陳燕培 夏棟林 王雨飛 陳 超 沈鈴玲 顧海鷹1， 何 紅

1(南通大學(xué)杏林學(xué)院，江蘇 南通 226019)2(南通大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院，江蘇 南通 226019)3(南通通大化學(xué)物安全性評(píng)價(jià)中心，江蘇 南通 226019)4(南通大學(xué)航海醫(yī)學(xué)研究所，江蘇 南通 226019)5(南通大學(xué)附屬醫(yī)院，江蘇 南通 226001)

創(chuàng)面復(fù)合液體敷料在皮膚創(chuàng)傷中的治療研究

陳燕培1?夏棟林2?王雨飛2,3陳 超2,3沈鈴玲4顧海鷹1，2,3何 紅5*

1(南通大學(xué)杏林學(xué)院，江蘇 南通 226019)2(南通大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院，江蘇 南通 226019)3(南通通大化學(xué)物安全性評(píng)價(jià)中心，江蘇 南通 226019)4(南通大學(xué)航海醫(yī)學(xué)研究所，江蘇 南通 226019)5(南通大學(xué)附屬醫(yī)院，江蘇 南通 226001)

基于羧甲基殼聚糖的高生物相容性及聚乙烯醇縮丁醛的快速成膜，構(gòu)建了一種創(chuàng)面復(fù)合液體敷料，并對(duì)其應(yīng)用效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。首先應(yīng)用羧甲基殼聚糖 (CMC)、聚乙烯醇縮丁醛 (PVB)和乙醇溶液，按照一定的比例，制備創(chuàng)面復(fù)合液體敷料。對(duì)其防水、透氣、阻菌、細(xì)胞毒性進(jìn)行性能研究及安全性評(píng)價(jià)。然后選擇健康成年Sprague-Dawley(SD)大鼠40只，雌雄各半，構(gòu)建大鼠創(chuàng)面模型，并將含有不同濃度的羧甲基殼聚糖(1.0、10.0、30.0 mg/mL)應(yīng)用在其創(chuàng)面上，通過日常觀察、HE染色等，研究創(chuàng)面復(fù)合液體敷料在皮膚創(chuàng)傷中的治療效果。結(jié)果顯示創(chuàng)面復(fù)合液體敷料上層膜液在1.8～2.3 mm 之間具有很好的防水透氣性、阻菌性及生物兼容性。運(yùn)用在動(dòng)物模型上可以看到，第7 d含有10.0、30.0 mg/mL CMC組的大鼠創(chuàng)面愈合率分別為65.42%、67.38%，明顯高于對(duì)照組且存在顯著性差異(P< 0.01)，14 d后含有10.0、30.0 mg/mL CMC組的大鼠創(chuàng)面愈合率已達(dá)到100%。HE 染色的第七天含有10.0、30.0 mg/mL CMC的創(chuàng)面復(fù)合液體敷料組中觀察到有復(fù)層扁平的表皮和真皮的膠原纖維，第12 d組織開始出現(xiàn)內(nèi)陷結(jié)構(gòu)，含有厚實(shí)、粗糙膠原纖維的正常真皮與較薄的膠原纖維水平連接，表皮的復(fù)層鱗狀上皮遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于對(duì)照組中的三到四層。而且創(chuàng)面連接真皮結(jié)締組織，它的表皮構(gòu)成非常接近于正常皮膚組織。構(gòu)建的創(chuàng)面復(fù)合液體敷料(10.0 mg/mL CMC)具備良好的防水、透氣、阻菌性以及生物兼容性，隨著羧甲基殼聚糖濃度的升高，治療急性創(chuàng)面的效果越好，創(chuàng)面復(fù)合液體敷料能夠?qū)?chuàng)面起到早期保護(hù)和促進(jìn)愈合的效果。.

創(chuàng)面復(fù)合液體敷料；急性皮膚潰瘍模型；羧甲基殼聚糖；聚乙烯醇縮丁醛

引言

隨著皮膚創(chuàng)面二次污染的機(jī)會(huì)增加，繼發(fā)感染也日益增多，從而加劇了清創(chuàng)的難度及抗生素的大量應(yīng)用，不但給病人帶來痛苦，也會(huì)延遲創(chuàng)面的愈合。對(duì)開放性創(chuàng)傷中預(yù)防感染是重要環(huán)節(jié)之一，傳統(tǒng)的處理主要是用紗布包扎，常常收到外界水和細(xì)菌的污染[1]。早期使用能夠快速覆蓋的創(chuàng)面預(yù)防感染的敷料，促進(jìn)愈合是首選。

一個(gè)理想的敷料應(yīng)該具備3個(gè)條件：一是適合的水蒸氣透過率(MVTR)，既能夠?yàn)閯?chuàng)面提供濕潤(rùn)的環(huán)境，又能夠防水；二是阻菌，防止外界細(xì)菌對(duì)創(chuàng)面的污染；三是安全性高，不會(huì)產(chǎn)生二次傷害[2-3]，能夠提供適合細(xì)胞生長(zhǎng)、遷移的微環(huán)境，促進(jìn)皮膚愈合。

研究表明羧甲基殼聚糖能夠促進(jìn)皮膚細(xì)胞的生長(zhǎng)，并且抑制瘢痕形成，另外，羧甲基殼聚糖具有一定的抑菌性能，能夠預(yù)防細(xì)菌對(duì)創(chuàng)面的感染。本研究中利用羧甲基殼聚糖能夠促進(jìn)創(chuàng)面愈合及聚乙烯醇縮丁醛(PVB)的快速成膜的性能，構(gòu)建一種創(chuàng)面復(fù)合液體敷料，通過對(duì)其防水、透氣、阻菌性能、安全性進(jìn)行評(píng)價(jià)，找到組合的最佳比例，并將其應(yīng)用在SD大鼠創(chuàng)面模型中進(jìn)行效果評(píng)價(jià)[4]。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：Sprague-Dawley(SD)大鼠40只，雌雄各半，體重200～220 g，由浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院提供，合格證號(hào)SCXK(浙)2014—0001，自由攝食飲水，光照：12 h明/12 h暗，在實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)1周后進(jìn)入實(shí)驗(yàn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

TSJ-Q全自動(dòng)封閉式組織脫水機(jī)、BMJ-III型組織包埋機(jī)、PHY-III型病理組織漂洪儀均購(gòu)自常州中威電子儀器有限公司，HM315R石蠟切片機(jī)購(gòu)自上海倍曼生物科技有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)材料

羧甲基殼聚糖(CMC)購(gòu)自上海海曲公司，聚乙烯醇縮丁醛(PVB)購(gòu)自上海第一試劑廠，乙酸乙酯購(gòu)自南京化學(xué)試劑有限公司，MTT購(gòu)自Ruibio(德國(guó))，粘質(zhì)沙雷菌由南通大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)中心贈(zèng)送，小鼠成纖維細(xì)胞(L929)購(gòu)自上海酶聯(lián)生物科技有限公司。

1.4 方法

1.4.1 創(chuàng)面復(fù)合液體敷料的制備

本實(shí)驗(yàn)中制造的新型創(chuàng)面復(fù)合液體敷料分上下二層，具體制備過程如下：

上層膜液：將2.0 g/mL PVB溶于50 mL乙酸乙酯并與95%乙醇(1∶8 V/V)混合，(37±0.5)℃恒溫水浴箱中放置過夜至完全溶解，然后保存在密閉的容器中。

下層膜液：將CMC溶于生理鹽水分別配成1.0、10.0及30.0 mg/mL的溶液。

組合：將適量下層膜液滴加在創(chuàng)面上，再在其上涂加上層膜液，靜置30 s后成膜，即得到創(chuàng)面復(fù)合液體敷料。

1.4.2 防水性試驗(yàn)

將上層膜液倒入培養(yǎng)皿中，制成厚度為1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mm的膜，按照國(guó)家醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《接觸性創(chuàng)面敷料試驗(yàn)方法第3部分：阻水性》(YY/T 0471.3—2004)對(duì)上層膜的防水性進(jìn)行測(cè)試，具體如下：將膜裁剪成1 cm×2 cm大小，且固定在容器的底部，并在容器中加注500 mm靜水壓，出現(xiàn)滲水計(jì)時(shí)停止。

1.4.3 透氣性(MVTR)試驗(yàn)

按照國(guó)家醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《接觸性創(chuàng)面敷料試驗(yàn)方法第2部分：透氣膜敷料水蒸氣透過率》(YY/T 0471.2—2004)進(jìn)行透氣性測(cè)試，具體如下：將上層膜(厚度與防水性試驗(yàn)相同)固定在瓶口面積為10 cm2的容器口，容器內(nèi)放滿水，并計(jì)重W1。在恒溫為(37±0.5)℃、相對(duì)濕度<20%的空間里放置24 h后再稱量W2，并計(jì)算透氣性。

MVTR=(W1-W2)×10 000×24/T

(1)

1.4.4 阻菌性試驗(yàn)

按照接觸性創(chuàng)面敷料阻菌性試驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)[5]對(duì)上層膜的阻菌性能進(jìn)行測(cè)試，檢查被樣品覆蓋的表面積內(nèi)是否有粘質(zhì)沙雷菌紅色菌落生長(zhǎng)。

1.4.5 生物相容性評(píng)價(jià)

按照Borghi報(bào)道的方法[6]進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)組分別為上層膜的DMEM培養(yǎng)基浸提液及1.0、10.0及30.0mg/mLCMC創(chuàng)面復(fù)合液體敷料，組別分別設(shè)為實(shí)驗(yàn)組a、實(shí)驗(yàn)組b、實(shí)驗(yàn)組c、實(shí)驗(yàn)組d。然后對(duì)其生物兼容性進(jìn)行評(píng)價(jià)。

1.4.6 建立皮膚潰瘍模型及分組

參照周氏造模方法，選取SD大鼠40只，雌雄各半，體重200～220g。在SD大鼠背部造直徑為1cm創(chuàng)面，深至筋膜。將造模成功的SD大鼠隨機(jī)分成4組：對(duì)照組及創(chuàng)面復(fù)合液體敷料治療組(CMC濃度分為1.0、10.0、30.0mg/mL等3組)。創(chuàng)面復(fù)合液體敷料的治療是先在大鼠體表皮膚創(chuàng)面處先涂下層膜液，然后再涂抹上層膜液，30s左右上層膜液即成膜。

1.4.7 愈合面積及病理

分別在1、4、7、11d觀察動(dòng)物創(chuàng)面，并拍攝照片，采用photoshop計(jì)算其面積，繪制未愈合傷口面積隨時(shí)間的變化曲線。分別在7和12d處死動(dòng)物，進(jìn)行組織病理學(xué)觀察。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用SPSS 13.0對(duì)各組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)做單因素方差分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 創(chuàng)面復(fù)合液體敷料的構(gòu)建

構(gòu)建的創(chuàng)面復(fù)合液體敷料的結(jié)構(gòu)如圖1所示，該敷料包括上下兩層，在使用前均為液體。使用時(shí)先將底液涂抹在創(chuàng)面上，形成凝膠，覆蓋整個(gè)創(chuàng)面，然后在其上涂抹上層膜液，膜液會(huì)迅速形成膜，并且與周圍皮膚良好的結(jié)合，對(duì)創(chuàng)面進(jìn)行封閉，能夠有效地對(duì)創(chuàng)面形成保護(hù)。

2.2 創(chuàng)面復(fù)合液體敷料的防水透氣性

構(gòu)建的創(chuàng)面復(fù)合液體敷料的防水、透氣主要由上層膜起作用，因此對(duì)上層膜的防水、透氣性進(jìn)行測(cè)試，結(jié)果見圖2。隨著膜厚度的增加，防水性能不斷提高，厚度約為1.79 mm在300 s時(shí)出現(xiàn)滲水，厚度達(dá)到3 mm時(shí)，則超過700 s都不會(huì)有滲水現(xiàn)象。

圖2 創(chuàng)面復(fù)合液體敷料上層膜的防水、透氣性Fig.2 Waterproof and permeability of the upper layer of wound composite liquid dressing

膜的透氣性伴隨的膜厚度的增加而下降，當(dāng)膜的厚度為2.3 mm時(shí)，透氣率低于1 000 g·m-2·24 h-1，當(dāng)膜的厚度進(jìn)一步增加，達(dá)到3 mm時(shí)，透氣率低于150 g·m-2·24 h-1。根據(jù)前期研究[7]，優(yōu)良的皮膚敷料防水時(shí)間應(yīng)該超過300 s，透氣率的理想值應(yīng)高于1 000 g·m-2·24 h-1，因此該復(fù)合液體敷料的上層膜液的厚度應(yīng)選擇在1.8～2.3 mm之間。

2.3 阻菌性

阻菌性主要由上層膜起作用。在本試驗(yàn)中，上層膜的厚度選擇1.8 mm，結(jié)果見圖3。經(jīng)過培養(yǎng)，對(duì)照組(紗布)有黏質(zhì)沙雷氏菌的生長(zhǎng)，而上層膜沒有產(chǎn)生黏質(zhì)沙雷氏菌，說明上層PVB膜具有良好的阻菌性，能夠起到良好的阻擋外界細(xì)菌對(duì)創(chuàng)面污染的作用。

圖3 創(chuàng)面復(fù)合液體敷料的阻菌性結(jié)果 (a) 對(duì)照組；(b) 實(shí)驗(yàn)組Fig.3 The result of bacterial resistance for the wound composite liquid dressing (a)control group; (b)experimental group

2.4 細(xì)胞毒性評(píng)價(jià)

從圖4 中可以看出，對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組a、實(shí)驗(yàn)組b、實(shí)驗(yàn)組c、實(shí)驗(yàn)組d的OD值分別為1.239、1.207、1.341、1.091、0.972。由OD值可以得出上層膜液形成膜后的浸提液無細(xì)胞毒性。創(chuàng)面復(fù)合液體敷料其下層的底液為1.0、10.0、30.0 mg/mL 羧甲基殼聚糖(CMC)的浸提液對(duì)其進(jìn)行評(píng)價(jià)發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞毒性與測(cè)試物的濃度成正比，當(dāng)濃度為30.0 mg/mL時(shí)，其OD 值與對(duì)照組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。而1.0 mg/mL CMC 組的OD 值比對(duì)照組還要高，這可能是CMC能夠促進(jìn)細(xì)胞快速貼壁，加快了細(xì)胞的生長(zhǎng)速度。進(jìn)一步說明該創(chuàng)面液體復(fù)合敷料沒有細(xì)胞毒性，有促進(jìn)創(chuàng)面愈合的效果。

圖4 創(chuàng)面復(fù)合液體敷料細(xì)胞毒性(**表示與對(duì)照組相比，P<0.01)Fig.4 Cell toxicity of the wound composite liquid dressing(*compared with the control, P<0.01)

2.5 傷口愈合結(jié)果

圖5中第4 d各組創(chuàng)面愈合率出現(xiàn)差異，分別為17.69%、31.13%、36.58%、34.10%。可以看出，含有10.0 mg/mL CMC組與對(duì)照組比較具有差異性(P<0.05)；第7 d含有10.0、30.0 mg/mL CMC組的大鼠創(chuàng)面愈合率分別為65.42%、67.38%，明顯高于對(duì)照組且存在顯著性差異(P<0.01)。同時(shí)，從圖6看以觀察到，對(duì)照組結(jié)痂不明顯，并且創(chuàng)面仍未有愈合的跡象；在10.0、30.0 mg/mL CMC的復(fù)合液體敷料組的痂已較好地覆蓋了創(chuàng)面，同時(shí)創(chuàng)面面積在不斷減小。這進(jìn)一步說明，當(dāng)CMC濃度大于10.0 mg/mL時(shí)，能夠快速促進(jìn)創(chuàng)面的愈合。

圖5 大鼠創(chuàng)面愈合率(與對(duì)照組相比，*表示P<0.05，**表示P<0.01)Fig.5 The rate of Wound healing in rats(compared with the control, *indicates P<0.05,** indicates P<0.01)

圖6 大鼠第7 d創(chuàng)面愈合。 (a) 對(duì)照組；(b) 1.0 mg/mL CMC；(c) 10.0 mg/mL CMC;(d) 30.0 mg/mL CMCFig.6 Schematic diagram of wound healing in seventh days of rats. (a) Control group； (b) 1.0 mg/mL CMC；(c) 10.0 mg/mL CMC;(d) 30.0 mg/mL CMC

2.6 病理結(jié)果

圖7 大鼠皮膚組織第7 d。 (a) 對(duì)照組；(b) 1.0 mg/mL CMC；(c) 10.0 mg/mL CMC; (d) 30.0 mg/mL CMCFig.7 HE staining in seventh days for skin tissue of rat. (a) Control group； (b) 1.0 mg/mL CMC；(c) 10.0 mg/mL CMC; (d) 30.0 mg/mL CMC

對(duì)7和12 d進(jìn)行病理檢查。從圖7中可以看出，在7 d對(duì)照組中沒有觀察到表皮的形成，并且有炎癥。在1.0 mg/mL CMC的復(fù)合液體敷料組中，有幾層薄薄的表皮覆蓋在傷口區(qū)域，還有一個(gè)不完整的粒狀組織。而10.0、30.0 mg/mL CMC的復(fù)合液體敷料組中觀察到有復(fù)層扁平的表皮和真皮的膠原纖維。

在12 d時(shí)，可以觀察到10.0、30.0 mg/mL CMC的復(fù)合液體敷料組中組織開始出現(xiàn)內(nèi)陷結(jié)構(gòu)，含有厚實(shí)、粗糙膠原纖維的正常真皮與較薄的膠原纖維水平連接，表皮的復(fù)層鱗狀上皮遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于對(duì)照組中的3～4層。而且，創(chuàng)面連接真皮結(jié)締組織，它的表皮構(gòu)成非常接近于正常皮膚組織。

圖8 大鼠皮膚組織第12 d HE染色。 (a) 對(duì)照組；(b) 1.0 mg/mL CMC；(c) 10.0 mg/mL CMC; (d) 30.0 mg/mL CMCFig.7 HE staining in seventh days and 12 days for skin tissue of rat. (a) Control group； (b) 1.0 mg/mL CMC； (c) 10.0 mg/mL CMC;(d) 30.0 mg/mL CMC

3 討論

當(dāng)皮膚遭受急性損害時(shí)，外界的細(xì)菌、污物等會(huì)侵蝕創(chuàng)面，極易引起創(chuàng)面感染，從而造成創(chuàng)面的修復(fù)時(shí)間延長(zhǎng)[8]。因此，構(gòu)建一種能夠及時(shí)并有效地覆蓋創(chuàng)面的敷料，防止外界細(xì)菌感染，控制創(chuàng)面細(xì)菌數(shù)量，能夠加快創(chuàng)面的愈合。目前傳統(tǒng)的用于創(chuàng)面?zhèn)谧o(hù)理的敷料主要是紗布、創(chuàng)可貼等，存在很多缺點(diǎn)，如易與創(chuàng)面粘連，換藥時(shí)會(huì)產(chǎn)生二次損傷，加重患者疼痛感，另外紗布無法阻擋外界細(xì)菌感染等[9]。傳統(tǒng)的愈合觀念被‘濕性愈合’觀念打破。1962年，George Winter首先提出了濕性愈合，他發(fā)現(xiàn)濕潤(rùn)環(huán)境下的創(chuàng)面愈合速度是干燥環(huán)境下的2倍，這是因?yàn)閯?chuàng)面周圍濕潤(rùn)環(huán)境能夠促進(jìn)創(chuàng)面邊緣細(xì)胞遷移[10]。隨著敷料的迅速發(fā)展，濕性敷料開始占據(jù)整個(gè)敷料市場(chǎng)發(fā)展的主導(dǎo)位置。市面上常見的液體敷料主要是混合型液體創(chuàng)貼，干燥速度較慢，生物兼容性差，防水、透氣不能同時(shí)具備[11-12]。因此，我們制備了一種快速覆蓋皮膚創(chuàng)面的復(fù)合液體敷料。該復(fù)合液體敷料上層膜液能夠快速成膜，防止二次污染，并具備良好的防水、透氣性；下層膜液能夠?yàn)閯?chuàng)面提供濕潤(rùn)的環(huán)境，從而使傷口快速愈合。

水蒸氣滲透率是決定敷料舒適度一個(gè)很重要的因素。理想的敷料應(yīng)保持最優(yōu)的水蒸氣傳輸速率和防水率。Queen等報(bào)道：透氣率在1 000～2 500 g-2d-1之間將提供充足的水分，防止脫水及滲出液積聚。但當(dāng)高于2 500 g-2d-1時(shí)會(huì)讓傷口更快地干涸，產(chǎn)生疤痕；低于1 000 g-2d-1時(shí)積累滲出，這將導(dǎo)致增長(zhǎng)細(xì)菌的風(fēng)險(xiǎn)。本文研制的復(fù)合液體敷料的防水透氣膜厚度低于2.3 mm時(shí)，透氣率超過1 000 g-2d-1。另外，防水性也是皮膚敷料一個(gè)重要的指標(biāo)，隨著防水膜的厚度減少到1.79 mm，膜在300 s時(shí)開始出現(xiàn)滲水。因此，復(fù)合液體敷料的上層膜的膜厚度應(yīng)該在1.8～2.3 mm之間比較合適。能夠起到良好的防水、透氣及阻菌的作用。

羧甲基殼聚具有良好的水溶性和更快的生物降解性[13]，大大拓展了應(yīng)用領(lǐng)域。如其能促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)及修復(fù)的能力[14]，亦可作為藥物緩釋控制[15]及神經(jīng)修復(fù)材料[16]，也能止血[17]。本研究中利用了羧甲基殼聚在創(chuàng)面修復(fù)方面的特性，避免上層膜液與創(chuàng)面直接接觸，減少了皮膚產(chǎn)生炎癥反應(yīng)。敷料中的羧甲基殼聚糖的濃度越大，創(chuàng)面愈合的效果越好，故該創(chuàng)面復(fù)合液體敷料的底液CMC的濃度選擇10.0 mg/mL。

4 結(jié)論

本研究所制備的創(chuàng)面復(fù)合液體敷料分為兩層，上層是以PVB膜液，下層以羧甲基殼聚糖為主的膠液。上層膜液速干，與創(chuàng)面緊密貼合，防水、抗菌、透氣，并為底液提供濕潤(rùn)、無菌的良好愈合環(huán)境。下層羧甲基殼聚糖具有良好的生物相容性、可降解性，且無毒副作用，可明顯促進(jìn)正常皮膚成纖維細(xì)胞的增殖，從而抑制瘢痕疙瘩皮膚成纖維細(xì)胞的增殖，防止疤痕增生，有利于外觀和功能的恢復(fù)，使傷口得到高質(zhì)量愈合。從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，創(chuàng)面復(fù)合液體敷料能夠快速促進(jìn)創(chuàng)面愈合，提高創(chuàng)面愈合的質(zhì)量。所以，利用創(chuàng)面復(fù)合液體敷料能使創(chuàng)面的及早覆蓋，能夠有效減少感染的風(fēng)險(xiǎn)，加快創(chuàng)面的愈合。

[1] Madaghiele M, Demitri C, Sannino A, et al. Polymeric hydrogels for burn wound care: Advanced skin wound dressings and regenerative templates[J]. Burns and Trauma, 2014, 2(4): 153-161.

[2] Naguib G, Al-Mashat H, Desta T, et al. Diabetes prolongs the inflammatory response to a bacterial stimulus through cytokine dysregulation[J]. Journal of Investigative Dermatology, 2004, 123(1): 87-92.

[3] Goren I, Müller E, Pfeilschifter J, et al. Severely impaired insulin signaling in chronic wounds of diabetic ob/ob mice: a potential role of tumor necrosis factor-α[J]. The American Journal of Pathology, 2006, 168(3): 765-777.

[4] Luo Yangchao, Teng Zi, Chen Pei, et al. Encapsulation of indole-3-carbinol and 3, 3′-diindolylmethane in zein/carboxymethyl chitosan nanoparticles withcontrolled release property and improved stability[J]. Food Chemistry, 2013, 139(1): 224-230.

[5] 王文慶, 侯麗, 吳平, 等. 接觸性創(chuàng)面敷料阻菌性試驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)介紹及改進(jìn)構(gòu)想[J]. 中國(guó)醫(yī)療器械信息, 2010, 16(7): 40-41.

[6] Borghi AA, Oliveiranascimento L, Stephano MA, et al. Cytotoxicity of doxycycline effluent generated by the fenton process[J]. The Scientific World Journal, 2013,2014:439461-439461.

[7] Queen D, Gaylor JDS, Evans JH, et al. The preclinical evaluation of the water vapour transmission rate through burn wound dressings[J]. Biomaterials, 1987, 8(5): 367-371.

[8] 劉德伍, 劉德明. 組織工程化人工皮膚的構(gòu)建與應(yīng)用[J]. 中國(guó)臨床康復(fù), 2002, 6(10): 1421-1422.

[9] Rasuli S, Lotfi M, Seyedamini B, et al. The effects of biological, synthetic and traditional dressing on pain intensity of burn wound in children[J]. Iran Journal of Nursing, 2013, 26(85): 15-25.

[10] Winter GD. Formation of the scab and the rate of epithelization of superficial wounds in the skin of the young domestic pig[J]. 1995,4(8):368-371.

[11] Qu Meijun, Wang Weiqing. Efficacy observation of dermlin for skin injury of the neck in throat cancer patients accepted radiotherapy[J]. China Pharmacy, 2013, 18: 028.

[12] Wei Wei, Wang Yumei. Effect of dermlin wound healing enhancer (paste) on persistent amiodarone therapy induced phlebitis[J]. Journal of Nursing Science, 2012, 20: 046.

[13] Wang Lingchong, Chen Xiguang, Xu Chenquan, et al. Plasma protein adsorption pattern and tissue-implant reaction of poly(vinylalcohol)/carboxymethyl-chitosan blend films[J]. Journal of Biomaterials Science, Polymer Edition, 2008, 19(1): 113-129.

[14] Ho YC, Wu SJ, Mi FL, et al. Thiol-modified chitosan sulfate nanoparticles for protection and release of basic fibroblast growth factor[J]. Bioconjugate chemistry, 2009, 21(1): 28-38.

[15] Liang Xiaofei, Tian Hui, Luo Hao, et al. Novel quaternized chitosan and polymeric micelles with cross-linked ionic cores for prolonged release of minocycline[J]. Journal of Biomaterials Science, Polymer Edition, 2009, 20(1): 115-131.

[16] Wang Gan, Lu Guangyuan, Ao Qiang, et al. Preparation of cross-linked carboxymethyl chitosan for repairing sciatic nerve injury in rats[J]. Biotechnology Lsetters, 2010, 32(1): 59-66.

[17] 吳偉萍, 彭承宏, 韓寶三, 等. 羧甲基殼聚糖在大鼠創(chuàng)傷出血模型的止血效果的觀察[J]. 外科理論與實(shí)踐, 2010, 15(3): 240-244.

The Fabrication of Composite Liquid Dressing and Applications in Skin Wound Healing

Chen Yanpei1?Xia Donglin2?Wang Yufei2,3Chen Chao2,3Shen Lingling4Gu Haiying1,2,3He Hong5*

1(NantongUniversityXinglinCollege,Nantong226019,Jiangsu,China)2(SchoolofPublicHealth,NantongUniversity,Nantong226019,Jiangsu,China)3(NantongTongdaChemicalsSafetyEvaluationCenterCo.LTD,Nantong226019,Jiangsu,China)4(InstitueofNauticalMedicine,NantongUniversity,Nantong226019,Jiangsu,China)5(AffiliatedHospitalofNantongUniversity,Nantong226001,Jiangsu,China)

The aim of this study is to investigate the effect of the composite liquid dressing in the treatment of acute skin ulcer for further applications in the prevention of surgical wound infection and promotion of wound healing. The composite liquid dressing (CLD) was prepared by carboxymethyl chitosan (CMC), polyvinyl butyral (PVB) and ethanol solution, according to the certain formulation. The performance and biological safety of CLD were evaluated by experiments of waterproof, breathable, bacteria resistance, and cell toxicity. Forty healthy adult SD rats, half male and half female, were made wound, carboxymethyl chitosan meanwhile different concentration at 1.0 mg/mL, 10.0 mg/mL, 30.0 mg/mLwas applied to the wound. The therapeutic effect of the wound composite liquid dressing was studied by daily observation and HE staining. The upper membrane liquid of CLD between 1.8～ 2.3 mm had very good waterproof permeability and resistance to bacteria. In animal models, the wound healing rate of the experimental group (10.0 and 30.0 mg/mL CMC) was 65.42% and 67.38%, which was higher than that of control group with significant difference (P< 0.01) on the 7thday. The wound healing rate of the experimental group (10.0 and 30.0 mg/mL CMC) was 100% on the 14thday. Seven days after the operations, the wound healing rate of the experimental group (10.0 and 30.0 mg/mL CMC), the stratified squamous epithelium that formed the epidermis and the dermis consisted of thin collagen fibers. The organization began to fall into the interior; the normal dermis with a thick, coarse collagen fiber was connected to a thin collagen fiber. The stratified squamous epithelium of the epidermis was much larger than that of the control group from 3 to 4. The wound was connected with dermal connective tissue. The skin was very close to the normal skin on the 12thday. The results showed that the dressing functioned (10.0 mg/mL CMC ) as a good barrier against the penetration of infection, it was waterproof, had a suitable water vapor transmission rate, good biosafety and a rapid wound closure rate.

new composite liquid dressing; acute skin ulcer model; carboxymethyl chitosan; polyvinyl butyral

10.3969/j.issn.0258-8021. 2016. 04.009

2015-09-16， 錄用日期:2016-04-12

江蘇省自然科學(xué)基金(BK2012651)

R318

A

0258-8021(2016) 04-0453-07

?共同第一作者

*通信作者(Corresponding author)， E-mail: honghe@ntu.edu.cn