袁人飛，鄧偉民*，韓麗萍，陳小香，3，蘇海容，3

（1.廣東藥學(xué)院，廣州510006；2.廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院，廣州510010；3.廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣州510403）

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研究進(jìn)展

成年生長(zhǎng)激素缺乏動(dòng)物模型與骨代謝相關(guān)研究進(jìn)展

袁人飛1，2，鄧偉民1，2*，韓麗萍2，陳小香2，3，蘇海容2，3

（1.廣東藥學(xué)院，廣州510006；2.廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院，廣州510010；3.廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣州510403）

【摘要】目的 探討成年生長(zhǎng)激素缺乏動(dòng)物模型的幾種建立方法，為實(shí)驗(yàn)研究和治療因生長(zhǎng)激素缺乏引起的骨代謝異常提供良好的模型。方法 通過查閱文獻(xiàn)，對(duì)成年生長(zhǎng)激素缺乏動(dòng)物模型的建立方法進(jìn)行綜述和評(píng)價(jià)。結(jié)果 成年生長(zhǎng)激素缺乏動(dòng)物模型可分為自發(fā)性生長(zhǎng)激素缺乏動(dòng)物模型、垂體切除動(dòng)物模型、基因敲除模型三種。結(jié)論 垂體切除動(dòng)物模型價(jià)格低廉，可操作性強(qiáng)，但受影響的因素較多，不適合于生長(zhǎng)激素與骨代謝之間關(guān)系的研究；自發(fā)性生長(zhǎng)激素缺乏動(dòng)物模型與基因敲除動(dòng)物模型價(jià)格高昂，但特異性缺乏生長(zhǎng)激素，利于研究生長(zhǎng)激素缺乏對(duì)骨代謝的影響。

【關(guān)鍵詞】生長(zhǎng)激素缺乏；動(dòng)物模型；骨代謝；胰島素樣生長(zhǎng)因子1

代謝性骨病是指機(jī)體因先天或后天性因素破壞或干擾了正常骨代謝和生化狀態(tài)，導(dǎo)致骨生化代謝障礙而發(fā)生的骨疾患。整個(gè)生命過程中，生長(zhǎng)激素（growth hormone，GH）與胰島素樣生長(zhǎng)因子-1（insulin-like growth factor-I，IGF-I）在體內(nèi)骨代謝平衡起了重要的調(diào)控作用［1-3］。GH可直接作用于骨骼細(xì)胞，但更多的是通過影響IGF-1的合成進(jìn)行調(diào)控，循環(huán)和骨骼局部的IGF-1在骨形成以及骨量的維護(hù)上起重要作用［4-6］。通過對(duì)成年生長(zhǎng)激素缺乏（growth hormone deficiency，GHD）患者進(jìn)行生長(zhǎng)激素治療發(fā)現(xiàn)，GH可以提高骨轉(zhuǎn)換，GH與IGF-1可能通過調(diào)控骨建立與骨重建來維持骨量，而這一時(shí)期GHD將增加患骨質(zhì)疏松癥的風(fēng)險(xiǎn)［7-8］。

骨質(zhì)疏松癥（osteoporosis，OP）是代謝性骨病中最為常見的一種，是骨形成與骨吸收平衡破壞導(dǎo)致骨密度降低、骨微結(jié)構(gòu)破壞、骨量低下為特征的全身性骨?。?］。OP患者血漿中GH濃度明顯低于正常值。正常人血液中的GH水平隨著年齡的增大而逐漸降低，到了60歲左右，男性體循環(huán)內(nèi)的GH濃度只有年青時(shí)的5% ～20%［10-12］。生長(zhǎng)激素抑制素也會(huì)隨年齡的增加而增加［13］。GH水平的降低與骨質(zhì)疏松有無(wú)直接聯(lián)系，目前還沒有準(zhǔn)確的定論。所以，建立一個(gè)成年后GHD的動(dòng)物模型，與老年OP患者的臨床實(shí)際情況更加切合，可以通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)來更好地研究GH與OP的關(guān)系。同時(shí)，GH缺乏也直接導(dǎo)致體循環(huán)中IGF-1缺乏，建立成年GHD動(dòng)物模型，可以進(jìn)一步了解GH-IGF-1軸與骨質(zhì)疏松間的相互聯(lián)系。

現(xiàn)有的研究OP的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ腿缛ヂ殉仓鹿琴|(zhì)疏松模型、去勢(shì)大鼠致骨質(zhì)疏松模型等也均為成年動(dòng)物造模，但并不是特異性減少腦垂體分泌的GH，而成年GHD致骨質(zhì)疏松癥動(dòng)物模型尚未建立。所以研究成年動(dòng)物缺乏腦垂體分泌GH的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，并建立成年GHD致骨質(zhì)疏松癥的動(dòng)物模型是非常迫切的。

1　自發(fā)性成年GHD動(dòng)物模型

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物未經(jīng)任何有意識(shí)的人工處理，在自然狀態(tài)下成年后缺乏GH、IGF-1的為自發(fā)性GHD。目前用于研究GHD的自發(fā)性動(dòng)物模型主要是由Lewis大鼠自然突變而來的矮種大鼠（dwarf rat）。

這種矮種大鼠在1985年由Sonntag首次發(fā)現(xiàn)于Lewis大鼠群落中［14］?，F(xiàn)有的研究顯示，Dwarf大鼠在促生長(zhǎng)激素細(xì)胞生長(zhǎng)所需的轉(zhuǎn)錄因子基因上發(fā)生了突變，并且這些突變基因是隱形遺傳的［15-16］。由于突變只影響促生長(zhǎng)激素細(xì)胞生長(zhǎng)所需的轉(zhuǎn)錄因子的合成，所以dwarf大鼠腦垂體中其他激素的分泌并不會(huì)發(fā)生變化，只降低腦垂體中GH的合成和血液中GH的濃度［17-18］。這種GH合成和分泌的顯著降低是在大鼠出生后的第26天才開始的，表現(xiàn)為成年后GHD［19］。在自發(fā)性突變的dwarf大鼠中，體循環(huán)GH濃度的減少十分顯著，僅為正常的Lewis大鼠的10%。GH依賴性IGF-1在肝內(nèi)的合成也同樣減少，體循環(huán)中IGF-1濃度顯著降低。

Dwarf大鼠屬于隱形基因遺傳，純合子的dwarf大鼠（矮種大鼠）體型較正常Lewis大鼠小。在建dwarf大鼠GHD模型時(shí)，純合子的dwarf雄性大鼠（Dw/Dw）和正常的Lewis雌性大鼠（Le/Le）進(jìn)行雜交繁育，產(chǎn)生雜合子（Le/Dw）后代，這種雜合子后代體型和正常的Lewis大鼠一樣。然后，體型正常的雜合子（Le/Dw）雌性后代與純合子的dwarf雄性大鼠（Dw/Dw）繼續(xù)雜交繁育，產(chǎn)生第三代。第三代有（Dw/Dw）和（Le/Dw）兩種基因型，正常體型和矮小體型兩種表現(xiàn)型。同窩出生的純合子與雜合子幼鼠在發(fā)育期（1～24 d）中體重并無(wú)明顯差異，第25天開始，正常嚙齒類動(dòng)物體內(nèi)的GH分泌將出現(xiàn)較大的增幅，在第30天時(shí)，純合子矮種大鼠與雜合子正常大鼠的體重差異開始具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）［20］。由于是同代同胞生，差異性較小，此時(shí)將大鼠分為實(shí)驗(yàn)組（Dw/Dw）和對(duì)照組（Le/Dw）兩個(gè)組別進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)。

由于Dwarf大鼠成年后特異性減少GH，不影響其他腦垂體分泌的激素，而GH與IGF-1具有促進(jìn)代謝的激素減少，有助于老年患者特有的表型模型的構(gòu)建，這些表型包括能量代謝和免疫功能的降低、神經(jīng)衰退及骨量的減少［21-22］。Sonntag研究發(fā)現(xiàn)生長(zhǎng)激素缺乏導(dǎo)致ATP水平的下降，血漿中IGF-1的水平與腦中葡萄糖的利用具有高度的相關(guān)性［14］。研究同時(shí)發(fā)現(xiàn)，Dwarf大鼠體循環(huán)內(nèi)IGF-1的濃度降低為正常大鼠的50%，而這個(gè)下降值和老年的嚙齒類動(dòng)物以及包括人在內(nèi)的老年哺乳類動(dòng)物體內(nèi)的下降值是一致的，進(jìn)一步完善了dwarf大鼠模型，為成年GHD模型提供了有力的證據(jù)［19］。

2　誘導(dǎo)性成年GHD動(dòng)物模型

用各種物理、化學(xué)方法損傷成年動(dòng)物垂體導(dǎo)致腦垂體分泌GH減少，如外科手術(shù)性、病毒性等，或者通過特異性基因敲除的分子生物學(xué)方法，特異性地敲除成年后垂體GH基因，導(dǎo)致垂體分泌GH減少。基因敲除性動(dòng)物模型目的性強(qiáng)，發(fā)病明確，可塑性強(qiáng)，是一種較為理想的成年GHD動(dòng)物模型，但是高成本限制了其應(yīng)用。而外科手術(shù)性GHD模型由于技術(shù)成熟，現(xiàn)應(yīng)用廣泛。

2.1 垂體切除動(dòng)物模型

臨床研究發(fā)現(xiàn)，垂體機(jī)能減退癥常導(dǎo)致成年后GH的缺乏，降低正常的生活質(zhì)量，表現(xiàn)為注意力不集中，疲乏，記憶力下降等［23］。給以GH治療可以很好地改善患者的生活質(zhì)量。實(shí)驗(yàn)中，常采用外科手術(shù)切除垂體的方式來建立垂體機(jī)能減退的模型。Wister大鼠是較為常用的一種垂體切除用大鼠，出生50 d后，通過腹側(cè)面進(jìn)行腦部垂體切除手術(shù)得到垂體切除動(dòng)物模型。除了生長(zhǎng)激素在垂體中合成分泌外，還有其他一些激素的合成與垂體具有直接或間接的關(guān)系，如催乳素（PRL）、促甲狀腺激素（TSH）、黃體生成素（LH）等［24］。垂體切除后，這些激素水平會(huì)出現(xiàn)相應(yīng)的下降，所以在建立大鼠缺乏垂體分泌GH模型時(shí)，通常會(huì)在垂體切除后，給大鼠甲狀腺素（andl-thyroxine）和氫化可的松（hydrocortisone），補(bǔ)充生長(zhǎng)激素外其他受影響的激素。

垂體切除致GHD動(dòng)物模型由于其成本較低，建立方法相對(duì)簡(jiǎn)單，現(xiàn)有較多的研究在使用這一模型。

2.2 基因敲除動(dòng)物模型

2.2.1 靶向敲除GHRH基因

下丘腦分泌的生長(zhǎng)激素釋放激素（growth hormone-releasing hormone）控制著GH細(xì)胞的生長(zhǎng)，以及GH的合成和分泌。大鼠中的GHRH基因有126個(gè)堿基對(duì)，建立動(dòng)物模型時(shí)，使用Neor（neomycin resistance cassette）代替了GHRH基因中內(nèi)含子2的一部分和外顯子3的大部分，獲得了GHRH基因突變的GHD大鼠模型［27-28］。在相關(guān)的研究中，雜合子（+/-）的雜交育種得到25.8%的正常后代（+/+），以及52.8%的雜合子（+/-）后代，21.4%的突變后代（-/-），說明GHRH基因的變異在大鼠身上未表現(xiàn)出致命性［28］。出生3周后，（-/-）大鼠開始表現(xiàn)出了較為明顯的生長(zhǎng)阻礙；12周后，突變鼠的體重僅為正常鼠的60%［27，29］。之后，該大鼠表現(xiàn)GH和IGF-1缺乏，同時(shí)GH mRNA和肝內(nèi)的IGF-1 mRNA水平下降。GHRH敲除大鼠表現(xiàn)出嚴(yán)重的骨縱向生長(zhǎng)缺陷，骨小梁體積減少，骨密質(zhì)降低。

還有一種轉(zhuǎn)基因的生長(zhǎng)遲緩鼠Tgr（transgenic growth-retarded）鼠也被用于GHD的研究。Tgr鼠垂體中GH含量下降到正常鼠的60%，分泌量則下降到正常鼠的50%。這個(gè)GHD模型的程度與成年GHD患者的情況極為相似，并且在分析GHD對(duì)骨強(qiáng)度的影響時(shí)，此模型比高度缺乏GH的Dwarf大鼠更加合適［30］。

2.2.2 AOiGHD動(dòng)物模型

成年后特異性缺乏GH（adult onset-isolated GH deficiency，AOiGHD）動(dòng)物模型是通過GH啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)誘導(dǎo)Cre重組酶的合成轉(zhuǎn)基因大鼠（Cre）與Cre誘導(dǎo)白喉毒素受體（Cre-inducible diphtheria toxin receptor，iDTR）合成的轉(zhuǎn)基因大鼠雜交育種得到的［31-32］。雜交后代有雜合子的（Cre+/-，iDTR+/-），以及無(wú)Cre重組酶合成的（Cre-/-，iDTR+/-）。在大鼠成年后（10～12周），對(duì)雜交后代進(jìn)行為期10 d的白喉毒素注射（DT），每天注射兩次，每次劑量為4 ng/（g·bw）。（Cre+/-，iDTR+/-）在DT干預(yù)后，在垂體前葉促生長(zhǎng)激素細(xì)胞族群中，由于GH啟動(dòng)子誘導(dǎo)了Cre合成，進(jìn)而合成了（白喉毒素受體）DTR，DT與DTR結(jié)合破壞組織細(xì)胞，這種破壞會(huì)導(dǎo)致循環(huán)中的GH與IGF-1水平的下降，表現(xiàn)出AOiGHD。而其他細(xì)胞群不合成GH，細(xì)胞中無(wú)Cre重組酶，未被破壞。（Cre-/-，iDTR+/-）后代則由于GH啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)不誘導(dǎo)Cre的合成，促生長(zhǎng)激素細(xì)胞族群在受到DT攻擊后，生長(zhǎng)正常。通過此類方法即可挑選出（Cre+/-，iDTR+/-）基因型，而（Cre-/-，iDTR+/-）基因型是實(shí)驗(yàn)組的同代同胞生大鼠，可作為GH正常控制的對(duì)照組。

這一模型的優(yōu)點(diǎn)在于GH的缺乏時(shí)間是可控的，針對(duì)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，可以設(shè)計(jì)不同時(shí)段的GHD模型。這種成年后的缺乏并不影響動(dòng)物前期的生長(zhǎng)，在靶向攻擊后，也不影響其他激素的合成與分泌，特異性的減少GH。Luque等［33］使用這一動(dòng)物模型研究GH對(duì)脂肪和蛋白質(zhì)代謝的影響，在實(shí)驗(yàn)中證實(shí)了（Cre-/-，iDTR+/-）大鼠只在垂體的促生長(zhǎng)激素細(xì)胞群中表達(dá)DTR，垂體的其他細(xì)胞系統(tǒng)生長(zhǎng)正常，并且DTR在無(wú)DT作用時(shí)并不影響促生長(zhǎng)激素細(xì)胞的合成和數(shù)量。實(shí)驗(yàn)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，在注射DT后，促生長(zhǎng)激素細(xì)胞群的破壞會(huì)導(dǎo)致垂體的尺寸減小和生長(zhǎng)激素細(xì)胞數(shù)量按比例減少，垂體中GH mRNA量以及體循環(huán)中GH水平也下降。

利用類似的原理，Bouchoucha等［34］建立了小鼠垂體前葉Egr-2陽(yáng)性細(xì)胞特異性消融的動(dòng)物模型，早期生長(zhǎng)響應(yīng)因子-2（early grorth respone factor 2，Egr-2）在早期的各種激素細(xì)胞體系中起作用，但出生后它的表達(dá)受到生長(zhǎng)激素細(xì)胞體系的限制。Egr-2陽(yáng)性細(xì)胞的敲除會(huì)導(dǎo)致腦垂體下葉發(fā)育不全。實(shí)驗(yàn)中，使用Egr-2等位基因攜帶活化的Cre重組酶毒素基因，在垂體內(nèi)進(jìn)行Egr-2陽(yáng)性細(xì)胞的敲除。出生后，基因敲除小鼠的促生長(zhǎng)激素細(xì)胞中呈現(xiàn)出一種特殊的漸進(jìn)的消融。

3　討論

GH可直接作用于骨骼細(xì)胞，但更多的是通過影響IGF-1的合成進(jìn)行控制的，循環(huán)中和骨骼局部的IGF-1在骨形成以及骨量的維護(hù)上起重要作用。胚胎時(shí)期，存在著一個(gè)軟骨內(nèi)骨化的過程，生長(zhǎng)板內(nèi)的軟骨細(xì)胞增殖、生長(zhǎng)并分化形成新的軟骨，新形成的軟骨被血管入侵，然后形成骨小梁。這個(gè)過程受基因、激素、環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)等控制，Waters等［6］發(fā)現(xiàn)這一時(shí)期胎兒生長(zhǎng)主要是由局部分泌的胰島素樣生長(zhǎng)因子和非垂體的胎兒組織分泌GH控制，此時(shí)IGF-1的促生長(zhǎng)作用獨(dú)立于GH之外。GH和IGF-1在出生后的整個(gè)青春期中的縱骨生長(zhǎng)過程中都扮演著一個(gè)重要的角色，縱骨生長(zhǎng)是由軟骨組織增生和縱骨生長(zhǎng)板細(xì)胞分化引起的軟骨內(nèi)骨化所決定的［35］。這一時(shí)期GH和IGF-1的促骨合成作用也決定著骨量的積累，青春期晚期以及成年期早期是骨量獲得的關(guān)鍵時(shí)刻，此時(shí)將達(dá)到骨峰值，骨量積累的多少將決定未來患骨質(zhì)疏松的風(fēng)險(xiǎn)大小。

除了影響縱骨生長(zhǎng)外，GH與IGF-1被認(rèn)為與骨建立和骨重建有關(guān)。骨重建是骨吸收與骨形成的一個(gè)平衡，多核的破骨細(xì)胞吸引到特異位點(diǎn)進(jìn)行骨的重吸收，吸收完成后，進(jìn)行一個(gè)反轉(zhuǎn)的過程，單核的成骨細(xì)胞被吸引到這個(gè)凹槽進(jìn)行骨的重新合成。骨重建對(duì)于維持骨鈣穩(wěn)態(tài)以及消除潛在的壞骨組織具有重要的意義。

血液中的GH水平隨著年齡的增長(zhǎng)而下降，在60歲時(shí)達(dá)到最低點(diǎn)。老年人的GH分泌量只有年輕人的5%～20%。GH的這種變化與GHRH的下降以及生長(zhǎng)激素抑制素的增加有關(guān)。中樞中的膽堿能的調(diào)節(jié)性下降導(dǎo)致生長(zhǎng)激素抑制素的增加，可以解釋GH水平的變化。伴隨著GH的減少，IGF-1也隨之下降，IGF-1與GH導(dǎo)致骨礦物密度的減少。

參考文獻(xiàn)

［1］ Giustina A，Mazziotti G，Canalis E.Growth hormone，insulinlike growth factors，and the skeleton［J］.Endocrine Rev，2008，29（5）：535-559.

［2］ Yakar S，Isaksson O.Regulation of skeletal growth and mineral acquisition by the GH/IGF-1 axis：lessons from mouse models ［J］.Growth Horm IGF Res，2015，Sep 28.pii：S1096-6374 （15）30031-9.doi：10.1016/j.ghir.2015.09.004.［Epub ahead of print］..

［3］ Perrini S，Laviola L，Carreira MC，et al.The GH/IGF1 axis and signaling pathways in the muscle and bone：mechanisms underlying age-related skeletal muscle wasting and osteoporosis［J］.J Endocrinol，2010，205（3）：201-210.

［4］ Ohlsson C，Mohan S，Sjogren K，et al.The role of liver-derived insulin-like growth factor-I［J］.Endocrine Rev，2009，30（5）：494-535.

［5］ Baroncelli GI，Bertelloni S，Sodini F，et al.Acquisition of bone mass in normal individuals and in patients with growth hormone deficiency［J］.J Pediat Endocrinol Metab.2003，16（Suppl 2）：327-335.

［6］ Waters MJ，Kaye PL.The role of growth hormone in fetal development［J］.Growth Hormone IGF Res，2002，12（3）：137-146.

［7］ Van der Eerden BCJ，Karperien M，Wit JM，et al.Systemic and local regulation of the growth plate［J］.Endocrine Rev，2003，24（6）：782-801.

［8］ Matkovic V，Jelic T，Wardlaw GM，et al.Timing of peak bone mass in Caucasian females and its implication for the prevention of osteoporosis：inference from a cross-sectional model［J］.J Clin Invest，1994，93（2）：799-808.

［9］ Shibli JA，AguiarK，Melo L，et al.Histological comparison between implants retrieved from patients with and without osteoporosis［J］.Int J Oral Maxillofac Surg，2008，37（4）：321-327.

［10］ Zadik ZVI，Chalew A，Mccarter Jr RJ，et al.The influence of age on the 24-hour integrated concentration of growth hormone in normal individuals［J］.J Clin Endocrinol Metab，1985，60（3）：513-516.

［11］ Veldhuis JD，Bowers CY.Human GH pulsatility：an ensemble property regulated by age and gender［J］.J Endocrinol Invest，2003，26（9）：799-813.

［12］ Ryall JG，Schertzer JD，Lynch GS.Cellular and molecular mechanisms underlying age-related skeletal muscle wasting and weakness［J］.Biogerontology，2008，9（4）：213-228.

［13］ Giustina A，Mazziotti G，Canalis E，et al.Growth hormone，insulin-like growth factors，and the skeleton［J］.Endocr Rev，2008，29（5）：535-559.

［14］ Charlton HM，Clark RG，Robinson I，et al.Growth hormone-deficient dwarfism in the rat：a new mutation［J］.J Endocrinol，1988，119（1）：51-58.

［15］ Nogami H，Takeuchi T.Increased population of nonhormone-producing cells suggests the presence of dysfunctional growth hormone cells in the anterior pituitary gland of the spontaneous dwarf rat［J］.Neuroendocrinology，1993，57（2）：374-380.

［16］ Pan W，Kastin AJ.Interactions of IGF-1 with the blood-brain barrier in vivo and in situ［J］.Neuroendocrinology，2000，72 （3）：171-178.

［17］ Nieves-Martinez E，Sonntag WE，Wilson A，et al.Early-onset GH deficiency results in spatial memory impairment in mid-life and is prevented by GH supplementation［J］.J Endocrinol，2010，204（1）：31-36.

［18］ Bailey-Downs LC，Sosnowska D，Toth P，et al.Growth hormone and IGF-1 deficiency exacerbate high-fat diet-induced endothelial impairment in obese Lewis dwarf rats：implications for vascular aging［J］.Gerontol A Biol Sci Med Sci，2012，67（6）：553-564.

［19］ Sonntag WE，Bennett C，Ingram R，et al.Growth hormone and IGF-I modulate local cerebral glucose utilization and ATP levels in a model of adult-onset growth hormone deficiency［J］.Am J Physiol Endocrinol Metab，2006，291（3）：604-610.

［20］ Yan H，Mitschelen M，Bixler GV，et al.Circulating IGF1 regulates hippocampal IGF1 levels and brain gene expression during adolescence［J］.Endocrinol，2011，211（1）：27-37.

［21］ Carter CS，Ramsey MM，Sonntag WE.The growth hormone IGF-1 axis and mammalian aging［M］.In：Handbook of the Biology of Aging，edited by Masoro EJ and Austad SN.Elsevier，2005.

［22］ Hua K，F(xiàn)orbes ME，Lichtenwalner RJ，et al.Adult-onset deficiency in growth hormone and insulin-like growth factor-I alters oligodendrocyte turnover in the corpus callosum ［J］.Glia，2009，57（10）：1062-1071.

［23］ Bengtsson BA，Eden S，Lonn L，et al.Treatment of adults with growth hormone（GH）deficiency with recombinant human GH ［J］.J Clin Endocrinol Metab，1993，76（2）：309-317.

［24］ Sun LY，Evans MS，Hsieh J，et al.Increased neurogenesis in dentate gyrus of long-lived Ames dwarf mice［J］.Endocrinology，2005，146（3）：1138-1144.

［25］ Walser M，Hansén A，Svensson PA，et al.Peripheral administration of bovine GH regulates the expression of cerebrocortical betaglobin，GABAB receptor 1，and the Liss encephaly-1 protein （LIS-1）in adult hypophysectomized rats［J］.Growth Horm IGF Res，2011，21（1）：16-24.

［26］ Aberg ND，Johansson I，Aberg MAI，et al.Peripheral administration of GH induces cell proliferation in the brain of adult hypophysectomized rats［J］.J Endocrinol，2009，201（1）：141-50.

［27］ Alba M，Salvatori R.A Mouse with targeted ablation of the growth hormone-releasing hormone gene：A new model of isolated growth hormone deficiency［J］.Endocrinology，2004，145（9）：4134-43.

［28］ Greenhalgh CJ，Rico-Bautista E，Lorentzon M，et al.SOCS2 negatively regulates growth hormone action in vitro and in vivo ［J］.J Clin Invnest，2005，115（2）：397-406.

［29］ Kasukawa Y，Baylink DJ，Guo R，et al.Evidence that sensitivity to growth hormone（GH）is growth period and tissue type dependent：studies in GH-deficient lit/lit mice［J］.Endocrinology，2003，144（9）：3950-3957.

［30］ Evans B，Warner JT，Elford C，et al.Morphological determinants of femoral strength in growth hormone-deficient transgenic growth-retarded（Tgr）rats［J］.J Bone Miner Res，2003，18 （7）：1308-1316.

［31］ Luque RM，Amargo G，Ishii S，et al.Reporter expression，induced by a growth hormone promoter-driven Cre recombinase （rGHp-Cre）transgene，questions the developmental relationship between somatotropes and lactotropes in the adult mouse pituitary gland［J］.Endocrinology，2007，148（5）：1946-1953.

［32］ Buch T，Heppner FL，Tertilt C，et al.A Cre-inducible diphtheria toxin receptor mediates cell lineage ablation after toxin administration［J］.Nat Methods，2005，2（6）：419-426.

［33］ Luque RM，Lin Q，Córdoba-Chacón J，et al.Metabolic impact of adult-onset，isolated，growth hormone deficiency（AOiGHD）due to destruction of pituitary somatotropes［J］.PLoS One，2011，6（1）：e15767.

［34］ Bouchoucha YX，Charnay P，Gilardi-Hebenstreit P.Ablation of Egr2-positive cells in male mouse anterior pituitary leads to atypical isolated GH deficiency［J］.Endocrinology，2013，154（1）：270-282.

［35］ Yakar S，Adamo ML.Insulin-like growth factor 1 physiology：lessons from mouse models［J］.Endocrinol Metab Clin North Am，2012，41（2）：231-247.

Research progress of adult animal models of growth hormone deficiency and bone metabolism

YUAN Ren-fei1，2，DENG Wei-min1，2*，HAN Li-ping2，CHEN Xiao-xiang2，3，SU Hai-rong2，3
（1.Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006，China；2.General Hospital of Guangzhou Military Command of Chinese PLA，Guangzhou 510010；3.Traditional Chinese Medicine University of Guangzhou，Guangzhou 510403）

【Abstract】Objective To explore the establishment methods of animal models of adult growth hormone deficiency，and to provide a good model for experimental research and treatment for abnormal bone metabolism caused by growth hormone deficiency.Methods The methods of establishment of animal models of adult growth hormone deficiency were reviewed and evaluated refering to literature.Results There were three methods including spontaneous lack-of，pituitectomized and gene knockout can establish animal models of adult growth hormone deficiency.Conclusions Hypophysectomized animal models are inexpensive and easy to create，but not suitable for studying the relationship between growth hormone and bone metabolism.Spontaneous lack-of and gene knockout models are specific growth hormone deficiency and of great research significance in exploring the relationship between growth hormone and bone metabolism.

【Key words】Growth hormone deficiency；Animal model；Bone metabolism；Insulin-like growth factor-I

【中圖分類號(hào)】Q95-33

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【文章編號(hào)】1005-4847（2016）02-0208-05

Doi：10.3969/j.issn.1005-4847.2016.02.019

［基金項(xiàng)目］軍隊(duì)保健專項(xiàng)項(xiàng)目（編號(hào)：13BJZ13）。

［作者簡(jiǎn)介］袁人飛（1992-），男，碩士研究生。Email：yuanrenfei@139.com。

［通訊作者］鄧偉民（1959-），男，教授。Email：dengweimin1959@21cn.com。

Corresponding author：DENG Wei-min，Email：dengweimin1959@21cn.com

［收稿日期］2015-10-23