李　秦，儲文慶，孔橡飛，程云龍

(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實驗動物研究所，中英合作MOTAC神經(jīng)科學(xué)實驗室，

莫泰科生物技術(shù)咨詢(北京)有限公司， 北京　100050)

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關(guān)于現(xiàn)行《國標(biāo)》兩個問題的思考

李秦，儲文慶，孔橡飛，程云龍

(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實驗動物研究所，中英合作MOTAC神經(jīng)科學(xué)實驗室，

莫泰科生物技術(shù)咨詢(北京)有限公司， 北京100050)

【摘要】大群飼養(yǎng)的實驗用猴,B病毒抗體陽性率高達(dá)60%～70%。現(xiàn)行《實驗動物國家標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定，B病毒為普通級實驗猴必檢項目，并且要求“被測猴血清中的BV抗體”為陰性。作為國家標(biāo)準(zhǔn)，如果脫離了該國行業(yè)的實情，那就要權(quán)衡修訂。實驗動物飼料硬度/松脆度沒能作為一個指標(biāo)被列入《國標(biāo)》，而這個指標(biāo)可以大大影響了實驗動物飼料的攝入和受試動物的生理狀況。建議將該指標(biāo)吸納進(jìn)《國標(biāo)》，進(jìn)行通盤考量。

【關(guān)鍵詞】獼猴；B病毒；飼料；硬度/松脆度

第1版《國標(biāo)》誕生、貫徹、實施至今已經(jīng)31年了。實驗動物科學(xué)及其相關(guān)行業(yè)在《國標(biāo)》的規(guī)范下，得以健康發(fā)展和迅速擴(kuò)大。但是，具體執(zhí)行的過程中，還存在一些不如意之處。這里就自己感觸較多的兩個問題予以贅述。

1實驗用猴B病毒感染的問題

眾所周知，實驗用猴(特別是食蟹猴、獼猴和紅面猴)是生命科學(xué)研究中非常重要的實驗動物。在我國有著非常豐富的實驗用猴資源。近35年來，全國各地相繼建立了多家、各種規(guī)模的實驗用猴繁育場。據(jù)不完全統(tǒng)計，截止2014年末，我國實驗用猴存欄量超過30萬頭。每年可使用和出口的指標(biāo)達(dá)到10萬頭。表面上看，幾乎所有的實驗用猴企業(yè)和實驗用猴單位都取得了動物質(zhì)量合格證。

然而，還是讓我們面對真正的流行病學(xué)現(xiàn)實吧。上世紀(jì)五六十年代，國外學(xué)者(Andrewes，C.，1964.，Keeble 1960.， Hartley 1964.， Πилле 1965.)對野生實驗用猴群進(jìn)行B病毒感染流行病學(xué)調(diào)查的結(jié)果是病毒檢出率3%左右，B病毒抗體陽性率10%左右。但是，大群飼養(yǎng)的動物中B病毒抗體陽性率高達(dá)60%～70%。我國目前存欄的實驗用猴，B病毒抗體檢測的情況怎么樣呢？報的都很低。但可以肯定的講，陽性率只會高于這個數(shù)字。據(jù)業(yè)內(nèi)人士估計，都在80%左右。原因很簡單，B病毒抗體陰性的，前些年都作為“優(yōu)質(zhì)商品猴”出口了?？梢钥隙ǖ卣f，真正查的話，家家都有“B病毒抗體陽性”的巨大煩惱。這個不爭的事實甚至讓那些來中國低價選購“優(yōu)質(zhì)商品猴資源”的“洋客商們”望而卻步。我們國家的專家、學(xué)者、研究人員，有多少真正用上了“B病毒抗體陰性”的實驗用猴呢？

可是，我國現(xiàn)行《實驗動物國家標(biāo)準(zhǔn)》，還不讓給動物打疫苗、不是查抗原、而是查抗體……勢必嚴(yán)重阻礙了實驗用猴行業(yè)的發(fā)展。如果真正在所有實驗用猴企業(yè)和實驗用猴單位硬性強(qiáng)制落實《國標(biāo)》的話，將在本行業(yè)產(chǎn)生巨大的資源浪費(fèi)，甚至對該行業(yè)造成毀滅性打擊。因為，《國標(biāo)》中規(guī)定，B病毒(獼猴皰疹病毒1型)為普通級實驗猴必檢項目，并且要求:檢測判定的方法是“檢測猴血清中的BV抗體”為陰性。如果檢出陽性，還要建議隔離撲殺……也就是說，那會血流成河，然后家家停業(yè)！相信誰也不愿看到，實驗動物行業(yè)無猴可用、猴橫遍野，這一可悲的現(xiàn)象出現(xiàn)。

為什么不換個角度考慮，做些利國利民利于行業(yè)發(fā)展的變通呢？

1.1建議工作人員使用疫苗

組織專家，找到合適的疫苗，并且鼓勵從業(yè)人員使用。目前各個實驗用猴單位預(yù)防B病毒感染的“一般措施”都是：①新來實驗用猴最好單籠關(guān)養(yǎng)，應(yīng)仔細(xì)檢查它們的唇緣和舌； ②同有疑似B病毒病變的猴子或猴組織接觸的人應(yīng)帶口罩和護(hù)目鏡； ③工作人員萬一被疑似B病毒感染的猴子咬傷或抓傷，傷口應(yīng)立即放血，用肥皂水充分洗滌，然后以碘酒或酒精消毒，病人觀察三周(因B病毒病的潛伏期最長為20 d)(Davidson，W.L.等，1960；Perkine，F(xiàn).T.等，1966)； ④盡量不要徒手捕捉猴子，必要時可給動物注射麻醉劑和鎮(zhèn)靜劑，以利于實驗操作，有開放性創(chuàng)傷的工作人員需待充分恢復(fù)后才能同猴子接觸(Hartley，E.G.，l966)。所有這些“一般措施”，都是在被動應(yīng)付，很實用，但完全不能從根本上解決問題。就是在被動觀望病毒如何作為！從上世紀(jì)30年代，出現(xiàn)第一例B病毒病患者至今，全球超過43例人感染猴B病毒的事件中，2/3集中在美國，其他則分布在加拿大和英國，幾乎全部是白種人，亞太地區(qū)從未有過人感染猴B病毒的事件報道。30多年來，我國的工作人員屢有被實驗用猴咬傷抓傷的情況發(fā)生。但未發(fā)現(xiàn)過B病毒病，也未見到國內(nèi)任何的報道。在目前尚無充分的證據(jù)證明“我國無B病毒感染”，或者說“黃種人很有可能對B病毒有天然抵抗力”的情況下，我們?nèi)匀徊荒苈楸源笠?。?yīng)該尋找適用的疫苗，保護(hù)所有從業(yè)人員。

1.2給所有的實驗用猴接種疫苗

試想，我國有大量的B病毒陽性實驗用猴(將近20多萬)，它們的出路是什么？為什么不考慮讓它們徹底從病毒感染狀態(tài)脫離出來？為什么不通過疫苗接種主動把傳播控制??？無論我們主動防疫與否，為數(shù)巨大的B病毒抗體陽性動物都存在?！疤蕴驌錃ⅰ倍疾惶F(xiàn)實。因此，從國情出發(fā)，在充分保護(hù)工作人員的前提下，在有條件和主動免疫保護(hù)的情況下，試行飼養(yǎng)及使用猴B病毒抗體陽性實驗用猴，無可厚非。再說了，使用B病毒抗體陽性猴子，對科學(xué)研究造成的影響是有限的。對于有影響的研究就不要用了，就選擇“B病毒陰性猴”。事實上，許多科研單位和公司目前都在使用B病毒抗體陽性猴，這已成為行業(yè)的普遍而又無奈的現(xiàn)象。可以說，B病毒抗體陽性猴，在目前條件下，給生命科學(xué)發(fā)展所做的貢獻(xiàn)遠(yuǎn)大于B病毒陰性猴。

1.3鼓勵并幫助實驗用猴企業(yè)逐漸建立真正的B病毒陰性猴群

一個行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的制定是為給行業(yè)的發(fā)展保駕護(hù)航，但其前提是適合這個行業(yè)，適合這個行業(yè)所處的國情。變化是這個世界發(fā)展的本質(zhì)定律，行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)也要因時因地制宜。等到時機(jī)成熟了，我們在修訂《國標(biāo)》，把我們的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)再提高一步，也未嘗不可！

2實驗動物飼料的硬度/松脆度問題

所有飼料生產(chǎn)廠家，幾乎完全依靠經(jīng)驗和售后反饋的體會來調(diào)節(jié)這一指標(biāo)。甚至可以說，這個指標(biāo)是虛擬的，臆想的！這造成目前行業(yè)中各個企業(yè)關(guān)于飼料硬度/松脆度的標(biāo)準(zhǔn)不一。同種動物飼料在每個廠家生產(chǎn)的硬度有差異，不利于相關(guān)檢驗和管理，更不利于實驗動物使用單位的選擇。

經(jīng)驗告訴我們：有的嚙齒類實驗動物飼料硬度/松脆度較低，造成動物采食過量，動物生長曲線與標(biāo)準(zhǔn)生長曲線不符。更有甚者，造成大量“盜料”，引起飼料嚴(yán)重浪費(fèi)。對于非人靈長類動物膨化飼料，有的硬度較高，松脆度不夠，動物根本就咬不動。以至于它們拒絕采食，體質(zhì)變差。

飼料作為實驗動物最重要的攝入因素，可主宰研究的結(jié)果和導(dǎo)向。如果飼料有問題，將會給實驗帶來多大影響？這是不是就要求我們，盡可能細(xì)化《國標(biāo)》。特別是在原有指標(biāo)之外，增加硬度/松脆度這樣的關(guān)鍵質(zhì)量控制指標(biāo)。

硬度/松脆度可以通過測定壓碎力和脆碎度來衡量。具體做法都很簡單而且很容易實現(xiàn)。比如，用硬度儀、脆碎度檢測儀來測定等。

鑒于飼料存在的硬度/松脆度問題，這里建議：(1)不同實驗動物的飼料硬度/松脆度應(yīng)該有所差異，具體應(yīng)結(jié)合動物采食習(xí)性，口腔牙齒的結(jié)構(gòu)做出相應(yīng)調(diào)整。例如：嚙齒類動物(大小鼠等)的門牙會不斷的生長發(fā)育，因此需要有足夠的硬度/松脆度來幫助嚙齒類動物磨牙；非人靈長類(獼猴、食蟹猴等)實驗動物采食挑剔，飼料的硬度/松脆度就要做出相應(yīng)的調(diào)整。(2)應(yīng)該針對同種動物的不同年齡段，為其制作不同硬度/松脆度的飼料。

一個成熟的行業(yè)《國標(biāo)》，應(yīng)該是科學(xué)的、規(guī)范的、具象化的、有實操性的。當(dāng)然更是要符合國情的、與時俱進(jìn)的。在實際操作的過程中，我們發(fā)現(xiàn)了一些問題。正是基于這些問題，呈請專家學(xué)者考慮并參與討論。修改現(xiàn)行《國標(biāo)》中有關(guān)內(nèi)容。

〔修回日期〕2015-12-30

Two considerations about the current National Standard of Laboratory Animals

LI Qin, CHU Wen-qing, KONG Xiang-fei，CHENG Yun-long

(Institute of Medical Laboratory Animal Science, Sino-British MOTAC Neuroscience Collaboration Lab，MOTAC Beijing Services LtD., Beijing 100050, China)

【Abstract】According the current National standard for laboratory animal, herpes B virus antibody must be tested and negative for all the breed/tested macaques,howere,in fact the positive rate is around 60-70% in breeding colony. Being the National Standard, if it is too far from the reality of the filed, weighing and changing should be made. Hardness/crispness degree of laboratory animal diet never been considered as a listed value in the National Standard for Laboratory Animal to identify the quality of diet. In fact, this index affects a lot about daily diet intake and physiological status of laboratory animals. Hereby, the authors suggest to take the index into the National Standard, to assess the quality of laboratory animal diet in a more comprehensive way.

【Key words】Macaque；B virus；Diet；Hardness/crispness degree

doi:10.3969.j.issn.1671-7856. 2016.02.002

【中圖分類號】R-33

【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A

【文章編號】1671-7856(2016) 02-0004-03

[通訊作者]李秦，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向：神經(jīng)系統(tǒng)疾病模型。Email： liqin@motac.com。

“實驗動物國家標(biāo)準(zhǔn)論壇”專題