李中堯，何英姿

（廣西師范學(xué)院化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，廣西 南寧 530001）

紅花酢漿草抗氧化活性研究

李中堯，何英姿

（廣西師范學(xué)院化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，廣西 南寧 530001）

采用DPPH法分別對紅花酢漿草的根莖、葉子、花等部位的極性提取物進(jìn)行抗氧化活性測試，結(jié)果表明，隨著提取物濃度的增大，其對DPPH自由基的清除能力越強；其中紅花酢漿草根莖的乙酸乙酯提取物對DPPH的清除率達(dá)90%以上。紅花酢漿草的根莖、花、葉均具有良好的抗氧化活性，以酢漿草根莖最為突出。

紅花酢漿草；提取物；抗氧化活性

生命活動過程中必定產(chǎn)生自由基，生命體內(nèi)的自由基濃度過高會造成細(xì)胞損傷，誘發(fā)一系列的疾病，如衰老、炎癥、心血管、腫瘤等［1-5］。因此，清除體內(nèi)過多的自由基有助于預(yù)防和治療多種疾病。近年來，大量的研究發(fā)現(xiàn)，中草藥有利于清除體內(nèi)過多的自由基，具有延緩衰老、保健等作用。

紅花酢漿草又名銅錘草、紫花酢漿草、大酸味草等，主要分布于我國河北、陜西、華北、華中、華南、四川和云南等地［6］。紅花酢漿草既可入藥又能食用，同時也是優(yōu)良的蜜源植物［7-8］。據(jù)報道，紅花酢漿草葉子具有很強的抗氧化活性［9］。DPPH（1，1-二苯基苦基苯肼）是一種穩(wěn)定的有機自由基，研究表明，DPPH法是一種能夠快速、簡便、靈敏地評估植物抗氧化能力的可行方法［10］。本文采用DPPH法測試紅花酢漿草根莖、葉子、花等部位的不同極性提取物的抗氧化活性，旨在為紅花酢漿草的開發(fā)和利用提供數(shù)據(jù)參考。

1 材料和方法

1.1 實驗材料

實驗所用紅花酢漿草均采自廣西師范學(xué)院明秀校區(qū)。

1.2 實驗方法

將采集的紅花酢漿草分為根莖、葉子和花3個部分，并分別洗凈陰干，粉碎備用。將酢漿草粗粉分別放入浸泡缸中，加入95%乙醇浸泡7d，浸泡期間定時攪拌，抽濾旋干，得紅花酢漿草各部分浸膏。連續(xù)浸泡3次，將所得的浸膏合并，分別得到紅花酢漿草根莖的粗提物（RCGE）、紅花酢漿草葉子的粗提物（RCYE）和紅花酢漿草花的粗提物（RCFE）。

將上述紅花酢漿草各部分的粗提物加入適量蒸餾水制成懸濁液，并分別用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取。將萃取后的提取液減壓濃縮成浸膏，得到根莖部分的石油醚相（RCGE1）、氯仿相（RCGE2）、乙酸乙酯相（RCGE3）、正丁醇相（RCGE4）及水相（RCGE5）。葉子部分的石油醚相（RCYE1）、氯仿相（RCYE2）、乙酸乙酯相（RCYE3）、正丁醇相（RCYE4）及水相（RCYE5）。花部分的石油醚相（RCFE1）、氯仿相（RCFE2）、乙酸乙酯相（RCFE3）、正丁醇相（RCFE4）及水相（RCFE5）。

1.3 試劑配制

DPPH溶液的配制：準(zhǔn)確稱量DPPH 0.0197g（M=394.32），用無水乙醇溶解定容至250mL即得到DPPH濃度為2×10-4mol·L-1的乙醇溶液，備用，避光冷藏。

樣液的配制：準(zhǔn)確稱量待測樣品0.0010g，取1mL無水乙醇將其溶解，得到1mg·mL-1的原液。分別取原液0.05mL、0.10mL、0.15mL、0.20mL、0.25mL，并將其稀釋至0.05mg·mL-1、0.10mg·mL-1、0.15 mg·mL-1、0.20 mg·mL-1、0.25 mg·mL-1。

蘆丁溶液配制：準(zhǔn)確稱量蘆丁0.0010g，取1mL無水乙醇將其溶解，得到1mg·mL-1的原液。分別取原液0.05mL、0.10mL、0.15mL、0.20mL、0.25mL，并將其稀釋至0.05mg·mL-1、0.10mg·mL-1、0.15mg·mL-1、0.20mg·mL-1、0.25mg·mL-1。

2 酢漿草各部分提取物的DPPH自由基清除能力的測定

分別向各比色管中加入2.0mL不同濃度的樣品溶液（或者蘆丁溶液），每支試管中各加入2.0mL濃度為2.0×10-4mol·L-1的DPPH溶液，充分搖勻后，于常溫下黑暗處靜置30min，以無水乙醇作為參比，測定其在517nm處的吸光度，記為Ai。同時測定2.0mL無水乙醇與2.0mL DPPH溶液混合后的吸光度值，記為A0。2.0mL無水乙醇和2.0mL樣品溶液（或者蘆丁溶液）混合后的吸光度，記為Aj。

式中：A0為2.0mL DPPH溶液+2.0mL無水乙醇混合后的吸光度；

Ai為2.0mL DPPH溶液+2.0mL樣品溶液（或蘆丁溶液）混合液的吸光度；

Aj為2.0mL無水乙醇+2.0mL樣品溶液（或蘆丁溶液）混合液的吸光度。

3 結(jié)果與分析

圖1 紅花酢漿草根莖部分不同極性提取物以及蘆丁對DPPH自由基清除作用的測定

圖1是紅花酢漿草根莖部分的不同極性提取物以及蘆丁對DPPH自由基清除作用的測定結(jié)果。由圖1可以看出，在測試濃度低于0.25mg·mL-1時，紅花酢漿草根莖各極性部分的清除率隨濃度增大而增強，其中RCGE3（乙酸乙酯相）的活性最強，其對DPPH自由基清除作用和蘆丁的清除作用最為接近，其濃度為0.05mg·mL-1時對DPPH自由基的清除率達(dá)90%。而RCGE5（水相）的活性最弱。RCGE2（氯仿相）、RCGE4（正丁醇相）、RCGE1（石油醚相）對DPPH自由基均具有良好的清除能力。

圖2是紅花酢漿草葉子部分的不同極性提取物以及蘆丁對DPPH自由基清除作用的測定結(jié)果。根據(jù)實驗所測得的數(shù)據(jù)可知，在測試濃度低于0.25mg·mL-1時，紅花酢漿草葉子部分各極性提取物的清除率均隨濃度增加而增強，RCYE3（乙酸乙酯相）遞增最快，其清除DPPH的能力均強于其他各相。當(dāng)RCYE3（乙酸乙酯相）濃度為0.25mg·mL-1時，DPPH自由基的清除率達(dá)67.06%。因此，由圖2可知，紅花酢漿草葉子部分對強自由基有良好的清除作用。

圖2 紅花酢漿草葉子部分不同極性提取物以及蘆丁對DPPH自由基清除作用的測定

圖3是紅花酢漿草花部分的不同極性提取物以及蘆丁對DPPH自由基清除作用的測定結(jié)果。由圖3可知，當(dāng)測試濃度在0.05～0.25mg·mL-1之間，樣品對DPPH自由基的清除率強弱順序依次為RCFE3（乙酸乙酯相）＞RCFE4（正丁醇相）＞RCFE1（石油醚相）＞RCFE2 （氯仿相）＞RCFE5（水相）。在0.05～0.25mg·mL-1時，RCFE3和RCFE4遞增速率最大，RCFE1和RCFE2遞增速率稍弱，RCFE5遞增速率最弱。當(dāng)濃度為0.25mg·mL-1，RCFE3和RCFE4對DPPH的清除率分別為78.95%、77.05%。因此，紅花酢漿草花部分對DPPH自由基有良好的清除作用。

圖3 紅花酢漿草花部分不同極性提取物以及蘆丁對DPPH自由基清除作用的測定

4 小結(jié)

本文以蘆丁作為對照，分別對紅花酢漿草的根莖、葉子和花等部位的不同極性提取物進(jìn)行DPPH自由基抗氧化活性測試。結(jié)果表明，紅花酢漿草的根莖、葉子和花3個部位均具有良好的抗氧化活性。其中根莖部分的抗氧化活性較強，花部分活性相對較弱，葉子的活性最弱。在紅花酢漿草各部位的極性提取物中，乙酸乙酯相的抗氧化活性均最強，正丁醇相次之，氯仿相和石油醚相的活性相對較弱，水相的抗氧化活性最弱。

本實驗僅對紅花酢漿草進(jìn)行了自由基清除活性進(jìn)行測定，其確切的有效成分還有待進(jìn)一步的分析確認(rèn)。

［1］ 趙俊，等. 20種中草藥醇提液與水提液清除自由基活性的比較［J］.天津中醫(yī)藥，2007，24（1）：67-70.

［2］ 李春陽，等. DPPH法測定葡萄籽原花青素清除自由基的能力［J］.食品與生物技術(shù)學(xué)報，2006，25（2）：102-106.

［3］ 吳朝霞，王媛，張琦，孫希云.改進(jìn)的DPPH法測定葡萄籽原花青素抗氧化能力研究［J］.中國釀造，2008（20）：77-79.

［4］ 劉薇，王宏君，等.鄰二氮菲-Fe2+法測定保健食品的抗氧化能力［J］.食品科學(xué)，2010，31（18）：333-337.

［5］ 賈之慎，鄔建敏，等.比色法測定Fenton反應(yīng)產(chǎn)生的羥基自由基［J］.生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展，1996，23（2）：184-186.

［6］ 楊紅原，趙桂蘭，王軍憲.紅花酢漿草化學(xué)成分研究［J］.西北藥學(xué)雜志， 2006，21（4）：156-158.

［7］ 張中印，劉荷芬，余昊，孫玲.銅錘草蜜源的觀察與研究［J］.蜜蜂雜志， 2005（11）：7-8.

［8］ 王俊輝，萬紅輝，楊敏群.紅花酢漿草和雪茄花［J］.中國蜂業(yè)，2006（5）：30.

［9］ 李若男.酢漿草清除自由基DPPH有機自由基活性研究［J］.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2010，37（4）：744-747.

［10］ 丁良，等.酢漿草提取物體外抗氧化活性研究［J］.遼寧中醫(yī)雜志，2011，28（10）：2055-2057.

Research on Antioxidant Activity of Oxalis Corymbosa DC

LI Zhong-yao， HE Ying-zi
（College of Chemistry and Life Science， Guangxi Teachers Education University， Nanning 530001， China）

The antioxidant activity of oxalis corymbosa DC in vitro was studied. An antioxidant activity test on polarity extracts from rhizome， leaf， fower of oxalis corymbosa DC， was carried out by DPPH method. The results showed that with the extracts concentration of oxalis corymbosa DC increased， the eliminating capability on DPPH free radicals was gradually enhanced. DPPH clearance rate of ethyl acetate extract from rhizome of oxalis corymbosa DC was more than 90%. The rhizome， fower and leaf of oxalis corymbosa DC had good antioxidant activity， among which the most prominent was rhizome.

； extracts； antioxidant activity

R 284

A

1671-9905（2016）05-0027-03

李中堯（1990-），男，重慶人，碩士研究生，電話：15177909407，E-mail：zhongyao36@163.com

何英姿，博士，教授，碩士生導(dǎo)師

2016-03-15