張 韜

（吉林省輝南縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，吉林輝南 135100）

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一株三黃雞雞痘病毒的分離鑒定

張 韜

（吉林省輝南縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，吉林輝南 135100）

[摘 要]通過(guò)臨床癥狀觀察，三黃雞病雞產(chǎn)生典型的皮膚病變，通過(guò)絨毛尿囊膜接種分離并進(jìn)行傳代培養(yǎng)，病毒EID50測(cè)定、病毒理化特性檢驗(yàn)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、動(dòng)物回歸試驗(yàn)等進(jìn)行鑒定。證明2013年3月吉林省吉林市某三黃雞飼養(yǎng)場(chǎng)500只三黃雞中的50只發(fā)病雞是雞痘病毒感染，其病毒感染滴度 EID50為 10-5.56/ml。

[關(guān)鍵詞]雞痘 病毒 分離鑒定

1 雞痘病毒的特性

1.1 病毒的理化特性

雞痘病毒對(duì)干燥具有強(qiáng)大的抵抗力，痂皮內(nèi)的病毒可以存活幾個(gè)月。但在雞糞和泥土中，活力通常不超過(guò)幾周。雞痘病毒抵抗乙醚，對(duì)氯仿敏感，但曾報(bào)道某些毒株對(duì)乙醚的抵抗力不強(qiáng)，phy和Hanson則指出雞痘病毒對(duì)乙醚有抵抗力，Melick則指出對(duì)乙醚處理有無(wú)抵抗力是痘病毒的準(zhǔn)則之一。雞痘病毒可耐1%石炭酸和0.1% 福爾馬林達(dá)9d之久。60℃和50℃加熱，分別可在10min和30min內(nèi)使其滅活，胰酶對(duì)病毒DNA或病毒的完整性均無(wú)影響。對(duì)于己有包涵體中脫出的病毒粒子，1%～2%的氫氧化鉀或氫氧化鈉呈現(xiàn)明顯的滅活作用。冷凍干燥和50%甘油鹽水可使雞痘病毒長(zhǎng)期保持活力達(dá)幾年。

1.2 病原特性

雞痘的病原體是禽痘病毒屬的代表株，在分類上屬于痘病毒科，經(jīng)絨毛尿囊膜種9～12日齡SPF雞胚會(huì)出現(xiàn)灶狀白色不透明的痘斑，容易在雞胚皮膚細(xì)胞內(nèi)或原代雞胚細(xì)胞增殖，并且會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞病理性變化。病毒對(duì)外界環(huán)境有比較高的抵抗力，在完全干燥和陽(yáng)光照射多周后，上皮細(xì)胞屑中的病毒仍能保存活力。但是游離病毒在1%～2%氫氧化鈉或鉀或10%醋酸中很快能被滅活。在腐敗環(huán)境中雞痘病毒很快會(huì)死亡，但在冷凍干燥和50%甘油條件下可使病毒長(zhǎng)期保持活力，甚至保存幾年。

1.3 培養(yǎng)特性

雞痘病毒在雞的皮膚或氣囊上皮、絨毛尿囊膜外胚層細(xì)胞及雞胚皮膚細(xì)胞中以復(fù)制方式進(jìn)行增值。在雞胚絨毛尿囊膜感染后的典型病變出現(xiàn)局灶性或彌漫性的致密的增生性的痘斑。

2 雞痘的概述

雞痘病毒（Fowlpox virus）屬于痘病毒科（Poxviridae），為禽痘病毒屬（Avipoxvirus）的成員?？梢越?jīng)絨毛尿囊膜種9～12日齡SPF雞胚會(huì)出現(xiàn)灶狀白色不透明的痘斑，容易在雞胚皮膚細(xì)胞內(nèi)或原代雞胚細(xì)胞增殖，并且會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞病理性變化。病毒對(duì)外界環(huán)境有比較高的抵抗力，在完全干燥和陽(yáng)光照射多周后，上皮細(xì)胞屑中的病毒仍能保存活力。但是游離病毒在1%～2%氫氧化鈉或鉀或10%醋酸中很快能被滅活。在腐敗環(huán)境中雞痘病毒很快會(huì)死亡，但在冷凍干燥和50%甘油條件下可使病毒長(zhǎng)期保持活力，甚至保存幾年。

感染該病毒后，禽的死亡率不高，但是常可使感染的病禽的產(chǎn)蛋量下降及生長(zhǎng)發(fā)育遲緩，種禽發(fā)病后孵化率也會(huì)降低，一旦繼發(fā)其他傳染病容易導(dǎo)致大批感染家禽死亡，雛雞更嚴(yán)重。近幾年來(lái)，雞痘頻頻發(fā)生，給養(yǎng)殖業(yè)造成很大的經(jīng)濟(jì)損失。因此對(duì)國(guó)家經(jīng)濟(jì)具有顯著的影響。

3 雞痘的流行病學(xué)

雞群發(fā)生雞痘原因很多，主要有雞舍溫度高、濕度大、通風(fēng)不良、雞群未種雞痘疫苗、蚊蟲(chóng)叮咬也促使本病的發(fā)生，尤其是繼發(fā)和混合感染，更加劇了雞痘對(duì)養(yǎng)殖業(yè)的危害，雞痘繼發(fā)葡萄球菌感染、雞痘和雞盲腸肝炎混合感染、皮膚型雞痘繼發(fā)腺胃炎、雞痘繼發(fā)大腸桿菌引起眼結(jié)膜炎、雞痘和腺胃型傳染性支氣管炎并發(fā)、雞傳染性喉氣管與黏膜型雞痘并發(fā)等都有報(bào)道。

本病一年四季都能發(fā)生，夏末和秋季最易流行。任何年齡、性別和品種的鳥(niǎo)類均可感染禽痘病毒。已報(bào)道過(guò)約20個(gè)科近60種野鳥(niǎo)發(fā)生該病毒的自然感染（Karstad.L，1971）；鴨和鵝等水禽很少發(fā)生，即使感染也無(wú)嚴(yán)重癥狀。雞痘主要因與病雞發(fā)生直觸而感染。白喉雞痘的呼吸道滲出液中含有大量病毒，可因污染飲水，飼料和用具等而發(fā)生間感染。雞痘病毒不能侵入未破損的皮膚和黏膜，所以一般認(rèn)為感染是經(jīng)皮膚或黏膜上的微小擦傷或刺傷而發(fā)生的，但病毒也可以經(jīng)毛囊侵入。吸血昆蟲(chóng)，包括蚊、蠅、虱、蜂等呈現(xiàn)一定的病毒傳播作用。

4 診斷

4.1 臨床診斷

雞痘在臨床上由于有特征性病變，一旦發(fā)病根據(jù)癥狀就很容易診斷和確診。但是應(yīng)區(qū)別白喉型雞痘與傳染性喉氣管炎所引起的呼吸癥狀和吞咽困難，以及皮膚型雞痘引起的眼瞼腫脹，特別是有干酪樣分泌物滲出而引起的眼睛失明。在幼雛，容易將痘病與泛酸或生物素缺乏癥及T-2毒素引起的疾病相混淆。野鴿及家鴿的白喉型病變常與雞毛滴蟲(chóng)引起的病灶相混淆，后者可通過(guò)涂片鏡檢或培養(yǎng)而診斷。禽痘病毒皮膚型感染必須經(jīng)組織病理學(xué)或病毒分離進(jìn)行確診。

4.2 病毒的分離與鑒定