%殼聚糖)、復(fù)方中藥藥汁的藥物擴(kuò)散中以黃聚凝膠最為和緩，在皮膚外側(cè)有較高的濃度，延長藥物的釋放和擴(kuò)散過程，可以提高藥物的靶向性，提高藥物利用度，且穩(wěn)定性好[22]。

單純的殼聚糖溫度敏感凝膠力學(xué)強(qiáng)度低，體溫下凝膠形成速度不易控制，通過在體系中引入其他組分并調(diào)節(jié)比例，或與其他輔料形成物理交聯(lián)，或使用其衍生物等修飾手段，可以獲得適宜的臨床性能。李永霞等[23]研究復(fù)方烏黃水凝膠的制備方法，優(yōu)選工藝條件，烏頭堿含量為指標(biāo)，考察殼聚糖用量、海藻酸鈉用量、交聯(lián)時(shí)間、交聯(lián)溫度四個(gè)因素對復(fù)方烏黃水凝膠的制備工藝的影響，結(jié)果顯示，殼聚糖，海藻酸鈉，中藥浸膏用量比例為2∶6∶1，交聯(lián)40 min，交聯(lián)溫度30 ℃時(shí)水凝膠性能較好，并且凝膠中的烏頭堿含量最高，載藥量最大。

1.2離子敏感型體液中含有大量的鈉、鉀、鈣等陽離子,某些多糖類衍生物能夠與體液中的陽離子絡(luò)合而改變構(gòu)象，在用藥部位形成凝膠。較為常用的材料有海藻酸鹽、去乙酰結(jié)冷膠。

1.2.1海藻酸鹽海藻酸鹽是一種天然可生物降解線形多聚糖，是棕色藻類的胞內(nèi)產(chǎn)物，由兩種不同類型的單糖組成，屬陰離子型共聚物，其來源廣泛，易于獲得，生物相容性好，且易于凝膠化，該材料制備的原位凝膠毒性低、親水性良好。高捷等[24]用正交設(shè)計(jì)法篩選制備蛇床子素水凝膠栓的最佳處方。結(jié)果：最佳處方為：海藻酸鈉0.4 g、吐溫-80 2.4 g、單硬脂酸甘油酯1.2 g、卡波姆0.4 g。黃德福等[25]通過單因素考察法篩選制備蛇葡萄素凝膠劑的處方工藝，可選用3%海藻酸鈉溶液與1%無水氯化鈣溶液為基質(zhì)，二甲基亞砜為增溶劑，維生素C為抗氧劑，工藝簡單可行，質(zhì)量穩(wěn)定可控。熊富良等[26]用用海藻酸鈉為原料、浸漬法制備黃連素的海藻酸鈣凝膠，并通過黃連素溶液的濃度、海藻酸鈉溶液的濃度和交聯(lián)時(shí)間三個(gè)因素，來考察黃連素凝膠小球的制備工藝，并在模擬胃液和腸液pH環(huán)境下，測試其釋放行為。結(jié)果顯示黃連素濃度的提高，有利于載藥量的提高；海藻酸鈉濃度的提高，會使載藥量降低；交聯(lián)時(shí)間對載藥量的影響很小。載藥量最高可以達(dá)到16%，與黃連素同類藥物相比，顯著提高了載藥量。最佳工藝小球在pH 1.0的介質(zhì)中幾乎不溶脹，2 h累積釋放不到10%，而在模擬腸液的pH 7.4環(huán)境中，6 h累積釋放達(dá)到70.14%，24 h累積釋放達(dá)98.21%，具有較好的緩控釋效果，可以降低黃連素對胃部的刺激，并可應(yīng)用于黃連素對潰瘍性結(jié)腸炎的治療。張彥青等[27]以滴加法制成燈盞花素海藻酸鈣凝膠小球，在單因素考察的基礎(chǔ)上采用正交設(shè)計(jì)篩選最優(yōu)處方。最優(yōu)處方為海藻酸鈉質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.5% ，海藻酸鈉與藥物的比例為1∶1，氯化鈣濃度為0.3 mol/L。優(yōu)化處方制備的凝膠小球大小均勻，載藥量均勻，包封率和體外釋放度具有良好的重現(xiàn)性。

1.2.2去乙酰結(jié)冷膠去乙酰結(jié)冷膠是由四糖單元重復(fù)組成的陰離子多聚糖，由于分子中的乙?；糠只蛉棵撊?，分子間空間位阻作用明顯降低，膠凝能力較強(qiáng)，在加熱及有一定量陽離子存在的條件即可轉(zhuǎn)變成無色透明半固體狀凝膠，對鈣、鎂離子敏感，在鼻腔給藥系統(tǒng)中有較好的應(yīng)用。

蔡錚等[28]以去乙酰結(jié)冷膠為基質(zhì)制成天麻素離子敏感鼻用原位凝膠，并采用擴(kuò)散池法考察其釋藥規(guī)律、以無膜溶出法觀察其釋放機(jī)制。結(jié)果天麻素鼻用原位凝膠的釋藥符合Fick’s第一擴(kuò)散定理，其溶蝕度較小且與釋放度無明顯相關(guān)性。與天麻素溶液劑相比，其鼻用原位凝膠能延長釋藥時(shí)間累積釋放量是其溶液劑的1.71倍。反映天麻素離子敏鼻用原位凝膠的釋藥方式主要為擴(kuò)散而非溶蝕。羅潔琦等[29]以去乙酰結(jié)冷膠為材料，采用旋轉(zhuǎn)黏度計(jì)測定溶液-凝膠相轉(zhuǎn)變特性篩選三七總皂苷離子敏感型鼻用原位凝膠，采用HPLC法測定PNS中人參皂昔Rg1含量。結(jié)果顯示，離子敏感型原位凝膠的黏度隨著去乙酰結(jié)冷膠質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加而上升，0.5%、0.75%去乙酰結(jié)冷膠能在加入模擬鼻液后形成具有一定強(qiáng)度理想的凝膠，0.2%凝膠黏度過低，而1%凝膠黏度過高；藥物主要以擴(kuò)散方式從去乙酰結(jié)冷膠釋放，并能放慢藥物釋放速度，減少給藥次數(shù)，起到緩釋作用。卓玉娟等[30]采用去乙酰結(jié)冷膠為材料制備辛芷離子敏感型鼻用原位凝膠，并研究體外釋藥規(guī)律及機(jī)制。結(jié)果：辛芷離子敏感型鼻用原位凝膠的黏度隨去?；Y(jié)冷膠的濃度增加而增大，其釋藥量隨結(jié)冷膠的濃度增加而減少，釋藥速度為0.2%>0.5 %>1.0%，符合一級釋藥模型，其溶蝕度較小且與釋放率無明顯相關(guān)，其中0.5%結(jié)冷膠黏度小，釋放度適當(dāng)，是最適合的濃度。

1.2.3混合型劉粵疆等[31]以脫乙酰結(jié)冷膠和海藻酸鈉為基質(zhì)制備苦參堿離子敏感型原位凝膠，并采用高效液相色譜法測定含量，并進(jìn)行穩(wěn)定性試驗(yàn)，顯示結(jié)果該制劑制備工藝簡便，性質(zhì)穩(wěn)定，質(zhì)量可控，具有較好的緩釋作用。本處方聯(lián)合將脫乙酰結(jié)冷膠和海藻酸鈉聯(lián)合應(yīng)用作為凝膠基質(zhì)，與淚液中陽離子接觸后黏度能迅速增加，與擔(dān)負(fù)使用相比，兩者合用能降低總基質(zhì)的使用量，提高了凝膠性能。在眼部用藥安全無刺激，提高了苦參堿在眼部的生物利用度。

1.3pH敏感型pH敏感型原位凝膠是通過改變聚合物周圍環(huán)境的pH值化而發(fā)生膠凝反應(yīng)，其膠凝行為是電荷間的捧斥作用導(dǎo)致分子鏈伸展與相互纏結(jié)的結(jié)果。常用基質(zhì)有丙烯酸類聚合物(如卡波姆)、醋酸纖維素酞酸酯(CAP)等。劉宏偉等[32]以卡波姆基質(zhì)(Carbopol)，同時(shí)引入了羥丙基甲基纖維素(HPMC)，以星點(diǎn)設(shè)計(jì)一效應(yīng)面法優(yōu)化磷酸川芎嗪鼻用pH敏感型原位凝膠的處方，優(yōu)選的最佳條件為卡波姆的用量為0.55%，羥丙基甲基纖維素的用量為1.4%。由于較大濃度的卡波姆才能形成穩(wěn)定的凝膠，且不易被中和且有刺激性，所以不適于單獨(dú)用作原位凝膠的基質(zhì)。為減少卡波姆用量、提高位膠凝能力，該項(xiàng)研究加入羥丙基甲基纖維素，二者皆為塑性流體，在pH為 4.0時(shí)為低黏度流體，pH為 7.4時(shí)膠凝，均具有緩釋作用。武昊昀等[33]采用槳法進(jìn)行黃芩苷眼用原位凝膠劑處方的體外釋藥試驗(yàn)，并進(jìn)行處方優(yōu)選。建立UV法測定體外釋藥量；應(yīng)用離體角膜進(jìn)行體外滲透試驗(yàn)，建立HPLC法測定離體角膜滲透量。結(jié)果：凝膠基質(zhì)黏度隨pH值的增大而增大，其拐點(diǎn)為pH 5.8～6.0,暫定0.5% HPMC E4M-0.3%Carbopol和0.6% HPMC E4M-0.3% Carbopol為最優(yōu)處方。在一定范圍內(nèi)，親水凝膠材料用量越大，凝膠基質(zhì)的緩釋作用越好；凝膠體外釋放符合Ritger-Peppas方程，藥物釋放機(jī)制為Fick擴(kuò)散機(jī)制；離體角膜滲透行為符合零級釋放規(guī)律，黃芩苷以恒定速率從凝膠中釋放，且角膜滲透速度和程度都較黃芩苷滴眼液組慢，且對角膜上皮細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞無損傷。本研究也是將卡波姆作為凝膠基質(zhì)，同時(shí)與HPMC配伍作為增粘劑， 增加了凝膠在眼內(nèi)的舒適度，同時(shí)有良好的緩釋效果。崔海珍等[34]以卡波姆934、HPMC為凝膠基質(zhì)制備pH敏感型鼻用原位凝膠劑,對黏度、黏附性及藥物離體透黏膜吸收進(jìn)行研究,對處方進(jìn)行優(yōu)選。最優(yōu)處方為0.8%卡波姆934和1.5% HPMC可制備原位凝膠。

2藥理實(shí)驗(yàn)研究

為了驗(yàn)證原位凝膠的藥理作用及安全性，一些學(xué)者以動(dòng)物為研究對象，進(jìn)行了藥理研究，證實(shí)原位凝膠劑用藥對動(dòng)物安全、可靠，無毒副作用，藥物吸收好，生物利用度高，在抗腫瘤、治療腦血管疾病等方面具有一定優(yōu)勢。

李楠等[35]評價(jià)黃芩苷磷脂復(fù)合物原位凝膠經(jīng)鼻給藥的鼻黏膜毒性，在體蟾蜍藥物對纖毛運(yùn)動(dòng)的影響，用溶血實(shí)驗(yàn)考察藥物對生物膜的作用。結(jié)果黃芩苷磷脂復(fù)合物原位凝膠對蟾蜍鼻纖毛的運(yùn)動(dòng)幾乎無影響，經(jīng)鼻藥安全，無毒副作用。對其在大鼠體內(nèi)血液與腦組織中的藥物分布及腦靶向性研究發(fā)現(xiàn)，黃芩苷磷脂復(fù)合物原位凝膠腦靶向指數(shù)高于靜注黃芩苷磷脂復(fù)合物溶液組，且嗅區(qū)轉(zhuǎn)移率高(88.8%)，藥物平均滯留時(shí)間延長近3倍。說明鼻用黃芩苷磷脂復(fù)合物原位凝膠具有腦靶向性，可作為治療腦部疾病一種優(yōu)勢給藥途徑[35-36]。

劉宏偉等[37]研究磷酸川芎嗪(TMPP)鼻用pH敏感型原位凝膠對急性腦缺血模型大鼠腦部紋狀體區(qū)氨基酸含量的影響顯示，鼻腔給予TMPP鼻用pH敏感型原位凝膠(10 mg/kg)后，大鼠體內(nèi)的Glu和Asp與對照組相比顯著下降，Tau和GABA量卻有所增加，提示TMPP能明顯降低模型大鼠腦內(nèi)興奮性氨基酸的含量，增加腦內(nèi)抑制性氨基酸的含量，對急性腦缺血神經(jīng)具有保護(hù)作用。對大鼠腦部TMPP的濃度測定顯示，在急性腦缺血模型病理狀態(tài)，TMPP鼻用pH敏感型原位凝膠中的TMPP在腦部消除減慢，生物利用度提高[37-38]。

蔡錚等[39]研究發(fā)現(xiàn)，天麻素離子敏感鼻用原位凝膠在大鼠體內(nèi)血液與腦組織中的藥物均顯著高于天麻素溶液靜注，藥物平均滯留時(shí)間延長近4倍，提示天麻素鼻用原位凝膠具有腦靶向性及緩釋作用。李洪斌等[40]研究顯示銀杏葉提取物溫度敏感型鼻用原位凝膠中的銀杏葉提取物能繞過血腦屏障由鼻—腦通道直接進(jìn)入腦內(nèi)，發(fā)揮改善小鼠學(xué)習(xí)記憶功能障礙，提高腦功能。

董芙蓉等[41]對芷冰鼻腔原位凝膠劑的藥效學(xué)及鼻纖毛毒性進(jìn)行研究顯示，芷冰鼻腔原位凝膠劑的鎮(zhèn)痛效果顯著優(yōu)于阿司匹林，并隨劑量的增加而增強(qiáng)，并且經(jīng)鼻給藥對鼻纖毛運(yùn)動(dòng)基本無影響，對兔體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)的研究顯示，芷冰原位凝膠在兔體內(nèi)的吸收程度大于芷冰藥液。說明芷冰鼻腔原位凝膠劑是一種安全有效、生物利用度高的治療頭痛的新型制劑[40-41]。

孫慕松等[42]研究顯示，紫景天原位凝膠緩釋劑可明顯減輕牙周炎大鼠牙齦指數(shù)、齦溝出血指數(shù)，從而發(fā)揮預(yù)防和治療實(shí)驗(yàn)性牙周炎的作用。有研究顯示，紫景天原位凝膠劑在體外對牙齦卜啉菌、放線共生放線桿菌、產(chǎn)黑色素?cái)M桿菌等均有較好的抑制作用，這可能是其防治牙周炎的作用機(jī)制[42-43]。

張桂賢等[44]對紫杉醇一PECT溫敏型可注射原位凝膠進(jìn)行藥效學(xué)評價(jià)，瘤旁植入載藥凝膠10 mg/kg，腫瘤生長抑制率為56.62%，效果優(yōu)于同等劑量靜脈注射給藥組的2.99%；相同劑量下瘤內(nèi)植入，腫瘤生長抑制率為38.16%，與同等劑量靜脈注射效果相當(dāng)。說明PECT凝膠材料原位植入對腫瘤生長沒有影響，紫杉醇一PECT載藥材料植入給藥與注射劑相比能夠顯著提高抗腫瘤的療效，降低毒性反應(yīng)。

3總結(jié)與展望

中醫(yī)藥因其毒副作用少、療效確切、具有多靶點(diǎn)的綜合療效，在臨床中應(yīng)用越來越多，尤其是對腦血管疾病、腫瘤、慢性胃腸道疾病、抗病毒等方面，應(yīng)用廣泛。但是這些疾病用藥時(shí)間長，湯劑、顆粒劑等中藥劑型長期服用患者依從性差，生物利用度低。而原位凝膠劑的開發(fā)可以更有效地調(diào)節(jié)藥物的緩釋、控釋性，提高生物利用度，擴(kuò)大了中藥的應(yīng)用范圍，以更好地發(fā)揮中醫(yī)藥的作用。原位凝膠新型給藥因其良好的順應(yīng)性及緩控釋能力，成為近年來國內(nèi)外藥劑學(xué)研究者的研究熱點(diǎn)，尤其是中藥制劑的研究。

通過對近年對中藥原位凝膠劑的研究可以看出，目前研究較多的是溫感型凝膠劑，以泊洛沙姆為基質(zhì)材料的研究較多。并且為了達(dá)到更理想的治療效果，中藥原位凝膠制劑的研制與其他技術(shù)相結(jié)合，如與脂質(zhì)體、包合物等技術(shù)相結(jié)合，制成微凝膠、油微囊、微乳等，使這些技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)相結(jié)合，進(jìn)一步提升了藥物的緩釋性、穩(wěn)定性及靶向性等，可作為中藥凝膠劑的一個(gè)新的研究方向。

原位凝膠劑可根據(jù)多樣化的凝膠機(jī)制設(shè)計(jì)成不同途徑的藥物制劑，用藥部位十分廣泛。目前，中藥原位凝膠劑的給藥途徑主要為鼻黏膜、眼、直腸及注射用，其中鼻用原位凝膠研究較多。鼻用原位凝膠劑以液體形式滴入鼻腔后膠凝成半固體黏附在鼻黏膜上，一方面延長了制劑在鼻腔中的滯留時(shí)間，提高了藥物的生物利用度；另一方面，由于鼻黏膜分布有豐富的血管，藥物吸收好，避免了胃腸道和肝臟的首過效應(yīng)；還能有效地使藥物通過鼻黏膜上的嗅神經(jīng)上皮細(xì)胞，繞過血腦屏障，靶向遞送到腦部。因此，鼻用中藥原位凝膠是一種極有發(fā)展前景及優(yōu)勢的腦部疾病給藥途徑，可進(jìn)一步研究與開發(fā)，以在腦血管疾病的治療上發(fā)揮更有效的作用。

原位凝膠劑的優(yōu)勢已經(jīng)得到各界的認(rèn)可，目前國外已有成熟產(chǎn)品問世，而中藥這一領(lǐng)域的研究尚處于起步階段，仍存在許多問題。除原位凝膠劑“突釋”問題、高分子材料對皮膚的刺激性、對角膜的安全性等問題未解決外[43]，目前關(guān)于中藥凝膠劑的研究還存在以下問題：①研究多以中藥活性單體成分為研究對象，而復(fù)發(fā)中藥的研究較少；②大部分研究只是對凝膠劑的處方及質(zhì)量控制進(jìn)行研究，但缺少相關(guān)的藥理、藥動(dòng)力學(xué)研究及臨床應(yīng)用等；③制劑的制備方法及質(zhì)量控制缺乏嚴(yán)格、統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，制備工藝多樣化，質(zhì)量不可控；④用于中藥的凝膠基質(zhì)材料種類少，仍不能滿足日益多樣化的臨床需求；⑤中藥成分復(fù)雜，加入凝膠基質(zhì)后成分多樣化，臨床安全性有待考察[45]。

隨著中藥應(yīng)用的日益增多，將中藥開發(fā)成質(zhì)量可控、服用方便、療效確切的新劑型具有廣闊的市場前景及學(xué)術(shù)價(jià)值，也是中藥走向現(xiàn)代化、走向世界的要求。中藥凝膠劑的研究必須引進(jìn)先進(jìn)的現(xiàn)代藥劑學(xué)理論和技術(shù)，應(yīng)深入研究基本的理論和制備工藝，保障中藥材質(zhì)量合格的基礎(chǔ)上，制定高標(biāo)準(zhǔn)的質(zhì)量控制方法，保障制劑的療效及安全；研究開發(fā)新型輔料，將新制劑如微乳、微囊、納米微球、復(fù)合乳等用于劑型的改進(jìn)，使中藥凝膠劑更加高效、長效、質(zhì)量更穩(wěn)定、藥物生物利用度及靶向性更高，這樣才能使中藥制劑研究邁上新臺階。加快相關(guān)制劑的藥理研究及臨床應(yīng)用觀察，以促進(jìn)中藥凝膠劑在臨床上發(fā)揮應(yīng)用的作用。

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[收稿日期]2015-10-10

[中圖分類號]R283

[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A

[文章編號]1008-8849(2016)11-1247-06

doi:10.3969/j.issn.1008-8849.2016.11.037