胡二紅 龐新豐

晚期先天梅毒診斷中聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)的應(yīng)用價值

胡二紅 龐新豐

目的通過試驗數(shù)據(jù)的分析對比,得出聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)在晚期先天梅毒診斷中的意義。方法對梅毒孕婦產(chǎn)后無癥狀新生兒42例出生時采用PCR技術(shù)檢測臍血和胎盤組織結(jié)果進(jìn)行對比,采用梅毒螺旋體特異抗體測定(TPPA)和梅毒血清學(xué)實驗(trust)血清學(xué)檢測并且進(jìn)行隨訪定期復(fù)查。結(jié)果PCR技術(shù)檢測梅毒螺旋體選用臍血和胎盤組織檢測敏感性對比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=3.91,P＜0.05)。6個月內(nèi)TPPA 檢測陽性例數(shù)均多于實際陽性例數(shù)；trust法檢測4倍于母體例數(shù)均少于實際陽性例數(shù)。結(jié)論TPPA和trust法用于先天梅毒的實驗室檢測有一定弊端,檢測結(jié)果不能完全有效的反映新生兒真實情況,出生時選用胎盤組織進(jìn)行PCR檢測,對先天梅毒診斷有積極作用。

聚合酶鏈反應(yīng)；胎盤組織；晚期先天梅毒

梅毒傳播途徑中新生兒先天梅毒主要原因是母嬰垂直傳播［1］。先天梅毒可治可防,對于新生兒先天梅毒早確診早治療最為重要。先天梅毒因為臨床癥狀表現(xiàn)不明顯,多為晚期先天梅毒。因此選擇有效準(zhǔn)確的實驗室方法對于嬰兒的預(yù)后有積極的作用。PCR技術(shù)具有敏感性高、特異性強(qiáng)等特點,本文進(jìn)行回顧性分析,具體報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012～2013年在本院圍生期保健中確診的梅毒孕婦所產(chǎn)嬰兒,出生時無梅毒臨床癥狀42例作為研究對象。6個月最終確認(rèn)為先天梅毒的23例。

1.2 方法 PCR儀器選用達(dá)安7600,試劑原廠配套；trust法試劑由上海榮盛生產(chǎn)；TPPA法試劑由日本富士提供。出生時進(jìn)行TPPA、trust、PCR法檢測。并且在嬰兒1、3、6月齡時進(jìn)行TPPA和trust法復(fù)查。

1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn) 先天梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn)參照2006年美國疾病控制中心制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)［2］。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 臍血作為檢測標(biāo)本敏感性60.87%(14/23),胎盤組織作為檢測標(biāo)本敏感性100.00%(23/23)。臍血和胎盤組織檢測敏感性對比,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2= 3.91,P＜0.05)。見表1。

2.2 6個月內(nèi)TPPA檢測陽性例數(shù)均多于實際陽性例數(shù),trust法檢測4倍于母體例數(shù)均少于實際陽性例數(shù)。見表2。

3 討論

圍生期保健中發(fā)現(xiàn)的梅毒孕婦進(jìn)行必要的驅(qū)梅藥物治療,但是因人而異,治療效果不盡相同,新生兒情況也不會一致。實驗室檢測時不典型的試驗表達(dá)會因正規(guī)治療后的梅毒活動性不強(qiáng)而增多?？贵w含量的高低差異容易影響結(jié)果,敏感性較差。PCR技術(shù)具有確診早、特異性高的優(yōu)點。

先天梅毒患兒出生時2/3癥狀沒有臨床表現(xiàn) ,但在4～8周時會有臨床癥狀出現(xiàn)［3］,出生后2年內(nèi)出現(xiàn)臨床癥狀的稱為早期先天梅毒 ,2年后出現(xiàn)臨床癥狀的稱為晚期先天梅毒。診斷先天梅毒的標(biāo)準(zhǔn)是以血清學(xué)檢測和臨床癥狀結(jié)合的方法,對于晚期先天梅毒血清學(xué)檢測缺點明顯。無癥狀先天梅毒的早期診斷及治療對于優(yōu)生有積極意義。

本次研究表1中胎盤組織標(biāo)本23例陽性與實際情況完全吻合,臍血標(biāo)本中9例未檢出梅毒螺旋體為假陰性,是因為血液中存在梅毒螺旋體的隨機(jī)性強(qiáng),一次檢出率低［4］。PCR法診斷先天梅毒標(biāo)本選用胎盤組織敏感性、特異性均高于血液標(biāo)本,診斷優(yōu)勢明顯。

血清學(xué)檢測可以作為可靠的檢驗指標(biāo),但在先天梅毒和神經(jīng)型梅毒、不典型梅毒中效果不好［5］。表2中兩種檢測方法均出現(xiàn)了不同程度的誤差。TPPA法假陽性率高,6個月內(nèi)TPPA 檢測陽性例數(shù)均高于實際陽性例數(shù)。梅毒特異性抗體血清學(xué)檢測出現(xiàn)假陽性原因是多樣的：IgG抗體可以通過胎盤由母體傳入胎兒,會對結(jié)果有影響,這也是需要隨訪確診的原因；其次是類風(fēng)濕因子,自身抗體和其他感染的干擾也會有誤差出現(xiàn),特異性較差。

trust法假陰性率高,trust法檢測4倍于母體例數(shù)均低于實際陽性例數(shù)。trust法檢測假陰性率過高是因為嬰幼兒早期受梅毒螺旋體的侵襲尚未產(chǎn)生足夠的反應(yīng)素表達(dá),母體妊娠期驅(qū)梅治療也會減低梅毒的侵襲力,先天梅毒trust法滴度未能大于母體4倍。trust法檢測還會因滴度過高原倍檢測時產(chǎn)生假陰性。

晚期先天梅毒的診斷根據(jù)梅毒血清學(xué)隨訪結(jié)果進(jìn)行確認(rèn),容易錯過最佳治療時機(jī),對于疑似病例積極使用驅(qū)梅藥物治療又會造成抗生素的濫用。因此,對于臨產(chǎn)前梅毒血清學(xué)檢測滴度較高,驅(qū)梅治療不積極,效果不太好的孕婦,產(chǎn)后新生兒無臨床癥狀,疑似梅毒感染的,采用出生后處理過的胎盤組織進(jìn)行PCR技術(shù)熒光定量檢測診斷先天梅毒可靠有效。通過積極的治療可以有效預(yù)防晚期先天梅毒的發(fā)生,對于新生兒先天梅毒PCR技術(shù)可以作為確診試驗的首選。

［1］陳涵強(qiáng).新生兒先天性梅毒52例.實用兒科臨床雜志,1999,14(1):22-23.

［2］Marangoni A,Moroni A,Tridapalli E,et al.Antenatal syphilis serology in pregnant women and follow-up of their infants in northern Italy.Clin Microbiol Infect,2008,14(11):1065-1068.

［3］阮光強(qiáng),陳衛(wèi).梅毒檢測方法的比較分析.檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2011,8(20):2470-2471.

［4］Abel EA.Diagnosis of drug induced psoriasis.Semin Dermatol,1992,11(4):269-274.

［5］Hollier LM,Cox SM.Syphilis.Semin Perinatol,1998,22(4):323-331.

Application value of polymerase chain reaction technique in diagnosis of late congenital syphilis

HU Er-hong,PANG Xin-feng.Department of Inspection,Jiaozuo City Hospital of Ophthalmology and Otorhinolaryngology,Jiaozuo 454000,China

ObjectiveTo analyze and compare experimental data in order to gain significance of polymerase chain reaction (PCR) technique in diagnosis of late congenital syphilis.MethodsPCR was applied to detect umbilical cord blood and placenta tissue in 42 asymptomatic newborn by syphilis women,and the detection ourcomes were compared.Serological tests were applied through treponema pallidum antibody (TPPA) and tolulized red unheated serum test (trust).Follow-up and regular reexaminations were also applied.ResultsThe difference of detection sensitivity by PCR in treponema pallidum between umbilical cord blood and placenta tissue had statistical significance (χ2=3.91,P＜0.05).TPPA showed more positive cases in 6 months than actual positive cases,and trust method showed less cases with 4 times of matrix than actual positive cases.ConclusionDue to certain disadvantages shown by TPPA and trust method in laboratory detection of congenital syphilis,they can not reveal fully effective condition of newborn.Implement of PCR for placenta tissue detection can provide positive effect in diagnosis of congenital syphilis.

Polymerase chain reaction; Placenta tissue; Late congenital syphilis

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.07.007

2015-12-07］

454000 焦作市五官醫(yī)院檢驗科(胡二紅)；河南省焦作市婦幼保健院檢驗科(龐新豐)